全 文 ：道地黄芩与甘肃产黄芩对急性肝损伤
小鼠保肝作用的比较研究
耿广琴，杨志军* ，杨秀娟，李晶
(甘肃中医学院，甘肃 兰州 730000)
摘 要:目的:探讨甘肃产黄芩与河北承德产道地黄芩保肝作用的差异。方法:腹腔注射 0． 1% CCl4建
立小鼠急性肝损伤模型，检测肝组织 SOD活性、MDA含量，观察肝组织结构损伤。结果:甘肃产黄芩与
道地黄芩高剂量组均能增强 CCl4致肝损伤小鼠肝组织 SOD活力，降低 MDA含量(P ＜ 0． 01)，明显改善
肝组织病变。结论:甘肃产黄芩与道地黄芩均有显著的保肝作用，同剂量道地黄芩保肝功效略优于甘肃
陇西产黄芩，但二者之间差异不显著。
关键词:黄芩;肝损伤模型;SOD活性;MDA含量;组织结构变化;比较研究
中图分类号:Ｒ285． 5 文献标识码:A 文章编号:1002 － 2392(2015)03 － 0042 － 03
收稿日期:2014 － 07 － 16 修回日期:2014 － 08 － 15
基金项目:2012 甘肃省高校基本科研业务费项目(BH2012 － 020)
作者简介:耿广琴(1971 －)，女，讲师，主要从事生物化学的教学及相关
研究。
* 通讯作者:杨志军(1971 －)，女，副教授。研究方向:中药学药效基础
研究。
黄芩为常用中药，为唇形科植物黄芩(Scutellaria
baicalensis Georgi)的干燥根。过去，黄芩主要为野生
来源，近年来随着黄芩需求量的不断增加及野生资源
锐减，栽培黄芩成为我国药用黄芩的主要来源［1 － 2］。
目前，甘肃已成为全国重要的黄芩栽培地之一。有研
究表明，不同产地，由于气候、土壤、栽培条件等因素的
差异，黄芩中主要活性成分的含量不同，导致其药效存
在差异［3］。河北承德地区为黄芩传统道地产区，俗称
“热河黄芩”［4］。为科学评价甘肃产黄芩的品质，本实
验通过研究黄芩水煎液对 CCl4致肝损伤模型小鼠肝
细胞 SOD 活性、MDA 含量及肝组织结构的影响，探讨
甘肃产黄芩与河北承德产黄芩保肝作用的差异。
1 实验材料
1． 1 实验动物
2 月龄昆明种小鼠 108 只(SPF 级)，雌雄各半，体
质量(20 ± 2)g，购自兰州大学实验动物中心。合格证
号:SCXK(甘)2009 － 0004。
1． 2 实验药物
道地黄芩，两年生，11 月初采自河北承德;甘肃产
黄芩，两年生，11 月初采自甘肃陇西，经甘肃中医学院
药学院杜弢教授鉴定二者均为唇形科植物黄芩(Scute-
llaria baicalensis Georgi)的干燥根。取黄芩适量，第 1
次加 10 倍量水煎煮 1h，第 2 次加 8 倍量水煎煮 1h，合
并 2 次提取液，过滤后，水浴浓缩成含生药浓度为 1g /
mL的水煎剂。高压灭菌，置 4℃冰箱备用。
1． 3 试剂
四氯化碳(CCl4，分析纯，上海凌峰化学试剂有限
公司，批号 120728)，使用时用橄榄油配制成 0． 1%的
橄榄油溶液;联苯双酯滴丸(北京协和药厂，批号
12090204)，使用时用蒸馏水溶解稀释至所需浓度);
考马斯亮蓝测定试剂盒(批号 20120816)，丙二醛
(MDA)试剂盒(批号 20120726)，超氧化物歧化酶
(SOD)试剂盒(批号 20120726)均购自南京建成生物
工程研究所;其他试剂均为国产分析纯。
1． 4 仪器
BS224S型电子天平(赛多利斯科学仪器有限公
司);HH － 4 数显恒温水浴锅(郑州杜甫仪器厂) ;
XYJ80 － 20 型离心机(金坛市恒丰仪器厂);XW － 80A
型旋涡混匀器(上海精科实业有限公司);VIS － 723N
型紫外可见分光光度计(北京瑞利分析仪器有限公
司);CX31 － 12C04 光学显微镜(日本奥林巴斯公司)。
2 实验方法
2． 1 动物分组及肝损伤模型建立
将 108 只小鼠，随机分为 9 组，每组 12 只，雌雄各
半，分别为正常对照组、模型组、联苯双酯对照组、道地
黄芩低、中、高剂量组，甘肃陇西产黄芩低、中、高剂量
组。适应性喂养 3 天，采用灌胃给药。正常对照组、模
型组每日每只给予 0． 2mL /10g 的生理盐水，联苯双酯
对照组每日每只给予联苯双酯 0． 15g /kg，黄芩各组每
日每只按相当于生药量 1． 5、3、6g /kg 三个剂量给小鼠
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灌服黄芩水煎液，连续灌胃 7 天。末次给药 2h 后，除
正常对照组外，其余各组均腹腔注射 0． 1% CCl4橄榄
油溶液 0． 1mL /10g建立小鼠急性肝损伤模型，正常对
照组腹腔注射等体积橄榄油。
禁食不禁水 18h 后，各组小鼠称重，断头处死，迅
速剖取肝组织，用预冷的 4℃生理盐水洗净表面残血
备用。
2． 2 实验指标检测
2． 2． 1 肝组织 SOD 活性、MDA 含量测定生化指标
检测
分别取大鼠肝脏组织块约 0． 3g，用预冷的生理盐
水制备成 10%的肝匀浆，3 000r /min 离心 5min，上清
液 － 20℃冻存，用于 SOD 活性、MDA 含量测定。SOD
活性测定采用黄嘌呤氧化酶法，测定总超氧化物歧化
酶活性;MDA 含量测定采用硫代巴比妥酸法(TBA)
法;组织蛋白含量的测定采用考马斯亮兰法，具体测定
流程按照试剂盒说明书进行。
2． 2． 2 肝组织结构观察(石蜡切片法)
肝组织用 4%多聚甲醛固定 24h，常规石蜡包埋、
切片(厚度 7μm)，HE染色，光镜下观察，拍照，MiE 显
微图像分析软件进行分析。
2． 3 统计学处理
采用 SPSS13． 0 软件对数据进行统计与分析，结果
以平均数 ±标准误差(珋x ± s)表示，组间差异采用one －
way ANOVA分析，P ＜ 0． 05 表示差异显著，P ＜ 0． 01 表
示差异极显著。
3 结果
3． 1 各组小鼠肝、肾 SOD活性及 MDA含量对比
如表 1 所示，CCl4致肝损伤模型组小鼠肝组织
SOD活性显著降低，MDA 含量明显升高，与正常对照
组相比，差异极显著(P ＜ 0． 01)。道地黄芩与甘肃陇
西产黄芩中、高剂量组均能增强 CCl4致肝损伤小鼠肝
组织 SOD活性，降低 MDA含量，其中高剂量组与模型
组相比，差异显著(P ＜ 0． 01)。二者相同剂量间比较
差异不显著。
3． 2 小鼠肝组织结构变化
如图 1 所示，正常对照组小鼠肝细胞以中央静脉
为中心，向四周呈放射状排列，肝细胞完整，排列整齐;
模型组小鼠肝组织正常结构被破坏，肝细胞空泡变性、
坏死，伴炎性细胞浸润;联苯双酯组、道地黄芩与甘肃
陇西产黄芩高剂量组小鼠肝细胞变性、坏死程度明显
减轻，炎性细胞浸润程度明显减轻，肝组织病变明显
改善。
图 1 小鼠肝脏组织显微结构(400 ×)
4 讨论
黄芩始载于《神农本草经》，列为中品，有清热燥
湿、解毒、泻火之功效［5］。黄芩在临床应用中历史悠
久，是我国常用大宗药材品种。2010 年中华人民共和
国药典规定唇形科植物黄芩(Scutellaria baicalensis
Georgi)为正品，以河北产者为道地，尤其是承德燕山
山地和丘陵区的黄芩质量最佳［6］。20 世纪 90 年代初
黄芩开始在北方各地等地引种栽培，并逐渐形成了山
东、山西、陕西、甘肃四大产区。有研究表明不同产地
黄芩中主要活性成分黄芩苷、黄芩素、汉黄芩苷、汉黄
芩素、黄芩新素及其微量元素的含量存在差异，导致其
药效存在差异［7］。近年来，甘肃黄芩种植面积以 30%
左右的速度逐年递增，其中陇西成为黄芩主要栽培产
表 1 小鼠肝组织中 SOD活力、MDA含量变化(珋x ± s)
组别 n 剂量(g /kg) SOD活力(U /mg) MDA含量(nmol /mg)
正常对照组 12 － 144． 65 ± 3． 66＊＊ 1． 34 ± 0． 03＊＊
肝损伤模型组 12 － 97． 70 ± 3． 22## 1． 91 ± 0． 02##
联苯双酯对照组 12 0． 15 136． 16 ± 12． 81＊＊ 1． 48 ± 0． 03＊＊#
道地黄芩低剂量组 12 1． 5 97． 18 ± 3． 61## 1． 93 ± 0． 03##
道地黄芩中剂量组 12 3 101． 75 ± 2． 21## 1． 82 ± 0． 05##
道地黄芩高剂量组 12 6 133． 91 ± 3． 19＊＊ 1． 49 ± 0． 03＊＊##
甘肃陇西产黄芩低剂量组 12 1． 5 96． 66 ± 4． 41## 1． 91 ± 0． 04##
甘肃陇西产黄芩中剂量组 12 3 99． 60 ± 2． 75## 1． 81 ± 0． 06##
甘肃陇西产黄芩高剂量组 12 6 131． 27 ± 3． 47＊＊ 1． 53 ± 0． 02＊＊##
注:与模型组相比，* P ＜ 0． 05，＊＊P ＜ 0． 01;与正常对照组相比，#P ＜ 0． 05，##P ＜ 0． 01。
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区，因此研究甘肃产黄芩的药效对于黄芩在甘肃的推
广种植具有重要意义。
CCl4致急性肝损伤模型是常用的经典动物模
型［8］。其机制为 CCl4在肝内经微粒体细胞色素 P450
分解活化，生成活泼的三氯甲基自由基和氯自由基，导
致肝微粒体的脂质过氧化，使肝细胞结构和功能受到
损害［9］。SOD是机体重要抗氧化酶，其活性的高低可
以间接地反映机体清除氧自由基的能力［10］。MDA 是
自由基引发的脂质过氧化作用的最终分解产物，其含
量大小可以间接反映自由基对组织的破坏程度［11］。
本研究表明，与正常对照组比较，模型组肝组织
匀浆中 SOD活性明显下降，MDA 含量升高，符合 CCl4
致小鼠肝损伤的一些病理学特征［12 － 13］，表明肝损伤模
型的建立成功。道地黄芩与甘肃陇西产黄芩高剂量组
均可以明显升高肝损伤模型小鼠肝组织 SOD 活性、降
低 MDA 的含量，提示黄芩水煎液具有较强的抗氧化
和清除自由基能力。病理组织学观察结果显示，道地
黄芩与甘肃陇西产黄芩对 CCl4致肝损伤模型小鼠的
肝细胞变性、坏死等症状有明显的改善作用。
综上所述，正品黄芩与甘肃陇西产黄芩具有较好
的保肝作用，同剂量正品黄芩保肝功效略优于甘肃产
黄芩，但二者之间差异不显著。
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Comparative Study on Liver － protective Effect of Scutellaria Baicalensis
Georgi from Hebei and Gansu on Acute Liver Injury Mice
GENG Guang － qin，YANG Zhi － jun，YANG Xiu － juan，LI Jing
(Gansu University of Traditional Chinese Medicine，Lanzhou 730000，China)
Abstract:Objective:The article was to explore the differences of protective effects on hepar by Scutellaria baicalensis
Georgi from Longxi of Gansu province and Chengde of Hebei province． Methods:The mice were injected by intraperito-
neal injection with 0． 1% CCl4 olive oil to induce the acute liver injury models． The liver tissues were collected to detect
SOD activities and MDA levels，and the morphological changes of liver were observed with microscope． Ｒesults:SOD ac-
tivities were both elevated obviously and MDA levels were notably reduced in hepatic tissue after the mice were given by
Scutellaria baicalensis Georgi with high dose(P ＜ 0． 01)． The damage of liver was lightened as well． Conclusion:Scute-
llaria baicalensis Georgi from both places has the liver protective effect． The liver － protective effect in the equilibrium
dose of Scutellaria baicalensis Georgi from Hebei was slightly better than that from Gansu． There is no significant differ-
ence．
Key words:Scutellaria baicalensis Georgi;Liver injury model;SOD activities;MDA level;Structural changes;Compara-
tive study
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