全 文 ：香蜂花茎节丛生芽诱导及快速繁殖技术研究
贾文庆 ,姚连芳 ,刘会超
(河南科技学院园林学院 ,河南 新乡　453003)
摘　要:以香蜂花茎段为外植体 ,MS为基本培养基 ,设计不同浓度的 6-BA、NAA、IBA等单因子和不同比例的细胞分裂素和细胞
生长素组合试验。结果表明:适宜不定芽诱导分化的培养基为MS+6-BA 2.5 mg/ L+NAA 0.2 mg/ L;适宜诱导生根的培养基为
1/ 2MS+IBA 2.0 mg/ L。
关键词:香蜂花;组织培养;激素
中图分类号:S682.29　　文献标识码:A　　文章编号:1006-060X(2007)04-0026-03
The Induction and Rapid Propagation of Axillary Bud of Melissa Officnalis
JIA Wen-qing , YAO Lian-fang , LIU Hui-chao
(College of Horticulture and Forestry , Henan Science and Technology School , Xinxiang 453003 , PRC)
Abstract:Stalk segments of Melissa officnalis were explants on MS medium supplemented with plant hormone in different
concentrations.The results showed that MS medium supplemented with 6-BA 2.5 mg/ L and NAA 0.2 mg/ L was the most effective
medium for the differentiation and multiplication of the shoots.The optimal rooting medium was 1/ 2MS+IBA 1.0 mg/ L.
Key words:Melissa officnalis;tissue culture;plant hormone
　　香蜂花 ,别名蜜蜂花 ,属唇形花科香蜂花属多年
生草本植物 ,原产欧洲南部 。香蜂花不仅是营养丰
富 、药用价值极高的深受消费者喜爱的烹饪调味类
芳香蔬菜 ,也是种草养花爱好者首选的特色保健型
食用花卉[ 1] 。花叶中含有独特的柠檬醛类芳香油 ,
是制造香水 、化妆品 、洗涤用品以及清凉糖 、口香糖
的重要原料[ 2] 。此外 ,在庭院 、公园的花坛中植入适
量的香蜂花 ,不断散发香气 ,可使空气更加清新宜
人。香蜂花四季常绿 ,香气中带有清凉和香甜味 ,作
为园林植物具有良好的发展前景。因此 ,它越来越
受到人们的青睐 ,具有广阔的开发利用前景。目前 ,
对香蜂花的研究多集中于成分分析 、药理作用及栽
培技术等方面[ 1-3] ,以其茎节为外植体进行丛生芽
诱导和植株再生的研究尚未见报道 。
1　材料与方法
1.1　供试材料及材料处理
收稿日期:2007-03-20
基金项目:河南省创新人才工程项目和河南科技学院博士基
金资助项目(5046)
作者简介:贾文庆(1979-),男 ,河南淮阳市人 ,助教 , 硕士 ,主
要从事观赏植物生物技术研究。
　　盆栽香蜂花(Melissa officnalis),购自郑州花卉市
场 。
取盆栽50 d 龄的健壮植株茎节(包括顶部 、中
部 、底部茎节)为外植体 ,去掉叶片 ,流水冲洗1 h ,用
吸水纸吸干水分 。在无菌条件下 ,切取带芽茎节置
于 70%酒精中浸摇 30 s , 再用 0.1%HgCl2 浸泡 5
min 、7 min 、9 min ,无菌水冲洗 6次 ,每次 1 min ,并轻
轻摇动 。
1.2　香蜂花丛生芽的诱导和试管苗的生根
以MS为基本培养基 ,附加不同浓度的6-BA(0
～ 4 mg/L)和 NAA(0 ～ 0.3 mg/L),按照单因子随机
设定的方法实验诱导香蜂花丛生芽的最佳激素组
合 。当诱导形成的丛生芽生长到 2 ～ 3 cm 时 ,用于
生根。以不同浓度的 IBA(0 ～ 2 mg/L)以及不同的
基本培养基组合(MS 、1/2MS 、1/4MS)处理来研究其
对生根的影响。
以上培养基中均添加 3%蔗糖 , 0.52%琼脂 ,灭
菌前 pH调至 5.8 ,121 ℃高温 、高压灭菌 20 min ,培
养温度为 25±1 ℃,光照时间 12 ～ 13 h/d ,光照度
2 000 lx ,所有培养均在光照恒温培养箱中完成 。
2　结果与分析
2.1　不同消毒方式对茎节诱导分化的影响
　湖南农业科学　2007 ,(4):26 ～ 28　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　Hunan Agricultural Sciences　
DOI :10.16498/j.cnki.hnnykx.2007.04.041
将茎节接入诱导分化培养基中 ,每瓶接 1个外
植体。于接种后 5 d 、10 d 、20 d后观察茎节的污染
率 、褐化死亡率 、存活率等情况 ,比较不同表面灭菌
方式的灭菌效果 ,筛选最适外植体处理方式。
从表 1可以看出:不同的表面灭菌方式 ,其效果
是不一样的 , 其中 70%酒精表面灭菌 30 s 后用
0.1%升汞溶液灭菌 7 min处理的外植体 ,其成活率
高达 80%,污染率 10%,褐化死亡率 10%,为 3种表
面灭菌方式中效果最好的 。从实验结果还可看出 ,
取茎段的中部茎节 ,其成活率高于顶部和底部 ,取茎
段的中部作外植体 ,成活率高 ,丛生芽分化快 、增殖
多 ,生长快 ,苗势壮。
　表 1　 不同表面灭菌方式对香蜂花茎节
诱导分化的影响
处
理
接种茎
段总数
(个)
污染茎
段数
(个)
茎节污
染率
(%)
褐化死亡
茎段数
(个)
茎段褐化
死亡率
(%)
成活茎
段数
(个)
茎段成
活率
(%)
(1) 60 10 16.67 3 0.05 47 78.33
(2) 60 1 1.67 6 10.00 53 88.33
(3) 60 0 0 32 53.33 20 33.33
　注:处理(1)为 70%酒精 30 s , 0.1%升汞 5 min;处理(2)为 70%酒精
30 s , 0.1%升汞 7 min;处理(3)为 70%酒精 30 s , 0.1%升汞 9 min。
2.2　不同激素配比对诱导分化的影响
外植体接种到同时添加 6-BA及 NAA的诱导
培养基上 7 d后 ,即可见芽开始萌发 ,并长出叶片 。
至接种 18 d后 ,大多数外植体已出芽 ,形成了较为
整齐一致的丛生芽 ,最先出芽外植体的最长嫩梢已
有2 cm左右高 。由表 1可知 ,当 6-BA与 NAA 协
作使用时 ,能大大提高外植体的出芽率 。由此可见 ,
合适的 6-BA和 NAA激素组合是影响香蜂花茎节
芽分化的重要因素。实验中发现 ,培养基中没有添
加6-BA时 ,没有丛生芽的分化 。而 6-BA浓度在
1.0 mg/L 以上时 ,外植体均分化出丛生芽。尽管丛
生芽的诱导率随 6-BA 浓度在一定范围内增加而
相应升高(图1),但浓度过高时诱导出的丛生芽容
图 1　不同浓度的 6-BA对香蜂花丛生芽诱导率的影响
易产生变异 ,且苗生长缓慢 ,茎也很难再生长。另一
方面 ,NAA 也在香蜂花丛生芽的诱导中起重要作
用 。当 6-BA浓度一定时 ,NAA在 0.05 ～ 0.3 mg/L
间变化时 ,丛生芽的诱导率都呈现先升高后降低的
趋势(图 2)。因此在以香蜂花茎节作为外植体诱导
丛生芽时 ,NAA 在 0.2 ～ 0.3 mg/L、6-BA 在 2 ～ 3
mg/L时对丛生芽的分化较为有利 。而用 MS+2.5
mg/L 6-BA+0.2 mg/L NAA的培养基培养时 ,诱导
率达 96%;同时外植体切口处愈伤化程度也较小 ,
平均直径只有0.27 cm ,因而该培养基是较为理想的
诱导培养基 。
　图 2　不同浓度的 NAA对香蜂花丛生芽诱导率的影响
2.3　生根与移栽
将高2 ～ 3 cm的再生苗分别接种到生根培养基
C1 ～ E4上 。基本培养基是影响香蜂花试管苗不定
根分化的一个重要因素(表 2),试管苗可在无生长
素的1/2MS 、1/4MS培养基上分化出不定根 ,其分化
率可以达到 20%,而在 MS培养基上则没有不定根
的分化 ,在分别加入不同浓度的 IBA时 ,1/4MS 培养
基上的试管苗不定根的分化频率最高;其次为
1/2MS;而MS则最低 。由此可见 ,低盐的基本培养
基有利于不定根的分化 ,尽管以 1/4MS 为基本培养
基的组合可使不定根的诱导频率增加 ,但不定根的
根数和根长均不及 1/2MS组合。1/4MS+2.0 mg/L
IBA生根率达到 100%, 但其平均根数还不到 3.7
根 ,其平均根长仅 1.2 cm;而组合为 1/2MS +2.0
mg/L IBA 时 ,其生根率尽管只有 95%,但其平均根
数可达到 5根 ,且平均根长为 2.2 cm。这说明 ,与
1/2MS比较 ,1/4MS培养基中所含的营养物质满足
不了不定根的生长 ,将已形成不定根的试管苗转移
到无激素的 1/2MS培养基中后 ,不定根可在该培养
基中迅速生长 , 并且有利于侧根的形成 。因此 ,
1/4MS有利于不定根的分化 ,而 1/2MS 则有利于根
的生长 。
27第4 期　　　　　　　　　　　　　贾文庆等:香蜂花茎节丛生诱导及快速繁殖技术研究　　　　　　　　　　　　　
　表 2　　　不同培养基对香蜂花生根的影响
类号 培养基 平均根数 平均根长(cm)
生根率
(%)
C1 1/ 2MS 1.0 1.2 40
C2 1/ 2MS+IBA 1.0 mg/ L 3.0 1.2 90
C3 1/ 2MS+IBA 1.5 mg/ L 4.6 1.4 92
C4 1/ 2MS+IBA 2.0 mg/ L 5.0 2.2 95
D1 MS 0.0 0.0 0
D2 MS+ IBA 1.0 mg/ L 1.0 0.4 75
D3 MS+IBA 1.5 mg/L 3.0 0.8 70
D4 MS+IBA 2.0 mg/L 2.6 0.9 75
E1 1/ 4MS 2.0 0.7 100
E2 1/ 4MS+IBA 1.0 mg/ L 3.0 0.9 96
E3 1/ 4MS+IBA 1.5 mg/ L 3.2 1.0 100
E4 1/ 4MS+IBA 2.0 mg/ L 3.7 1.2 100
　注:表中为接种 30 d后的数据
　　将根长为 1.5 ～ 2.5 cm的生根小苗移入经过消
毒的珍珠岩 、蛭石 、泥炭土(1∶1∶1)基质中 ,遮荫 ,喷
雾保湿 ,2周后即可移入土壤 ,成活率在 95%以上 。
3　小结与讨论
在香蜂花丛生芽诱导过程中 ,适当的细胞分裂
素和生长素的浓度和组合对诱导出高频率 、高质量
的芽起着关键作用。激素组合试验表明 , 不同
6-BA和 NAA浓度配比均可诱导丛生芽的形成 ,但
只有当6-BA为 2.5 mg/L 、NAA 为 0.2 mg/L 时 ,才
能得到大量且生长健壮的丛生芽 。
基本培养基影响试管苗生根的实质是无机盐浓
度对试管苗生根存在很显著的影响 。研究结果表
明:1/2MS对试管苗不定根分化效果最好 ,诱导率可
达到60%;其次是 1/2改良MS;再次为改良MS 。这
也说明低盐浓度的培养基有利于香蜂花试管苗的生
根 。植物激素的种类及其浓度对于试管苗根诱导有
调控作用 。一般认为 ,较高浓度的生长素有利于根
的形成。实验中 IBA在 0.1 ～ 2 mg/L 就足以诱导生
根 ,但浓度过高会使插入培养基的部分产生较多的
愈伤组织 ,根系从愈伤组织上分化出来 。这种生根
苗由于根系与苗的茎维管束连接不好 ,移栽时较难
成活。
参考文献:
[ 1] 　黄士诚.香蜂花的栽培与加工[ J] .香料香精化妆品 , 1998, (3):
30-33.
[ 2] 　彭全云.长生不老药———香蜂花[ J] .农村新技术 ,2005 ,(4):27.
[ 3] 　李冬霞.香蜂花的主要栽培技术[ J] .农村经济与科技 , 2005 ,
(9):35-36.
(上接第 23页)
　表 2　 2006 年浏阳市 16 个超级中稻新品种(组合)展示表现情况
品种 展示面积(m2)
播种期
(月-日)
移栽期
(月-日)
成熟期
(月-日)
全生育
期(d)
有效穗
(万穗/ hm2)
穗平
总粒数
结实率
(%)
千粒重
(g)
理论产量
(t/hm2)
实际产量
(t/hm2) 抗倒力
C两优 87 1 533 05-25 06-14 09-24 123 241.80 171.7 91.2 30.1 11.40 10.88 较强
58S/588 2 067 05-24 06-15 09-23 123 238.95 201.5 80.9 30.3 11.14 10.37 强
C两优 396 2 800 05-26 06-16 09-26 124 222.30 170.2 90.7 30.4 10.43 10.02 较强
Y优 7号 1 333 05-25 06-13 09-24 123 217.95 183.1 90.8 28.1 10.18 9.87 中等
Ⅱ优 1140 1 867 05-25 06-14 09-25 124 203.40 187.6 94.2 27.8 9.99 9.75 强
88S/747 1 467 05-24 06-13 09-25 125 199.50 195.7 82.3 30.6 9.83 9.73 强
隆两优 1号 1 733 05-26 06-16 09-28 126 198.60 197.1 83.0 30.7 9.97 9.69 强
科超 1136 1 400 05-26 06-16 09-27 125 189.00 201.3 92.5 28.2 9.92 9.56 中等
Y优 20 1 667 05-25 06-13 09-23 122 210.30 170.5 95.1 28.9 9.85 9.46 一般
58S/747 1 667 05-26 06-14 09-24 122 196.80 215.2 83.7 27.2 9.64 9.39 强
安隆 3S/安选 6号 1 467 05-26 06-15 09-26 124 199.50 192.7 93.5 27.1 9.74 9.35 强
C两优 343 2 333 05-25 06-14 09-25 124 235.50 166.8 88.1 27.2 9.41 9.30 较强
新香 A/ 1102 1 333 05-25 06-14 09-23 122 249.45 162.7 89.3 26.4 9.57 9.20 一般
科优 21 1 867 05-26 06-16 09-26 124 191.40 208.6 85.0 28.0 9.50 9.19 一般
HN0463 1 333 05-25 06-15 09-24 123 196.80 178.6 88.1 28.6 8.86 8.60 中等
Y优 838 1 600 05-25 06-16 09-22 121 213.15 168.2 90.5 28.4 9.21 8.44 一般
示范和推广发挥了重要的窗口作用 。当地及周边农
民慕名前来参观 ,为来年品种选择作参考。
3　小　结
大面积品种比较试验及展示结果表明 ,科超
3218 、淮 S/1243 、C 两优 87 、Y优 7 号 、C 两优 396 、
58S/588等 6个品种(组合)的丰产性 、抗性及抗倒伏
能力 、分蘖能力 、株叶型态等综合性状较突出 ,具有
大面积推广价值。而其它品种(组合)可进一步试验
示范 ,针对其特征 、特性制定最佳栽培技术方案 。
28　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　湖南农业科学　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　第 4期