全 文 ：RP-HPLC法测定地不容药材中轮环藤碱的含量
★　段建华 　(广州金域医学检验中心有限公司　广州 510330)
★　胡子帆　欧阳辉　杨世林　(中药固体制剂制造技术国家工程研究中心　南昌 330006)
摘要:目的:建立高效液相色谱法测定地不容药材中轮环藤碱的含量方法。方法:采用反相高效液相色谱(RP-HPLC)测定地
不容药材中轮环藤碱的含量 ,色谱柱:Hypersil C18(5 μm , 250 mm×4.6 mm);甲醇-水-三乙胺(77∶23∶0.02)为流动相;流速为
1.0 m L·min-1;紫外检测波长为 282 nm;柱温为 25 ℃。结果:该法可测定地不容药材中轮环藤碱的含量 ,轮环藤碱在 2.05～
4.1 μg 的范围内与蜂面积呈良好的线性关系 , 平均回收率为 98.84%, RSD =0.38 %(n =6)。结论:该方法简便 、准确 , 可作
为地不容药材中轮环藤碱的含量测定方法。
关键词:地不容;轮环藤碱;高效液相色谱法;含量测定
中图分类号:R 282.73　　文献标识码:B
　　地不容为防己科植物地不容 S tephania
delavayi Diels的块根 ,产于我国云南东部 、中部和
西部 ,四川西部和南部等地 。本种块根是云南著名
的传统中草药 ,味苦而辛 ,性凉 ,有小毒 ,具有清热解
毒 、消痰 、镇静 、理气 、止痛等功能。临床主要用于痈
疽肿痛 、喉闭 、疟疾 、胃痛等疾病[ 1] 。其化学成分主
要含轮环藤碱 、千金藤素 、西法安生 、左旋箭毒碱 、异
紫堇定碱 、木兰花碱 、轮环藤酚碱等[ 2] 。为更好地
控制地不容药材质量 ,本文采用 HPLC 法对地不容
药材中轮环藤碱含量进行测定 。
1　仪器与试药
HP1100型高效液相色谱仪 , DAD 型检测器 ,
Mettler分析天平(梅特勒-托利多)。轮环藤碱对照
品自制(经峰面积归一法测定 ,含量>98%)。甲醇
为色谱纯 ,水为蒸馏水(经M ILLIPORE纯化仪),其
余试剂为分析纯 。地不容药材由安徽和堂药业有限
公司提供。2　方法与结果
2.1　色谱条件　色谱柱:Hypersil C18(5 μm , 250
mm×4.6 mm);流动相:甲醇-水-三乙胺(77∶23∶0.
02);流速为 1.0 mL·min-1;紫外检测波长为 282
nm;柱温为 25 ℃;进样量:10μL。
2.2　对照品溶液的制备　取轮环藤碱对照品约 10
mg ,精密称定 ,置 50 mL容量瓶中 ,加甲醇稀释至刻
度 ,摇匀 ,备用。
2.3　线性关系考察 　取上述对照品溶液 1 、2 、5 、
10 、15 、20 μL ,分别注入色谱仪 ,测定其峰面积 。以
轮环藤碱对照品峰面积积分值为纵坐标(A),进样
量W(μg)为横坐标 ,进行线性回归 ,回归方程(n =
6)为 A=1857.2W-57.667(r =0.999 8),表明轮
环藤碱在 0.205 ～ 4.10 μg 的范围内与蜂面积呈良
好的线性关系 。
2.4　供试品溶液的制备　取本品粗粉约 1 g ,精密
称定 ,用乙醇 25 mL 回流 1小时 ,放冷 ,滤过 ,滤液
减压浓缩至干 ,残渣用 5%盐酸溶液 25 mL溶解 ,滤
过 ,滤液加 5%氢氧化钠调至 pH =10 ,并用三氯甲
烷萃取 4次 ,每次 10 mL ,合并三氯甲烷萃取液减压
浓缩至干 ,用甲醇定容至 50 mL ,摇匀 ,即得 。
2.5　精密度实验　取地不容药材 ,按“2.4”项下同
法操作制备一份供试品溶液 ,取该溶液 ,重复进样 5
次 ,每次进样 10 μL ,测定轮环藤碱峰面积积分值 ,
得其 RSD =0.85%(n =5),结果表明本仪器精密
度好 。
2.6　重复性试验　取同一批样品(批号:20060515)
5份 ,分别按供试品溶液制备项下方法操作 ,制备供
试品溶液 5份 ,依次进样 ,每次进样 10 μL ,测定轮
环藤碱峰面积积分值 ,得其 RSD =1.21%(n=5),
结果表明本方法重现性好。
2.7　稳定性试验　取重现性项下一份样品 ,分别于
0 、2 、4 、8 、12 、18小时后进样 ,进样量 10 μL ,测定轮
环藤碱峰面积积分值 ,得其 RSD =1.12%(n=6),
表明供试品溶液在 18小时内基本稳定 。
2.8　加样回收试验　采用加样回收率测定法 ,精密
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江西中医学 院学报 2 0 0 7 年 6 月第 1 9 卷第 3期
JOURNAL OF JIANGXI UN IVERSITY OF TCM 2007 Vol.19 No.3
作者简介:段建华 ,男 , 主管中药师 , 执业中药师 , 主要从事药品质量管理工作;Tel:13711276202;Email:djh-002@163.
com.
　
○中药研究○
升降散对急性肺损伤大鼠肺细支气管粘膜上皮细胞
ICAM-1表达的影响＊

★　魏凯峰　常加松　张梅勇　张庆宏　潘云　(南京中医药大学　南京 210029)
摘要:目的:探讨升降散对急性肺损伤模型大鼠细气管粘膜上皮 ICAM-1 表达的影响。方法:40 只雄性 SD 大鼠 , 随机分为正
常组 、模型组 、升降散大剂量组 、中剂量组及小剂量组。给药 6 天后 ,舌下静脉注射 LPS 复制急性肺损伤模型 , 取肺组织切片 ,
免疫组化检测。采集图像 , 分析细支气管粘膜上皮细胞胞质的平均灰度。结果:药物治疗组与模型组比较 ,能明显抑制肺细
气管粘膜上皮细胞胞质 ICAM-1的表达 ,有显著性差异。结论:升降散可通过抑制肺细气管粘膜上皮细胞胞质 ICAM-1 的表
达 , 抑制炎症反应对肺组织造成的急性损伤 , 对急性肺损伤起到防治作用。
关键词:升降散;急性肺损伤;肺细支气管粘膜上皮细胞;ICAM-1
中图分类号:R 285.5　　文献标识码:A
Effect of Shengjiang Powder on Expression of ICAM-1 of Lung Bronchiolar Epithelium Mucosae in Acute
Lung Injury Rats
WEI Kai-feng ,CHANG Jia-song , ZHANG Mei-yong , ZHANG Qing-hong , PAN Yun
Nanjing University of Traditional Chinese Medicine , Nanjing210029
Abstract:Objective:To investig ate the effect of Shengjiang Powder on expression of ICAM-1 of lung bronchio lar epithelium muco sae
称取已知含量的同一批样品 6份 ,分别加入含量的
80%、100%、120%的轮环藤碱对照品 ,按供试品溶
液制备方法处理 ,进行测定 ,结果平均加样回收率为
98.84%, RSD =0.38%。
2.9 样品测定 　取三批地不容药材(批号:
20060513 、20060514 、20060515),按供试品溶液制备
项下制备供试品溶液 ,进行测定 ,记录色谱峰面积 ,
以外标法计算 ,结果见表 1。
表 1　地不容药材中轮环藤碱的平均含量(n=3)
批号 轮环藤碱含量/mg·g -1 RSD(%)
20060513 2.34 0.95
20060514 2.32 1.43
20060515 2.28 1.72
3　讨论
3.1　流动相的选择　由于轮环藤碱具有一定的碱
性 ,在流动相中加入一定量的三乙胺 ,很好地改善了
峰形 ,轮环藤碱在药材样品中和其他杂质峰达到良
好的基线分离 。
3.2　提取方法的选择 　总生物碱的提取方法文
献[ 3]多采用在提取溶剂中加入一定量的酸回流提
取或者用乙醇回流提取以后再加酸把生物碱提取出
来 ,本文采用乙醇回流提取 ,并加入 5%的盐酸将地
不容中的生物碱提取出来 ,较好地达到了提取效果 ,
提取的酸水液加入 5%NaOH 调pH 至 10 ,用三氯甲
烷多次萃取 ,生物碱转移比较完全 。薄层显示轮环
藤碱提取完全 ,该方法重复性较好 。
参考文献
[ 1] 江苏新医学院《中药大辞典》编委会.中药大辞典(上册)[ M ] .上
海:上海科学技术出版社 , 2002:809
[ 2] 杨云 ,张晶 ,陈玉婷.天然药物化学成分提取分离手册(第二版)
[ M] .北京:中国中医药出版社 , 2003:246
[ 3] 安银铃 ,章欣 ,胡旺云.百解藤的化学成分研究[ J] .天然产物研究
与开发 , 1998 , 11(1):27
(收稿日期:2007-04-21)
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江西中医学院 学报 2 0 0 7 年 6 月第 1 9 卷第 3 期
JOURN AL OF JIANGXI UNIVERSITY OF TCM2007 Vo l.19 No.3
基金项目:南京中医药大学校自然科学基金(No.05XZK01)
　
○实验研究○