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赤小豆活性成分的提取及保健功能研究进展



全 文 :389
赤小豆活性成分的提取
及保健功能研究进展
彭 游,李仙芝,柏 杨
(九江学院功能有机分子制备与应用九江市重点实验室,江西九江 332005)
摘 要:赤小豆营养丰富,其中含有五环三萜皂苷类、黄酮类、鞣质等化合物。目前赤小豆主要作为普通食品供人们食
用,其多种功效还未能充分认识与应用。通过对近年来赤小豆活性成分的提取与保健功能的研究进行综述,以期为赤
小豆作为保健食品新资源的开发和应用提供依据。
关键词:赤小豆,提取,保健功能,食品新资源,研究进展
Research progress in extraction and health care function
of active ingredients from red adzuki bean
PENG You,LI Xian-Zhi,BO Yang
(Key Laboratory of Jiujiang City for Preparation and Application of Organic Functional Molecules,Jiujiang 332005,China)
Abstract:Red adzuki bean contains many nutritional ingredients that includ five ring three terpene saponins,
flavonoids,tannins etc.At present,it is mainly as a common food for human consumption.Its many activities had not
be realized and applied fully.The latest research on extraction and health care function active ingredients from red
phaseolus bean had been summarized.The aim was to provide a reference for the development and utilization of
flavonoids of puerarin as new resources of health foods.
Key words:red adzuki bean;extraction;health care function;new resource of health foods;research progress
中图分类号:TS210.1 文献标识码:A 文 章 编 号:1002-0306(2013)09-0389-04
收稿日期:2013-01-24
作者简介:彭游(1971 -) ,男,博士,副教授,研究方向:食品化学与
营养。
基金项目:国家自然科学基金(81160412) ;江西省自然科学基金
(2010GZN0106)。
赤小豆为豆科植物赤小豆 vigna umbeuata Ohwi
et Ohashi的干燥成熟种子,具有利水消肿,解毒排脓
的功能[1]。赤小豆又名赤豆、红小豆,既是常用中药,
又是我国广泛食用的豆类。赤小豆始载于《神农本
草经》,其后历代本草、医方亦多有记载。现代药理
研究表明,赤小豆具有抗氧化、增强免疫、抗菌、雌激
素样作用等药理作用[2-4]。赤小豆主要含有五环三
萜皂苷类、黄酮类、鞣质等化合物[5]。本文对近年来
赤小豆活性成分的提取与保健功能的研究进行综
述,以期为赤小豆作为保健食品新资源的开发和应
用提供科学依据。
1 赤小豆活性成分的提取及其保健功能
1.1 胰蛋白酶抑制剂的提取与避孕作用
由于顶体粒蛋白具有类似胰蛋白酶的性质,能
使卵细胞的透明带水解出一条通道,使精子顺利穿
过透明带与卵细胞融合而受精。因此,如能有效地
抑制顶体粒蛋白的活力,就能控制受精,从而有计划
地控制人口的增长。
杨同成等[6]用酸抽提、2.5%的三氯乙酸 TCA 热
处理、硫酸按盆析、凝胶层析和 DEAE-纤维素离子交
换层析,从赤小豆中分离得到一种分子量为 7400 的
胰蛋白酶抑制剂。活性实验表明,对胰蛋白酶有较
强的抑制作用。
杨同成等[7]用从赤小豆中提纯的胰蛋白酶抑制
剂,剂量在 2mg /mL 以上时体外能全部抑制人体精
子,该抑制剂对人体精子顶体粒蛋白亦有较强的抑
制作用。
Klomklao等[8]用 0.15mol /L 的 NaCl 溶液从赤小
豆中提取胰蛋白酶抑制剂。萃取时间为 30min。初
提物在 90℃加热 10min,用 30% ~65%的硫酸铵盐
析,用 Sephacryl S-200 色谱分离,产率 53.9%,纯度
提高 10.91 倍。用 SDS-聚丙烯酰胺凝胶电泳法测定
胰蛋白酶抑制剂的分子量为 14ku。在 90℃ 保存
60min,纯化的胰蛋白酶抑制剂在宽的 pH 范围内保
持稳定,且对胰蛋白酶有高的抑制活性。0 ~3%的
NaCl溶液不影响其活性,但在电脉前经 β-巯基乙醇
处理后活性丧失。
1.2 蛋白质及酶的提取与活性
赤小豆种子中蛋白质主要是 7S 球蛋白糖蛋白,
含有 5%中性糖和 0.5%氨基糖。李续娥等[9]分别用
磷酸盐缓冲液和硼酸盐缓冲液提取赤小豆种子蛋白
质,结果表明,磷酸盐缓冲液(pH8.0)对赤小豆种子
DOI:10.13386/j.issn1002-0306.2013.09.080
390
蛋白质的提取效果较好。
超氧化物歧化酶(superoxide dismutase,SOD)是
一类广泛存在于生物体内的氧化还原酶。作为体内
自由基的有效清除剂,能使自由基的形成和消除处
于动态平衡,从而可抵御 O -2 ·的毒害作用。檀志芬
等[10]采用硫酸铵分步沉淀,以 40%硫酸铵饱和度去
除杂蛋白,以 95% 硫酸铵饱和度沉淀酶蛋白。结果
表明在光照下培养的赤小豆芽超氧化物歧化酶的活
性比未光照的对照组提高了 54%,蛋白含量提高了
30%,并测得在 0~0.001mg /L 范围内吲哚乙酸 IAA
对赤小豆芽超氧化物歧化酶活性起显著的促进作
用,随赤小豆芽长的增加,其超氧化物岐化酶的活性
呈上升趋势,子叶中赤小豆芽超氧化物歧化酶的活
性较高。
赤豆 β-半乳糖苷酶对乳糖表现出较高的亲和
力,使该酶用于工业化酶解牛奶中乳糖成为可能。
韩平治等[11]用阳离子修饰的 SephadexG - 100,经
BrCN活化,将部分纯化的赤豆 β-半乳糖苷酶通过
吸附和共价交联法固定化。固定化载体表现出较
高的蛋白载量和酶活性收率。固定化酶活性收率
达 65%。动力学性质研究表明,固定化酶酸碱稳定
性、热稳定性、存储稳定性和使用稳定性都比游离
酶好。
1.3 黄酮与酚类化合物的提取与抗氧化能力
赤小豆所含的黄酮类化合物具有较强的体外抗
氧化作用,对 Fe 导致的大鼠原代肝细胞氧化损伤具
有保护作用,是预防和治疗肿瘤、肝病等疾病的有效
成分。
彭游等[12]考察赤小豆总黄酮的微波光波组合无
溶剂提取法,并对提取机理进行分析。发现微波光
波提取干法以功率 800W(微波 55%与光波 45%)加
热 6min后,70%乙醇萃取得总黄酮。总黄酮的提取
率为 1.24%,与相应的常规加热回流提取法接近,该
法有操作简单快速,成本低等优点。利用荧光显微
镜 FM,IR对微波提取机理进行初步研究表明,微波
光波可能是从对植物组织细胞结构的影响上来改善
次生代谢产物的提取效率。
王海棠等[13]从赤豆的干燥种皮中提取,经聚酰
胺柱层析和制备薄层分离,首次从赤豆得到 1 个黄
色化合物,结构鉴定为芦丁。
李波等人[14]采用 Photochem 抗氧化测定仪对赤
豆总黄酮提取物体外抗氧化作用进行评价,同时评
价其对培养大鼠原代肝细胞 Fe2 +氧化损伤保护作用
的量效、时效关系。赤豆总黄酮提取物在 40、80、
120ng剂量下,抗氧化作用大于芹菜素。培养的原代
肝细胞中加入 100μmol /L Fe2 +后肝细胞活性减弱,
培养液中丙氨酸氨基转移酶(ALT)活力升高,脱落
明显,加入提取物后,可有效抑制上述损伤作用。实
验表明,赤豆总黄酮提取物具有较强的体外抗氧化
作用,对 Fe2 +导致的大鼠原代肝细胞氧化损伤具有
保护作用。
张幸国等人[15]评价赤豆黄酮的雌激素样作用及
其对人乳腺癌 MCF-7 细胞孕激素受体水平的影响。
采用富含雌激素受体的雌激素依赖性人乳腺癌细胞
株 MCF-7 细胞,分别观察赤豆黄酮提取物对其增殖
的影响,赤豆对孕激素受体 mRNA 和蛋白表达的影
响,并评价赤豆提取物发挥雌激素样作用的机制。
结果显示,与溶剂对照组比较,10~200μg /mL 赤豆黄
酮提取物能显著促进 MCF-7 细胞的增殖,100μg /mL
时作用达到最大;赤豆提取物能明显诱导 MCF-7 细
胞孕激素受体(PR)基因 mRNA 和蛋白的表达,以上
作用均能被雌激素受体拮抗剂所完全拮抗。研究表
明赤豆提取物具有雌激素活性。
Amarowicz等[16]用 80%丙酮从赤小豆萃取酚类
化合物,初提物经 Sephadex LH-20 分离成 I 和 II带。
用乙醇洗脱出的 I 带含小分子酚类物质。用 H2O /
acetone(1∶1;v /v)萃取的 II 带,主要含鞣酸。采用总
抗氧化能力、DPPH自由基清除能力与还原能力考察
赤小豆酚类化合物的体外抗氧化能力。结果表明,
鞣酸具有最强的抗氧化能力,鞣酸组为 4.17μmol
Trolox /mg,而初提物组与 I带组分别为 1.76和 1.40μmol
Trolox /mg。II带的总酚含量也最高,为 189mg /g。
1.4 膳食纤维的提取与血糖控制作用
膳食纤维主要是指不能被人体胃肠道中消化酶
所消化的且不被人体吸收利用的多糖,对肥胖症、肠
道疾病、心血管疾病、高血压、糖尿病等慢性非传染
性疾病起着预防和保健的作用。是食物中具有保健
功能的功效成分。赤豆皮是难得的膳食纤维源,纤
维含量高达 60%左右,且质感好、口感佳,可以加工
成高纯度、高品质、高附加值的膳食纤维。
曹阳[17]通过提取温度、提取时间、液固比、碱液
浓度四个因素三水平的实验提取赤豆皮中的膳食纤
维,以提取率为考察指标确定最佳工艺参数:提取温
度 55℃,时间 9h,液固比 6,碱溶液浓度 1.5%,以此
获得的提取率最高为 51%。最佳粉碎粒度的实验表
明,赤豆皮最佳粉碎粒度 1.0~1.5mm 时,膳食纤维提
取率最高,为 53.5%。
曹小红等人[18]将赤豆脱脂样品,经 NaOH 溶液
浸泡,脱蛋白,然后过滤,漂洗至中性,再用 HCl 浸
泡,过滤,漂洗至中性,烘干,磨细,用双氧水脱色,得水
不溶性膳食纤维成品。在体外模拟条件下,测定它对
NO-2 和胆酸钠的吸附作用,发现在酸性条件下赤豆皮
水不溶性膳食纤维对 NO-2 具有较好的吸附作用,在
pH2.0时,最大吸附速率为 0.132μmol /(g·mol) ,最小
吸附浓度 1.28μmol /L,平衡时间 73.3min。在 pH6.0
时,赤豆皮水不溶性膳食纤维对胆酸钠具有显著的
吸附作用。
陈秀霞[19]以加工后的赤豆豆渣为原料,以酶解
后的纤维素提取率为指标,评价复合纤维素酶的酶
解效果。实验条件下各因素对酶解反应速率影响从
大到小依次是温度、加酶量、酶解时间、pH、固液比。
酶解赤豆纤维工艺参数:加酶量 0.46%、酶解温度
46℃,酶解时间 17h、固液比 1∶11、pH4.8。
王彤等[20-21]报道,非胰岛素依赖型(Ⅱ型)糖尿
病(NIDDM)病人进食煮熟的整粒带皮赤小豆、白扁
豆、眉豆和绿豆后,血糖指数、血糖曲线增值面积及 C
391
肽曲线增值面积以红小豆最小,提示红小豆是 N
IDDM病人饮食治疗中较理想的食物之一。随后的
研究进一步证明,红小豆所致的餐后血糖波动最小,
餐后血糖反应明显低于眉豆和绿豆,利于糖尿病病
人餐后血糖的控制。
1.5 色素的提取与性质
王海棠等[22]从赤豆中提制出一种粉状天然食用
红色素,性质实验表明:赤豆红色素易溶于水;色素
的颜色随 pH 不同而变化,pH5~7 时,呈现稳定鲜艳
的红色,pH6 时色价≥5l;pH7 时色素的最大吸收谱
长为 500nm;具有一定的耐热性、耐光性和耐还原性,
但耐氧化性差;Mg2 +和蔗糖使红色增色,Zn2 +和柠檬
酸使红色稍褪,Na +、K +、Ca2 + 对色素无不良影响,
Fe2 +、Cu2 +、Al3 +使色素变色。急性毒性实验中白鼠
无异常表现,各项质量指标符合食用色素的要求。
吴春等[23]从赤豆皮渣中提取的玫瑰红色素属于
花色苷类化合物,该色素对光、热、pH 均不稳定,十
二烷基硫酸钠等对色素具有一定的护色作用,可使
色素的降解率在 30d内降低 20%。
陈平等[24]用 DA101、DA201 树脂提取赤豆皮色
素。实验测得树脂的饱和吸附容量为 0.088g /mL 湿
树脂。洗脱液乙醇的流速、浓度、用量和醇中酸的种
类对色素收率的影响,确定了最佳洗脱醇的浓度为
90% 当 l00mL 树脂饱和吸附时,用 200mL 乙醇(内
含 1% 盐酸)。流速在 40mL /min 时,色素收率在
90% 以上。
1.6 利尿作用有效部位筛选
闫婕等人[25]研究赤小豆对小鼠的利尿作用,筛
选利尿作用的有效部位。采用小鼠代谢笼法,测定
水负荷小鼠给药 4h 的尿量。结果显示,与空白给药
组相比,三氯甲烷萃取部位高剂量组具有显著的利
尿作用,正丁醇萃取部位高剂量组及药材水提液高
剂量组具有显著的利尿作用。实验表明,赤小豆三
氯甲烷及正丁醇萃取部位具有显著的利尿作用,可
能是赤小豆利尿作用的主要有效部位。
2 展望
目前的研究结果表明赤小豆胰蛋白酶抑制剂作
为避孕药有可能性,实验还仅限于体外抑制作用,对
体内受精过程影响如何及用药途径等问题,都急待
于进一步研究。赤豆皮水不溶性膳食纤维对胆酸钠
具有显著的吸附作用,其吸附能力随其用量的增加
而增强。但赤豆皮水不溶性膳食纤维的分子结构及
其他性能有待进一步研究。赤小豆利尿的主要成分
是否为皂苷及其苷元,还有待进一步对其总皂苷及
游离苷元进行提取、分离、纯化后,进行实验验证。
有关赤小豆的功能物质的研究主要包括膳食纤
维、蛋白质、各种酶及酶抑制剂、黄酮及多酚、色素的
提取及初步功能探讨。近年来国内外的研究文献表
明,赤小豆作为亚洲地区一种非常重要的食用豆类,
可能有着多方面的健康意义,特别是作为主食食材,
在糖尿病等慢性疾病的预防和控制方面具有一定优
势。其豆皮中所含多酚类物质的抗氧化作用可能是
其各种健康益处的重要基础。
有关赤小豆的保健功效的物质基础问题目前还
不十分清楚,构效关系更需进一步深入研究。通过
现代化学生物技术,从赤小豆分离纯化不同物质或
活性部位,明确其功效,为赤小豆作为保健食品新资
源的开发和应用提供科学依据。
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