全 文 ：收稿　2000-03-07　　　　修定　2000-05-29
牛奶子的组织培养及植株再生
姜长阳　宁淑香(辽宁师范大学生物系 , 大连 116029)
Tissue Culture and Planlet Regeneration of Elaeagnus umbellata
JIANG Chang-Yang , NING Shu-Xiang(Department of Biology , L iaoning Normal University , Dalian , L iaoning 116029)
1　植物名称　牛奶子(E laeagnus umbel lata),又
称甜枣 、羊奶子 。
2　材料类别　幼苗的下胚轴 。
3　培养条件　(1)MS +6-BA 1 mg·L-1(单位下
同)+2 ,4-D 3+IAA 0.5+CH 300;(2)MS+6-BA
2+2 , 4-D 2+NAA 0.5+CH 300;(3)MS +6-BA
3+2.4-D 1+IBA 0.5 +CH 300;(4)MS +6-BA
1.5+IAA 0.5;(5)MS+6-BA 1.5+NAA 0.5;(6)
MS+6-BA 1.5 +IBA 0.5;(7)MS+6-BA 0.2+
IAA 0.5+GA 0.5;(8)MS+6-BA 0.2+IAA 0.1+
GA 1;(9)MS +6-BA 0.2 +IAA 1.5 +GA 1.5;
(10)1/2MS+IAA 1.5 。上述培养基(1)～ (3)加蔗
糖 45 g·L-1 ,(4)～ (9)加蔗糖 30 g·L-1 ,(10)加蔗
糖 15 g·L -1 ,各种培养基 pH 5.8 ,加 0.6%的琼脂
粉固化 ,培养温度 20 ～ 28℃,每天光照12 ～ 13 h ,光
照度 2 000 ～ 3 000 lx 。
4　生长与分化情况
4.1　无菌材料的获得　将从大长山岛上采集的牛
奶子成熟种子反复搓洗后 ,放到超净工作台上的
250 ml磨口广口瓶中 ,倒入 70%乙醇灭菌 2 min ,
再用 0.1%的 HgCl2溶液灭菌 30 min ,用无菌水清
洗 5次后 ,在无菌条件下剥离掉外种皮 ,将胚接种
到培养基(10)上 。培养 45 d左右 ,可长出株高 1 ～
3 cm 的幼苗 ,剪取子叶下约 0.5 cm 长的下胚轴 ,作
为无菌培养材料 。
4.2　愈伤组织的诱导　把无菌下胚轴剪成 0.2 ～
0.3 cm 小段 , 接种到培养基(1)～ (3)上。7 d后大
部分组织块开始膨大;经过 30 d的培养 , 培养基
(1)、(2)上的愈伤组织均生长较快。培养基(1)的
愈伤组织开始是浅灰色 , 后来逐渐变为浅绿色 , 表
面还分布着许多疏松的白色斑块 , 但浅绿色部分
却很硬。培养基(2)的愈伤组织表面呈颗粒 , 在由
浅灰色变为浅黄色或浅绿色的过程中 , 颗粒间的
界限也逐渐明显。将在培养基(1)～ (3)上诱导的
愈伤组织在同一培养基上继代培养 , 仍能正常生
长 。
4.3　分化培养　将在培养基(1)、(2)上形成的浅
黄色和浅绿色呈颗粒状的愈伤组织接种到培养基
(4)～ (6)上 。10 d后 , 大部分组织块可见缓慢生
长;培养 35 d时 , 培养基(5)上的愈伤组织块表面
布满了分化小芽 , 培养基(4)～ (6)上仍未见分化 。
4.4　不定芽伸长培养　将在培养基(5)上分化的
小芽 ,接种到培养基(7)～ (9)上 ,放在 27℃左右的
条件下暗培养 14 d ,所有的不定芽均开始伸长生
长 ,52%的芽还在基部又分化 1 ～ 2个小芽 。将已
经开始伸长的芽移到光照条件下培养 ,生长速度趋
缓 。培养至 50 d时 ,在培养基(7)上的无根小苗平
均茎粗 0.21 cm ,株高为 0.7 ～ 1.7 cm ,大部分在 1
cm 左右;在培养基(8)上的无根苗为1.6 ～ 3.8 cm ,
大部分在 2 cm 左右;在培养基(9)上的无根苗平均
茎粗 0.11 cm ,株高为 2.6 ～ 4.7 cm ,大部分在3 cm
左右。培养基(9)虽适于进行不定芽的伸长培养 ,
但所培养的无根苗叶片少且茎细弱 ,而培养基(7)
上的无根苗的株高又较矮 ,因此 ,培养基(8)较适于
进行不定根的伸长培养。
4.5　生根培养及移栽　将株高 1.5 cm 以上 ,茎粗
0.13 cm 以上 ,外观较粗壮的无根试管苗 ,剪去基
部后 ,扦插到培养基(10)中 。17 d时少数可见形成
根原基 ,培养到 40 d时 ,接种的 78%无根苗长出 2
～ 8条 0.5 ～ 3 cm 长的根 ,形成试管苗 。将生根苗
打开瓶塞 ,在5 000 ～ 10 000 lx 的光照下炼苗 3 d
后 ,从培养瓶中取出 ,洗净基部的琼脂 ,移栽到下面
装着肥沃的园土 ,上面铺着一层珍珠岩与炉灰渣
(比例为 1∶1)的混合基质中 , 2 周后成活并长出新
叶 ,成活率为 81%。
4.6　扦插　选择在培养基(8)上培养的株高 2 cm
以上 、生长粗壮的无根试管苗 ,打开瓶塞后 ,向瓶中
倒入10mg·L-1的NAA水溶液5 ～ 10ml ,并置于
41植物生理学通讯　第 37卷 第 1期 , 2001 年 2 月
DOI :10.13592/j.cnki.ppj.2001.01.020
3 000 ～ 5 000 lx 的光照下炼苗 2 d ,取出无根苗 ,剪
去基部及下部 1 cm 以内的叶片 ,扦插于下面装着
沃土 ,上面铺着 5 ～ 7 cm 厚干净河沙的花盆中 , 2
周后扦插成活并长出新叶 ,成活率为 81%。
5　意义与进展　牛奶子属胡颓子科胡颓子属落叶
灌木 。适应性强 ,耐旱 、耐寒 、耐盐碱 ,可作为海岛
及沿海山坡 、沙滩等许多植物不宜生长的盐碱地用
于水土保持 、防沙造林的先锋树种 。但近年来由于
围滩 、垦坡造田等人工开发原因 ,沿海及岛屿上的
牛奶子分布及数量锐减。另外 ,牛奶子的果实不仅
可食 ,还可用于制糖;其树皮和果实有多种药用价
值;果实酿造的酒 ,亦颇受消费者的欢迎 。牛奶子
种子在自然条件下难以繁殖 ,人工分株方法获得种
苗速度又太慢 ,满足不了生产需要 。用组织培养方
法获得再生植株 ,有可能解决人们对其种苗的需
要 。目前尚未见牛奶子组织培养的报道 。
收稿　1999-12-28　　　　修定　2000-05-25
铁兰的组织培养和快速繁殖
李志英　徐　立 　李克烈 　赖齐贤(中国热带农业科学院热带园艺研究所 , 海南儋州 571737)
Tissue Culture and Rapid Propagation of Tillandsia cyanea
LI Zhi-Ying , XU Li , L I Ke-Lie, LAI Qi-Xian(Tropical Horticultural Research Institute , Chinese Academy of Tropcal Agricul-
tural Sciences , Danzhou , Hainan 571737)
1　植物名称　铁兰(Ti llandsia cyanea)。
2　材料类别　短缩茎。
3　培养条件　芽诱导培养基:(1)MS+6-BA 0.5
mg·L-1(单位下同)+NAA 0.1 。不定芽增殖与继
代培养基:(2)MS+6-BA 5+NAA 1+IAA 1;(3)
MS+6-BA 5+NAA 2;(4)MS +6-BA 5+IAA 2;
(5)MS+KT 5+NAA 1+IAA 1 。生根培养基:(6)
MS+NAA 0.5;(7)MS +IBA 0.5;(8)MS 。以上
培养基均附加蔗糖 3%、琼脂 0.7%, pH 值调至 5.
8 ,培养温度(25±1)℃,光照时间 12 h·d-1 ,光照度
1 500 ～ 2000 lx 。
4　生长与分化情况
4.1　芽的诱导　取自然高度 15 cm 左右的铁兰植
株 ,在流水下一边冲洗 ,一边剥取其短缩茎 , 保留
0.5 ～ 1 cm 基部叶鞘。灭菌时先用 75%酒精浸泡
30 s ,再用 0.1%升汞溶液浸泡 10 min ,无菌水冲洗
8 ～ 10次后 ,纵切成4 ～ 6 块 ,接种到培养基(1)中。
10 d左右腋芽萌发 , 30 d芽长至 2 cm 左右 ,部分叶
片已展开 。此时 ,将芽切下转入下一步培养基 。
4.2　芽的增殖与继代　将侧芽从短缩茎切块上切
下 ,切去展开叶 ,纵剖成 2块 ,接种到培养基(2)～
(5)中 。30 d左右 ,所有培养基均有不定芽产生 ,有
少数组织块产生愈伤组织 。其中 ,(3)、(5)有较多
愈伤 ,且苗比较弱;(4)丛生芽较少 , 愈伤也较少。
继代后的实验结果同上述结果一致。根据连续 4
次的实验统计结果 ,丛生芽在培养基(2)中的增殖
系数可达到 6 ～ 8倍。
4.3　生根与移栽　将丛生芽中 3 cm 左右的单株
切下 ,接种到培养基(6)～ (8)中 。20 d后各培养基
中小苗均有根产生 ,其中培养基(7)中的小苗生根
最多 ,且较粗壮;(6)中小苗生根较少 , 且较细弱;
(8)中小苗生根最少 ,但最粗壮。在生根培养基上
培养 30 d左右 ,小苗可长至 5 ～ 6 cm 。此时取出小
苗 ,洗干净后种植于经过消毒的园田土 、河沙 、椰
糠 、牛粪等量混合的基质中 ,保湿并遮阴 ,15 d后去
掉保湿设施 ,小苗成活率可达 95%左右 。
5　意义与进展　铁兰又名紫花凤梨 ,为凤梨科铁
兰属植物 ,是观赏凤梨家族中性状比较优良的小型
品种。其叶纤细修长 ,叶色浓绿 ,花序呈短剑状 ,玫
瑰红色 ,花瓣蓝色 ,分布在花序边缘 ,花期长达 12
个月 ,具有极高的观赏价值 ,也是近年来比较流行
的一种名贵花卉。铁兰利用分株等常规方法繁殖
速度太慢 ,且我国的铁兰生产所用种苗主要从国外
进口 ,价格较高。本文结果可为解决上述问题提供
参考。国内外尚未见铁兰组织培养的报道。
42 植物生理学通讯　第 37卷 第 1期 , 2001 年 2 月