全 文 :显示肝细胞体积增大,排列紊乱,细胞内含有大量大
小不一的脂肪泡,部分区域伴有炎症细胞浸润,表明
脂肪肝模型复制成功。
富铬松花粉中有机铬的含量较普通松花粉高,
三价铬是一种参与人体糖和脂质代谢的微量元素,
是体内葡萄糖耐量因子(GTF)的重要组成部分,协
同胰岛素一起参与人体糖和脂质代谢〔6〕。本研究
表明灌服富铬松花粉后大鼠肝脏系数、血脂和血清
转氨酶水平降低,肝脏组织病理学形态变化得到改
善,表明富铬松花粉通过改善肝功能、降低脂质水平
起到了抗 NAFLD作用。同时,本课题组前期降糖实
验研究表明,富铬松花粉能显著降低四氧嘧啶诱导
的糖尿病大鼠的血糖,改善胰岛素抵抗,具有调节血
糖的功能〔7〕,以上研究结果表明富铬松花粉能通过
改善脂质代谢紊乱,调节糖脂代谢,抑制胰岛素抵
抗,从而达到良好的保肝作用。本研究为富铬松花
粉治疗非酒精性脂肪肝的临床用途提供了依据。
参 考 文 献
[1]谢萍,周新喜,张琴 . 非酒精性脂肪肝的发病机制和治
疗[J].中西医结合学报,2010,8(3):201-209.
[2] LB Almeida-Muradian,Lucila C Pamplonaa,Slvia Coim-
braa,et al. Chemical composition and botanical evaluation
of dried bee pollen pellets[J]. Journal of food composition
and analysis,2005,18(1):105-111.
[3]刘玉玲,王建伟,佟继民,等 . 松花粉提取物对大鼠实验
性高血脂症的预防功能研究[J].实验动物科学,2013,
30(5):41-43.
[4]赵立新,喻陆 . 松花粉的作用机理及临床应用[J]. 吉
林中医药,2004,25(1):49-51.
[5]付俊鹤,余明华,许武桥,等 . 铬的生物学功能及富铬酵
母的应用[J]. 微量元素与健康研究,2011,28(1):66-
68.
[6] Vincent JB. Quest for the molecular mechanism of chromi-
um action and its relationship to diabetes[J]. Nutr Rev,
2000,58(3):67-72.
[7]宣自华,胡翠云,王学林,等 . 富铬松花粉中铬元素的含
量测定及降血糖作用研究[J].安徽医药,2011,15(7):
801-803.
收稿日期:2014-02-18
基金项目:四川省科技支撑计划项目(2010SZ0319;2012SZZ026)
作者简介:聂东(1968-),男,副教授,主要从事运动医学和中医药保健方向的教学和研究工作;Tel:0816-2200228,E-mail:myniedong@
163. com。
余甘子抗脑缺氧作用及对低压运动后血清抗氧化物质的影响
聂 东1,田 徽1,2,江 北1,马 骁2,周 莉1,刘晓梅1
(1. 绵阳师范学院生命科学与技术学院,四川 绵阳 621000;2. 成都中医药大学药学院中药教研室,四川
成都 611137)
摘要 目的:观察余甘子抗脑缺氧作用及对模拟高原低压环境下小鼠运动后血清抗氧化物质的影响。方法:
采用小鼠断头法、腹腔注射亚硝酸钠法,测定余甘子对脑缺血缺氧小鼠存活时间的影响;采用小鼠负重游泳实验,
测定小鼠在低压环境下力竭游泳时间;采用游泳实验,测定小鼠游泳后不同时间血清乳酸(LD)含量;采用定时不
负重游泳实验,测定小鼠血清超氧化物歧化酶(SOD)、谷胱甘肽过氧化物酶(GSH-Px)活性、以及一氧化氮(NO)及
丙二醛(MDA)水平。结果:与空白对照组比较,余甘子组小鼠断头、腹腔注射亚硝酸钠的存活时间均显著延长(P <
0. 05或 P <0. 01);与低压空白对照组比较,余甘子组小鼠负重游泳力竭时间显著延长(P < 0. 01),低压游泳后血清乳
酸曲线下面积显著下降(P <0. 05或 P <0. 01);定时游泳后,余甘子组小鼠血清超氧化物歧化酶(SOD)、谷胱甘肽过
氧化物酶(GSH-Px)活性显著升高(P <0. 01),丙二醛(MDA)含量显著降低(P < 0. 01)、一氧化氮(NO)含量显著升高
(P <0. 01)。结论:余甘子对脑缺氧小鼠模型有显著的脑保护作用,可提高低压环境下运动后机体的抗氧化功能。
关键词 余甘子;脑缺氧;低压环境;乳酸;抗氧化物质
中图分类号:R285. 5 文献标识码:A 文章编号:1001-4454(2014)08-1448-05
DOI:10. 13863 / j. issn1001-4454. 2014. 08. 035
余甘子系大戟科植物余甘子 Phyllanthus embli-
ca L. 的干燥成熟果实,又名油甘子、滇橄榄、橄榄
子、庵摩勒、久如拉、麻顶帮,是一种具护肝、抗心血
管系统疾病、抗衰老等多种药理活性且安全性较高
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的藏族习用药材〔1〕,同时也是卫生部公布既可以作
为食品也可以作为药品或保健食品开发的重要原料
之一。《本草纲目》称其“主补益气,久服轻身,延年
益寿”,目前也有研究报道发现余甘子在模拟高原
环境下具有缓解小鼠体力疲劳的作用〔2〕,笔者注意
到余甘子的很多药效实验显示其作用与抗高原反应
良药红景天相似〔3,4〕,因此其有开发为高原运动食
品的广阔应用前景。目前关于余甘子在低压环境中
提高运动能力的具体机理笔者未见文献报道,本实
验通过研究余甘子对脑缺血缺氧模型的保护作用及
对低压环境下小鼠运动后血清抗氧化物质的影响,
探讨其在高原上缓解运动疲劳作用的机理,为进一
步开发余甘子提供理论依据。
1 材料与仪器
1. 1 实验动物 清洁级昆明小鼠,体质量 18 ~ 20
g,雌雄各半,由四川大学华西医学院实验动物中心
提供,许可证号:SCXK(川)-10-2006。
1. 2 药物与试剂 余甘子、红景天购自成都市荷
花池中药材市场,经绵阳师范学院生科院罗明华教
授鉴定分别为 2010 年版中国药典一部收载品种
Phyllanthus emblica L. 的果实及 Rhodiola crenulata
(Hook. f. et. Thoms. )H. Ohba. 的根茎;乙醇、亚硝酸
钠等试剂购于成都科龙试剂有限公司,分析纯;丙二
醛(MDA)、超氧化物歧化酶(SOD)、谷胱甘肽过氧
化物酶(GSH-Px)、一氧化氮(NO)、血清乳酸(LD)
试剂盒均购于南京建成生物工程研究所。
1. 3 主要仪器 UltroSPec 3300 pro 紫外可见分光
光度计(美国 Amersham 公司);Buchi461 旋转蒸发
仪(瑞士 Buchi公司);5415D 离心机(德国 Eppend-
of);EIX800U 全波长扫描酶标仪(美国 Biotek 公
司)。
2 方法
2. 1 药物的制备 取余甘子药材,10 倍量水浸泡
30 min,武火煮沸,文火煎煮 2 h,过滤;滤渣加 10 倍
量水,武火煮沸,文火煎煮 2 h,过滤。合并 2 次滤液
后用。滤渣用 10 倍量 60%乙醇 80 ℃浸渍 90 min,
45 ℃旋转蒸发回收乙醇至干。加入合并后的 2 次
滤液,旋蒸浓缩定容至相应剂量体积即得。
2. 2 余甘子对小鼠脑缺血缺氧的影响 昆明小鼠
50 只,分为空白对照组、红景天阳性对照组及余甘
子低、中、高剂量组,每组 50 只。空白对照组灌胃生
理盐水 20 mL /kg,余甘子组灌胃 20 mL /kg 余甘子
水煎液,红景天组灌胃 20 mL /kg红景天水煎液。具
体给药剂量见表 1。连续灌胃 3 d,末次灌胃给药 30
min后,迅速从小鼠耳后颈部断头。记录从断头开
始小鼠张口次数以及至最后一次张口的时间,即为
小鼠存活时间。另取昆明小鼠 50 只,雌雄各半,按
以上方式分组给药,连续 3 d,末次灌胃给药 30 min
后,按 10 mL /kg 腹腔注射 4%亚硝酸钠溶液,记录
从腹腔注射开始至小鼠腹式呼吸消失的时间,即为
小鼠存活时间〔5〕。
2. 3 低压环境的模拟 顶部具塞真空干燥器,其
橡胶塞打 2 个孔,一孔由橡胶管连接真空泵,另一孔
由橡胶管连接空气,由管夹控制空气进出量,抽气使
真空表指针达到 0. 03 ~ 0. 035 mPA 间且平衡为标
准,以此达到模拟高原的低压环境。
2. 4 余甘子对小鼠低压负重游泳能力的影响 取
昆明小鼠 60 只,分为常压空白对照组、低压空白对
照组、余甘子低剂量组、余甘子中剂量组、余甘子高
剂量组、红景天阳性对照组,每组 10 只。空白对照
组灌胃 20 mL /kg 生理盐水,余甘子组灌胃 20 mL /
kg余甘子水煎液,红景天组灌胃 20 mL /kg 红景天
水煎液。具体给药剂量见表 2。灌胃后,除常压空
白对照组外,其他各组小鼠均放入模拟低压环境饲
养,于第 3 天给药 60 min 后,将小鼠置于低压环境
中装满水的 1 000 mL烧杯中,负重体质量 5%铅块,
水温为室温,进行游泳实验。以头部全部沉入水中
10 s不能浮出水面,记录各组自游泳开始至力竭状
态的时间作为小鼠力竭游泳时间〔5〕。
2. 5 余甘子对小鼠低压游泳后不同时间血清乳酸
的影响 取昆明小鼠 60 只,分为常压空白对照组、
低压空白对照组、余甘子低剂量组、余甘子中剂量
组、余甘子高剂量组、红景天阳性对照组,每组 10
只。空白对照组灌胃 20 mL /kg生理盐水,余甘子组
灌胃 20 mL /kg 余甘子水煎液,红景天组灌胃 20
mL /kg红景天水煎液。具体给药剂量见表 3。灌胃
后,除常压空白对照组外,其他各组小鼠均放入模拟
低压环境饲养,于第 3 天取各组各小鼠迅速眼球取
血,12 000 r /min离心分离血清,每组小鼠于末次给
药 30 min后从内眦静脉丛采血,然后不负重置于低
压环境中装满水的 1 000 mL烧杯中泳游泳 10 min,
取出后立即再次从内眦静脉丛采血,在低压环境休
息 20 min 后第 3 次采血。上述 3 个时间点的血样
按血清乳酸测定试剂盒要求测定各时间段血清乳
酸,并计算曲线下面积〔6〕。
曲线下面积 = 5 ×(游泳前血乳酸值 + 3 ×游泳后 0 min
血乳酸值 + 2 ×游泳后休息 20 min血乳酸值)
2. 6 余甘子对小鼠低压游泳后血清抗氧化物质的
影响 动物分组造模及给药同“2. 5”项,于第 3 天
给药 60 min后,将小鼠不负重置于低压环境中装满
·9441·Journal of Chinese Medicinal Materials 第 37 卷第 8 期 2014 年 8 月
水的 1 000 mL烧杯中游泳 15 min,迅速眼球取血,
12 000 r /min 离心分离血清,按试剂盒说明书操作
测定各组小鼠血清 MDA、SOD、GSH-Px、NO水平。
2. 7 统计学处理 采用 SPSS 17. 0 统计软件对实
验数据进行分析,计量资料以 珋x ± s 表示,各组间比
较采用单因素方差分析(One-way ANOVA)检验。
以 P < 0. 05 为差异有统计学意义。
3 结果
3. 1 余甘子对小鼠脑缺血缺氧的影响 结果如表
1 所示,与空白对照组比较,余甘子高剂量组小鼠的
断头张口次数、存活时间显及腹腔注射亚硝酸钠后
存活时间显著延长(P < 0. 05 或 P < 0. 01),余甘子
中、低剂量组小鼠断头及亚硝酸钠小鼠存活时间有
延长趋势但差异无统计学意义。
表 1 余甘子对小鼠脑缺血缺氧的影响(珔x ± s,n =10)
组别 剂量 /(g /kg) 断头
张口次数 /次
断头
存活时间 / s
腹腔注射亚硝酸
钠后存活时间 / s
空白对照组 - 11. 90 ± 2. 88 15. 37 ± 4. 13 596. 54 ± 74. 84
红景天组 0. 9 16. 70 ± 4. 85* 23. 47 ± 5. 86** 707. 11 ± 111. 90**
余甘子高剂量组 13. 5 16. 40 ± 4. 70* 20. 08 ± 6. 29* 710. 26 ± 92. 71**
余甘子中剂量组 1. 4 13. 20 ± 4. 16 16. 92 ± 4. 06 651. 64 ± 88. 21
余甘子低剂量组 0. 4 12. 30 ± 2. 98 16. 28 ± 4. 31 645. 30 ± 80. 10
注:与空白对照组比较,* P < 0. 05,**P < 0. 01
3. 2 余甘子对小鼠低压负重游泳能力的影响 结
果如表 2 所示,各给药组及空白对照组小鼠游泳时
间均显著长于低压空白对照组(P < 0. 01)。
表 2 余甘子对小鼠低压负重游泳能力
的影响(珔x ± s,n =10)
组别 剂 量 /(g /kg) 游泳时间 / s
常压空白对照组 - 887. 84 ± 319. 68**
低压空白对照组 - 542. 96 ± 313. 96
红景天组 0. 9 1898. 88 ± 248. 13**
余甘子高剂量组 13. 5 1399. 38 ± 260. 17**
余甘子中剂量组 1. 4 1049. 66 ± 361. 17**
余甘子低剂量组 0. 4 1017. 38 ± 338. 42**
注:与低压空白对照组比较,**P < 0. 01
3. 3 余甘子对小鼠低压游泳后不同时间血清乳酸
的影响 结果如表 3 所示,常压空白对照组小鼠血
清乳酸含量及曲线下面积均显著低于低压空白对照
组(P < 0. 05 或 P < 0. 01),余甘子高、低剂量组小鼠
游泳休息 20 min 后的血乳酸值和小鼠运动后血乳
酸的曲线下面积较低压空白对照组显著降低(P <
0. 05 或 P < 0. 01)。
3. 4 余甘子对小鼠低压游泳后血清 SOD、MDA、
GSH-Px、NO水平的影响 结果如表 4 所示,常压空
白对照组与低压空白对照组 SOD、GSH-Px 活性及
MDA、NO含量差异均有统计学意义(P < 0. 05);与
低压空白对照组比较,余甘子各剂量组小鼠血清
MDA含量显著降低(P < 0. 01);余甘子高、中剂量
组小鼠血清 SOD、GSH-Px 活性显著升高(P <
0. 01);余甘子高剂量组小鼠血清 NO含量显著升高
(P < 0. 01)。
4 讨论
当平原地区的人急速进入高原时,高原低氧的
环境会造成机体氧供应不足,产生急性高原病,现代
研究也表明,高原病与脑缺氧有密切的关系〔7〕。本
研究观察了余甘子对脑缺血缺氧模型的保护作用,
本实验结果显示,余甘子能显著提高断头小鼠张口
次数及存活时间(P < 0. 05)及亚硝酸钠小鼠存活时
间(P < 0. 01),表明余甘子具有的抗脑缺氧作用。
乳酸是无氧代谢的产物。当机体处于剧烈运动
或低压环境中,氧耗增加或摄氧量减少导致机体供
氧不足时,机体通过对葡萄糖无氧酵解的方式来获
得能量,同时产生代谢产物乳酸,因此,如果出现机
表 3 余甘子对小鼠低压游泳后血清乳酸含量及曲线下面积的影响(珔x ± s,n =10)
组别 剂量 /(g /kg)
血清乳酸含量 /(mmol /L)
游泳前 游泳 10 min 游泳后休息 20 min
乳酸曲线下面积
常压空白对照组 - 3. 24 ± 0. 27 6. 55 ± 0. 67* 3. 85 ± 0. 42** 152. 94 ± 12. 69**
低压空白对照组 - 3. 49 ± 0. 32 7. 19 ± 0. 58 4. 42 ± 0. 46 169. 40 ± 12. 78
红景天组 0. 9 3. 32 ± 0. 30 6. 59 ± 0. 70* 3. 98 ± 0. 47* 155. 39 ± 14. 91*
余甘子高剂量组 13. 5 3. 33 ± 0. 29 6. 56 ± 0. 59* 3. 93 ± 0. 37* 154. 29 ± 8. 22**
余甘子中剂量组 1. 4 3. 40 ± 0. 27 6. 65 ± 0. 46 4. 02 ± 0. 50 156. 89 ± 10. 46*
余甘子低剂量组 0. 4 3. 27 ± 0. 31 6. 54 ± 0. 66* 3. 93 ± 0. 48* 153. 66 ± 12. 64**
注:与低压空白对照组比较,* P < 0. 05,**P < 0. 01
·0541· Journal of Chinese Medicinal Materials 第 37 卷第 8 期 2014 年 8 月
表 4 余甘子对小鼠低压游泳后血清 SOD、MDA、GSH-Px、NO水平的影响(珔x ± s,n =10)
组别 剂 量 /(g /kg) MDA/(nmol /mL) SOD /(U/mL) GSH-Px /(U/mL) NO/(μmol /L)
常压空白对照组 - 4. 61 ± 0. 95* 82. 23 ± 16. 57* 79. 78 ± 15. 02* 64. 78 ± 8. 95*
低压空白对照组 - 5. 52 ± 1. 40 67. 79 ± 14. 72 63. 87 ± 11. 25 53. 82 ± 12. 31
红景天组 0. 9 2. 24 ± 0. 92** 102. 17 ± 15. 78** 93. 27 ± 12. 33** 71. 12 ± 10. 70**
余甘子高剂量组 13. 5 2. 10 ± 0. 84** 95. 76 ± 14. 29** 91. 37 ± 13. 56** 66. 43 ± 9. 28**
余甘子中剂量组 1. 4 3. 44 ± 0. 78** 89. 11 ± 10. 34** 88. 20 ± 9. 93** 61. 03 ± 7. 10
余甘子低剂量组 0. 4 4. 22 ± 1. 07** 80. 92 ± 16. 98 65. 32 ± 10. 8 57. 72 ± 11. 10
注:与低压空白对照组比较,* P < 0. 05,**P < 0. 01
体内乳酸增加或大量积累的现象,则表明机体的氧
供不足,有氧代谢能力下降,有氧代谢供能减少,无
氧代谢供能增加。在高原缺氧的环境下运动,由于
糖分解加速,致使丙酮酸和 NADH 生成速度大大加
快,同时缺氧抑制线粒体氧化丙酮酸和 NADH,上述
因素共同起作用,可明显提高乳酸生成速率〔8〕。本
实验结果显示,余甘子能显著提高小鼠在低压环境
的负重游泳能力能力(P < 0. 01),低压环境由于供
氧不足,小鼠负重游泳能力能力显著下降(P <
0. 05),乳酸产生显著高于常压小鼠(P < 0. 05),乳
酸的消除显著低于常压小鼠(P < 0. 01),这吻合高
原训练早期的现象,在给予余甘子后,小鼠在低压环
境的负重游泳能力显著提高(P < 0. 01),乳酸产生
及代谢接近常压小鼠,提示余甘子具有提高低压环
境下小鼠有氧代谢能力的作用,从而减少乳酸生成
并促进其消除。
运动使体内自由基生成增加,研究发现,在众多
自由基中,氧自由基与运动的关系最为密切。当生
物体内氧自由基的含量增加时,氧自由基就会与生
物膜中的多不饱和脂肪酸发生脂质过氧化反应。细
胞膜系统脂质过氧化的结果就会使膜的液态性、流
动性改变,膜上的酶、受体及离子通道受损,内质网
结构改变,甚至破坏。在高原中运动时,高原低氧低
压的环境使体内氧化与抗氧化之间的平衡紊乱,脂
质过氧化反应更加增强,抗氧化酶的保护功能进一
步减弱〔9〕。丙二醛(MDA)是脂质过氧化物降解产
物中的产物,其可间接获取自由基水平信息;超氧化
物歧化酶(SOD)主要由肝细胞产生,存在于肝细胞
胞浆和线粒体,是重要的超氧阴离子清除剂,可减
缓、抵御自由基损害,保护细胞;谷胱甘肽过氧化物
酶(GSH-Px)也可以清除由自由基诱发的脂质过氧
化物,保护细胞膜结构和功能的完整性;一氧化氮
(NO)是内皮细胞分泌的一种活性物质,具有扩张血
管、防止血小板聚集、激活,防止白细胞和血小板黏
附于血管内皮细胞等作用。人体内 NO代谢及氧化
抗氧化系统功能状态与健康密切相关,一旦 NO 代
谢异常及氧化抗氧化系统的动态平衡发生紊乱或破
坏,就会导致体内自由基浓度过高及一系列自由基
反应病理性加剧,造成生命反应异常。同样超氧阴
离子也是的 NO猝灭剂,生成超氧亚硝酸阴离子,过
量的亚硝酸阴离子可,导致羟自由基的大量生成从
而引发脂质过氧化〔10-12〕。本实验结果显示,余甘子
能显著提高在低压环境中不负重定时游泳后小鼠血
清中的 SOD、GSH-Px、NO 水平(P < 0. 01),显著降
低 MDA的含量。表明余甘子在低压环境中提高运
动能力可能与提高机体抗氧化能力相关。
本实验结果证实,余甘子对脑缺血缺氧具有保
护作用,能显著提高小鼠低压缺氧环境中运动能力,
其作用机制与提高小鼠有氧代谢能力和抗自由基损
伤作用有关,为今后进一步开发利用余甘子高原运
动食品奠定了坚实的基础。
参 考 文 献
[1]李萍,谢金鲜,林启云 . 余甘子对 D-半乳糖胺致小鼠急
性肝损伤的影响[J].云南中医中药杂志,2003,24(1):
31-33.
[2]张钢,周思敏,田怀军,等 . 余甘子对模拟高原环境小鼠
抗疲劳作用的实验研究[J].解放军药学学报,2011,27
(3):208-211.
[3]崔炳权,黄伟侨,林元藻 . 余甘子抗疲劳、抗缺氧作用实
验研究[J].中国现代中药,2006,10(6):26-28.
[4]吴万征,李朝晖,梁球 . 西藏红景天提取物抗缺氧作用
的实验研究[J].中药材,2005,28(1):41-42.
[5]陈奇 . 中药药理研究方法学[M].北京:人民卫生出版
社,1993:780-783.
[6]中华人民共和国卫生部 . 保健食品检验与评价技术规
范[S].北京:清华同方电子出版社,2003:91-93.
[7]杨燕,马慧萍,张汝学,等 . 急性高原病发病机制的研究
进展[J].医学综述,2010,16(17):2561-2563.
[8]吴环成 . 高原训练“乳酸矛盾现象”剖析[J].长江大学
学报(自然科学版),2010,7(3):658-659.
[9]崔建华,张西洲,何富文,等 . 不同海拔高度不同高原居
住时间血中 MDA 和 SOD 的测定[J]. 高原医学杂志,
1999,9(4):12-14.
·1541·Journal of Chinese Medicinal Materials 第 37 卷第 8 期 2014 年 8 月
[10]崔建华,王引虎,张西洲,等 . 红景天对高原人体运动
后自由基和血清肌酸激酶的影响[J]. 航天医学与医
学工程,2001,14(6):448-452.
[11]崔建华,张西洲,王引虎,等 . 银杏叶片对高原人体运
动后一氧化氮及一氧化氮合酶的影响[J]. 中国临床
康复,2004,8(33):7512-7513.
[12]周伯庭,丁志刚,李新中,等 . 茶多酚对染铅小鼠 NO、
NOS、MDA、SOD的影响[J].中国医院药学杂志,2008,
28(18):1563-1565.
收稿日期:2014-02-14
基金项目:广东省科技计划项目(2010B060900056);广东省国际合作项目(2011B050300024);广东省自然科学基金(S2012010009380);国
家自然科学基金(81274160)
* 通讯作者:周本杰,Tel:020-61643549,E-mail:zhoubj163@ 163. com。
护肝清脂片对非酒精性脂肪肝模型大鼠
肝脏蛋白质合成及胆汁代谢的影响
唐外姣,姚育法,殷锦锦,曾 璐,周本杰*
(南方医科大学珠江医院药学部,广东 广州 510282)
摘要 目的:观察护肝清脂片对非酒精性脂肪肝模型大鼠肝脏蛋白质合成及胆汁代谢的影响。方法:将 60 只
雄性 SD大鼠按体质量随机分为正常对照组、模型组、非诺贝特组及护肝清脂片高、中、低剂量组。采用高脂饲料边
造模边给药,正常对照组和模型组给予等体积生理盐水,连续灌胃 10 w后,行腹主动脉采血并处死所有大鼠,收集
血清,并测定各组大鼠血清总蛋白、白蛋白、球蛋白、白蛋白 /球蛋白、总胆红素、间接胆红素及胆汁酸等指标。结
果:与正常对照组比较,模型组大鼠血清总蛋白、球蛋白、总胆红素、间接胆红素及胆汁酸水平显著升高(P < 0. 05)。
而护肝清脂片各剂量组及非诺贝特组大鼠体内血清总蛋白、球蛋白、总胆红素、间接胆红素及胆汁酸水平均保持在
正常范围内,与模型组比较有统计学意义(P < 0. 05)。结论:护肝清脂片能阻止长期高脂饲料喂养对大鼠机体的损
伤,使肝脏蛋白质合成及胆汁代谢维持正常。
关键词 非酒精性脂肪肝病;护肝清脂片;蛋白质合成;胆汁代谢
中图分类号:R285. 5 文献标识码:A 文章编号:1001-4454(2014)09-1452-03
DOI:10. 13863 / j. issn1001-4454. 2014. 08. 036
非酒精性脂肪性肝病(non-alcoholic fatty liver
disease,NAFLD)是指除酒精和其他明确的肝损害因
素所致的,以弥漫性肝细胞大泡性脂肪变为主要特
征的临床病理综合征,NAFLD的病理过程包括单纯
性非酒精性脂肪肝(nonalcoholicsimple fatty liver,
NAFL)、非酒精性脂肪性肝炎(nonalcoholic steato-
hepatitis,NASH)及 NASH相关肝硬化〔1〕。
笔者前期工作已对护肝清脂片对 NAFLD 模型
大鼠的体质量、血清脂质水平(GLU、CHOL、TG)、氧
化应激受损水平(SOD、MDA、CAT、TAOC)、肝脏组
织病理学等指标变化的影响进行了观察,证实了护
肝清脂片对 NAFLD模型大鼠具有良好的预防及治
疗作用〔2〕。本文拟就护肝清脂片对 NAFLD 模型大
鼠肝脏蛋白质合成及胆汁代谢两方面的影响作进一
步的探讨。
1 材料
1. 1 实验动物 清洁级 8 周龄雄性 SD 大鼠,体质
量 150 ~ 180 g,收广州中医药大学动物实验中心提
供,合格证编号:0089476。常规饲养于南方医科大
学附属南方医院药学部清洁级动物房。
1. 2 药物与试剂 护肝清脂片由南方医科大学珠
江医院制剂室提供(批号:20101012),动物给药剂
量按实验动物与人体体表面积比等效量核算比率计
算,去除片剂表面包衣后用蒸馏水制成混悬剂,分
高、中、低 3 个剂量。非诺贝特片(规格 0. 1 g /片,
100 片 /瓶),由江苏恩华药业股份有限公司生产(批
号:20091216)。按上述方法制成混悬剂。高脂饲料
由广东省医学实验动物中心生产,真空包装并常温
保存。总胆汁酸(TBA)购于上海研吉生物科技有限
公司(批号:201208)。
2 方法
2. 1 造模 采用高脂饲料〔3〕(配方:胆固醇 2%、胆
酸钠 0. 5%、丙硫氧嘧啶 0. 2%、蔗糖 10%、猪油
10%、豆油 3%、基础饲料 74. 3%)饲喂,自由摄食、
饮水,连续 10 w(结合文献以及前期预实验结果),
建立 NAFLD大鼠模型。
·2541· Journal of Chinese Medicinal Materials 第 37 卷第 8 期 2014 年 8 月