全 文 ：The preparation of reference substance of 1，7-dihydroxy-3，8-dimethoxyxanthone in
Gentianopsis paludosa
Li Yang，Jing Ming，Chen Hui
(Gansu College of Traditional Chinese Medicine，Lanzhou 730000，China)
Abstract:Objective To study the preparation method of reference substance of 1，7-dihydroxy-3，8-dime-
thoxyxanthone in Gentianopsis paludosa． Methods Used ethanol extract Gentianopsis paludosa，isolated and pre-
pared reference substance from the ethanol extract for structural identification by using ultraviolet spectroscopy，in-
frared spectroscopy，mass spectrometry and nuclear magnetic resonance spectra． Results The reference substance
mass fraction is greater than 98% with the normalized quantitative． Conclusion The reference substance can be
used as index component on controlling the quality of Gentianopsis paludosa．
Key words:Gentianopsis paludosa;1，7-dihydroxy-3，8-dimethoxyxanthone;preparation
櫊櫊櫊櫊櫊櫊櫊櫊櫊櫊櫊櫊櫊櫊櫊櫊櫊櫊櫊櫊櫊櫊櫊櫊櫊櫊櫊櫊櫊櫊櫊櫊櫊櫊櫊櫊櫊櫊櫊櫊櫊櫊櫊櫊櫊櫊
收稿日期:2012－08－31
基金项目:浙江省科技厅现代中药制剂及其重点关键技术研究科技创新团队子课题( 2012R10044－09) 、浙江省中医药管理局青年教师资助项
目( 2010ZQ001)
作者简介:章德军( 1988－) ，男，在读硕士研究生，主要从事药物新剂型与新技术研究。
通讯作者:熊阳( 1979－) ，女，副教授，理学博士，主要从事中药新剂型与新型给药系统研究。Tel: 0571－86613524 E-mail: xyxnb@ 126． com
农吉利碱油水分配系数的紫外分光光度测定法研究
章德军，黄绳武，熊 阳
(浙江中医药大学，浙江 杭州 310053)
摘 要:目的 测定农吉利碱的油水分配系数，为农吉利碱脂质体经皮制剂处方设计提供参考。方法
建立农吉利碱的紫外含量测定方法，采用摇瓶法，正辛醇－水系统测定农吉利碱的油水分配系数。结果 农
吉利碱在 39． 04 ～ 175． 68 μg /mL质量浓度范围内与吸光度呈现良好的线性关系，平均回收率为( 100． 86±
1． 36) %，RSD为 1． 35% ( n = 6 ) ，实验测定得到农吉利碱的油水分配系数值为 3． 659，logP 值为 0． 563。
结论 紫外分光光度法操作简便，准确性高，可作为农吉利碱油水分配系数的测定方法;从农吉利碱的油水
分配系数来看，将农吉利碱制备成脂质体经皮制剂时需要采取一定的措施提高包封率以及增加药物的经皮
渗透性。
关键词:农吉利碱;紫外分光光度法;油水分配系数
中图分类号:R284 文献标识码:B 文章编号:1003－8450(2013)01－0052－03
农吉利碱(Monocrotaline)又称农吉利甲素、野
百合碱、猪屎豆碱、大叶猪屎豆碱等，是临床常用、试
验研究较多、研究较为透彻的抗癌中药成分，对多种
实验性肿瘤有抑制作用［1］，临床主要适用于皮肤
癌，如鳞状细胞癌(SCC)和基底细胞癌(BCC)［2］，疗
效确切。
农吉利碱属于吡咯里西啶类生物碱(PA) ，目前
PA是已知的最重要的植物性肝毒成分，被称为肝毒
吡咯里西啶生物碱，若被吸收进入体循环具有较大的
毒性，除可引起造血功能抑制、白细胞和血小板下降、
骨髓抑制和胃肠道反应、泌尿系统刺激等症状外，最
明显的毒性是肝脏毒性，它对肝脏具有蓄积的、不可
逆的、强烈的毒性作用，可引起肝细胞出血性坏死、肝
巨细胞症及静脉闭塞症等［3］。但事实上，农吉利碱原
形化合物毒性较弱，而是在经过肝脏转化成代谢产物
后引起肝毒性，因此，在民间或医院中常采用农吉利
鲜草浆或干品粉末外敷用于治疗 SCC 和 BCC，毒性
小并且效果良好［4］，但是临床应用不便。
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甘肃 中 医 学 院 学 报
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根据农吉利碱的性质以及临床经验，考虑将农
吉利碱制备成脂质体经皮给药制剂，考察其治疗皮
肤癌的可行性。而预测药物制备成脂质体是否具有
较高的包封率以及如何更好地设计经皮给药制剂，
其中重要的参数之一就是药物的油水分配系数。本
研究采用经典的摇瓶法，以正辛醇－水为系统测定
农吉利碱的油水分配系数［5 － 6］。这对于制备农吉
利碱脂质体经皮给药制剂的进一步研究具有重要的
意义。
1 材料和测定方法的建立
1． 1 药品及试剂
农吉利碱原料药，南京泽朗医药科技有限公司，
批号 ZL120222YY，纯度≥98%;正辛醇，分析纯，批
号 20120401，上海凌峰化学试剂有限公司;甲醇，分
析纯，批号 20100801，衢州巨化试剂有限公司;蒸馏
水，自制。
1． 2 仪器
UV759S紫外可见分光光度计，上海精密科学
仪器有限公司;QYC2102 恒温培养摇床，海福玛实
验设备有限公司生产;JA1003 电子天平，上海精科
有限公司。
1． 3 农吉利碱含量测定方法的建立
1． 3． 1 储备液的配置 精密称取 48． 8 mg 农吉利
碱对照品至 50 mL容量瓶中，甲醇定容至刻度，配成
0． 976 mg /mL的储备液，备用。
1． 3． 2 紫外吸收波长的确定 精密吸取上述储备
液 0． 6 mL 至 10 mL 容量瓶中，甲醇定容至刻度，在
200 ～ 500 nm波长下扫描最大吸收波长，结果显示，
其最大吸收波长位于 218 nm处，如图 1 所示。
图 1 农吉利碱对照品紫外扫描图谱
1． 3． 3 标准曲线的建立 分别吸取 0． 4，0． 6，0． 8，
1． 4，1． 6，1． 8 mL储备液至 10 mL容量瓶中，甲醇定
容至刻度，于 218 nm 波长下测定吸光度 A，建立吸
光度 A与质量浓度 C 的标准曲线，得标准曲线为
y=5． 839 5x+0． 015，r= 0． 999 9。由此可见，农吉利
碱在 39． 04 ～ 175． 68 μg /mL范围内，吸光度与质量
浓度的线性关系良好，如图 2 所示。
图 2 农吉利碱标准曲线
1． 3． 4 精密度的测定 精密移取 0． 4，0． 8，1． 6 mL
的储备液至 10 mL 容量瓶中，甲醇定容至刻度，在
218 nm处测定吸光度。分别于 1 日内连续测 6 次，
连续测定 6 d，根据标准曲线推算质量浓度，计算精
密度。结果如表 1 所示。结果显示，日内、日间精密
度的 RSD 均小于 3%，表明检测方法可靠，稳定
性高。
表 1 农吉利碱精密度结果(n=6)
质量浓度 /(mg /mL) 日内精密度 RSD /% 日间精密度 RSD /%
0． 039 0 0． 039 2±0． 03 0． 98 0． 041 8±0． 08 2． 08
0． 078 1 0． 080 3±0． 04 0． 51 0． 080 1±0． 01 1． 77
0． 156 0 0． 156 0±0． 02 0． 16 0． 158 0±0． 07 0． 51
1． 3． 5 回收率的测定 精密移取 0． 4，0． 8，1． 6 mL
的储备液至 10 mL 容量瓶中，再分别精密移取
0． 1 mL水饱和正辛醇，甲醇定容至刻度，在 218 nm
处测定吸光度，计算实测质量浓度，每组平行测定 6
次。根据实测值与理论值的比值计算回收率，结果如
表 2 所示。结果表明，该方法的平均回收率为
(100． 86±1． 36)%，RSD为 1． 35%，说明该方法稳定，
回收率高，可用于农吉利碱油水分配系数的测定。
2 农吉利碱油水分配系数的测定
2． 1 水饱和正辛醇和正辛醇饱和水的配制
用量筒量取 50 mL 正辛醇与 150 mL 蒸馏水于
具塞三角瓶中，振荡 24 h，使二者相互饱和，静止分
层后，分液漏斗分离，保存备用。其中，上层为水饱
和正辛醇，下层为正辛醇饱和水［7］。
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表 2 农吉利碱回收率(n=6)
添加药物质量浓度 /(mg /mL) 回收率 /% 平均回收率 /% RSD /%
0． 039 0 99． 95±0． 36
0． 078 1 102． 43±0． 24 100． 86±1． 36 1． 35
0． 156 0 100． 21±0． 06
2． 2 样品的配制
精密称取农吉利碱对照品 12． 2 mg，用水饱和
正辛醇溶解并定容至 25 mL，配制成含农吉利碱
0． 488 mg /mL的水饱和正辛醇溶液。将上述含农吉
利碱的水饱和正辛醇溶液和等体积的正辛醇饱和水
混合，恒温振荡 48 h，4 000 r /min 离心 30 min，分离
上下层。
2． 3 样品的处理
分别精密吸取 0． 5 mL 上层和下层溶液于
10 mL容量瓶中，用甲醇定容至刻度，于 218 nm 处
分别测得上层和下层溶液吸光度 A1 和 A2，计算出
上层和下层对应浓度 C1 和 C2。其中 C1 为农吉利
碱在水饱和正辛醇中的浓度，C2 为农吉利碱在正辛
醇饱和水中的浓度。按公式 P =C1 /C2 计算 P 值，结
果 P =3． 659，logP =0． 563。
3 讨论
油水分配系数是用于表示化合物亲脂性和透过
生物膜能力的重要参数。药物的制剂制备，经皮吸
收，在体内的溶解、吸收、分布、转运等均与油水分配
系数有关［8］。一般将药物分为 3 类:LogP＜－0． 3 的
水溶性药物为第 1 类，LogP 在－0． 3 ～ 4． 5 的为第
2 类，LogP＞4． 5 的脂溶性药物为第 3 类。一般对于
脂质体制备来说，第 1 类和第 3 类药物制备成脂质
体可能具有较高包封率［9］。本实验测得农吉利碱
的 logP 值为 0． 563，属于第 2 类药物，故将农吉利碱
制成脂质体经皮制剂时需要采取一定的措施提高包
封率以及增加药物的经皮渗透性，如采用 pH 梯度
法进行脂质体包封、脂质体处方中加入渗透促进
剂等。
在油水体系选择中，许多有机溶剂都被用来模
拟生物相，如氯仿、橄榄油和正辛醇等。由于正辛
醇的极性和溶解性能比其他惰性溶剂好［10］，更能
模拟药物在体内分配的过程，故目前多采用正辛
醇－水体系来测定药物的油水分配系数。
本实验首次对农吉利碱进行了油水分配系数的
测定，建立了其紫外测定方法，操作简便，方法可行，
为进一步研制其经皮给药制剂提供了理论和实验
依据。
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