全 文 ：第 26卷第 5期 　　　西　南　农　业　大　学　学　报 (自然科学版) Vol.26 , No.5
2004年 10月 Journal of Southwest Agricultural University(Natural Science) Oct.2004
文章编号:1000-2642(2004)05-0625-04
藏药复方中余甘子和甘草及木香的薄层定性鉴别
刘　圆1 ,白志川2 ,于　杰2
(1.西南民族大学 少数民族药物研究所 , 四川 成都　610041;2.西南农业大学 园艺园林学院 , 重庆　400716)
摘要:采用薄层色谱法对藏药复方中的甘草 、余甘子 、木香 3 味药材的有效成分进行了定性鉴别。结果表明:文中所
选用的方法专属性强 、灵敏度高 、准确可靠 ,适用于藏药复方的质量控制。
关　键　词:藏药复方;余甘子;甘草;木香;薄层色谱
中图分类号:R 931.5　　　　　　文献标识码:A
QUANT ITATIVE IDENTIFICATION OF FRUCTUS PHYLLANTHI RADIX
GLY CY RRHIZAE AND RADIX AUCKLANDIAE OF TIBETAN COUGH-RELIEVING
MEDICINAL SYRUP WITH THIN LAYER CHROMATOGRAPHY
LIU Yuan1 , BAI Zhi-chuan2 , YU Jie2
(1.Ethnic Pharmaceutical Institute , Southwest University of Nationalities , Chengdu 610041 , China;2.Horticulture Depar tment ,
Southwest Agricultural University , Chongqing 400716 , China)
Abstract:Thin layer chromatog raphy(TLC)w as used to quantitatively identify the active ingredients of Fructus phy llanthi , Radix
glycyrrhizin and R .aucklandiae , the three majo r components of a cough-relieving Tibetan medicinal sy rup.The procedures used in
this study proved to be highly selective , sensitive , precise and reliable and are recommended for adoption in quality control of the produc-
tio n of this cough-relieving T ibetan medicinal syrup.
Key words:cough-relieving Tibetan medicinal sy rup;Fructus phy llanthi;Radi x glycyrrhizin;R.aucklandiae;TLC
　　余甘子有抗衰老 、抗炎 、抑菌作用 ,对急性炎症的
发展有抑制作用 ,能诱生人白细胞干扰素 ,抗细胞毒 、
抗突变。其消食健胃有效成分为鞣质 ,其中含鞣质成
分较复杂 ,既有水解性的鞣质又有缩合性鞣质 。甘草
有抗菌和抗病毒 、防止大动脉硬化 、抗溃疡 、保肝 、促
胰腺分泌及抑制肠道运动的作用 ,还有增强免疫 、镇
咳祛痰 、抗氧化 、降胆固醇等作用 ,对药物中毒及食物
中毒也有一定解毒效果。其具有镇咳作用的有效成
分为甘草酸及甘草次酸 ,选用甘草次酸作为标准品 ,
从木香根油中分离出来的去内酯油及二氢木香内酯
对支气管平滑肌 、小肠平滑肌均有较好的解痉作用 ,
其生物碱部分也有明显的解痉作用 ,这可能与有扩张
外周血管和抑制心脏的作用有关 。木香水溶性成分
可抑制血小板凝聚 。此外木香挥发油 、煎剂尚有利
尿 、抗菌作用。木香平喘有效成分为水提液 、挥发油 、
总生物碱及二氢木香内酯 。
1　质量研究
1.1　实验材料来源
购于成都五块石荷花池药材市场 ,药材符合中华
人民共和国药典 2000版一部余甘子 、甘草 、木香项下
的有关规定 。
繱收稿日期:2004-04-16
基金项目:西南民族大学博士基金资助项目
作者简介:刘　圆(1968-),女 ,重庆忠县人 ,西南民族大学副教授 ,博士 ,从事民族药物及中药新药开发。
DOI :10.13718/j.cnki.xdzk.2004.05.029
1.2　试剂
硅胶 G ,青岛海洋化工产 。羧甲基纤维素-Na
(CMC-Na)。
1.3　薄层板的制备
硅胶 G或 GF 254 3 g ,加 0.5%CMC-Na的溶
液9 mL 研磨均匀后涂布于玻璃板(10 cm ×20 cm)
上 ,室温置干 ,于 105℃活化 0.5 ～ 1 h后 ,置于干燥器
内备用。
1.4　余甘子的 TLC鉴别
1.4.1　试剂　氯仿 、醋酸乙酯 、甲酸 、丙酮 ,均为分析
纯。
1.4.2　供试液制备[ 1 ～ 2] 　样品液的制备:取样品糖
浆20 mL ,加醋酸乙酯萃取 2 次 ,每次 20 mL。分取
醋酸乙酯液(上清液),蒸干 ,残渣加甲醇 1 mL 使溶
解 ,作为样品供试品溶液 。
阴性对照溶液的制备:取余甘子的阴性糖浆 20
mL ,加醋酸乙酯萃取 2次 ,每次 20 mL 。分取醋酸乙
酯液(上清液),蒸干 ,残渣加甲醇 1 mL 使溶解 ,作为
阴性供试品溶液 。标准品溶液的制备:精密称取 1
mg没食子酸标准品 ,加甲醇使成 1 mg/ mL 的溶液 ,
作标准品溶液。
1.4.3　点样　分别吸取样品供试品溶液 、阴性供试
品溶液各 15 μL ,标准品溶液各 5 μL 点样于硅胶 G
薄层板上 ,分别在展开剂①氯仿-醋酸乙酯-甲酸(6
∶4∶1);②氯仿-丙酮-甲酸(8∶1∶1)上行展开 。
1.4.4　显色　显色剂的配制:精确称取固体三氯化
铁 5 g ,用无水乙醇定容至 250 mL使制成 2%的三氯
化铁乙醇溶液。
展开后取出薄层板 , 晾干后 , 喷以显色剂 , 于
105℃加热至斑点清晰。
图 1
1.没食子酸标准品;2 , 3 , 4.样品;5.阴性。
Fig 1　1.T he Standard Sample of Gallic acid;2 , 3, 4.Sample;5.Nego-
t ive.
1.4.5　结果　样品供试品溶液和标准品溶液在展开
剂 1 中 , R f 值为 0.34处(图 1);在展开剂 2中 , Rf
值 0.14处(图 2)相同的位置有相同的斑点 ,而阴性
无干扰 。表明藏药糖浆中含有余甘子的主要有效成
分没食子酸 。
1.5　甘草的 TCL 鉴别
1.5.1　试剂　环己烷 、醋酸乙酯 、冰醋酸 、苯 ,各试剂
均为分析纯 。
图 2
1.没食子酸标准品 ;2 , 3 , 4.样品;5.阴性。
Fig 2　1.The Standard Sample of Gallic acid;2 , 3 , 4.Sample;5.Nego-
ti ve.
1.5.2　供试液的制备[ 3 ～ 5]
样品供试液的制备:取样品糖浆 30 mL ,加浓盐
酸 4.5 mL 加热回流 1 h ,放冷 ,加氯仿振摇提取 2
次 ,每次 22.5 mL ,合并氯仿提取液 ,蒸干 ,残渣加乙
醇1.5 mL 使溶解 ,作为样品供试品溶液。
阴性对照液的制备:取甘草阴性糖浆 30 mL ,加
浓盐酸 4.5 mL 加热回流 1 h ,放冷 ,加氯仿振摇提取
2次 ,每次 22.5 mL ,合并氯仿提取液 ,蒸干 ,残渣加
乙醇 1.5 mL 使溶解 ,作为阴性供试品溶液 。
标准品溶液的制备:取 1 mg 甘草次酸标准品 ,加
乙醇使成 1 mg/ mL 的溶液 ,作标准品溶液 。
1.5.3　点样　分别吸取样品供试品溶液 、阴性供试
品溶液各 15 μL , 标准品溶液 5 μL 点样于硅胶 G 薄
层板上 ,分别在展开剂[ 6] ①环己烷 -苯-醋酸乙酯
-冰醋酸(50∶30∶10∶1);②环己烷-醋酸乙酯-冰
醋酸(50∶30∶1)上行展开。
1.5.4　显色　显色剂的配制:精密称取磷钼酸 5 g ,
加无水乙醇使溶解成 100 mL ,即得。展开后取出薄
层板 ,晾干后 ,喷以显色剂 ,于 105℃加热至斑点清
晰 。
1.5.5　结果　样品供试品溶液和标准品溶液在展开
剂 1 中 , R f 值为 0.77处(图 3);在展开剂 2中 , Rf
值 0.90处(图 4)相同的位置有相同的斑点 ,而阴性
626 西　南　农　业　大　学　学　报　(自然科学版)　　　　　　　　2004年 10月
无干扰 。表明藏药糖浆中含有甘草的主要有效成分
甘草次酸 。
图 3
1.甘草次酸标准品;2 , 3 , 4.样品;5.阴性 。
Fig 3　1.The Standard Sample of Glycyrrh etint ic acid;2 , 3 , 4.
S ample;5.Negot ive.
图 4
1.甘草次酸标准品;2 , 3 , 4.样品;5.阴性。
Fig 4　1.The Standard Sample of Glycyrrh etintic acid;2 , 3 , 4.Sam-
ple;5.Negotive.
1.6　木香的 TCL 鉴别
1.6.1　试剂　己烷 、丙酮 、乙醚 ,均为分析纯。
1.6.2　供试液的制备[ 7～ 8]
样品供试液的制备:取 20 mL 样品糖浆 ,置分液
漏斗中 ,加入 20 mL 乙醚振摇提取 3 min ,分取乙醚
层(上清液),置分液漏斗中加 4%NaOH 溶液 15 mL ,
用力振摇分取乙醚液 ,加无水硫酸钠 1 g 振摇过滤 ,
用乙醚液洗涤无水硫酸钠 2 次 ,每次 10 mL ,合并乙
醚液 ,自然挥干 ,残渣加 1 mL 乙醚溶解 ,作为样品供
试液 。
阴性对照液的制备:取 20 mL 木香阴性糖浆 ,置
分液漏斗中 ,加入 20 mL 乙醚振摇提取 3 min ,分取
乙醚层(上清液),置分液漏斗中加 4%NaOH 溶液 15
mL ,用力振摇分取乙醚液 ,加无水硫酸钠 1 g 振摇过
滤 ,用乙醚液洗涤无水硫酸钠 2次 ,每次 10 mL ,合并
乙醚液 ,自然挥干 ,残渣加 1 mL 乙醚溶解 ,作为阴性
供试品溶液 。
对照药材溶液的制备:取 1 g 木香对照药材研
碎 ,加 20 mL 乙醚回流 1 h ,过滤 ,取乙醚液 ,置分液
漏斗中加 4%NaOH 溶液 15 mL ,用力振摇分取乙醚
液 ,加无水硫酸钠 1 g 振摇过滤 ,用乙醚液洗涤无水
硫酸钠 2次 ,每次 10 mL ,合并乙醚液 ,自然挥干 ,残
渣加 1 mL 乙醚溶解 ,作为对照药材供试液 。
1.6.3　点样　分别吸取样品供试品溶液 、阴性供试
品溶液各 15 μL ,标准品溶液各 5 μL 点样于硅胶 G
或硅胶 G 254薄层板上 ,分别在展开剂①己烷-丙酮
(10∶3);②乙醚-正己烷(2∶1)上行展开。
1.6.4　显色　显色剂的配制:精密称取香草醛 2 g ,
加浓硫酸 200 mL 使溶解 ,即得。展开后取出薄层
板 ,晾干后 ,喷以显色剂 ,于 105℃加热至斑点清晰。
图 5
1.木香对照药材;2 , 3 , 4.样品;5.阴性。
Fig 5　1.The standard of Radix Aucklandiae;2 , 3 , 4.Sample;5.Nego-
ti ve.
图 6
1.木香对照药材;2 , 3 , 4.样品;5.阴性。
Fig 6　1.The standard of Radix Aucklandiae;2 , 3 , 4.Sample;5.Nego-
ti ve.
1.6.5　结果　样品供试品溶液和标准品溶液在展开
剂 1中 , R f 值为 0.40处(图 5);在展开剂 2中 , Rf
值 0.73处(图 6)相同的位置有相同的斑点 ,而阴性
627第 26卷第 5期　　　　刘　圆等　藏药复方中余甘子和甘草及木香的薄层定性鉴别
无干扰 。表明藏药糖浆中含有木香对照药材相同的
有效成分 。
2　结论与讨论
2.1　结论
2.1.1　余甘子的 TLC 　在展开剂 1:氯仿-醋酸乙
酯-甲酸(6∶4∶1);2:氯仿-丙酮-甲酸(8∶1∶1)
中 ,样品供试品溶液和标准品溶液在展开剂 1中 , R f
值为 0.34 处(图 1);在展开剂 2 中 , Rf 值 0.14 处
(图 2)相同的位置有相同的斑点 ,而阴性无干扰。表
明藏药糖浆中含有余甘子的主要有效成分没食子酸。
2.1.2　甘草的 TLC　在展开剂 1:环己烷-苯-醋
酸乙酯-冰醋酸(50 ∶30∶10∶1);2:环己烷-醋酸乙
酯-冰醋酸(50 ∶30 ∶1)中 ,样品供试品溶液和标准
品溶液在展开剂 1中 , R f 值为 0.77 处(图 3);在展
开剂 2中 , Rf 值 0.90处(图 4)相同的位置有相同的
斑点 ,而阴性无干扰 。表明藏药糖浆中含有甘草的主
要有效成分甘草次酸 。
2.1.3　木香的 TLC　在展开剂 1:己烷-丙酮(10 ∶
3);2:乙醚-正己烷(2∶1)中 ,样品供试品溶液和标
准品溶液在展开剂 1中 , Rf 值为 0.40 处(图 5);在
展开剂 2中 , R f 值 0.73处(图 6)相同的位置有相同
的斑点 ,而阴性无干扰。表明藏药糖浆中含有木香对
照药材相同的有效成分。
2 .2　讨论
2.2.1　用 FeCl3 溶液检测可发现 ,用有机试剂在不
改变 pH 的条件下 ,不可能将药材提取液中的鞣质成
分完全萃取出来 。考虑到没食子酸为其有效成分 ,且
中华人民共和国药典 2000版一部中收载的只有没食
子酸标准品 ,故确定用没食子酸标准品作为对照。在
展开剂 1中的展开效果(Rf 值适中)较理想选做正
文;在选择展开系统 2 时 ,开始选取苯-丙酮-甲酸
(5∶5∶1)但是 R f 值太小 ,后改用氯仿-丙酮-甲酸
(8∶1∶1)使 Rf 值为 0.14选做验证系统。FeCl3 对
鞣质显色明显 ,故选用其乙醇溶液作为显色剂 。
2.2.2　在制备供试液时为使甘草酸充分转化为甘草
次酸 ,采用加盐酸回流 1 h 的方法 ,但最后得到的供
试液杂质较多 ,展开效果不好 ,后反复萃取精制供试
液;在展开剂的选择方面曾选用的展开剂有石油醚
(30-60`C)-苯-乙酸乙酯-冰醋酸(10∶20∶7∶0.
5)、石油醚(30-60`C)-苯-乙酸乙酯-甲酸(10∶
20∶7∶0.5)、环己烷-乙酸乙酯-冰醋酸(50∶30∶
1)、正己烷-乙酸乙酯 -冰醋酸(20 ∶8 ∶2.5)上层
液 ,甲苯-乙酸乙酯-甲酸(30∶15 ∶1)等 ,但除 1#
和 3#外 ,其他展开剂中均因极性太大而不能采用 ,
在 3#展开剂中 Rf 值(0.9)较小 ,只能选做验证系
统 ,经过多次反复的实验 ,降低了展开系统的极性 ,最
后选用环己烷-苯-乙酸乙酯-冰醋酸(50 ∶30 ∶10
∶1)作为正文 , R f 值为 0.77。
2.2.3　选取木香对照药材为对照 。在制备供试液
时 ,开始采用水浴蒸干的方法 ,木香中的挥发油也一
同被蒸出 ,而显色时无斑点 。所以改用自然挥干的方
法 。供试液制备好后 ,硅胶板 GF 254 上展开 , 用茴
香醛试液显色仍无斑点(据文献记载在紫外灯(365
nm)下光斑点 ,在紫外灯(254 nm)下应有荧光斑点),
但结果表明前者观察不到斑点 ,后者只有木香对照品
有斑点;增大点样量后结果相同 。最后选用 5%香草
醛浓硫酸试液后才能看到明显的紫色斑点。
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628 西　南　农　业　大　学　学　报　(自然科学版)　　　　　　　　2004年 10月