全 文 ：香蜂花组培快繁试验
贾文庆,刘会超,陈 韵
(河南科技学院园林学院,河南 新乡 453003)
摘 要:以香蜂花茎段为外植体进行组培快繁试验,结果表明,适合香蜂花茎节的消毒方式为 70%酒精浸摇 30s后再
用 0.1%HgCl2浸泡 7min;适宜诱导分化香蜂花不定芽的培养基为 MS+6-BA2.5mg/L+NAA0.2mg/L,诱导率达 96%、愈
伤化程度较小;适宜诱导生根的培养基为1/2MS+IBA2.0mg/L,生根率为95%,根长可达2.2cm,且有利于侧根的形成。
关键词:香蜂花;组织培养;快速繁殖
中图分类号:S682.39 文献标殖识码:B 文章编号:1004-874X(2007)05-0036-03
Experimentonaxilarybud’sinductionand
fastpropagationofMelissaoficnalis
JIAWen-qing,LIUHui-chao,CHENYun
(LandscapeColege,HenanInstituteofScienceandTechnology,Xinxiang453003,China)
Abstract:StemsegmentsofMelissaoficnalisweretakenasexplantstostudyit’sfastpropagationtechnology.Theresults
showedthatdippingwith70%alcoholfor30secondsand0.1%HgCl2for7minuteswassuitableforthedisinfectionofstem
segments.TheoptimalmediumfordiferentiationandmultiplicationofaxilarybudswasMS+6-BA2.5mg/L+NAA0.2mg/L,
theinducingratiowas96%.Themostefectivemediumforrootingwas1/2MS+IBA2.0mg/L,therootingratiowas95%andthe
lengthofrootcouldreach2.2centimeterslong.
Keywords:Melissaoficnalis;tissueculture;fastpropagation
收稿日期:2007-03-15
基金项目:河南省创新人才工程项目;河南科技学院重点项
目基金(0546)
作者简介:贾文庆(1979-),男,硕士,助教,E-mail:jiawq
99@126.com
香蜂花(Melissaoficnalis),别名蜜蜂花,属唇形花
科香蜂花属多年生草本植物,原产欧洲南部。香蜂花不
仅是营养丰富﹑药用价值极高且深受消费者喜爱的烹
饪调味类芳香蔬菜,也是种草养花爱好者首选的特色
保健型食用花卉[1]。香蜂花花叶中含有独特的柠檬醛
类芳香油,是制造香水﹑化妆品﹑洗涤用品以及清凉糖﹑
口香糖的重要原料[2]。此外,香蜂花四季常绿,香气中
带有清凉和香甜味,作为园林植物具有良好的发展前
景,在庭院和公园花坛中种植适量香蜂花,可使空气更
加清新宜人。因此,香蜂花越来越受到人们的青睐,具
有广阔的开发利用前景。
但是,目前对香蜂花的研究多集中于成分分析﹑药
理作用及栽培技术等方面[1-3],而以香蜂花茎节为外植
体进行丛生芽诱导和植株再生的研究尚未见报道。我
们以香蜂花茎段为外殖体进行组培快繁试验,现将试
验结果报道如下。
1 材料与方法
1.1 试验材料
供试材料为盆栽香蜂花,购自郑州花卉市场。
1.2 试验方法
诱导分化试验和生根试验的基本培养基均附加
3%蔗糖、0.52%琼脂,并调节pH值至5.8。接种后置于
恒温培养箱,培养温度为(25±1)℃,光照强度为 2000
lx、每天连续光照12～13h。
1.2.1 不同消毒时间对茎节诱导成活率的影响试验
取50d龄健壮植株的茎节中部为外植体,去掉叶片,
流水冲洗1h,用吸水纸吸干水分。在无菌条件下切取
带芽茎节,置于70%酒精中浸摇30s,再用0.1%HgCl2
浸泡,设 5、7、9min3个处理,最后用无菌水冲洗 6
次、每次轻摇1min。将消毒后的带芽茎节接种于诱导
培养基中,每个处理接种60个茎节。接种后20d调查
茎节的生长情况,统计成活率,筛选适合香蜂花茎节消
广东农业科学 2007年第5期36
DOI:10.16768/j.issn.1004-874x.2007.05.010
毒的方式。
1.2.2 不同激素配比对茎节诱导分化的影响试验 将
经最佳消毒方式处理的香蜂花茎节接种于 MS+NAA
0.2mg/L+6-BA(0、1.0、1.5、2.0、2.5、3.0、4.0mg/L)和
MS+6-BA2.5mg/L+NAA(0.01、0.05、0.10、0.15、0.20、
0.25、0.30mg/L)培养基中培养。每个处理接种30瓶,
每瓶接种2个茎节。接种后观察丛生芽的诱导情况,调
查不同激素配比对香蜂花丛生芽诱导分化的影响。
1.2.3 不同培养基对丛生芽生根的影响试验 当丛生
芽长至2～3cm长时,接种于添加了1.0、1.5、2.0mg/L
的 MS、1/2MS和 1/4MS培养基(表 1)中,每个处理接
种30瓶,每瓶接种1个丛生芽。接种后30d观察丛生
芽的生根情况,调查不同培养基对香蜂花丛生芽生根
的影响。
1.2.4 移栽试验 将根长1.5～2.5cm的生根小苗移植
入于经消毒的珍珠岩、蛭石、泥炭土(1∶1∶1)混合基质
中,做好遮阴、喷雾保湿工作,14d后调查小苗成活
率。
2 结果与分析
2.1 不同消毒时间对香蜂花茎节诱导成活率的影响
在试验中发现,取茎段中部茎节作外植体的成活
率高于茎段顶部和底部,丛生芽增殖多、分化快、生长
快、苗势壮。以茎节中部为外植体的调查结果(表1)表
明,不同消毒时间对香蜂花茎节成活率的影响不同,其
中用 70%酒精灭菌 30s后再用 0.1%HgCl2浸泡 7
min的效果最好,诱导成活率可达 88.3%,浸泡 5min
的成活率为78.3%,浸泡9min的效果最差、成活率仅
为46.7%。
2.2 不同激素配比对香蜂花茎节诱导分化的影响
将香蜂花茎节接种于同时添加 6-BA和 NAA的
诱导培养基后 7d,即可见芽开始萌发,并长出叶片。
接种后 18d大多数茎节已出芽,形成较整齐的丛生
芽,最长的嫩梢达2cm高。
由图 1可知,在 NAA浓度为 0.2mg/L的条件下,
当培养基中没有添加 6-BA时,丛生芽不分化;当
6-BA>1.0mg/L时,茎节均能分化丛生芽,而且在一定
范围内诱导率随 6-BA浓度的增加而升高,当 6-BA
浓度为 2.5mg/L时,丛生芽诱导率最高,达 96%;
当6-BA浓度过高(>2.5mg/L)时,诱导出的丛生芽易
产生变异、苗生长缓慢、茎也难以继续生长。当 6-BA
浓度为 2.5mg/L时、NAA在 0.01～0.30mg/L之间变
化时,丛生芽的诱导率同样呈现出先升高后降低的变
化趋势(图 2),其中 NAA浓度为 0.20mg/L时的丛生
芽诱导率高达96%,而当 NAA浓度继续升高时其诱
导率反而下降。
可见,当 6-BA与 NAA协作使用时,能大大提高
香蜂花茎节丛生芽的诱导率。在 NAA浓度为 0.20～
0.30mg/L、6-BA浓度在2.0～3.0mg/L时对丛生芽的分
化较为有利,其中又以MS+6-BA2.5mg/L+NAA0.20
mg/L培养基的诱导率最高(96%),同时茎节切口处愈
伤化程度也较小,平均直径只有 0.27cm,因此该培养
基是较为理想的香蜂花丛生芽诱导培养基。
2.3 不同培养基对丛生芽生根的影响
从表 2可见,丛生芽可在没有添加激素的 1/2
5min
7min
9min
表1 不同消毒时间对香蜂花茎节诱导成活率的影响
60
60
60
10
1
0
3
6
32
污染数 死亡数接种数 成活数消毒处理
47
53
28
成活率(%)
78.3
88.3
46.7
100
80
60
40
20
0
0.0 1.0 1.5 2.0 2.5 3.0 4.0
诱
导
率
(%
)
图1 不同浓度6-BA对香蜂花丛生芽诱导率的影响
6-BA浓度(mg/L)
100
80
60
40
20
0
0.01 0.05 0.10 0.15 0.20 0.25 0.30
诱
导
率
(%
)
图2 不同浓度NAA对香蜂花丛生芽诱导率的影响
NAA浓度(mg/L)
37
MS、1/4MS培养基上分化出不定根,生根率分别为
40%和 100%,而在 MS培养基上则没有不定根的分
化;在基本培养基中分别加入不同浓度 IBA时,1/4MS
培养基上的丛生芽生根率最高,其次为 1/2MS,而 MS
培养基的丛生芽生根率最低。说明基本培养基的种类
是影响香蜂花丛生芽不定根分化的一个重要因素,而
低盐的基本培养基有利于不定根的分化。
从表2还可以看出,尽管1/4MS+IBA培养基处理
的丛生芽生根率较高,但不定根的数量和长度均不及
1/2MS+IBA培养基。例如,1/4MS+IBA2.0mg/L培养基
的丛生芽生根率达100%,但其平均根数为3.7条、根
长仅为 1.2cm;而 1/2MS+IBA2.0mg/L培养基的丛生
芽生根率为95%,但平均根数和根长分别达5.0条和
2.2cm,其诱导的生根小苗见如图 3。可见,与 1/2MS
相比较,1/4MS培养基中的营养物质满足不了不定根
的生长。另外,在试验中还发现,将已形成不定根的试
管苗转移至未添加激素的 1/2MS培养基后,不定根可
迅速生长,而且侧根也逐渐形成。说明 1/4MS有利于
不定根的分化,1/2MS则有利于不定根的生长,而
1/2MS+IBA2.0mg/L培养基最适于香蜂花丛生芽的
生根。
2.4 移栽效果
将根长为1.5～2.5cm的生根小苗移于经过消毒的
珍珠岩、蛭石、泥炭土(1∶1∶1)基质中,遮阴并喷雾保湿,
14d后定植,成活率在95%以上。
3 结论与讨论
在香蜂花丛生芽诱导过程中,适当浓度的 6-BA
和NAA组合对诱导出数量多、质量高的丛生芽起着关
键作用。本试验结果表明,当 6-BA浓度为 2.5mg/L、
NAA浓度为0.2mg/L时,可获得大量生长健壮的丛生
芽;1/4MS对丛生芽不定根分化的效果最好,其次是
1/2MS,再次为MS,说明低盐培养基有利于香蜂花试管
苗的生根,这与韦三立[4]和李骏明[5]有关“基本培养基
影响生根的实质是无机盐浓度对生根存在显著影响”
的研究结论一致。
植物激素的种类和浓度对试管苗诱导有调控作
用,一般认为较高浓度IBA有利于根的形成[6-7]。在本
试验中,IBA浓度为0.1～2mg/L时就足以诱导生根,但
浓度过高将导致产生较多愈伤组织,易使根系从愈伤
组织上分化出来,由于根系与茎的维管束连接不好,因
此这种生根苗移栽时较难成活。
参考文献:
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30-33.
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[5] 李骏明.植物组织培养教程[M].北京:中国农业大学出版
社,1996.
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业出版社,1991.
[7] 曹孜义.实用植物组织培养技术教程[M].兰州:甘肃科学技
术出版社,1998.
MS
MS+IBA1.0mg/L
MS+IBA1.5mg/L
MS+IBA2.0mg/L
1/2MS
1/2MS+IBA1.0mg/L
1/2MS+IBA1.5mg/L
1/2MS+IBA2.0mg/L
1/4MS
1/4MS+IBA1.0mg/L
1/4MS+IBA1.5mg/L
1/4MS+IBA2.0mg/L
表2 不同培养基对香蜂花丛生芽生根的影响
0.0
1.0
3.0
2.6
1.0
3.0
4.6
5.0
2.0
3.0
3.2
3.7
根长(cm) 生根率(%)根数(条)培养基
0.0
0.4
0.8
0.9
1.2
1.2
1.4
2.2
0.7
0.9
1.0
1.2
0
75
70
75
40
90
92
95
100
96
100
100
图3 1/2MS+IBA2.0mg/L培养基诱导的生根小苗
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