全 文 ：H P L c法测定北豆根中蝙蝠葛碱和蝙蝠葛苏林碱的含量
刘 威 张振秋 洪 涛 刘丽 霞
(辽宁中医学院药学院 , 沈阳 1 0 3 3 )
摘要 采用高效液相色谱法同时测定北豆根中蝙蝠葛碱和蝙蝠葛苏林碱的含量 。 色谱条件为 iD am on isl C l 。柱
( 5林m , 1 50 x 4 . 6 m m ) , 以乙睛一水 一三乙胺 ( 4 5 : 5 5 : 0 . 0 5 ) 为流动相 : 检测波长为 2 8 4 n m 。 平均加样回收率分别为
9
.
40 %
,
10 9 % ; sR D 分别为 2 . 2% , 2 . 7 % 。 本方法精密度高 , 分离度良好 , 可用于同时测定北豆根中蝙蝠葛碱和
蝙蝠葛苏林碱的含量 。
关键词 高效液相色谱法 ;北豆根 ;蝙蝠葛碱 ;蝙蝠葛苏林碱
北豆根为防己科植物蝙蝠葛 Me n帅 e mr o m da u -
ir cu m D C 的根茎 , 别名有蝙蝠葛根 , 狗葡萄根 , 磨石
豆根 , 山豆秧根 ,苦豆根 ( 内蒙古 ) 。 北豆根一名始
见于《中国药典》 , 有北方用 的山豆根之意 ,而与南
方所产的广豆根相区别 。 北豆根味苦 ,性寒 , 人心肺
经 ,清热解毒 ,祛风止痛 ,利水消肿 。 主治咽喉肿毒 ,
口腔炎 , 肺炎 , 气管炎 , 肠炎 , 痢疾 , 蛇虫咬伤等 。 北
豆根中蝙蝠葛碱和蝙蝠葛苏林碱为其主成分 , 本文
采用高效液相色谱法同时测定此两成分的含量 , 为
控制北豆根药材的质量提供科学的依据 。
1 仪器与试药
蝙蝠葛碱对照品 ( 726 一0 4 ) 、蝙蝠葛苏林碱对
照品 ( 1 10 8 5 3一 0 2 01 ) , D ELT A 天然有机化合物信
息中心提供 ;北豆根药材购自各大药店 ,经辽宁中医
学院李峰教授鉴定为正品 ; U V礴 802 型紫外可见分
光光度计 ; LC 一10 A T 液相色谱仪 ; A S3 12 OA 超声波清
洗器 ; A 2R 14 0 电子分析天平 ; 甲醇为色谱纯 , 水为
重蒸馏水 ;其它试剂均为分析纯 。
2 实验条件
2
.
1 色谱条件 的 选择 色谱柱 : iD a m on isl C ls
( 5 卜m , 1 5 0 x 4 . 6 m m ) 柱 ; 流动相 : 乙睛一水一三 乙胺
( 4 5 : 5 5 : 0
.
0 5 ) ; 检测波长 : 2 84 n m ; 柱温 : 30 ℃ ; 流
量 : 1 m F m in ;理论塔板数按蝙蝠葛碱 、 蝙蝠葛苏林
碱对照品峰计算均不少于 3 00 。
2
.
2 提取条件的选择 供试品采用不同时间甲醇
超声提取和氯仿索氏提取 ,索氏提取含量较高 ,故采
用索氏提取 。
2
.
3 测 定波长的选择 用 U V并 802 检测器全波长
扫描测定 , 蝙蝠葛碱和蝙蝠葛苏林碱在波长 入 =
2 8 4 n m 有较强吸收 ,所以测定波长选为 入二 2 8 4 n m 。
2
.
4 对照品溶液制备 精密称取蝙蝠葛碱对照品
4
.
86 m g
, 蝙蝠葛苏林碱对照品 3 . 87 m g ,分别置 25
m l 容量瓶中 ,加甲醇稀释至刻度 , 摇匀 ,作为对照品
溶液 。
中药材第 28 卷第 9 期 20 5 年 9 月
2
.
5 线性关系考察 精密吸取蝙蝠葛对照品溶液
2
,
4
,
6
,
8
,
or
,
12
,
14 闪进样 ,按上述色谱条件测定峰
面积 ,以对照品进样量 X 为横坐标 、 峰面积值 Y 为
纵坐 标 , 绘 制 标 准 曲 线 , 回 归 方 程 为 : Y =
6 2 2 16 5
.
3 9 2 3 X + 2 0
.
4 13 6 8 3 3
, r 二 0
.
9 9 9 7 ;结果表明
蝙蝠葛碱在 0 林g 一 2 . 7 2 16 林g 范围内 ,具良好的线性
关系 , 同法精密吸取蝙蝠葛苏林碱对照品溶液 2 . 5 ,
5
,
7
·
5
,
10
,
12
.
5
,
15 林l 进样 , 回 归方程 为 : Y 二
6 9 2 6 8 8
.
9 2 7 8 X + 2 0
.
0 34 8 6 8 7 9
, r = 0
.
9 9 9 6
, 结果表明
蝙蝠葛苏林碱在 0 林g 一 2 . 32 卜g 范围内 , 具有良好
的线性关系 。
2
.
6 供试品溶液制备 取北豆根药材 1 9 , 精密称
定 ,置索氏提取器中 , 加氯仿 30 间 及浓氨水 l ml ,
浸泡过夜 ,再加氯仿 50 inl ,水浴回流 3 h , 回收溶剂 ,
残留液转移至蒸发皿中 , 蒸干 , 加甲醇转移至 25 ml
容量瓶中 , 加甲醇至刻度 , 摇匀即可 。 经 0 . 45 林 m
微孔滤膜过滤 ,作为供试品溶液 。
方法学考察
1 精密度试验 精密吸取 8 号溶液 20 闪 , 重复
3
进样 5 次 ,测得峰面积 ,蝙蝠葛碱积分值的相对标准
偏差 0 . 90 % ,蝙蝠葛苏林碱峰面积积分值的相对标
准偏差为 1 . 90 % , 均小 于 3% , 表明仪器精密度良
好 。
3
.
2 稳定性试验 精密吸取 6 号供试品溶液 , 在
o
、
2
、
4
、
s
、
12 h 各进样 10 卜l , 测定峰面积 , 蝙蝠葛碱
积分值的相对标准偏差为 2 . 3% , 蝙蝠葛苏林碱积
分值的相对标准偏差为 1 . 3% , 均小于 3% ,说明样
品在 12 h 内稳定 。
3
.
3 重复性试验 精密称取 6 号供试品 5 份 , 每
份约 1 . 0 9 , 照供试品溶液制备方法制备 , 每次进样
5 闪 ,测得蝙蝠葛碱 , 蝙蝠葛苏林碱含量 ,结果蝙蝠
葛碱 , 蝙蝠葛苏林碱含量相对标准偏差均小于 3% ,
表明方法重复性较好 。
3
.
4 加样回收率 取已知含量的 1 号样品 (蝙蝠
·
7 83
·
DOI : 10. 13863 /j . i ssn1001 -4454. 2005. 09. 019
葛碱含量: 0. 70 1 95,蝙蝠葛苏林碱 0 . 8205 % ) ,取各
约 0 . 1 9 ,精密称定 ,精密加人蝙蝠葛碱对照品 4 ml
(相当于 。 . 78 m g ) 、 蝙蝠葛苏林碱 5 m l( 相 当于
0
.
7 4 m g )
,照供试品溶液制备方法制备 ,求得平均
回收率分别为 98 . 8% 、 101 . 2% ;相对标准偏差 RSD
分别为 2 . 1% 、 2 . 2% 。
4 样品的测定
单体碱的含量测定 :精密吸取供试品溶液 5 闪
进样 ,注人液相色谱仪 ,按上述色谱条件分别测定蝙
蝠葛碱和蝙蝠葛苏林碱的含量 ,结果见表 l 及图 1 。
表 , 北豆根中总生物碱与蝙蝠葛
碱和蝙蝠葛苏林碱的含 t 测定
样品号 总生物碱含量
( m岁 g )
蝙蝠葛碱
( m岁 g )
图 1 北豆根生药 (吉林 )的 H甲 L C 图谱
t R 14
.
3 2峰为蝙蝠葛苏林碱 , t R 19 . 698 峰为蝙蝠葛碱
总生物碱的含量测定 :精密吸取供试品溶液 10
inl 置蒸发皿中 , 挥干甲醇 , 至烘箱 105 ℃ 30 m in , 除
去氨 ,无水乙醇转移至 l o iln 锥形瓶中。 加 0 . 01
m o F L 硫酸 10 iln ,摇匀 , 加 2 滴甲基红一澳甲酚绿指
示剂 ,用 0 . 0 2 m o F L 氢氧化钠返滴 ,至颜色由橙红
变黄 。 算出消耗的硫酸 ,每 1 iln o . ol mo F L 的硫酸
相当于 6 . 24 8 m g 的蝙蝠葛碱 , 算出总生物碱的含
量 ,结果见表 1 。
5 讨论
5
.
1 流动相 p H 值对分离的影响较大 , pH < 4 时 ,
蝙蝠葛碱与蝙蝠葛苏林碱以离子状态分离 , 也能分
开 ,但蝙蝠葛碱的峰形不好 , 在 p H 二 8 时两种生物
碱均以游离状态存在 , 蝙蝠葛碱分离较好 ,故选择乙
睛 ,水一三乙胺 ( 45 : 5 : 0 . 05 )为流动相 。
5
.
2 不同产地或商品地的北豆根蝙蝠葛碱与蝙蝠
葛苏林碱含量差别较大 , 即使同一省内的药材 ,含量
差异也很大 ,故控制北豆根药材质量 ,不能只控制单
体碱含量 ,因其疗效通常与总生物碱有关 ,故对其总
生物碱也应进行控制。
( 20 5
一以 一 0 5 收稿 )
或地产地品商
l 湖北 19 . 4 1 8 . 2 1 7 . 02
2 锦州 1 1 . 60 1 1 . 60 4 . 0()
3 安徽毫州 14 . 5 2 4 . 46 7 , 55
4 石家庄 16 . 06 2 . 2 1 10 . 62
5 广州 14 . 66 5 . 5 8 5 . 1 6
6 大连 14 . 5 5 1 1. 0 3 3 . 08
7 山西 14 . 47 9 . 62 4 . 88
8 山东 10 . 04 9 . 13 3 . 38
9 武汉 17 . 4 5 7 . 8 8 5 . 4 6
10 北京 20 . 07 1 6 . 53 2 . 3 5
1 1 郑州 13 . 0 1 9 . 09 4 . 35
12 河北 14 . 4 2 5 . 58 4 . 5 6
13 吉林 14 . 4 8 8 . 20 5 . 6 3
14 内蒙古 14 . 53 8 . 4 7 4 . 4 7
15 抚顺 15 . 57 8 . 2 6 2 . 86
虎杖药材中葱醒衍生物及其昔类成分的测定
梁广华 ’ 张建浩 2
( 1
. 广州市口岸药品检验所 ,广州 51 01 6 ;0 2 . 广东省药品审评认证 中心 ,广州 5 10 0 80)
摘要 目的 : 建立虎杖药材中芦荟大黄素 ,大黄酸 ,大黄素和大黄素甲醚含量测定方法 。 方法 :采用高效液相
色谱方法 , 以甲醇一 1% 高氯酸水溶液 ( 8:5 15) 为流动相 , 检测波长 : 2 20 n m 。 结果 :操作方便 ,结果准确 ,可供本品质
量控制。
关键词 虎杖 ;芦荟大黄素 ;大黄酸 ;大黄素 ;大黄素甲醚
虎杖为寥科植物虎杖 oP gly o n um c呷流ut m
iS he
.
et z cu 。 的干燥根茎和根 , 具有清热解毒 , 祛风
利湿 , 利尿通淋 ,祛痰止咳 ,通经等功效 。 主产于江
·
784
·
苏 、 浙江 、江西 、湖北 、湖南等地 。 中国药典 20 5 年
版一部虎杖项下采用 H PL C 法测定其大黄素与虎杖
昔含量 。 文献大部分只对其中白黎芦醇昔和大黄素
中药材第 28 卷第 9 期 20 5 年 9 月