全 文 ： 第 25 卷第 4 期
2006年 7月
食 品 与 生 物 技 术 学 报
Journal of Food Science and Biotechnology
Vo l.25 No.4
Jul. 2006
文章编号:1673-1689(2006)04-0113-03
收稿日期:2005-09-12; 修回日期:2005-11-12.
作者简介:程伟贤(1979-), 男 ,云南楚雄人 , 生物有机化学博士研究生;＊通讯作者.
余甘子功能食品的开发及其类 SOD 活力测定
程伟贤1 , 2 , 陈鸿雁3 , 张义平3 , 冯 宇2 , 曹槐1.2 , 古 昆1＊
(1.云南大学 应用化学系 ,云南 昆明 650091;2.云南大学 现代生物学研究中心 ,云南 昆明
650091;3.云南警官学院 , 云南 昆明 650223)
摘 要:余甘子是一种具有较高的食用和药用价值的野生植物资源 , 风味独特 ,含有丰富的类
SOD活性物质和其他多种具有生物活性的物质 , 具有清除自由基 、抗肿瘤 、抗衰老等保健作用 。
作者提出了余甘子保健口服液的生产工艺流程及配方 ,并采用改良的 Marklund 方法测定了类
SOD的活力 ,结果较为满意 。
关键词:余甘子;功能食品;生产工艺;配方;SOD活力
中图分类号:TS 275.4 文献标识码:A
Development of Functional Food Product from Phyllanthus emblica L.
and the SOD Activities Measurement
CHENG Wei-x ian1 , 2 , CHEN Hong-yan3 , ZHANG Yi-ping3 ,
FENG Yu
2 , CAO Huai1 , 2 , GU Kun＊1
(1.Applied Chemist ry Depar tment , Yunnan Univ ersity , Kunming 650091 , China;2.Modern Theo retical Biolog y
Research Center , Yunnan University , Kunming 650091 , China;3.Yunnan Po lice O fficer Co llege , Kunming
650223 , China)
Abstract:Phy llanthus embl ica L.is a wild plant w ith high nutrit ive and of ficinal v alue.I t has
special f lavor and abundant SOD type′s material , as w ell as other mult iple bioactivi ties , such as
f ree radical elimination , ant itumor and anti-senium abilit ies and so on.The production technique
and the componerts of the o ral-edible liquid product containing Phy l lanthus emblica L w ere
propo sed.T he SOD type′s activi ties w ere determined by improved M arklund method , and the
results we re sati sfying .
Key words:Phy l lanthus embl ica L;production proce ss;composing;SOD activity
余甘子(Phy l lanthus emblica L.), 俗称 “油
甘” 、“望果” 、“滇橄榄” 、“安摩尔” , 为大戟科叶下株
属落叶乔木或灌木。在中国栽培约有1 800年的历
史 , 广泛分布于云南 、福建 、广东 、广西 、贵州 、四川
等南方地区[ 1] 。云南野生余甘子主要分布在海拔
900 ～ 1 400 m 的金沙江 、元江 、怒江 、澜沧江 、南盘
江等大小水系流域的低热河谷区域 ,特别集中在楚
雄 、保山 、西双版纳 、临沧等地区。
余甘子果实风味独特 , 初食酸涩后回甜 , 有清
热解毒 、消食化瘀 、保健强身等功效。主治感冒发
热 、咳嗽 、咽喉痛 、消化不良 、慢性肝炎 、高血压病 、
肥胖症 、高脂血症等。据《滇南本草》记载:“治一切
喉火上炎 , 大头瘟症 , 能解温热 、春温 ,生津止渴 ,
利痰 , 解鱼毒 、酒 、积滞神效[ 2] 。”余甘子鲜果含水分
79.8 ～ 87.0 g/dL , 碳水化合物 6.6 ～ 14.1 g/dL ,
脂肪 0.2 ～ 1.1 g/dL , 灰分 0.6 ～ 0.7 g/dL , 蛋白质
0.7 ～ 2.2 g/dL , 以及丰富的维生素 、氨基酸 、微量
元素 、果胶 、生物碱 、有机酸和单宁等[ 3] 。
超氧化物歧化酶(SOD)作用的底物为 O2 · - ,
其催化的反应为 O2 · - +O 2 · - ※H 2O 2 +O 2.SOD
广泛存在于生物体内 , 是生物体内超氧自由基
(O2 · -)的一种重要清除剂 ,是生物体防御氧化损伤
的重要酶 。SOD是一种蛋白质 ,遇热(超过 80 ℃)
则失活 ,难以透过皮肤角质化细胞 ,在人体内半衰
期短 。以前的研究认为 , 余甘子中抗氧化成分为
SOD ,但后来发现余甘子这一成分耐热 、耐酸 、耐贮
藏 ,又能穿透皮肤被吸收 ,与一般 SOD 性质截然不
同 ,推测其很可能为类 SOD 小分子物质[ 4] 。类
SOD 物质分子小 ,易被吸收进入细胞 ,存活时间长 ,
耐热耐酸 ,极大地弥补了 SOD临床应用的不足 ,具
有很好的应用及开发前景 。
1 材料及仪器
新鲜余甘子果实 ,产地为云南楚雄市富民镇 。
试剂:邻苯三酚 、Na2 HPO4 、KH 2 PO 4 、HCl等均为
分析纯;SOD冻干粉(华东师范大学提供 , 400 万单
位/g);甘草水提浸膏(自制);蜂蜜 、阿斯巴甜 、甜蜜
素 、食盐和苯甲酸钠等均为市售食用级产品。仪器
:破碎机 , 去皮机 ,干燥箱 ,浸提罐 ,电子恒温水浴
锅 ,752型紫外可见分光光度计等 。
2 实验方法
2.1 功能性口服液的生产流程
余甘子原汁制取流程:
余甘子※清洗※破碎 ※加 1 g/dL 盐液 ,冷冻
(-1 ℃)※热水浸提※过滤※浓缩※备用
余甘子口服液调配流程:
甘草浸膏 、蜂蜜 、阿斯巴甜 、白砂糖 、食盐和葡萄糖酸钙等
↑辐照灭菌(Co60)
余甘子原汁※搅拌混匀※过滤※真空封口※杀菌※包装※成品
←
包装瓶※清洗※杀菌
2.2 SOD活力测定
称取标准 SOD 冻干粉(400 万单位/g)10 mg
溶于 10 mL 蒸馏水中 ,活力为 400 U/mL.采用改
良的 Marklund方法测定类 SOD的活性:在规定的
条件下 , 1 mL 反应液中 ,每分钟抑制邻苯三酚在
420 nm 波长下的自氧化速率达 50%时的酶量为 1
个酶活性单位(U)或称 Marklund单位 。在 10 mL
的比色管中加入 pH 8.2的 KH 2PO 4 —Na2HPO 4的
缓冲溶液 4.5 mL ,加入待测样品或蒸馏水 ,最后加
入适量 50.0 mmol/L 的邻苯三酚溶液 ,使总反应体
积为 5 mL ,摇匀后计时 ,自氧化速率在 3 min内有
效。控制邻苯三酚的量 ,使其在 420 nm 波长处的
自氧化速率的 A值(OD)的变化在0.07 OD/min左
右(反应温度 25 ℃)。测定样品的类 SOD活力时 ,
控制样品的加入量 ,使邻苯三酚自氧化速率的 A 值
(OD值)变化在 0.035 OD/min左右 。
测定时应以标准 SOD 的活力进行校正。按上
述方法进行实验 ,按式(1)计算 SOD 活力的实测值
C标实 ,按式(2)计算标准 SOD 活力的校正系数 ,按
式(3)计算口服液样品的单位体积类 SOD活力 。
SOD活力(U/mL)=
0.07-0.035
0.07 ×100%
50% ×5(mL)×1 000(μL)样品量(μL) (1)
K=C明示C标实 (2)
C=K C样实 ×5×1 000
V样 (3)
式中:K 为标准 SOD活力的校正系数;C标实为标准
SOD单位体积活力实测值;C明示为标准 SOD 明示
担保值;C为口服液样品类 SOD单位体积活力(U/
mL);C样实为口服液样品的单位体积活力实测值
(U/mL);V样为样品取样量(μL)。
3 结果与讨论
3.1 口服液的配方
对产品的色 、香 、味进行品评 ,不但保持了余甘
子中的活性成分 ,而且口感好 、风味佳 , 口味纯正 ,
营养丰富 ,具有保健功能 ,从而确定配方如下:
余甘子浓缩液 70 g/dL 、食用盐 0.3 g/dL 、甘草
浸膏 10 g/dL 、蜂蜜 8 g/dL 、阿斯巴甜 0.1 g/dL 、白
砂糖5 g/dL 、葡萄糖2 g/dL 、葡萄糖酸钙适量 、苯甲
酸钠适量 。
3.2 邻苯三酚用量
每个进样体积平行测定 5次 ,取其平均值 。当
邻苯三酚用量取 V =8.0 μL 时 , ΔA 值约为 0.070
OD/min ,结果见表 1。
3.3 标准 SOD及样品的类 SOD活力
每个进样体积平行测定 5次 ,取其平均值。当
标准 SOD 用量为 11.5 μL 时 , ΔA 值约为 0.035
OD/min ,结果见表 2。
114 食 品 与 生 物 技 术 学 报 第 25卷
表 1 邻苯三酚用量值与 ΔA的关系
Tab.1 The relation between o-trihydroxybenzene ΔA and it s
amounts
邻苯三酚用量/ μL A1 A2 ΔA/(OD/ min)
4.0 0.014 0.037 0.023
6.0 0.043 0.092 0.049
8.0 0.062 0.133 0.071
10.0 0.092 0.186 0.094
12.0 0.136 0.265 0.129
表 2 标准 SOD 进样量与 ΔA的关系
Tab.2 The relation between standard SOD amounts and ΔA
标准 SOD 进样量/μL ΔA/(OD/ min)
10.0 0.052
10.5 0.046
11.0 0.040
11.5 0.035
12.0 0.029
根据式(1)及(2)计算得标准 SOD实测活力及
校正系数:C标实 =434.8 U/mL ,K =0.91 。
控制余甘子口服液的样品进样量 ,使邻苯三酚
自氧化速率变化 ΔA值约为 0.035 ,平行测定 5次 ,
取其平均值 ,计算口服液样品的类 SOD活力 ,结果
见表 3 。
表 3 样品进样量与ΔA的关系
Tab.3 The relation between sample amounts and ΔA
样
品
进样
量 V/μL
ΔA/(OD/
min)
C样实/(U/
m L)
平均
C样实/(U/ mL)
C/(U/
mL)
平均标准
偏差/(U/m L)
相对
标准
偏差/ %
1 12.2 0.036 409.8
2 12.3 0.035 406.5
3 12.4 0.035 403.2 403.3 367.0 3.9 0.97
4 12.5 0.035 400.0
5 12.6 0.034 396.8
余甘子的鲜果或加工保健食品 ,因其口感好 、
无异味 、纯天然 ,是广大消费者清凉解暑 、四季保健
的最佳果品 。作者研究的余甘子功能口服液加工
方法合理 ,口味纯正 ,营养丰富 ,适合于各种人群 ,
尤其是可作为运动员饮料 ,已经受到广大消费者喜
爱 ,是一种值得推广的新型保健品 。目前 ,云南省
的余甘子尚未被充分开发 ,资源利用率低 ,随着经
济发展 , 它具有良好的市场前景 ,应加强余甘子的
基础应用研究和开发的力度 ,提高其附加值 。
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(责任编辑:李春丽)
(上接第 108页)
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(责任编辑:李春丽)
115 第 4期 程伟贤等:余甘子功能食品的开发及其类 SOD活力测定