全 文 ：药物研究
作者简介:德吉措姆 (1973 －)，女，主管药师。E － mail:973867981@ qq. com
紫外分光光度法测定藏药二十五味
余甘子丸中总鞣质的含量
德吉措姆 尼 珍 阿 萍
西藏自治区食品药品检验所，西藏 拉萨 850000
【摘 要】 目的:建立二十五味余甘子丸中总鞣质的含量测定方法。方法:以没食子酸为对照品，磷钼钨酸为显色
剂，检测波长 760nm。结果:没食子酸的线性范围为 1. 024 ～ 10. 24μg (r = 0. 9996)，平均回收率 99. 2%，ＲSD = 0. 6% 。
结论:该方法简单、准确、重复性好，可用于二十五味余甘子丸中总鞣质的含量测定。
【关键词】 二十五味余甘子丸;紫外分光光度法;总鞣质;含量测定
【中图分类号】Ｒ284. 1 【文献标志码】A 【文章编号】1007 － 8517 (2016)14 － 0013 － 02
Determination of Total Tannin in Tibetan Traditional Medicine Ershiwuwei yuganzi pills by UV
DEJI Cuomu NI Zhen A Ping
Tibet Institute for Food and Drug Control，Lhasa 850000，China
Abstract:ObjectiveTo set up a method for determination total tannin in ershiwuwei yuganzi pill． Methods Gallic acid to be refer-
ence，and colored with Phos phorus molybdenum tungsten acid，the wavelength of detect was set at 760 nm． Ｒesults The linearity was ob-
tained within the range of 1. 024 ～10. 240 μg (r =0. 9996);The average recovery (n =6)was 99. 2%，and ＲSD was 0. 6% ． Conclu-
sion The method is simple，accurate and repeatable． It could be adopted to determinate the total tannin in ershiwuwei yuganzi pill．
Key words:ershiwuwei yuganzi pill;UV;total tannin;content determination
藏药二十五味余甘子丸为藏医传统验方，处
方由余甘子、巴夏嘎、甘青兰等二十六味药材制
成的复方制剂，临床用于多血症、高血压、肝胆
疼痛、声哑目赤、口渴、口唇发紫、月经不
调［1］。研究采用紫外分光光度法测定［2 － 3］十一批
不同厂家的二十五味余甘子丸中总鞣质的含量，
为其质量控制提供实验依据。
1 仪器与材料
1. 1 仪器 TU1901 双光速紫外可见分光光度计
(北京普析通用公司);XP205 微量电子天平 (瑞
士 METTLEＲ 公司);KQ － 250DE 型数控超声波清
洗器 (昆山超声仪器有限公司)。
1. 2 材料 没食子酸对照品 (批号:110831 －
200803，中国药品生物制品检定所);所用的试剂
均为分析纯，二十五味余甘子丸样品 (见表 1)。
2 方法与结果
2. 1 对照品溶液制备 精密称取没食子酸对照品
11. 36mg，置 20mL 棕色量瓶中，加水溶解并稀释
至刻度，精密量取 5mL，置 50mL 棕色量瓶中，用
水稀释至刻度，摇匀，即得浓度为 0. 0512 mg /mL
的没食子酸对照品溶液。
2. 2 供试品溶液制备 精密称取供试品细粉
2. 0g，置 250 mL棕色容量瓶中，加入 30% 的甲醇
溶液 150mL，超声提取 40 min，放冷，加 30%甲
醇稀释至刻度，摇匀，过滤，取续滤液 20 mL，置
100 mL棕色容量瓶中，加水至刻度，即得。
2. 3 标准曲线的制备 精 密 量 取 浓 度 为
0. 0512mg /mL 没食子酸对照品溶液 0. 5、1. 0、
2. 0、3. 0、4. 0、5. 0 mL，分别置 25 mL 棕色量瓶
中，各加入磷钼钨酸试液 1 mL，再分别加水 11. 5、
11、10、9、8、7 mL，用 29% 碳酸钠溶液稀释至
刻度，摇匀，放置 30 min，以相应的试剂为空白，
在 760 nm 处测定吸光度。以吸光度为纵坐标，浓
度为横坐标，绘制标准曲线得回归方程 Y =
0. 12163X + 0. 06147 (r = 0. 9996)，表明没食子酸
在 1. 024 ～ 10. 24μg范围内线性关系良好。
2. 4 精密度试验 取供试品溶液 (批号:
101201)6 份，分别制成供试品溶液，按照 “2. 3”
项下方法操作，于 760 nm 处测定吸光度，结果吸
光度的相对标准偏差 (ＲSD)为 1. 3%，说明仪器
的精密度良好。
2. 5 稳定性试验 精密吸取供试品溶液 (批号:
101201)1mL，按 “2. 3”项下方法操作，显色
30 min后，每隔 5min 测定一次吸光度，共 6 次，
计算 (ＲSD)为 1. 2% (n = 6)，表明二十五味余
甘子丸的鞣质在显色终止反应后 30 min 内测结果
稳定。
2. 6 回收率试验 取已知含量 (批号:101201)
的样品 6 份，精密称取 2. 0g 细粉，各加入没食子
·31·中国民族民间医药 2016年 7月第 25卷第 14期 Chinese Journal of Ethnomedicine and Ethnopharmacy，2016，Vol. 25，No. 14
酸对照品 20. 0 mg，按照供试品溶液制备方法制
备，并按“2. 3”项下方法测定含量，结果 6 次测
定的平均回收率为 99. 2%，ＲSD = 0. 6%，说明该
测定方法回收率较好。见表 2。
表 1 样品收集情况
序号 名称 批号 生产厂家 剂型
1 二十五味余甘子丸 / 云南迪庆藏医院 丸剂
2 二十五味余甘子丸 20120326 甘肃夏河县藏医院 丸剂
3 二十五味余甘子丸 12113A 西藏自治区藏药厂 丸剂
4 二十五味余甘子丸 12190A 西藏自治区藏药厂 丸剂
5 二十五味余甘子丸 111001 昌都地区藏医院 丸剂
6 二十五味余甘子丸 2011063001 四川省甘孜藏族自治州藏医院 丸剂
7 二十五味余甘子丸 101201 甘南藏族自治州医药研究院 丸剂
8 二十五味余甘子丸 120408 日喀则地区藏医院 丸剂
9 二十五味余甘子丸 20120320 青海省藏医院制剂科 丸剂
10 二十五味余甘子丸 / 青海久美藏药药业有限公司 丸剂
11 二十五味余甘子丸 / 昌都日通藏药厂 丸剂
表 2 总鞣质加样回收率试验结果
样品含量
/mg
加入没食子
酸量 /mg
测得的量
/mg
回收
率%
平均回收
率 /%
ＲSD /%
20. 42 20. 0 40. 08 98. 3
20. 10 20. 0 39. 92 99. 1
20. 14 20. 0 39. 98 99. 2 99. 2 0. 62
20. 09 20. 0 40. 09 100. 0
20. 10 20. 0 39. 99 99. 5
20. 11 20. 0 39. 95 99. 2
2. 7 总鞣质含量测定
2. 7. 1 总酚 精密量取供试品溶液 2mL，置 25mL
棕色量瓶中，加入磷钼钨酸试液 1mL，再加水
10mL，用 29%碳酸钠溶液稀释至刻度，摇匀，放
置 30min，测定吸光度。
2. 7. 2 不被吸附的多酚 精密量取供试品溶液
25mL，加至已盛有 0. 6g干酪素的 100mL具塞锥形
瓶中，密塞，于 30℃水浴中保温 1h，时时振摇，
取出，放冷，摇匀，滤过，弃去初滤液，精密量
取续滤液 2mL，置 25mL棕色量瓶中，加入磷钼钨
酸试液 1mL，再加水 10mL，用 29% 碳酸钠溶液稀
释至刻度，摇匀，放置 30min，测定吸光度。结果
见表 3。
3 讨论
为了能够较为准确的测定总鞣质的含量，研
究对供试品的制备方法进行了优选。通过比较水、
50% 丙酮、30%甲醇超声提取制备的供试品中总
鞣质的含量，发现 50%丙酮和 30%甲醇提取所得
总鞣质含量最高，因此确定二十五味余甘子丸提
取溶剂为 30%的甲醇;而 50%丙酮虽含量比 30%
甲醇高但是在试验过程中二十五味余甘子丸中有
些药材在丙酮提取时对鞣质含量有影响。同时比
较了超声提取和放置过夜提取两种提取方法，发
现超声提取不仅提取完全，而且由于可以常温提
取，不会影响鞣质的含量。因此，确定采用超声
提取。
表 3 二十五味余甘子丸中总鞣质含量测定结果
样品号 编号 生产厂家
鞣质含量
/mg /g
平均含量
/mg /g
1 A 云南迪庆藏医院 53. 10
2 B 甘肃夏河县藏医院 26. 26
3 C 西藏自治区藏药厂 37. 21
4 D 西藏自治区藏药厂 48. 46 42. 21
5 E 昌都地区藏医院 46. 00
6 F 四川省甘孜藏族自治州藏医院 37. 78
7 G 甘南藏族自治州医药研究院 34. 82
8 H 日喀则地区藏医院 45. 90
9 I 青海省藏医院制剂科 42. 12
10 J 青海久美藏药药业有限公司 39. 30
11 K 昌都日通藏药厂 53. 36
由于鞣质类化合物性质不稳定，所以对样品
的制备、处理等均应考虑环境的影响，避免鞣质
类化合物发生变化，如:样品制备和超声时注意
温度的影响，提取液应避光保存，且宜迅速测
定等。
参考文献
［1］ 国家药典委员会． 中华人民共和国卫生部药品标准 (藏药，第一册)
［S］． 1995 :148．
［2］ 国家药典委员会． 中华人民共和国药典 (一部) ［S］ ． 北京:中国医
药科技出版社，2010:62．
［3］ 孙中文，刘汉青，黄一平，等． 藏药余甘子中总鞣质和没食子酸的含量
测定 ［J］． 现代中药研究与实践，2010，24 (3):60 ．
(收稿日期:2016. 04. 26)
·41· 中国民族民间医药 2016年 7月第 25卷第 14期 Chinese Journal of Ethnomedicine and Ethnopharmacy，2016，Vol. 25，No. 14