全 文 ：2007 年 8 月第 14 卷第 8期 中国中医药信息杂志 ·47·
HPLC 法测定辐花中獐牙菜苦苷的含量
张秀桥 1,黄凤娇 1,陈家春 1,2,刘焱文 1
(1.湖北中医学院,湖北 武汉 430061；2.华中科技大学同济医学院,湖北 武汉 430030)
摘要：目的 建立辐花中獐牙菜苦苷含量测定的方法。方法 用高效液相色谱法,色谱柱为 Alltimal C18(5 µm,
250 mm×4.6 mm),流动相为甲醇-水(水中含 0.05%磷酸),梯度洗脱,流速 1 mL/min,检测波长234 nm,柱温 30 ℃。结果
獐牙菜苦苷在 3.10～30.98 µg 范围内线性关系良好,相关系数为 0.999 1；平均回收率为 98.0%,RSD＝2.66%(n＝6)。
结论 该方法操作简便,分离度好,为建立其质量标准提供了实验依据。
关键词：辐花；高效液相色谱法；獐牙菜苦苷；含量测定
中图分类号：R284.1 文献标识码：A 文章编号：1005-5304(2007)08-0047-02
Determination of Swertiamarin in Lomatogoniopsis alpina by HPLC ZHANG Xiu-qiao1, HUANG
Feng-jiao1, CHEN Jia-chun1,2, et al (1.Hubei College of TCM, Wuhan 430061, China；2.Huazhong University of Science and
Technology, Wuhan 430030, China)
Abstract ： Objective To establish a method for content determination of swertiamarin in
Lomatogoniopsis alpina. Methods HPLC method for determination was used. Chromatographic column：
Alltimal C18 (250 mm×4.6 mm, 5 µm). Mobile phase： methanol-water (including 0.05% H3PO4), and
gradient elution. Flow rate：1 mL/min. Wavelength：234 nm. Column temperture：30 ℃. Results The
calibration curve of swertiamarin was in good linearity over the range of 3.10～30.98 (r =0.999 1). The
average recoveries were 98.0%, with RSD＝2.66% (n＝6). Conclusion It is a simple and sensitive method
in controlling the quality of Lomatogoniopsis alpina.
Key words：Lomatogoniopsis alpina；HPLC；swertiamarin；determination
辐花来源于龙胆科辐花属植物 Lomatogoniopsis alpina
T.N.Ho et S.W.Liu,主要产于西藏东北部、青海南部及四川等
地,生于云杉林缘、阴坡草甸及灌丛草甸中。辐花是国务院于
1999 年 8 月 4 日批准的《国家重点保护野生植物名录(第一
批)》保护级别为Ⅱ级的品种之一。为了变野生为家种,为建立
其质量标准提供实验依据,本试验用 HPLC 法测定了辐花中獐
牙菜苦苷(swertiamarin)的含量。
1 仪器与试药
美国 Agilent1100 高效液相色谱仪(G1311A 泵、柱温箱、
G1316A 紫外检测器、Shemstation 色谱工作站),Sartorius
BP211D 分析天平。
药材采自四川省阿坝州金川县俄热,经华中科技大学同济
医学院陈家春教授鉴定为龙胆科辐花属植物Lomatogoniopsis
alpina T.N.Ho et S.W.Liu。
对照品獐牙菜苦苷自提,HPLC 归一法测定纯度>98%。甲醇
为色谱纯,水为重蒸水,均经 0.45 µm 滤膜滤过。
2 方法和结果
2.1 色谱条件及系统适应性试验
色谱柱为 Alltimal C18 (250 mm×4.6 mm,5 µm)。流动相
为甲醇-水(水中含 0.05%磷酸),梯度洗脱,0～25 min,甲醇由
20%增至 50%；25～35 min,甲醇由 50%增至 60%；流速 1 mL/min。
检测波长 234 nm,柱温 30 ℃。理论塔板数均>104,对称因子

基金项目：国家自然科学基金(30271590)
通讯作者：陈家春
0.95～1.05。色谱图见图 1。





A B
注：A.对照品；B.辐花样品
图 1 辐花的 HPLC 图谱
2.2 供试品溶液的制备
2.2.1 对照品溶液的制备 分别精密称取对照品獐牙菜苦
苷一定量,混合后用甲醇超声溶解并定容,制成浓度分别为
1.549 mg/mL 的溶液,经 0.45 µm 滤膜滤过,滤液作为对照品溶
液。
2.2.2 样品溶液的制备 取辐花全草 0.5 kg,置 45 ℃烘箱干
燥至恒重,粉碎,过 80 目筛,混合均匀后取约 0.25 g,精密称
定。用约 8 mL 甲醇浸泡过夜,超声提取 2 次,每次 30 min,滤
过。合并滤液,滤液水浴蒸干后用甲醇定容至 10 mL,经 0.45 µm
滤膜滤过,滤液作为样品溶液。
2.3 方法学考察
2.3.1 线性关系考察试验 取上述对照品溶液,分别进样 2、
4、8、10、12、16、18、20 µL(n＝2),以进样量为横坐标、
峰面积为纵坐标进行回归计算,獐牙菜苦苷回归方程为：Y＝
594.29X＋127.34,r＝0.999 1,进样量在3.10～30.98 µg范围
内线性关系良好。
·48· Chinese Journal of Information on TCM Aug.2007 Vol.14 No.8
HPLC 法测定参桂调经丸中丹皮酚的含量
王永健,魏献春,唐 鹰
(佛山冯了性药业有限公司,广东 佛山 528000)
摘要：目的 建立 HPLC 法测定参桂调经丸中丹皮酚的含量。方法 采用 Agilent Hypersil-ODS-C18分析柱(250 mm×
4.0 mm,5 µm),以甲醇-水(70∶30)为流动相；检测波长为 274 nm,流速为 1.0 mL/min。结果 线性范围为 0.052～
0.84 µg(r＝0.999 9),平均回收率为99.94%(RSD＝1.63%)。结论 本法简便、灵敏、准确,可用于该制剂的质量控制。
关键词：参桂调经丸；丹皮酚；高效液相色谱法
中图分类号：R284.1 文献标识码：A 文章编号：1005-5304(2007)08-0048-02
Content Determination of Paeonol in Shengui Tiaojing Pill by HPLC WANG Yong-jian, WEI Xian-chun,
TANG Ying (Foshan Fengliaoxing Pharmaceutical Co.,Ltd., Foshan 528000, China)
Abstract：Objective To establish a method of HPLC for determining the Paeonol in Shengui Tiaojing Pill.
Method Agilent Hypersil-ODS-C18 (250 mm×4.0 mm, 5 µm) was used, the mobile phase consisted of
methanol-H2O (70∶30). The flow rate was 1.0 mL/min. The detecting wave length was at 274 nm. Results
The method was linear at the range of 0.052～0.84 µg for Paeonol (r =0.999 9). The average recovery was
99.94%. Conclusion The method is simple, sensitive, accurate and can be applied to the quality control of
Paeonol in Shengui Tiaojing Pill.
Key words：Shengui Tiaojing Pill；Paeonol；HPLC
参桂调经丸是由党参(炙)、川芎(制)、牡丹皮等多味中药
制成的中药制剂,具有温经活血之功效,临床用于月经不调、经
前后虚冷腹痛、月经过多。本品标准收载于《中华人民共和国
卫生部药品标准》中药成方制剂第十四册[1],原标准中无含量
测定项。本品处方中牡丹皮具清热凉血、活血化瘀之功,为处
方之主药,其主要成分为丹皮酚。笔者参考文献[2]建立了
HPLC 测定其中丹皮酚含量的方法。通过方法学研究,证明本法
准确、灵敏、重现性好、专属性强,可用于本品的质量控制。

2.3.2 精密度试验 取对照品溶液,重复进样5次,每次10 µL,
计算峰面积,RSD＝0.93%,结果表明精密度良好。
2.3.3 重复性试验 取同一批样品5份,按“2.2.2”项下方法
制备样品溶液并测定含量,RSD＝0.48%,结果表明重复性良好。
2.3.4 稳定性试验 取同一样品溶液,在 1 d 内分别于 0、2、
4、8、12 h 进样,计算峰面积,RSD＝0.45%,结果表明样品溶液
在 12 h 内稳定。
2.3.5 加样回收试验 取已知含量的同一批贵州獐牙菜全草
6份,精密称定,加入獐牙菜苦苷标准品适量,按“2.2.2”项下
制备,计算回收率,结果见表 1。
表 1 回收率试验结果(n =6)
本底量(mg) 加样量(mg) 测得量(mg) 回收率(%) 平均回收率(%) RSD(%)
7.924 5.31 13.066 96.84
7.995 5.19 13.316 102.52
7.957 5.22 13.077 98.08 99.00 2.66
8.078 5.37 13.565 102.18
8.007 5.33 13.185 97.15
8.060 5.26 13.174 97.22
2.4 样品测定
取不同产地的样品 3批,按“2.2.2”项下方法制备样品溶
液,以上述色谱条件测定,进样 20 µL,测定峰面积,计算其含量,
结果见表 2。
表 2 样品含量测定结果(n =3)
序号 样品(g) 峰面积 獐牙菜苦苷含量(mg/g)
1 0.251 56 10 805.2 35.71
2 0.252 23 11 023.4 36.34
3 0.251 89 10 909.2 36.01
3 讨论
试验考察了甲醇回流提取和超声提取等条件下的提取率,
结果提示,回流提取时獐牙菜苦苷成分部分被破坏,故采用超
声提取。超声提取时考察了药材粉碎度以及是否浸泡过夜的提
取率,结果提示,过 80 目筛后用甲醇浸泡过夜,再超声提取 2
次,每次 30 min,可提取完全。参考文献[1-2]考察了以下色谱
系统：甲醇-水、甲醇-水-磷酸、乙腈-水、乙腈-水-磷酸,所
得到的色谱图以甲醇-水(水中含 0.05%磷酸)梯度洗脱为最
佳。结果獐牙菜苦苷在 234 nm 处有最大吸收。
样品测定结果表明,四川省阿坝州金川县俄热产的辐花中
獐牙菜苦苷含量较高,具一定开发前景。
参考文献：
[1] 郑一敏,胥秀英,傅善权.弥勒獐牙菜药材不同部位獐牙菜苦苷与齐墩
果酸的含量测定[J].中国中药杂志,2004,29(7)：709.
[2] 李福双,徐康平,谭健兵,等.高效液相色谱法测定川东獐牙菜中獐牙菜
苦苷和去甲当药苷的含量[J].中南药学,2003,1(3)：141.
(收稿日期：2007-01-23,编辑：陈静)