全 文 ：第 40 卷第 23 期
2012 年 12 月
广 州 化 工
Guangzhou Chemical Industry
Vol. 40 No. 23
December. 2012
紫外分光光度法测定猪殃殃中绿原酸含量
陈 剑，刘频健，李洁琼
( 九江学院基础医学院，江西 九江 332000)
摘 要:建立紫外分光光度法测定猪殃殃中绿原酸含量。猪殃殃药材经醇提，以绿原酸为对照品，在最大吸收波长 329. 40
nm处测定其吸收度。1 g猪殃殃药材中含有 2. 284 mg绿原酸。经方法学考察，该方法精密度，重复性良好，具有很强的实用性。
关键词:紫外分光光度法;猪殃殃;绿原酸
中图分类号:R9 文献标识码:A 文章编号:1001 － 9677(2012)23 － 0105 － 02
作者简介:陈剑 (1977 －) ，女，副教授，主要从事药学专业教学和科研工作。
Determination of Chlorogenic Acid Content
in Cleavers with Ultraviolet Spectrophotometry
CHEN Jian，LIU Pin － jian，LI Jie － qiong
(School of Medicine，Jiujiang University，Jiangxi Jiujiang 332000，China)
Abstract:The method of ultraviolet spectrophotometry to determine chlorogenic acid content in Cleavers was estab-
lished. Cleavers extracted by the alcohol，chlorogenic acid as the reference substance，the absorbance of Cleavers was
measured at the maximum absorption wavelength of 329. 40 nm. The result showed that 1 g Cleavers contained 2. 284 mg
chlorogenic acid. The method was precision and had good repeatability with strong practical application.
Key words:UV spectrophotometry;Cleavers;chlorogenic acid
猪殃殃 ［Galium aparine L. var tenerum (Gren. Et Godr. )
Rebb.］又名锯锯草，活血草，是茜草科拉拉藤属小草本。猪殃
殃具有清除自由基、抗菌消炎、抗病毒、降糖、降脂、保肝、利
胆抗癌、抗艾滋等作用，对消化系统、血液系统、生殖系统疾病
均有显著疗效［1 －3］。药材中主要含有苯丙素类化合物和环烯醚萜
苷等化学成分［4 －5］，其中绿原酸为其主要活性成分之一，药理显
示绿原酸具有良好的抗菌、抗炎、抗病毒、抗氧化剂及自由基
等作用［6 －7］。为了更好地开发利用猪殃殃的植物资源，本试验对
其有效成分的提取及含量测定进行进一步的探索与研究，建立
了紫外分光光度法测定猪殃殃中绿原酸的含量测定方法。
1 仪器与试剂
TU － 1901 双光束紫外可见分光光度计 (北京普析通用) ;
绿原酸对照品 (110753 － 200413) ，中国药品生物制品检定所;
甲醇 (色谱纯) ，西陇化工有限公司。
2 方 法
2. 1 测定波长的选择
取浓度为 40 μg /mL 的绿原酸标准溶液，以甲醇作空白，
紫外分光光度计在 200 ～ 400 nm 波长范围内扫描，绿原酸在
201、218、329. 40 nm处分别有 3 个波峰。故选择最大吸收波
长为 329. 40 nm。
2. 2 对照品溶液的配制
精密称取绿原酸标准品 0. 0100 g 置于 10. 00 mL 容量瓶中，
用甲醇溶解，并加至刻度，摇匀，分别取 0. 20 mL、0. 50 mL、
1. 00 mL、1. 50 mL、2. 00 mL置于 10. 00 mL容量瓶中，加甲醇至
刻度，摇匀，用 0. 25 μm微孔滤膜过滤，即得系列对照品溶液。
2. 3 猪殃殃样品溶液的制备
取猪殃殃粗粉 50 g 置于 1000 mL 圆底烧瓶，加 75%甲醇
300 mL 于水浴上微沸加热 2 h，提取后稍冷却，抽滤。在药渣中
再加 200 mL 75%甲醇溶剂，同法操作两次。合并三次的提取液，
于水浴上加热浓缩，直至得最后总浸膏均约为 20 mL。将所得的
总浸膏分别用甲醇溶解，用 0. 25 μm微孔滤膜过滤，吸取 5 mL
供试品溶液置于 100 mL容量瓶中，甲醇定容，待用。
2. 4 标准曲线的绘制
浓度为 4，20，40，60，80 μg /mL 的绿原酸标准品溶液，
采用紫外分光光度法，设置吸收波长为 329. 4 nm，重复测量 3
次，浓度单位为 μg /mL，曲线评估 R2，评估值:正:0. 000;
负:0. 999。测定其吸光度，绘制标准曲线。各标准曲线的吸
光度及线性方程见表 1，标准曲线见图 1。
表 1 紫外分光光度法标准溶液
标准
溶液
浓度
/(μg /mL)
吸光度
(A)
K0 K1 R2
1 4 0. 165
2 20 0. 924
3 40 1. 897 － 0. 11503 0. 05273 0. 9991
4 60 3. 029
5 80 4. 168
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图 1 紫外分光光度法标准曲线
3 方法学考察
3. 1 精密度实验
取同一样品溶液，依次用比色杯重复进 4 μg /mL的标准溶
液 6 次，测定其吸光度，以峰面积积分值计算，显示 RSD 为
0. 2145%，表明该方法精密度良好。
3. 2 重复性实验
取同一批样品，按样品的制备方法制备 6 份样品溶液，分
别用比色杯重复进 4 μg /mL的标准溶液，测定其吸光度，以峰
面积积分值计算，显示 RSD为 0. 7315%，表明该方法重复性良
好。
3. 3 加样回收率实验
依次取样品溶液 2 mL，分别至于两只 10 mL 的容量瓶中，
编号 1、2，再分别取 60 μg /mL，80 μg /mL的标准溶液各 2 mL
置于 1，2 号容量瓶中，乙醇定容，摇匀，即得加标溶液。依
次用比色杯分别进 1、2 号容量瓶中的加标溶液，结果见表 2。
表 2 加标溶液测得含量
编号 已知量 /μg 加入量 /μg 测得量 /μg 回收率 /%
1 45. 68 120 167. 84 101. 3
2 45. 68 160 216. 58 105. 3
4 样品的测定
按“2. 3”所述方法制备样品溶液，测定了三批样品的浓
度和吸光度。计算得平均浓度为 22. 840 μg /mL，RSD =
0. 1621%，可知母液中绿原酸含量为 114. 2 mg，即每 1 g 猪殃
殃药材中含有 2. 284 mg绿原酸。结果见表 3。结果表明三批药
材中绿原酸含量相对较为稳定，因此可将绿原酸作为标准控制
药材质量。
表 3 样品溶液测得结果
供试品 吸光度
浓度
/(μg /mL)
平均值
/(μg /mL)
RSD /%
1 1. 088 22. 815
2 1. 092 22. 8910 22. 840 0. 1621
3 1. 088 22. 8150
5 讨 论
5. 1 绿原酸的保存
绿原酸 (Chlorogenic acid，CA) ，分子式为 C16 H18 O9，相
对分子质量为 354. 30，是由咖啡酸 (caffeic acid)与奎尼酸
(Quinic acid，1 －羟基六氢没食子酸)生成的缩酚酸，是植物
体在有氧呼吸过程中经莽草酸途径产生的一种苯丙素类化合
物。该成分易于氧化和水解［8］，中草药的提取工艺不同，有可
能会造成绿原酸的提取不完全，或引起不同程度的降解和损
失，从而影响绿原酸的含量测定。故绿原酸的供试品溶液放置
于棕色瓶，冰箱(2 ℃)保存时最稳定［9］。
5. 2 结果
紫外分光光度法精密度测得各溶液 RSD = 0. 2145%，仪器
精密度良好，测得供试品溶液中绿原酸平均浓度为 22. 840 μg /mL，
RSD = 0. 1621%，计算得母液中绿原酸含量为 114. 2 mg，即每
1 g 猪殃殃药材中含有 2. 284 mg绿原酸。
参考文献
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檵檵檵檵檵檵檵檵檵檵檵檵檵檵檵檵檵檵檵檵檵檵檵檵檵檵檵檵檵檵檵檵檵檵檵檵檵檵檵檵檵檵檵檵檵檵檵檵檵
4．
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化环己醇脱水制备环己烯，结果表明都有良好的催化性能。
(2)用草酸催化环己醇脱水制备环己烯的产率最高，其次
是对甲苯磺酸作催化剂，再次是氯化亚锡作催化剂，最差的是
三氯化铁。
(3)草酸作为催化剂，虽然用量较大，但草酸价格低廉，
催化环己醇脱水反应时间极短，且在实验过程中反应完毕后烧
瓶容易清洗，其残渣较容易处理。
(4)教学过程中，可用易得的固体酸取代传统的液态酸，
但在工作生产过程应该考虑非均相催化过程中的问题。
参考文献
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