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藏边大黄中皂苷提取工艺的初步研究



全 文 :No.7.2006
藏边大黄(RheumemodiWal.)系蓼科(Polygo-
naceae)大黄属(RheumL.)波叶组(Sect.Rheum)植物。
茎直立,粗壮,无毛,高70~100cm。生长在海拔
3200~4300m的山坡灌丛,分布于锡金、印度西北部、
巴基斯坦等地区[1]。
《藏药志》载:藏边大黄,味酸、苦、性寒,能
排出毒热、腑热和培根病。而且藏边大黄还具有利
尿、通便和健胃等功效。一些研究表明,藏边大黄
具有降糖[2-3]、保护肾功能[4]和抗菌[5-6]等作用。藏边大
黄中含有大黄酚、大黄素甲醚、大黄素和土大黄素,
不含大黄酸和芦荟大黄素[7]。其中的大黄素具有多种
药理作用,大黄素是一种强的激酶抑制剂,具有抗
肿瘤的作用。另外大黄素还具有抗病毒、抗氧化和
保肝等作用[8]。藏边大黄还具有抗超氧负离子的活
性,但活性不如华北大黄和河套大黄[9]。
很多植物中的皂苷都具有很好的应用价值和应
用前景,如苦瓜皂苷具有降血糖的作用[10],罗汉果中
的三萜皂苷是一种可以不被人体分解消化的甜味剂[11],
知母皂甙具有滋阴的功能[12]等。但目前对于藏边大
黄中皂苷的研究还较少,因此本文对藏边大黄中皂
苷的提取进行研究,以便对藏边大黄进一步的开发
利用。
1 材料与方法
1.1 实验材料与试剂
藏边大黄:采于西藏自治区,海拔4000m左右的
藏边大黄中皂苷提取工艺的
初步研究
尹 楠,沈 群*
(中国农业大学食品科学与营养工程学院,北京 100083)
摘要:对藏边大黄中皂苷的提取工艺进行了初步研究,研究结果表明使用高氯酸-香草醛方法对藏边
大黄中的皂苷进行检测,其最大吸收峰为510nm。在提取过程中,乙醇浓度对皂苷提取率的影响最
大,提取的最佳条件为乙醇浓度50%,浸泡温度35℃,浸泡时间6h,提取温度70℃。
关键词:藏边大黄;皂苷;提取
中图分类号:TS201.1 文献标识码:A 文章编号:1005-9989(2006)07-0131-03
Preliminaryresearchontheextractionofrheumemodi’ssaponin
YINNan,SHENQun*
(FoodScienceandNutritionEngineeringColege,ChinaAgriculturalUniversity,
Beijing100083)
Abstract:TosomepreliminaryresearchontheextractionofRheumemodi’ssaponin.Theresultsindicatethat
whenusingperchloricacid-vanilintomeasurethesaponincontentinRheumemodi,thereisanabsorption
peakinthe510nm.Theconcentrationofethanolimpactontheextractiononsaponinpercentagemost.The
bestextractionconditionisusing50%ethanolconcentration,soaking6hoursin35℃,thenextractingin70℃.
Keywords:rheumemodi;saponin;extraction
收稿日期:2006-04-08 *通讯作者
作者简介:尹楠(1982-),女,硕士研究生,研究方向为食品科学。
工艺技术
131
DOI:10.13684/j.cnki.spkj.2006.07.046
No.7.2006
山坡上。经中国科学院植物研究所李安仁鉴定为蓼科
大黄属植物藏边大黄。经50℃烘干,剪成1cm的小段
待用。
无水乙醇,石油醚(沸程30~60℃),氯仿,乙酸已
酯,正丁醇,氢氧化钠,盐酸,二甲苯,异丙醇:北
京化工厂;硅胶板(50mm×100mm,厚度0.2~0.25mm):
青岛海洋化工厂分厂。
1.2 主要设备
SHZ-Ⅲ真空泵:上海亚荣生化仪器厂;AR5120
电子精密天平:奥豪斯公司;HH·SY11-N1电热恒温
水浴锅:北京市长风仪器仪表公司;CS-101-1AB电
热恒温鼓风干燥器:中国重庆银河试验仪器有限公
司;RE-52CS旋转蒸发仪:上海振荣科学仪器有限公
司;TU-1901紫外可见光分光光度计:北京普析通用
仪器有限责任公司。
1.3 实验内容及方法
1.3.1 皂苷提取工艺流程:
乙醇溶液浸泡→冷凝回流提取→旋转蒸发除去
乙醇→分别经石油醚、氯仿、乙酸乙酯、正丁醇萃
取→将正丁醇萃取液旋转蒸干→甲醇定容
1.3.2 皂苷检测方法的建立 目前对于藏边大黄中的
皂苷研究还未见报道,因此对于其检测方法也没有参
考。本文选用香草醛-高氯酸法对皂苷进行检测。提
取得到的皂苷与香草醛高氯酸发生反应产生颜色,皂
苷含量的多少会影响反应颜色的深浅,由此来检测皂
苷的含量。但由于目前还没有藏边大黄中皂苷的标准
品,因此本文以最大吸收峰下的吸光值作为相应值来
衡量皂苷的相对含量,从而对提取工艺进行研究。
取烘干后的藏边大黄10.00g,用100mL80%乙醇
溶液60℃下冷凝回流提取1.5h,每0.5h抽滤得提取液,
然后再加入100mL新鲜溶剂,合并提取液,真空旋转
蒸发浓缩以除去乙醇,再分别用石油醚、氯仿、乙酸
乙酯和正丁醇萃取,将正丁醇萃取液真空旋转蒸干,
用甲醇定容至50mL。将提取得到的皂苷甲醇溶液取
出100μL放入试管中,水浴挥干。向其中加入0.2mL
0.5%的香草醛-冰醋酸溶液,在加入0.8mL高氯酸溶
液,摇匀,60℃水浴加热15min,反应后取出迅速用
冷水冷却,再加入5mL冰醋酸,摇匀后静置。以
100μL无水甲醇作为空白,其它操作同上。10min后
进行200~900nm的全波长扫描,得到最大吸收峰。
1.3.3 皂苷提取工艺的研究 研究乙醇浓度、浸泡温
度、浸泡时间、提取温度对于皂苷提取率的影响。
乙醇浓度对皂苷提取率的影响:取6份藏边大黄,
每份10g,分别用100mL的蒸馏水、40%、50%、
60%、70%、80%的乙醇常温浸泡12h,80℃冷凝回流
提取1.5h,每0.5h取出滤液,添加100mL新鲜溶剂。
提取后将滤液合并,旋转蒸发除去乙醇,再分别用
石油醚、氯仿、乙酸乙酯、正定醇萃取,将正丁醇萃
取液旋转蒸干,用甲醇定容至50mL。取出30μL用香
草醛-高氯酸法测其最大吸收峰下的吸光值。根据吸
光值的大小确定提取的最佳乙醇浓度。
浸泡温度对皂苷提取率的影响:60%乙醇溶
液,1∶10的料液比,分别置于20℃、30℃、40℃、
50℃、60℃和70℃下浸泡12h,80℃冷凝回流提取
1.5h,每0.5h取出滤液,添加100mL新鲜溶剂。其
他操作同上。
浸泡时间对皂苷提取率的影响:60%乙醇溶液,
1∶10的料液比,常温下分别浸泡6h、12h、18h和24h,
其他操作同上。
提取温度对皂苷提取率的影响:60%乙醇溶液,
1∶10的料液比,常温下浸泡12h,分别于60℃、70℃、
80℃和90℃下冷凝回流提取,其他操作同上。
1.3.4 数据处理 以上实验均进行3个重复,皂苷测
定时每次3个平行。得到数据用SASV8.0进行New-
man-Keuls分析,用Origin6.0作图。
2 实验结果与分析
2.1 藏边大黄皂苷的吸收波长的测定
藏边大黄中皂苷的全波长扫描结果见图1。
从图1左侧峰值检出值中可以看到藏边大黄皂苷
有两个明显的吸收峰,其中最大吸收峰为510nm,另
一个吸收峰在401nm处,因此采用510nm下的吸光值
作为衡量皂苷提取率的指标。
2.2 皂苷提取工艺的研究
2.2.1 乙醇浓度对皂苷提取率的影响 取6份藏边大
黄,每份10g,分别用100mL的蒸馏水、40%、50%、
60%、70%、80%的乙醇常温浸泡12h,80℃冷凝回流
提取1.5h。收集滤液旋转蒸发,经石油醚、氯仿、乙
酸已酯和正丁醇萃取后,用甲醇定容,使用香草醛-
图1 皂苷提取液全波长扫描图
工艺技术
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No.7.2006
图2 乙醇浓度对皂苷提取率的影响
高氯酸法测定吸光值。试验结果如图2所示。
从图2可知,乙醇浓度对于皂苷的提取率影响很
大。乙醇浓度低于50%时,皂苷提取率随乙醇浓度的
增加而增加,当乙醇浓度低于50%时,皂苷的提取率
随乙醇浓度的增加而降低,即皂苷的提取率随乙醇
浓度的增加先增加后减少。对数据进行显著性分析,
分析结果表明,数据整体在p<0.05水平上有差异,也
就是说乙醇浓度对皂苷提取率是有影响的。当乙醇
浓度为50%时,皂苷的提取率最高,吸光值达到
0.39,乙醇浓度为0时,皂苷的提取率最低,吸光值
为0.10,仅为最高值的1/4,说明乙醇浓度对于藏边大
黄中皂苷的提取率影响较大。
2.2.2 浸泡温度对皂苷提取率的影响 60%乙醇溶
液,1∶10的料液比,分别置于20℃、30℃、40℃、
50℃、60℃和70℃下浸泡12h,80℃冷凝回流提取
1.5h。其他操作同2.2.1。试验结果如图3所示。
对数据进行显著性分析,分析结果表明数据整
体在p<0.05水平上有差异,说明浸泡温度对皂苷提取
率是有影响的。从图3可知当浸泡温度为35℃时,皂
苷提取率达到最大值,吸光值为0.30,当浸泡温度为
50℃时,皂苷提取率最低,吸光值为0.21,仅为最高
值的1/1.43。说明浸泡温度虽然对皂苷提取率有影
响,但是影响不大。
2.2.3 浸泡时间对皂苷提取率的影响 60%乙醇溶
液,1∶10的料液比,常温下分别浸泡6h、12h、18h和
24h,其他操作同2.2.1。试验结果如图4所示。
对数据进行显著性分析,分析结果表明数据整体
在p<0.05水平上有差异,也就是说浸泡时间对皂苷提
取率有影响。从图4可知随浸泡时间的增加,皂苷的
提取率有所增加,但增幅很小。当浸泡时间为24h时,
吸光值为0.22,当浸泡时间为6h时,吸光值为0.19,
仅为最高值的1/1.16。
2.2.4 提取温度对皂苷提取率的影响 60%乙醇溶
液,1∶10的料液比,常温下浸泡12h,分别于60℃、
70℃、80℃和90℃下冷凝回流提取,其他操作同
2.2.1。试验结果如图5所示。
对数据进行显著性分析,分析结果表明,数据整
体在p<0.05水平上有差异,说明提取温度对皂苷提取
率是有影响的。从图5可以看出,随浸泡时间的增加,
皂苷的提取率也有所增加。当提取温度为70℃时,皂
苷提取率达到最大值,吸光值为0.26,当提取温度达
到70℃以上后,再提高提取温度,吸光值变化不大。
当提取温度为60℃时,皂苷提取率最低,吸光值为
0.18,仅为最高值的1/1.44。说明浸泡时间虽然对皂
苷提取率有影响,但是影响不大。
3 结论
乙醇浓度的变化对于皂苷提取率的影响是最大
的,乙醇浓度为50%时,皂苷提取率较高。浸泡温度
对皂苷提取率有一定的影响,皂苷提取率随浸泡温度
的升高先升高后降低,浸泡温度为35℃时,皂苷提取
率较高。皂苷提取率随浸泡时间的延长而略有升高,
但升高幅度较小,综合能源等方面因素来考虑,选用
浸泡时间为6h即可。皂苷提取率随提取温度的升高先
升高后略有降低,提取温度为70℃时,皂苷提取率较
高。
0.50
0.45
0.40
0.35
0.30
0.25
0.20
0.15
0.10
0.05
-10 0 102030405060708090
乙醇浓度(%)



(5
10
nm
)
图3 浸泡温度对皂苷提取率的影响
0.50
0.45
0.40
0.35
0.30
0.25
0.20
0.15
0.10
0.05
0.00
152025303540455055606570
浸泡温度(℃)



(5
10
nm
)
图4 浸泡时间对皂苷提取率的影响
浸泡时间(h)
0.30
0.20
0.10
0



(5
10
nm
)
6h 12h 18h 24h
60 65 70 75 80 85 90
提取温度(℃)



(5
10
nm
) 0.40
0.30
0.20
0.10
图5 提取温度对皂苷提取率的影响
工艺技术
133
No.7.2006
参考文献:
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木瓜中齐墩果酸和熊果酸
提取工艺的研究
王志芳1,汪芳安1,2,彭光华1,张声华1*
(1.华中农业大学食品科技学院,武汉 430070;2.武汉工业学院,武汉 430023)
摘要:用正交试验法对木瓜中的齐墩果酸和熊果酸的提取工艺进行研究。在单因素实验基础上,采用
L9(34)正交实验考察提取时间、提取温度、料液比、原料粒度对提取得率影响,用高效液相色谱法测定
齐墩果酸和熊果酸含量,确定最优提取工艺。齐墩果酸最佳提取参数为95%的乙醇、温度为60℃、
时间3h、料液比为1∶8、原料粒度40目、提取2次。熊果酸最佳提取参数为95%的乙醇、温度为60℃、
时间3h、料液比为1∶6、原料粒度60目、提取2次。该工艺为齐墩果酸和熊果酸的工业化提取提供理
论依据。
关键词:木瓜;齐墩果酸;熊果酸;提取工艺;高效液相色谱法
中图分类号:TS201.2 文献标识码:A 文章编号:1005-9989(2006)07-0134-04
Studyontechnologyofextractingoleanolicacidand
ursolicacidfromChineseQuince
WANGZhi-fang1,WANGFang-an1,2,PENGGuang-hua1,ZHANGSheng-hua1*
收稿日期:2006-04-17 *通讯作者
基金项目:成果转化项目(EK010029)。
作者简介:王志芳(1979-),女,硕士研究生。
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