全 文 ：Western Journal of Traditional Chinese Medicine,2013 Vol.26 No.5
中国科技 核心期刊
方 药·质量分析
珠子草(Phyllanthus niruri Linn)为大戟科叶
下珠属植物，是我国传统的中草药，具有平肝清
热、利水解毒之功效，常用于肠炎、肝炎、痢疾、尿
路感染、无名肿痛等疾病的治疗，具有明显的抗乙
型肝炎病毒活性及对肝损伤的保护作用，且毒副
作用低，是一种值得深入开发的天然药物。其药效
成分咖啡酸近年来多有研究报道［1-8］。本研究建
立了高效液相色谱法测定11个产地珠子草中咖
啡酸含量的方法，为珠子草植物药的开发应用提
供理论依据，也为更好地控制珠子草药材的质量
提供了方法。
1 材料与仪器
1.1 实验材料咖啡酸对照品(中国药品生物制
品检定所，批号：110885-200102)；珠子草药材(采
自云南蛮耗)，经鉴定为珠子草(Phyllanthus niruri
Linn.)；乙腈(色谱纯，深圳西陇化工股份有限公
司)；甲醇(色谱纯，深圳西陇化工股份有限公司)；
双蒸水(自制)，其他试剂均为分析纯。
1.2 仪器岛津 LC-20A 高效液相色谱仪 -DAD
检测器 (日本岛津公司提供)；Waters2695-2996高
效液相色谱仪(美国Waters公司提供)；FA2004N
电子分析天平(上海精密科学仪器有限公司提供)。
不同产地珠子草药材中
有效成分咖啡酸含量的测定 *
梁 云 1，李彩东 2△，张 伟 2，王 信 2
1 兰州市肺科医院，甘肃 兰州 730046；2 兰州市第二人民医院
［摘 要］目的：建立珠子草药材中咖啡酸含量的测定方法，并对不同产地珠子草咖啡酸含量进行比较。
方法：采用高效液相色谱法，色谱柱：Shimazu C18(150mm×4.6mm，5μm)；流动相：乙腈(B)∶0.1%磷酸(A)梯度洗
脱，流速：0.8mL/min；柱温：室温；检测波长：270nm；进样量10μL。结果：测得11个产地珠子草中咖啡酸含量
在0.122～0.610mg/mL浓度范围内，平均加样回收率100.06%。结论：该测定方法操作简便，结果准确，可用于
珠子草中咖啡酸含量的测定；云南产珠子草咖啡酸含量明显高于其他各地，以咖啡酸含量进行评判，云南产珠
子草具有其道地性。
［关键词］珠子草；高效液相色谱法；咖啡酸；含量测定
［中图分类号］R284.1［文献标识码］A ［文章编号］1004-6852(2013)05-0022-03
Determination of Caffeic Acid in ZhuZiCao from Different Producing Areas
LIANG Yun1, LI Caidong2△, ZHANG Wei2, WANG Xin2
1 Lanzhou Municipality Pulmonary Disease Hospital, Lanzhou 730046, China;
2 The Second Peoples Hospital of Lanzhou
Abstract Objective: To establish the determination method of caffeic acid in ZhuZiCao (Phyllanthus niruri
Linn) and compare its contents of ZhuZiCao from different producing areas. Method: HPLC was adopted,
chromatographic column: Shimazu C18 (150 mm×4.6 mm, 5 μm); mobile phase: acetonitrile (B): 0.1% phosphoric
acid (A); gradient elution, the flow rate was 0.8 mL/min; the temperature was room temperature; detection
wavelength was 270 nm; sampling was 10 μL. Result: Caffeic acid of ZhuZiCao from 11 producing areas showed the
linear relationship in the range of 0.122 to 0.610 mg/ml, average recovery rate was 100.06% . Conclusion: The
method, simple, accurate and feasible, could be used for the determination of caffeic acid of ZhuZiCao; the content of
caffeic acid from Yunnan is higher than the ones from others places, the genuineness of ZhuZiCao from Yunnan
could be identified by judging the contents of caffeic acid.
Keywords ZhuZiCao (Phyllanthus niruri Linn); high perfomance liquid chromatography (HPLC); caffeic acid;
content determination
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2013年第 26卷第 5期
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图4 咖啡酸标准曲线
在 0.122～0.610 mg/mL 浓度范围内，咖啡酸
的色谱峰面积与浓度呈良好的线性关系(见图1)，
回归方程为：Y=4.786×107X+165969.46，相关系
数 r=0.9990。
2.4 精密度测定精密吸取咖啡酸对照品溶液
20μL，重复进样5次，记录峰面积积分值，其峰面
积RSD为1.23%，说明仪器精密度良好。
2.5 稳定性测定取同一份珠子草供试品溶液
(药材产地为云南蛮耗)，按“2.1”项色谱条件，分
别在0、2、4、8、16、24小时检测，记录峰面积积分
值，咖啡酸峰面积RSD为2.30%，结果显示供试品
溶液在24小时内稳定。
2.6 重复性测定取同一批珠子草药材进行 5
次平行实验，记录峰面积并计算含量，结果咖啡酸
的平均含量为4.13mg/g，RSD为1.27%。
2.7 回收率测定采用加样回收方法，精密称取
己知含量的同一样品5份，分别加入咖啡酸对照
品溶液，按“2.2.2”项下供试品溶液进行制备，在
“2.1”项色谱条件进行分析测定，计算加样回收
率。结果咖啡酸的平均回收率(n=5)为 100.06，
RSD为1.47%，结果见表2。
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2 方法与结果
2.1 色谱条件色谱柱：Shimazu C18(150 mm×
4.6 mm，5μm)；流动相：乙腈(B)-0.1%磷酸(A)梯
度洗脱程序(见表1)，流速：0.8mL/min；柱温为室
温，检测波长：270nm；进样量10μL，见表1。
表1 梯度洗脱程序
时间/min 乙腈/% 0.1%磷酸/%
0 3 97
10 11 89
30 13 87
45 20 80
55 30 70
65 50 50
75 3 97
2.2 试液的制备
2.2.1 对照品溶液精密称取咖啡酸对照品适
量，置10mL量瓶中，用甲醇溶解并定容至刻度，
摇匀，即得浓度为0.61mg/mL的对照品溶液备用。
2.2.2 供试品溶液精密称取珠子草药材细粉
(过60目筛)2g，置具塞锥形瓶中，加入50%甲醇
30mL，称量，常温超声30分钟，取出放冷，称量，
用50%甲醇补足减失的重量，过滤，取上清液用微
孔滤膜(0.45μm)滤过，即得，见图1—3。
2.3 线性范围精密吸取咖啡酸对照品溶液
4.0、8.0、12.0、16.0和20.0μL，进样，按“2.1”项
下色谱条件测定峰面积，以峰面积为纵坐标(Y)，
以咖啡酸对照品的浓度(mg/mL)为横坐标(X)进
行线性回归分析，绘制标准曲线，见图4。
时间/min 时间/min 时间/min
图1 空白图谱 图2 咖啡酸标准品图谱 图3 珠子草样品图谱
mA
U
mA
U
mA
U
表2 咖啡酸回收率测定结果
取样量/mg 样品中咖啡酸含量/mg 加入量/mg 测得量/mg 回收率/% 平均回收率/% RSD/%
520.12 2.1507 2.09 4.2023 98.16
510.08 2.1092 2.04 4.1776 101.39
500.22 2.0684 1.99 4.0532 99.74 100.06 1.47
490.31 2.0274 1.93 3.9445 99.33
480.04 1.9849 1.87 3.8864 101.68
254nm，4nm(1.00) 270nm，4nm(1.00) 270nm，4nm(1.00)
浓度(mg/mL)
峰
面
积
(A
)
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2.8 不同产地珠子草药材咖啡酸的含量不同
产地珠子草药材中咖啡酸的含量差异较大，平均
含量为0.40%。云南景洪的含量最高为0.68%，其
次为云南孟腊为0.60%，含量最低的为广西南宁
0.20%，明显低于其他各产地，约为最高量的1/3，
见表3。
表3 珠子草药材不同产地咖啡酸含量测定结果(n=3)
产地 咖啡酸/% RSD/%
云南蛮耗 0.41 1.28
云南个旧 0.51 1.32
云南景洪 0.68 0.93
云南孟腊 0.60 1.25
云南昆明 0.43 1.14
湖南株洲 0.30 1.03
海南三亚 0.36 0.91
陕西汉中 0.29 1.21
广东湛江 0.26 1.36
甘肃武都 0.39 1.05
广西南宁 0.20 1.14
3 讨论
建立的珠子草药材有效成分咖啡酸含量的
HPLC测定方法，在0.122～0.610mg/mL浓度范围
内，咖啡酸的色谱峰面积与浓度呈良好的线性关
系，回归方程为：Y=4.786×107X+165 969.46，相
关系数 r=0.9990，加样回收率为100.06%。
不同产地珠子草药材中咖啡酸含量差异较
大，平均为0.40%，测定结果反映出珠子草中咖啡
酸含量以云南产地为最高，均在0.4%以上，其他
产地珠子草咖啡酸含量均在0.4以下，若以咖啡
酸含量为评价指标，可确定珠子草云南产地的道
地性；甘肃武都珠子草系从云南蛮耗引种，其咖啡
酸含量高于云南外的其他产地，但引种后是否会
发生品种退化和各种成分含量的缓慢变化，仍需
进一步研究。
参考文献
［1］ 石其福.咖啡酸对破骨细胞形成及分化的影响［D］.河北医
科大学，2010：46-49.
［2］ 周燕园.HPLC法测定墨旱莲配方颗粒中绿原酸和咖啡酸［J］.
中成药，2012，35(2)：374-377.
［3］ 宋宇红，王盛.高效液相色谱法测定蒲公英注射液中咖啡酸
含量［J］.安徽医药，2012，18(11)：1596-1597.
［4］ 刘燕，彭章明，粟珊，等.HPLC同时测定宜宾产蒲公英中的咖
啡酸和绿原酸［J］.华西药学杂志，2012，15(2)：198-199.
［5］ 赵春贵，李海鹏，张立伟，等.中草药有效成分绿原酸和咖啡
酸抗氧化活性研究［C］.第八届全国发光分析暨动力学分析
学术研讨会论文集，2005：67.
［6］ 王素军，张志伟，张振清，等.绿原酸在大鼠原位肠-肝灌流
标本中代谢［C］.第八次全国药物与化学异物代谢学术会议
论文摘要，2006：44-45.
［7］ 陈少洲.油葵中绿原酸和咖啡酸的提取及对oxLDL诱导损
伤内皮细胞的保护作用［D］.中国农业大学，2003：33-36.
［8］ 何渝军.咖啡酸苯乙酯对大肠癌细胞抑制作用及对β-
catenin通路相关基因的影响［D］.第三军医大学，2004：50-
51.
收稿日期：2013-01-27
*基金项目：兰州市科技局项目(编号2007-1-75)
作者简介：梁云(1973—)，男，副主任药师。研究方向：医院药
学及临床药学研究。
△通讯作者：李彩东(1969—)，女，主任药师。研究方向：类风
湿性关节炎的中西医结合治疗。
RP-HPLC法测定展筋酊中
大黄素、大黄酚的含量 *
郭钰龙 1，王谨慧 2，靳子明 2，陶翠祥 2，杨锡仓 2△
1 甘肃中医学院，甘肃 兰州 730020；2 甘肃中医学院附属医院
［摘 要］目的：建立展筋酊中大黄素,大黄酚的RP-HPLC测定方法。方法：Symmetry C18色谱柱(5.0μm),
甲醇∶0.1％磷酸溶液(85∶15)为流动相，流速：0.8mL/min；柱温：20℃，检测波长：423nm。结果：大黄素、大黄酚
在 10.0～30.0μg/mL 浓度范围内与峰面积呈良好的线形关系(r=0.999 9，0.999 7)；平均回收率分别为
101.35%和98.25%(RSD=2.26%,1.17%)。结论：本方法快速、灵敏、专属性强，可用于展筋酊的含量测定。
［关键词］展筋酊；HPLC法；大黄素；大黄酚；含量测定
［中图分类号］R284［文献标识码］A ［文章编号］1004-6852(2013)05-0024-04
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