全 文 ：2009年 5月第 5期　　　　　　　　　　　　　中国民族医药杂志　　　　　　　　　　　　　　　　　　 　
　药物定性定量研究　
高效液相色谱法测定新疆种植地锦草中槲皮素与山柰素的含量■
　　　　　　新疆维吾尔医学专科学校(和田 848000)　买买提江·阿布都瓦克　吐尔洪·吾买尔　玉素甫·艾合买提
　　　　　　江西中医学院(南昌 330004)　　　　　　龚千锋(博士生导师)　　　　　　　　　　　　　　　
　　　　　　新疆和田县医院(和田 848000)　　　　　古丽扎曼·阿布都拉　　　　　　　　　　　　　　　
摘　要:目的:建立新疆种植地锦草中高效液相色谱(HPLC)法的含量测定方法。方法:采用 HPLC对槲皮素与山柰素进行
定量测定;采用戴安 Ultimate3000系列高效液相色谱仪 Diamonsil(钻石)C
18
5μm200×4.6mm色谱柱 ,检测波长为 360nm。结
果:色谱条件为流动相甲醇 -0.025%磷酸水(60:40);柱温 30℃;流速 1.0ml/min,此法槲皮素线性范围 3.3725 ～ 134.90μg, r
=0.9999,山柰素线性范围 1.125 ～ 45.0μg, r=0.9999,方法的精密度 RSD为槲皮素 0.34%、山柰素 0.26%(n=5)。槲皮素
与山柰素平均回收率分别为 98.0%、 99.80%(n=5)。结论:此方法操作简便 、准确性好 ,可以作为地锦草中槲皮素与山柰素
含量测定方法。
关键词:新疆地锦草;高效液相色谱法;槲皮素;山柰素;含量测定
中图分类号:R291.5　文献标识码:B　文章编号:1006-6810(2009)05-0037-02
　　地锦草为大戟科大戟属地锦 EuphorbiahumifusaWild.
的干燥全草。地锦草是一种常用中药材 , 也是一种维吾尔
药材和蒙药材 , 在《中华人民共和国卫生部药品标准维吾尔
药材分册》和《内蒙古药材标准》均有记载。地锦草具有清
热解毒 、凉血止血等功效 ,主要用于治疗各种皮肤病 、瘙痒 、
痢疾 、肠炎 、咳血 、吐血 、便血 、崩漏 、外伤出血 、湿热黄疸 、乳
汁不通 、痈肿疔疮及跌打肿痛等疾病。新疆地锦草具有几
百年的栽培历史 , 但是没有有效成分含量测定的资料 , 通过
测定地锦草有效成分槲皮素与山柰素 , 为控制药材质量与
制定或完善地锦草饮片标准提供科学依据。
1　仪器 、试剂和药材
戴安 Ultimate3000系列高效液相色谱仪;色谱柱:Dia-
monsil(钻石)C18 (5μm, 200 ×4.6mm);METTERAE240电
子天平(瑞士);槲皮素(批号:100081-200406), 山柰素(批
号:10861-200701)均为供含量测定用对照品 , 均购自中国
药品生物制品检定所。地锦草新疆和田地区栽培品 , 经江
西中医学院赖学文老师鉴定均为正品地锦草 , 为大戟科植
物地锦 EuphorbiahumifusaWild.的干燥全草。甲醇为色谱
纯 , 其他试剂均为分析纯 ,流动相用水为重蒸馏水。
2　方法与结果
2.1　色谱条件:色谱柱为 Diamonsil(钻石)C
18
(5μm, 200×
4.6mm)色谱柱 , 检测波长为 360nm。流动相为甲醇 -0.
025%磷酸水(60:40);柱温 30℃;流速 1.0ml/min。
2.2　线性关系的考察:精密称取槲皮素对照品 13.49mg,
　■自治区科技兴新项目。项目编号:2006005A03
山柰素对照品 4.50mg置于 100ml棕色溶量瓶中 , 加入 80%
甲醇溶解 ,定容于 100ml,作对照品溶液。
精密吸取上述对照品溶液制成一系列不同浓度的对照
品溶液 ,分别进样 ,按色谱条件测定峰面积积分值 , 以峰面
积为纵坐标 ,浓度为横坐标 , 绘制标准吸收曲线 , 线性范围
和回归方程分别为槲皮素;Y=0.3082X-0.481,相关系数 r
=0.9999, 线性范围 3.3725 ～ 134.90μg;山柰素:Y=0.
3168X-0.0641,相关系数 r=0.9999,线性范围 1.125 ～ 45.
0μg。 HPLC色谱图见图 1。
A.对照品　B.地锦草　1.槲皮素　2.山柰素
图 1　HPLC色谱图
2.3　供试品溶液的制备:取本品粉末 1.5g, 精密称定 ,置具
塞锥形瓶中 , 精密加入 80%甲醇 50ml, 密塞 , 称定重量 , 加
热回流 1.5h, 放冷 , 在称定重量 , 用 80%甲醇补足减失重
量 ,摇匀 ,滤过 , 精密量取续滤液 20ml, 精密加入 25%盐酸
7ml, 置 85℃水浴中水解 30min, 取出 , 迅速冷却 , 转移至
50ml量瓶中 ,并加甲醇稀释至刻度 , 摇匀 ,滤过 , 取续滤液 ,
即得。
2.4　精密度实验:精密吸取对照品供试液 ,按 “ 2.1”项下条
件 ,连续进样 5次 , 5μl/次 ,测定峰面积积分值计算 RSD值 ,
结果槲皮素 、山柰素 RSD分别为 0.34%、0.26%,说明仪器
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DOI :10.16041/j.cnki.cn15-1175.2009.05.015
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和色谱条件均具有良好的精密度。
2.5　重现性实验:精密称取药品粉末 1.5g共 5份 , 按 “ 2.
3”项下样品溶液的制备操作 , 按 “ 2.1”项下条件连续进样 5
次 , 每次 10μl测定峰面积计算得槲皮素 RSD=0.94%、山
柰素 RSD=0.19%, 结果显示 ,该方法具有较好的重现性。
2.6　稳定性实验:在室温条件下 , 将样品按测定方法处理
后 , 分别在 0, 2.0, 4.0, 6.0, 10.0h每次进样 10μl, 测得峰面
积计算 , 槲皮素 RSD=0.84%、山柰素 =0.49%(n=5)。结
果表明 , 该溶液含量基本保持不变。
表 1　地锦草中槲皮素 、山柰素的含量
产地 槲皮素含量(%) 山柰素含量(%)
墨玉县 1 0.101 0.726
墨玉县 2 0.104 0.789
墨玉县 3 0.108 0.701
洛浦县 1 0.105 0.506
洛浦县 2 0.103 0.497
2.7　加样回收率实验:取已知含量地锦草粉末 5份 , 每份
约 0.1g精密称定 , 分别添加浓度为 0.2004mg/ml, 0.
2344mg/ml的槲皮素 , 山柰素对照品溶液 0.5ml、3ml按 2.3
项下供试品溶液制备方法制备并测定 、计算 , 槲皮素 、山柰
素的平均回收率分别为 98.0%、 99.8%;RSD分别为 0.
93%, 1.89%(n=5), 表明方法回收率较好。
2.8　样品的测定:供试液自动进样 10μl, 在 360nm处测定
峰面积 ,根据线性回归方程 ,计算含量见表 1。
3　讨　论
本实验利用高效液相法测定新疆栽培地锦草中槲皮
素 、山柰素的含量尚属首次 , 该方法简便 、准确 , 重现性好 ,
为地锦草药材的开发提供了质量控制标准。
参考文献
〔1〕国家药典委员会.中华人民共和国药典 〔S〕.北京:化学
工业出版社 , 2005.84.
〔2〕柳润辉 ,王汉波 , 孔令义.地锦草化学成分的研究〔J〕.中
草药 , 2001, 32(2):107.
〔3〕李肖玲 ,崔岚 , 祝德秋.正交试验法优选地锦草的提取工
艺〔J〕.中国中医药信息杂志 , 2005, 12(4):54.
2008年 12月 15日收稿
硬毛棘豆的生药学研究
内蒙古医学院 2008级硕士研究生(呼和浩特 010110)　乌兴荣　导师:那生桑
摘　要:目的:建立对硬毛棘豆进行生药学鉴别和总黄酮含量测定方法。方法:采用常规药材软化 、永久切片制作方法 、生药
学鉴别方法 、比色 -分光光度法。结果:确定了显微鉴别特征;首次检出硬毛棘豆还有生物碱类 、皂甙类成分总黄酮的含量
为 8.7625mg/g, RSD=0.98%, 平均回收率 97.59%。结论:所建立的方法简便、准确、重复性好,可用于硬毛棘豆的质量控制。
关键词:硬毛棘豆;生药鉴定;总黄酮;含量测定
中图分类号:R291.2　文献标识码:B　文章编号:1006-6810(2009)05-0038-03
　　硬毛棘豆(OxytropishirtaBge.)为豆科棘豆属植物。全
草入蒙药(蒙药名:旭润 -奥日都扎), 能杀 “黏 、消热 、燥
“黄水”、愈伤 、生肌 、止血 、消肿 、通便。主治瘟疫 、发症 、丹
毒 、腮腺炎 、阵刺痛 、肠刺痛 、脑刺痛 、麻疹 、通风 、游痛症 、创
伤 、月经过多 、吐血 、咳嗽等症 〔1〕。化学成分研究表明 , 硬毛
棘豆地上部分中含有多种黄酮类成分 〔2〕 , 为了给该药材的
进一步研究和开发利用提供科学依据 , 本文对梗毛棘豆进
行了生药学鉴别研究 , 利用分光光度法对其地上部分的总
黄酮含量进行了测定 。
1　仪器及材料
仪器:UV755B水浴锅(上海精密科学仪器有限公司),
ZMD-2自动磨刀机(上海医械专机厂), LZ-4012-2型回
转式切片机(浙江金华无线电厂), 101-1型电热鼓风干燥
箱(上海泸南科学仪器联营厂), ZF-I型三用紫外分析仪
(上海顾村电光仪器厂), 生物显微镜(OLYMPUSJAPAN),
电子天平(AUY120广州市新英电器有限公司)。
材料:硬毛棘豆(OxytropishirtaBge.)采自内蒙古大兴
安岭五叉沟林业局浩森沟林场 , 经作者鉴定。对照芦丁由
北京药品生物制品鉴定所生产。
实验所用试剂均为分析纯。
2　方法与结果
2.1　药材性状鉴别 〔2〕:本品多断碎 , 根呈短圆锥状 , 长 2 ～
3cm,直径 0.5 ～ 1cm, 表面黑褐色 , 具粗网状纹理 , 难折断 ,
断面纤维性。根头残存基生叶柄 , 叶柄基部与托叶合生 ,有
较长硬毛。叶多从叶轴上脱落 , 较完整者可见小叶对生或
近对生:小叶卵状披针形或长随圆形 , 长 1.5 ～ 5cm, 宽 5 ～
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