全 文 ：浙江理工大学学报（自然科学版），第３５卷，第４期，２０１６年７月
Ｊｏｕｒｎａｌ　ｏｆ　Ｚｈｅｊｉａｎｇ　Ｓｃｉ－Ｔｅｃｈ　Ｕｎｉｖｅｒｓｉｔｙ（Ｎａｔｕｒａｌ　Ｓｃｉｅｎｃｅｓ）
Ｖｏｌ．３５，Ｎｏ．４，Ｊｕｌ．２０１６
ＤＯＩ：１０．３９６９／ｊ．ｉｓｓｎ．１６７３－３８５１．２０１６．０７．０２４
收稿日期：２０１５－０９－０７
基金项目：国家自然科学基金项目（３１４００７９７）；浙江省自然科学基金项目（ＬＱ１４Ｃ１００００１）；浙江省省科技厅分析测试项目（２０１５Ｃ３７０３１）
作者简介：赵雪芹（１９８３－），女，河南平顶山人，博士，主要从事肿瘤治疗方面的研究。
含羞草素对肝癌细胞ＱＧＹ－７７０３周期同步化的作用
赵雪芹１，任　磊２，王大巾１，张永明１，陶斯杰１
（１．浙江理工大学生命科学院，杭州３１００１８；２．厦门大学材料学院，福建厦门３６１００５）
　　摘　要：恶性肿瘤是严重威胁人类健康的疾病之一。肿瘤的发生发展本质上就是细胞无限制的周期性生长、增
殖和分化的失调。细胞同步化是研究肿瘤发生发展及治疗的基础。实验以人肝癌ＱＧＹ－７７０３细胞株为研究对象，考
察含羞草素阻断对周期同步化的作用。并与胸腺嘧啶脱氧核苷阻断法相对照，研究含羞草素阻断去除后对 ＱＧＹ－
７７０３细胞周期的影响。结果显示：ＱＧＹ－７７０３细胞在含羞草素阻断后释放的第１０ｈ进入Ｓ期，第２０ｈ进入Ｇ２／Ｍ
期，且最高同步率分别为Ｇ１期９４．６％，Ｓ期８６．０％。含羞草素能较好地使肝癌细胞株ＱＧＹ－７７０３同步化于Ｇ１期和
Ｓ期。
关键词：含羞草素；肝癌细胞；细胞周期；同步化
中图分类号：ＴＳ１９５．６４４　 文献标志码：Ａ　 文章编号：１６７３－３８５１（２０１６）０４－０６２０－０５　 引用页码：０７０７０１
０　引　言
肝癌是全球最常见的五种恶性肿瘤之一。我国
原发性肝癌发病人数占全球的５５％，死亡人数占
４５％。虽然目前以外科手术、放疗、化疗为主的肝癌
基本治疗手段取得了一定发展，但由于肿瘤细胞对
化、放疗耐受等问题，其疗效甚微。研究发现，肿瘤
组织中生长着不同周期时相的肿瘤细胞。绝大多数
化疗药物与放疗手段对肿瘤细胞的杀伤作用依赖于
细胞周期特异性。喜树碱、丝裂霉素、氮芥、氟脲嘧
啶为Ｓ期特异性［１－３］，而长春新碱、泰素和放疗具有
Ｇ２／Ｍ期特异性［４］。如何安排放、化疗的时程，最大
化治疗效果，仍是临床上有待解决的问题。
细胞同步化是研究肿瘤发生发展及治疗的基
础。同步化后再使用放疗或化疗药物作用于肿瘤，
能够起到协同增效作用。沙利度胺能够增强Ｘ射
线对胶质瘤Ｕ２５１细胞敏感性［５］。姜黄色素显著提
高人前列腺癌、胃癌细胞株ＳＧＣ－７９０１与直肠癌的
放疗敏感性［６－８］。曲智锋等［９］利用多西他赛联合奥
沙利铂同步化放疗局部晚期非小细胞肺癌，提高了
临床治疗效果。此外，王雪卿等［１０］发现同步化能加
强紫杉醇对肿瘤细胞的作用效果以及逆转其耐药
性。故此，利用同步化试剂，合理安排放疗、化疗的
时程，能达到最佳治疗效果。
含羞草素（Ｌ－ｍｉｍｏｓｉｎｅ）是从含羞草或银合欢中提
炼的植物氨基酸。它具有与胸腺嘧啶高度相似的化学
结构，可竞争性地与腺嘌呤结合［１１－１２］，从而阻碍ＤＮＡ
的合成，使细胞阻滞在Ｇ１／Ｓ点。研究表明含羞草素能
将ＰＣ－３细胞阻滞在 Ｇ１期，ＬＮＣａＰ细胞阻滞在Ｓ
期［１３］。同时，含羞草能够抑制Ｋ５６２，７４０２等多种肿瘤
细胞生长，并可其诱导凋亡［１４－１５］。鉴于此，本研究以含
羞草素作为ＤＮＡ合成抑制剂，从细胞周期角度出发，
探讨肝癌细胞ＱＧＹ－７７０３对含羞草素的敏感性，并对
比胸腺嘧啶脱氧核苷（简称胸苷）阻断法，研究含羞草
素阻断去除后对ＱＧＹ－７７０３细胞周期的影响。
１　材料与方法
１．１　实验材料与设备
ＲＰＭＩ－１６４０培养基、胎牛血清、双抗和胰酶为
美国 Ｈｙｃｌｏｎｅ公司产品。含羞草素（Ｌ－ｍｉｍｏｓｉｎｅ，
ＡＲ）购于美国Ａｃｒｏｓ　Ｏｒｇａｎｉｃ公司。胸腺嘧啶脱氧
核苷（ＴｄＲ，ＡＲ）、碘化丙啶（ＰＩ，ＡＲ），曲拉通Ｘ－１００
（Ｔｒｉｔｏｎ　Ｘ－１００，ＡＲ）和胰核糖核酸酶（ＲｎａｓｅＡ）为美
国Ｓｉｇｍａ公司产品。流式细胞仪为美国ＢＤ公司
ＦＡＣＳＶａｎｔａｇｅ　ＳＥ型产品。ＱＧＹ－７７０３细胞株为本
室保存的，来源于上海细胞库的细胞。
１．２　试验方法
１．２．１　细胞培养
将肝癌细胞株 ＱＧＹ－７７０３接种于 ＲＰＭＩ－１６４０
培养基（含１００Ｕ／ｍＬ青霉素，１００Ｕ／ｍＬ链霉素和
１０％胎牛血清）。于３７℃，５％ ＣＯ２ 的恒温培养箱
中进行培养。４８～７２ｈ传代１次。
１．２．２　细胞同步化方法
ａ）含羞草素阻断法：用含３００μＭ 含羞草素的
培养液培养２４ｈ，弃去培养液，ＰＢＳ清洗２次除去残
余药物，换正常培养基继续培养若干小时，以流式细
胞术（ＦＣＭ）检测药物去除后细胞的同步化程度。
ｂ）胸苷单阻断法：加入含２ｍＭ胸苷的１６４０培养
液处理２４ｈ后，除去培养液，ＰＢＳ清洗数次，再将细胞
放在含有１０％小牛血清的１６４０培养液中继续培养设
定时间。每隔２ｈ收集细胞。收集的细胞用ＰＢＳ洗涤
后以预冷的７０％乙醇固定细胞，放置于４℃冰箱过夜。
１．２．３　细胞周期检测
用 ＦＣＭ 检测 ＱＧＹ－７７０３ 细胞不同时相的
ＤＮＡ含量。向收集的各组样本中，加入２ｍＬ预冷
的７０％乙醇固定细胞过夜。检测前，离心去乙醇，
ＰＢＳ清洗后加入０．５ｍＬ碘化丙啶染料（５０μｇ／ｍＬ
ＰＩ，１００μｇ／ｍＬ　ＲＮａｓｅＡ，０．２％ Ｔｒｉｘｏｎ－１００），室温
避光染色３０ｍｉｎ，收集碘化丙啶荧光信号。使用
ＣｅｌＱｕｅｓｔ软件分析细胞各周期时相比率。
２　结果分析
２．１　含羞草素作用后细胞同步化结果
本实验将含羞草素作用于人肝癌ＱＧＹ－７７０３细胞
株，研究其对ＱＧＹ－７７０３细胞株的同步化作用效果。
以ＦＣＭ检测ＤＮＡ荧光标识细胞各时相的变化。
单次含羞草素阻断后各时点的流式图见图１。
从图１可看出：含羞草素同步化处理后的绝大部分细
胞被阻断在预期的时相，而未加药物处理的对照组细
胞中处于预期时相的细胞比例较低，大多数处于非同
步化生长状态。又由图１（ａ）知，未同步化的 ＱＧＹ－
７７０３细胞各时相分别为Ｇ１期占６５．８％，Ｓ期占２０．
７％，Ｇ２／Ｍ期占１２．７％。通过计算可得出：细胞Ｇ１
期时长为１３．２ｈ，Ｓ期为４．１ｈ，Ｇ２／Ｍ期为２．５ｈ。
图１　含羞草素作用ＱＧＹ－７７０３细胞后不同时点的流式周期分布
　　为了便于观察各周期时相的变化规律，将多次
同步化结果汇总成图２。可发现：含羞草素处理细
胞２４ｈ后，各周期时相所占的百分率依次由少量向
高峰过渡。在含羞草素作用结束后的第０ｈ，Ｇ１期
１２６第４期 赵雪芹等：含羞草素对肝癌细胞ＱＧＹ－７７０３周期同步化的作用
与Ｓ期细胞比率占到总数的９０％，这说明大多数
ＱＧＹ－７７０３细胞被阻断在Ｇ１期末（图１（ｂ））；继续
培养８ｈ后，Ｇ１期细胞逐渐减少，Ｓ期细胞逐渐增
多，第８ｈ细胞 Ｇ１期达到最大值，为９６．４％（图１
（ｃ）），且在第０～１０ｈ内保持８０％以上同步率；第
２０ｈ细胞Ｓ期达到最大值为８２．９％；随后Ｇ２／Ｍ期
细胞逐渐增加。这表明含羞草素能够可逆的作用于
ＱＧＹ－７７０３细胞，并可获得同步化效果较好的 Ｇ１
期和Ｓ期细胞。此外，由含羞草素处理后的 Ｇ１期
曲线可发现，Ｇ１期最高值９４．６％与最低值７．９％分
别出现在去除药物后的第８ｈ和第２０ｈ，相差１２ｈ，
与未同步化的Ｇ１期时长（１３．２ｈ）相似。并且，各曲
线在２０ｈ处，均出现拐点，推测含羞草素基本不影
响ＱＧＹ－７７０３细胞周期总时长。
图２　含羞草素阻断后细胞周期分布
２．２　胸苷作用后细胞同步化结果
胸苷是ＤＮＡ的特异前体，氚标记胸苷渗入法
是目前常用的细胞增殖检测方法。故此，本研究采
用胸苷阻断后 ＱＧＹ－７７０３细胞各时相的变化来对
比研究含羞草素的作用效果。
胸苷处理后（图３），在前８ｈ内Ｇ１期细胞逐渐
减少，Ｓ期细胞逐渐增多，第８ｈ细胞Ｇ１期达到最
图３　胸腺嘧啶脱氧核苷阻断细胞周期分布
小值２９．０％，Ｓ期达到最大值７５．７％；随后 Ｇ２／Ｍ
期细胞逐渐增加，第１０ｈ细胞Ｇ２／Ｍ期达到最大值
为４１．９％。此外，细胞Ｇ１期的两个峰值分别为２ｈ
的５２．２％和２２ｈ的８７．２％，两峰值间隔２０ｈ，表明
实验条件下该细胞周期约为２０ｈ。Ｇ２／Ｍ 期曲线８
～１２ｈ出现峰，推测Ｇ２／Ｍ期时长４ｈ。Ｓ期曲线２
～１０ｈ出现峰，推测Ｓ期时长８ｈ。与按空白细胞
推测的各期时间长度不同（图１ａ），可能是细胞种植
密度过大，接触抑制造成Ｇ１期延长。
含羞草素与胸苷都是通过调控细胞Ｇ１／Ｓ时点
将细胞阻滞于Ｇ１期末，但由图３、图２中的 Ｇ１期
曲线可发现：胸苷组在第２ｈ开始减少（图３，Ｇ１期
２ｈ处）；而含羞草素处理的在第８ｈ开始减少（图
２，Ｇ１期８ｈ处），相较于胸苷组延后６ｈ。同样，对
比两种药物处理组的Ｓ期曲线，可发现：胸苷组在第
８ｈ开始减少（图３，Ｓ期８ｈ处）；而含羞草素处理的
在第２０ｈ开始减少（图２，Ｇ１期２０ｈ处），相较于胸
苷组延后１２ｈ。则含羞草素使 ＱＧＹ－７７０３细胞Ｓ
期延后６ｈ。Ｐａｒｋ等［１６］发现含羞草素可使人宫颈
癌Ｈｅｌａ细胞株的Ｓ早期延后４ｈ。故此推测，本实
验条件下ＱＧＹ－７７０３细胞对含羞草素的作用敏感，
用药后细胞进入正常周期的时间延后６ｈ，且Ｓ早
期也延后６ｈ。
３　讨　论
肿瘤的发生发展本质上是细胞周期的失调。大
部分抗肿瘤药物具有细胞周期特异性。同步化是研
究细胞周期调控与药物特异性作用最重要的方法。
细胞分裂是细胞最基本的生理活动。细胞周期
的运行遵循着严格的时相次序。体外培养细胞根据
细胞来源不同选用不同阻断方法是细胞停止在细胞
周期的某一时相。目前报道的主要有血清饥饿、药
物抑制、低温、照射、机械振动收集分裂细胞等［１７］。
其中，药物阻断法是体外培养细胞人工同步化最常
用的方法。该阻断法要求对细胞周期的阻断是可逆
的，即去除药物加入培养基后细胞仍可正常生长。
目前应用最多的合成抑制剂是胸苷［１６－１７］。白瑞
霞等［１８］通过胸苷阻断人肝癌细胞株 ＨｅｐＧ２获得了
同步率６０％以上的 Ｇ１期和Ｇ２期。胸苷阻断法的
优点是细胞同步化效率高，且适用于任何体外培养
的细胞体系，缺点是容易造成细胞的不均等生长。含
羞草素与胸腺嘧啶具有高度相似性化学结构，可竞争
性地与腺嘌呤结合，将细胞同步于Ｇ１晚期，并且研究
表明含羞草素对多种肿瘤细胞有抑制作用，可作为放
２２６ 　　　　　　　　　　　　　　浙　江　理　工　大　学　学　报 ２０１６年　第３５卷
射增敏剂增加对肿瘤的疗效［１９－２２］。本实验条件下，含
羞草素不仅能同步肝癌细胞ＱＧＹ－７７０３，而且获得的
高Ｇ１期同步率（８０％以上）能够持续１０ｈ，这将便于
应用于耗时较长的生物物理方面的研究。
４　结　论
ａ）ＱＧＹ－７７０３细胞在阻断结束后第０～１０ｈ内
Ｇ１期的同步率均维持在８０％以上，第１０ｈ进入Ｓ
期，第２０ｈ进入Ｇ２／Ｍ期。
ｂ）可实现的Ｇ１、Ｓ期最高同步率分别为９４．６％
和８６．０％。且同步率稳定可靠。
ｃ）含羞草素能造成 ＱＧＹ－７７０３细胞 Ｇ１期阻
滞，并可使Ｓ期延后６ｈ。
参考文献：
［１］ＧＯＲＣＺＹＣＡ　Ｗ，ＧＯＮＧ　Ｊ，ＡＲＤＥＬＴ　Ｂ，ｅｔ　ａｌ．Ｔｈｅ　ｃｅｌ
ｃｙｃｌｅ　ｒｅｌａｔｅｄ　ｄｉｆｆｅｒｅｎｃｅｓ　ｉｎ　ｓｕｓｃｅｐｔｉｂｉｌｉｔｙ　ｏｆ　ＨＬ－６０ｃｅｌｓ
ｔｏ　ａｐｏｐｔｏｓｉｓ　ｉｎｄｕｃｅｄ　ｂｙ　ｖａｒｉｏｕｓ　ａｎｔｉｔｕｍｏｒ　ａｇｅｎｔｓ［Ｊ］．
Ｃａｎｃｅｒ　Ｒｅｓｅａｒｃｈ，１９９３，５３（１３）：３１８６－３１９２．
［２］罗贤雯，刘仁刚，周洁萍，等．高温阻滞 ＨｅＬａ细胞于Ｇ１
期并引起Ｇ１期细胞凋亡［Ｊ］．华中科技大学学报：医学
版，２００５，３４（１）：１７－１９．
［３］王昱，卢仲毅，许峰，等．羟基脲对体外 Ｈｅｌａ细胞周期同
步化作用的研究［Ｊ］．重庆医学，２０１０，３９：３３３１－３３３２．
［４］张鹏．化疗药物细胞周期特异性的重新评估［Ｄ］．武汉：
华中科技大学，２００６．
［５］于静萍，孙美玲，孙苏平，等．沙利度胺增强Ｘ射线对胶
质瘤Ｕ２５１细胞辐射敏感性机制的研究［Ｊ］．辐射研究与
辐射工艺学报，２０１０，６：３６８－３７２．
［６］ＺＨＵ　Ｈ　Ｐ，ＺＨＡＮＧ　Ｑ　Ａ， ＭＵ　Ｓ　Ｕ，ｅｔ　ａｌ．，
Ｅｘｐｅｒｉｍｅｎｔａｌ　ｓｔｕｄｙ　ｏｎ　ｓｅｎｓｉｂｉｌｉｔｙ　ｏｆ　ｒａｄｉｏｔｈｅｒａｐｙ　ｆｏｒ
ｈｕｍａｎ　ｐｒｏｓｔａｔｅ　ｃａｎｃｅｒ　ｃｅｌ　ｌｉｎｅｓ　ＰＣ－３ｗｉｔｈ　ｃｕｒｃｕｍｉｎ［Ｊ］．
Ｃｈｉｎａ　Ｊｏｕｒｎａｌ　ｏｆ　Ｍｏｄｅｒｎ　Ｍｅｄｉｃｉｎｅ，２０１４，２４（１８）：２７－３０．
［７］吴宏，闫国诚，王双全，等．姜黄素对胃癌细胞放疗增敏
作用的研究［Ｊ］．陕西医学杂志，２０１４（２）：１３７－１３９．
［８］王东，裘建明，杨关根，等．姜黄素对直肠癌细胞放疗增
敏的机制研究［Ｊ］．中华胃肠外科杂志，２０１５，１８（６），６０２－
６０５．
［９］曲智锋，王培，穆双锋，等．多西他赛联合奥沙利铂同步
化放疗治疗局部晚期非小细胞肺癌临床观察［Ｊ］．医药
论坛杂志，２０１０，１８：４０－４２．
［１０］王雪卿，尹婕，毛宁，等．细胞周期同步化逆转卵巢癌对
紫杉醇耐药的研究［Ｊ］．现代妇产科进展，２００９，１８（２）：
１０９－１１２．
［１１］ＫＵＢＯＴＡ　Ｓ，ＦＵＫＵＭＯＴＯ　Ｙ，ＩＳＨＩＢＡＳＨＩ　Ｋ，ｅｔ　ａｌ．
Ａｃｔｉｖａｔｉｏｎ　ｏｆ　ｔｈｅ　ｐｒｅ－ｒｅｐｌｉｃａｔｉｏｎ　ｃｏｍｐｌｅｘ　ｉｓ　ｂｌｏｃｋｅｄ　ｂｙ
ｍｉｍｏｓｉｎｅ　ｔｈｒｏｕｇｈ　ｒｅａｃｔｉｖｅ　ｏｘｙｇｅｎ　ｓｐｅｃｉｅｓ－ａｃｔｉｖａｔｅｄ
ＡＴＭ　ｗｉｔｈｏｕｔ　ＤＮＡ　ｄａｍａｇｅ［Ｊ］．Ｊｏｕｒｎａｌ　ｏｆ　Ｂｉｏｌｏｇｉｃａｌ
Ｃｈｅｍｉｓｔｒｙ，２０１４，２８９（９）：５７３０－５７４６．
［１２］ＭＬＡＤＥＮＯＶ　Ｅ，ＡＮＡＣＨＫＯＶＡ　Ｂ．ＤＮＡ　ｂｒｅａｋｓ
ｉｎｄｕｃｔｉｏｎ　ｂｙ　 ｍｉｍｏｓｉｎｅ ［Ｊ］． Ｚｅｉｔｓｃｈｒｉｆｔ　 Ｆüｒ
Ｎａｔｕｒｆｏｒｓｃｈｕｎｇ　Ｃ，２０１４，５８（９－１０）：７３２－７３５．
［１３］ＣＨＵＮＧ　Ｌ　Ｃ，ＴＳＵＩ　Ｋ　Ｈ，ＦＥＮＧ　Ｔ　Ｈ，ｅｔ　ａｌ．Ｌ－
Ｍｉｍｏｓｉｎｅ　ｂｌｏｃｋｓ　ｃｅｌ　ｐｒｏｌｉｆｅｒａｔｉｏｎ　ｖｉａ　ｕｐｒｅｇｕｌａｔｉｏｎ　ｏｆ
Ｂ－ｃｅｌ　ｔｒａｎｓｌｏｃａｔｉｏｎ　ｇｅｎｅ　２ａｎｄ　Ｎ－ｍｙｃ　ｄｏｗｎｓｔｒｅａｍ
ｒｅｇｕｌａｔｅｄ　ｇｅｎｅ　１ｉｎ　ｐｒｏｓｔａｔｅ　ｃａｒｃｉｎｏｍａ　ｃｅｌｓ［Ｊ］．
Ａｍｅｒｉｃａｎ　Ｊｏｕｒｎａｌ　ｏｆ　Ｐｈｙｓｉｏｌｏｇｙ　Ｃｅｌ　Ｐｈｙｓｉｏｌｏｇｙ，２０１２，
３０２（４）：Ｃ６７６－Ｃ６８５．
［１４］ＨＥ　Ｘ　Ｊ，ＧＯＮＧ　Ｊ　Ｐ，ＳＨＥＮ　Ｙ，ｅｔ　ａｌ．Ｒｏｌｅｓ　ｏｆ
ｒｏｓｃｏｖｉｔｉｎｅ　ａｎｄ　ｍｉｎｏｓｉｎｅ　ｉｎ　Ｆａｓ－ｍｅｄｉａｔｅｄ　ｌｅｕｋｅｍｉａ　ｃｅｌ
ａｐｏｐｔｏｓｉｓ　ａｎｄ　ｔｈｅ　ｐｏｓｓｉｂｌｅ　ｍｅｃｈａｎｉｓｍ［Ｊ］．Ｃｈｉｎｅｓｅ
Ｊｏｕｒｎａｌ　ｏｆ　Ｃａｎｃｅｒ　Ｂｉｏｔｈｅｒａｐｙ，２００８，１５（５）：４６４－４６９．
［１５］ＱＩＡＯ　Ｓ， ＭＵＲＡＫＡＭＩ　Ｋ， ＺＨＡＯ　Ｑ，ｅｔ　ａｌ．
Ｍｉｍｏｓｉｎｅ－ｉｎｄｕｃｅｄ　ａｐｏｐｔｏｓｉｓ　ｉｎ　Ｃ６ｇｌｉｏｍａ　ｃｅｌｓ　ｒｅｑｕｉｒｅｓ
ｔｈｅ　ｒｅｌｅａｓｅ　ｏｆ　ｍｉｔｏｃｈｏｎｄｒｉａ－ｄｅｒｉｖｅｄ　ｒｅａｃｔｉｖｅ　ｏｘｙｇｅｎ
ｓｐｅｃｉｅｓ　ａｎｄ　ｐ３８，ＪＮＫ　ａｃｔｉｖａｔｉｏｎ［Ｊ］．Ｎｅｕｒｏｃｈｅｍｉｃａｌ
Ｒｅｓｅａｒｃｈ，２０１２，３７（２）：４１７－４２７．
［１６］ＰＡＲＫ　Ｓ　Ｙ，ＩＭ　Ｊ　Ｓ，ＰＡＲＫ　Ｓ　Ｒ，ｅｔ　ａｌ．Ｍｉｍｏｓｉｎｅ
ａｒｒｅｓｔｓ　ｔｈｅ　ｃｅｌ　Ｃｙｃｌｅ　ｐｒｉｏｒ　ｔｏ　ｔｈｅ　ｏｎｓｅｔ　ｏｆ　ＤＮＡ
ｒｅｐｌｉｃａｔｉｏｎ　ｂｙ　ｐｒｅｖｅｎｔｉｎｇ　ｔｈｅ　ｂｉｎｄｉｎｇ　ｏｆ　ｈｕｍａｎ　Ｃｔｆ４／
Ａｎｄ－１ｔｏ　ｃｈｒｏｍａｔｉｎ　ｖｉａ　Ｈｉｆ－１αａｃｔｉｖａｔｉｏｎ　ｉｎ　ＨｅＬａ　ｃｅｌｓ
［Ｊ］．Ｃｅｌ　Ｃｙｃｌｅ，２０１２，１１（４）：７６１－７６６．
［１７］高世勇，曲笑莹．细胞周期同步化研究进展［Ｊ］．中国药
理学通报，２０１４，３０（１）：１７－２１．
［１８］白瑞霞，王文礼，李丽梅．ＴｄＲ诱导肝癌细胞株 ＨｅｐＧ２
细胞周期同步化的效果［Ｊ］．科学技术与工程，２００８，８
（１）：１６４－１６５．
［１９］ＶＡＣＫＯＶＩ，ＥＮＧＥＬＯＶáＭ，ＭＡＲＩＮＯＶ　Ｉ，ｅｔ　ａｌ．
Ｃｅｌ　ｃｙｃｌｅ　ｓｙｎｃｈｒｏｎｉｚａｔｉｏｎ　ｏｆ　ｐｏｒｃｉｎｅ　ｇｒａｎｕｌｏｓａ　ｃｅｌｓ　ｉｎ
Ｇ１ｓｔａｇｅ　ｗｉｔｈ　ｍｉｍｏｓｉｎｅ［Ｊ］．Ａｎｉｍａｌ　Ｒｅｐｒｏｄｕｃｔｉｏｎ
Ｓｃｉｅｎｃｅ，２００３，７７（３－４）：２３５－２４５．
［２０］ＬＩ　Ｈ，ＺＨＡＯ　Ｗ，ＳＨＩ　Ｙ，ｅｔ　ａｌ．Ｒｅｔｉｎｏｉｃ　ａｃｉｄ　ａｍｉｄｅ
ｉｎｈｉｂｉｔｓ　ＪＡＫ／ＳＴＡＴ　ｐａｔｈｗａｙ　ｉｎ　ｌｕｎｇ　ｃａｎｃｅｒ　ｗｈｉｃｈ
ｌｅａｄｓ　ｔｏ　ａｐｏｐｔｏｓｉｓ［Ｊ］．Ｔｕｍｏｒ　Ｂｉｏｌｏｇｙ，２０１５，３６（１１）：
８６７１－８６７８．
［２１］ＺＡＬＡＴＮＡＩ　Ａ．Ｒｅｖｉｅｗ：ｐｏｔｅｎｔｉａｌ　ｒｏｌｅ　ｏｆ　ｃｅｌ　ｃｙｃｌｅ
ｓｙｎｃｈｒｏｎｉｚｉｎｇ　ａｇｅｎｔｓ　ｉｎ　ｃｏｍｂｉｎａｔｉｏｎ　ｔｒｅａｔｍｅｎｔ　ｍｏｄａｌｉｔｉｅｓ
ｏｆ　ｍａｌｉｇｎａｎｔ　ｔｕｍｏｒｓ［Ｊ］．Ｖｉｖｏ，２００５，１９（１）：８５－９１．
［２２］ＤＩＰＥＶ　Ｖ，ＧＯＴＡＲＤＯ　Ａ　Ｔ，ＨＡＲＡＧＵＣＨＩ　Ｍ，ｅｔ　ａｌ．
Ｍｉｍｏｓｉｎｅ　ａｎｄ　ｃｙｃｌｏｐｈｏｓｐｈａｍｉｄｅ：ａ ｐｏｔｅｎｔｉａｌ　ｎｅｗ
ｃｏｍｂｉｎａｔｉｏｎ　 ｔｈｅｒａｐｙ　 ｕｓｅｄ　 ｔｏ　 ｐｒｅｖｅｎｔ　 ｔｕｍｏｒ
ｄｅｖｅｌｏｐｍｅｎｔ［Ｊ］．Ｂｒａｚｉｌｉａｎ　Ａｒｃｈｉｖｅｓ　ｏｆ　Ｂｉｏｌｏｇｙ　＆
Ｔｅｃｈｎｏｌｏｇｙ，２０１２，５５（６）：８７１－８７６．
３２６第４期 赵雪芹等：含羞草素对肝癌细胞ＱＧＹ－７７０３周期同步化的作用
Ｃｙｅｃｌｅ　Ｓｙｎｃｈｒｏｎｉｚａｔｉｏｎ　ｏｆ　Ｈｕｍａｎ　Ｈｅｐａｔｏｍａ　Ｃｅｌ　ＱＧＹ－７７０３
Ｉｎｄｕｃｅｄ　ｂｙ　Ｌ－ｍｉｍｏｓｉｎｅ
ＺＨＡＯ　Ｘｕｅｑｉｎ１，ＲＥＮ　Ｌｅｉ２，ＷＡＮＧ　Ｄａｊｉｎ１，ＺＨＡＮＧ　Ｙｏｎｇｍｉｎｇ１，ＴＡＯ　Ｓｉｊｉｅ１
（１．Ｃｏｌｅｇｅ　ｏｆ　Ｌｉｆｅ　Ｓｃｉｅｎｃｅｓ，Ｚｈｅｊｉａｎｇ　Ｓｃｉ－Ｔｅｃｈ　Ｕｎｉｖｅｒｓｉｔｙ，Ｈａｎｇｚｈｏｕ　３１００１８，Ｃｈｉｎａ；
２．Ｃｏｌｅｇｅ　ｏｆ　Ｍａｔｅｒｉａｌｓ，Ｘｉａｍｅｎ　Ｕｎｉｖｅｒｓｉｔｙ，Ｘｉａｍｅｎ　３６１００５，Ｃｈｉｎａ）
Ａｂｓｔｒａｃｔ：Ｃａｎｃｅｒ　ｉｓ　ｏｎｅ　ｏｆ　ｄｉｓｅａｓｅｓ　ｗｈｉｃｈ　ｓｅｖｅｒｅｌｙ　ｔｈｒｅａｔｅｎ　ｈｕｍａｎ　ｈｅａｌｔｈ．Ｉｎ　ｅｓｓｅｎｃｅ，ｔｕｍｏｒｉｇｅｎｅｓｉｓ
ａｎｄ　ｔｕｍｏｒ　ｐｒｏｇｒｅｓｓｉｏｎ　ｒｅｓｕｌｔ　ｆｒｏｍ　ａ　ｄｉｓｏｒｄｅｒ　ｏｆ　ｕｎｌｉｍｉｔｅｄ　ｐｅｒｉｏｄｉｃ　ｇｒｏｗｔｈ，ｐｒｏｌｉｆｅｒａｔｉｏｎ　ａｎｄ　ｄｉｆｆｅｒｅｎｔｉａｔｉｏｎ
ｏｆ　ｃｅｌｓ．Ｃｅｌ　ｓｙｎｃｈｒｏｎｉｚａｔｉｏｎ　ｉｓ　ｔｈｅ　ｆｏｕｎｄａｔｉｏｎ　ｏｆ　ｒｅｓｅａｒｃｈｅｓ　ｏｎ　ｔｕｍｏｒｉｇｅｎｅｓｉｓ，ｔｕｍｏｒ　ｐｒｏｇｒｅｓｓｉｏｎ　ａｎｄ
ｔｒｅａｔｍｅｎｔ．Ｈｅｒｅ，ｗｅ　ｉｎｖｅｓｔｉｇａｔｅｄ　ｔｈｅ　ｅｆｆｅｃｔ　ｏｆ　Ｌ－ｍｉｍｏｓｉｎｅ　ｂｌｏｃｋｉｎｇ　ｏｎ　ｃｙｃｌｅ　ｓｙｎｃｈｒｏｎｉｚａｔｉｏｎ　ｂｙ　ｔａｋｉｎｇ
ｈｕｍａｎ．ｈｅｐａｔｏｍａ　ｃｅｌ　ＱＧＹ－７７０３．Ｆｕｒｔｈｅｒｍｏｒｅ，ｃｏｍｐａｒｅｄ　ｗｉｔｈ　ｔｈｙｍｉｄｉｎｅ　ｂｌｏｃｋｉｎｇ，ｔｈｅ　ｅｆｆｅｃｔ　ｏｆ　Ｌ－
ｍｉｍｏｓｉｎｅ　ｂｌｏｃｋｉｎｇ　ｒｅｍｏｖａｌ　ｏｎ　ｃｅｌ　ｃｙｃｌｅ　ｏｆ　ＱＧＹ－７７０３ｃｅｌｓ　ｗａｓ　ｉｎｖｅｓｔｉｇａｔｅｄ．Ｔｈｅ　ｒｅｓｕｌｔｓ　ｓｈｏｗ　ｔｈａｔ　ＱＧＹ－
７７０３ｃｅｌｓ　ｅｎｔｅｒ　Ｓｐｈａｓｅ　ａｔ　ｔｈｅ　１０ｔｈ　ｈｏｕｒ　ａｎｄ　ｅｎｔｅｒ　Ｇ２／Ｍ　ｐｈａｓｅ　ａｔ　ｔｈｅ　２０ｔｈ　ｈｏｕｒ　ａｆｔｅｒ　ｒｅｌｅａｓｅ　ｆｒｏｍ　ｔｈｅ　Ｌ－
ｍｉｍｏｓｉｎｅ．Ｔｈｅ　ｈｉｇｈｅｓｔ　ｓｙｎｃｈｒｏｎｉｚａｔｉｏｎ　ｒａｔｅ　ｉｓ　９４．６％ｉｎ　Ｇ１ｐｈａｓｅ　ａｎｄ　８６．０％ｉｎ　Ｓ　ｐｈａｓｅ　ｃｅｌｓ．Ｉｎ
ｃｏｎｃｌｕｓｉｏｎ，ＱＧＹ－７７０３ｃｅｌ　ｃａｎ　ｂｅ　ｓｕｃｃｅｓｓｆｕｌｙ　ｓｙｎｃｈｒｏｎｉｚｅｄ　ｉｎ　Ｇ１ｐｈａｓｅ　ａｎｄ　Ｓ　ｐｈａｓｅ　ｂｙ　ｔｈｅ　Ｌ－ｍｉｍｏｓｉｎｅ
ｔｒｅａｔｍｅｎｔ．
Ｋｅｙ　ｗｏｒｄｓ：Ｌ－ｍｉｍｏｓｉｎｅ；ｈｕｍａｎ　ｈｅｐａｔｏｍａ　ｃｅｌ；ｃｅｌ　ｃｙｃｌｅ；ｓｙｎｃｈｒｏｎｉｚａｔｉｏｎ
（责任编辑：许惠儿）
４２６ 　　　　　　　　　　　　　　浙　江　理　工　大　学　学　报 ２０１６年　第３５卷