全 文 ：华西药学杂志
W C J·P S 2016，31(5)∶514 ～ 516
基金项目:四川省科技厅应用基础研究项目(2014JY0233);西南民族大学研究生创新型科研项目(CX2016SZ048)
作者简介:李姗(1992—)，女，正攻读民族药物化学专业的硕士学位。Email:lishan_317@ 163． com
* 通信作者(Correspondent author)，Email:zhangzhf99@ gmail． com
HPLC测定川西高原 4 种龙胆科植物中的环烯醚萜苷类
李 姗，吕露阳，刘 圆，王凯顺，杨圣贤，张志锋*
(西南民族大学化学与环境保护学院 青藏高原研究院，四川 成都 610041)
摘要:目的 比较川西高原地区多基源藏药蒂达的 4 种龙胆科植物(蓝玉簪龙胆、肋柱花、铺散肋柱花和椭圆叶花锚)中 3 种
环烯醚萜苷类化合物(獐牙菜苦苷、獐牙菜苷和龙胆苦苷)在各部位中的分布。方法 采用 YMC － Triart C18色谱柱(250 mm ×
4． 6 mm，5 μm)，流动相为甲醇(A)－ 0． 2%冰乙酸(B)，梯度洗脱(0 ～ 40 min、20% ～50% A)，流速 1 mL·min －1，检测波长 240
nm，柱温 25 ℃。结果 獐牙菜苦苷、獐牙菜苷和龙胆苦苷的线性范围均为 0． 0567 ～ 0． 9756 mg·mL －1，回收率为 97． 88% ～
100． 4%，ＲSD为 1． 43% ～ 1． 95%;3 种环烯醚萜苷在 4 种植物各部位中的含量存在明显差异。结论 所用方法可区分川西高
原的 4 种龙胆科植物，可为其质量标准的制定提供依据。
关键词:高效液相色谱法;龙胆科;藏药;蒂达;獐牙菜苦苷;獐牙菜苷;龙胆苦苷;环烯醚萜类
中图分类号:Ｒ917 文献标志码:A 文章编号:1006 － 0103(2016)05 － 0514 － 03
DOI:10． 13375 / j． cnki． wcjps． 2016． 05． 023
Determination of iridoid glycosides in four kinds of Gentianaceae species from west Sichuan
plateau by HPLC
LI Shan，L Luyang，LIU Yuan，WANG Kaishun，YANG Shengxian，ZHANG Zhifeng*
(Tibetan Plateau Institute，Chemistry and Environment Protection Institute，Southwest University for Nationalities，Chengdu，Sichuan，
610041 P． Ｒ． China)
Abstract:OBJECTIVE To compare the distribution of three kinds of iridoid glycosides(swertiamarin，sweroside and gentiopicrin)
in different parts of the original plants for Tibetan medicine Dida，including Gentiana veitchiorum，Lomatogonium rotatum，L． thomsonii
and Halenia elliptica from west Sichuan plateau． METHODS The analysis was performed on the YMC － Triart C18(250 mm × 4． 6
mm，5 μm)column． Methanol(A)and 0． 2% aqueous glacial acetic acid (B)were used as the mobile phase with gradient elution(0 －
40 min，20% － 50% A)． The flow rate was 1． 0 mL·min －1 with the wavelegth of 240 nm and the column temperature of 25 ℃ ．
ＲESULTS All the linear ranges of swertiamarin，sweroside and gentiopicrin were 0． 0567 － 0． 9756 mg·mL －1 ． The average recovery
rates were 97． 88% － 100． 4% with the ＲSD of 1． 43% － 1． 95% ． There were obvious differences of contents in the different parts of the
above four plants． CONCLUSION The method can be used to distinguish four kinds of Gentianaceae plants from west Sichuan
plateau． It can also be used for the quality control of Gentianaceae plants．
Key words:HPLC;Gentianaceae;Tibetan medicine;Dida;Swertiamarin;Sweroside;Gentiopicrin;Iridoid glycosides
CLC number:Ｒ917 Document code:A Article ID:1006 － 0103(2016)05 － 0514 － 03
蒂达最早记录于《晶珠本草》中，为常用藏药之
一，具有清肝利胆、利尿、续筋骨、止血等功效，临床
上用于治疗急性黄疸性肝炎、病毒性肝炎和胆囊炎
等［1］。蒂达在不同的藏区的不同市场、医院及制药
企业使用的基源植物有较大区别，主要有龙胆科的
獐牙菜属、花锚属和肋柱花属等多种植物［2］。在中
国川西高原阿坝藏羌族自治州，就有蓝玉簪龙胆
Gentiana veitchiorum Hemsl、肋柱花 Lomatogonium
rotatum、铺散肋柱花 L． thomsonii 与椭圆叶花锚
Halenia elliptica 等 4 种植物被广泛使用。目前，国
内外已对多种龙胆科植物的化学成分进行过研
究［3 － 4］，但有关这 4 种植物的化学分类研究的报道
较少［5］。龙胆科植物的主要化学成分为环烯醚萜
类、黄酮类。其中，环烯醚萜类的化合物包括獐牙菜
苦苷、獐牙菜苷、龙胆苦苷，皆为龙胆科植物的重要
活性成分［6］。现采用 HPLC法同时测定了蓝玉簪龙
胆、肋柱花、铺散肋柱花和椭圆叶花锚的全草及各个
部位中 3 个环烯醚萜苷类成分的含量，可为 4 种植
物的合理使用及化学分类提供依据。
1 实验部分
1. 1 仪器与试药
2695 高效液相色谱仪(美国 Waters)。蓝玉簪
龙胆、肋柱花、铺散肋柱花、椭圆叶花锚采自四川省
阿坝藏羌族自治州红原县县城周边，海拔 3． 54 km，
均经鉴定;龙胆苦苷、獐牙菜苦苷、獐牙菜苷对照品
(成都康邦生物科技有限公司);甲醇为色谱纯;水
为去离子水。
1. 2 方法与结果
1. 2. 1 色谱条件 采用 YMC － Triart C18色谱柱
(250 mm × 4． 6 mm，5 μm)，流动相为甲醇(A)－
0. 2%冰乙酸(B)，梯度洗脱(0 ～ 40 min、20% ～
50% A)，流速 1 mL·min －1，检测波长 240 nm，柱温
25 ℃，进样量 10 μL。在上述色谱条件下，混合对照
品溶液的色谱图见图 1。
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cr
in
0 5 10 15 20 25 30 35 40
t/min
图 1 混合对照品溶液的 HPLC图
Figure 1 HPLC chromatogram of mixed control solution
1. 2. 2 溶液的制备 分别精密称取对照品獐牙菜
苦苷 6． 02 mg、龙胆苦苷 7． 05 mg、獐芽菜苷 5． 61
mg，置同一 10 mL 量瓶中，加甲醇溶解并定容，得
1 mg·mL －1混合对照品贮备液。取各药材全草及各
部位的粉末 0． 5 g，精密称定，置锥形瓶中，用甲醇超
声提取 20 min(10 mL × 2)，过滤，合并滤液，置 25
mL量瓶中，加甲醇定容，用 0． 22 μm 滤膜过滤，得
供试品溶液。
1. 2. 3 标准曲线的制备 分别吸取混合对照品贮
备液适量，以甲醇稀释并定容，得 1． 0、0． 5、0． 02、
1 × 10 －3、6 × 10 －4、3 × 10 －5 mg·mL －1线性溶液，按
“1． 2． 1”项色谱条件进样，记录峰面积。以峰面积
为纵坐标、各对照品浓度为横坐标绘制标准曲线，得
回归方程(表 1)。
1. 2. 4 精密度、重复性与稳定性试验 精密吸取蓝
玉簪龙胆供试品溶液 10 μL，重复进样 5 次，计算得
獐牙菜苷、獐牙菜苦苷和龙胆苦苷峰面积的 ＲSD 分
别为 1． 56%、2． 03%、1． 34%(n = 5)，表明仪器精密
度良好。取蓝玉簪龙胆样品 5 份，每份约 0． 5 g，精
密称定，按“1． 2． 2”项方法制备供试品溶液，分别进
样，计算得獐牙菜苷、獐牙菜苦苷、龙胆苦苷峰面积
的 ＲSD分别为 1． 38%、2． 45%、1． 67%(n = 5)，表
明重复性较好。精密吸取蓝玉簪龙胆供试品溶液，
分别在 0、2、4、6、8、10、12 h 时进样，计算得獐牙菜
苷、獐牙菜苦苷、龙胆苦苷峰面积的 ＲSD 分别为
1. 80%、1． 86%、1． 20%，表明供试品溶液在 12 h 内
稳定。
表 1 獐牙菜苷、獐牙菜苦苷与龙胆苦苷的标准曲线、线性范围及相
关系数
Table 1 Standard curve，linear range and r of sweroside，swer-
tiamarin and gentiopicrin
Compounds Standard curves Linear ranges /
μg·mL －1
r
Sweroside Y = 1． 2823 × 107X + 5． 4205 × 104 56． 7 － 668． 6 0． 9999
Swertiamarin Y = 1． 8307 × 107X － 3． 7702 × 104 57． 3 － 975． 6 0． 9999
Gentiopicrin Y = 9． 9309 × 106X + 3． 5924 × 104 56． 7 － 974． 5 0． 9998
1. 2. 5 加样回收率试验 取已知含量的蓝玉簪龙
胆供试品 5 份(含獐牙菜苦苷、獐牙菜苷、龙胆苦苷
分别为 4． 89、1． 46、11． 52 mg·g －1)各约 0． 5 g，精密
称定，每份中分别加入獐牙菜苦苷对照品 1． 8 mg、
獐牙菜苷对照品 1． 0 mg和龙胆苦苷对照品 2． 0 mg，
按“1． 2． 2”项方法制备供试品溶液，分别进样，计算
得獐牙菜苦苷、獐牙菜苷和龙胆苦苷对照品的平均
回收率分别为 100． 04%、97． 88%、100． 40%，ＲSD
分别为 1． 84%、1． 43%、1． 95%(n = 5)。
1. 2. 6 含量的测定 取 4 种样品不同部位的粉末，
按“1． 2． 2”项方法制备供试品溶液，再按“1． 2． 1”项
色谱条件分别进样，记录色谱图(图 2)，计算 4 种样
品不同部位中 3 种环烯醚萜苷类的含量(表 2)。
表 2 4 种龙胆科植物中 3 种环烯醚萜苷的含量测定结果(mg·g －1)
Table 2 Ｒesults of the content determination of three kinds of
iridoid glycosides in four kinds of Gentianaceae plants
(mg·g －1)
Plants Parts Swertiamarin Sweroside Gentiopicrin
G． veitchiorum stem 1． 49 1． 69 5． 82
leaf 5． 06 － 5． 56
flower 1． 62 0． 47 18． 92
herba 4． 89 1． 46 11． 52
L． thomsonii stem 14． 92 15． 77 －
leaf 55． 18 5． 03 －
flower 55． 89 21． 22 －
herba 54． 91 20． 69 －
L． rotatum stem 16． 24 16． 92 －
leaf 59． 84 3． 86 －
flower 50． 22 5． 77 －
herba 53． 22 12． 44 －
H． elliptica stem － － －
leaf － － －
flower － － －
herba － － －
515第 5 期 李 姗，等。HPLC测定川西高原 4 种龙胆科植物中的环烯醚萜苷类
B1 B2 B3 B4
C1 C2 C3 C4
0 10 20 30 40 0 10 20 30 40 0 10 20 30 40 0 10 20 30 40
0 10 20 30 40 0 10 20 30 40 0 10 20 30 40 0 10 20 30 40
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A1 A2 A3 A4
0 10 20 30 40 0 10 20 30 40 0 10 20 30 40 0 10 20 30 40
sw
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D1 D2 D3 D4
0 10 20 30 40 0 10 20 30 40 0 10 20 30 40 0 10 20 30 40
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t/min
图 2 蓝玉簪龙胆(A)、铺散肋柱花(B)、椭圆叶花锚(C)和肋柱花(D)不同部位样品溶液的色谱图(1．全草;2．花;3．茎;4．叶)
Figure 2 Chromatograms of sample solution of different parts of Gentiana veitchiorum(A)，Lomatogonium thomsonii(B)，Halenia elliptica(C)
and Lomatogonium rotatum(D)(1． whole plants;2． flowers;3． stems;4． leaves)
2 讨论
以不同比例的甲醇 －水及不同浓度的冰乙酸为
流动相进行梯度洗脱时，在文中流动相系统下，样品
中獐牙菜苦苷、獐牙菜苷及龙胆苦苷的色谱峰与共
存峰完全达到基线分离，且峰形较好。4 种样品分
别来自龙胆科不同属，由图 4 可见:4 种样品的有
效成分及含量均有较大差异。龙胆苦苷仅存在于
蓝玉簪龙胆中，而獐牙菜苦苷、獐牙菜苷在蓝玉簪
龙胆中的含量远远小于肋柱花和铺散肋柱花中的
含量。因此，3 个环烯醚萜苷类成分可以作为区分
龙胆科不同属植物化学成分的标志成分，可为植
物化学分类学提供依据。文中建立的 HPLC 方法
简单、准确、快速，可为龙胆类药材质量标准的建
立提供参考。
参考文献:
［1］ 蒂玛尔·丹增彭措．晶珠本草［M］．上海:上海科学技术出版
社，1988:79 － 181．
［2］ 钟国跃，王昌华，刘翔，等．常用藏药“蒂达(藏茵陈)”的资源
与使用现状调查［J］．世界科学技术(中医药现代化)，2010，
12(1) :122 － 124．
［3］ Mustafa AM，Caprioli G，Ｒicciutelli M，et al． Comparative HPLC /
ESI － MS and HPLC /DAD study of different populations of culti-
vated，wild and commercial Gentiana lutea L．［J］． Food Chemis-
try，2015，174(1) :426 － 433．
［4］ Hosokawa K，Fukushi E，Kawabata J，et al． Seven acylated antho-
cyanins in blue flowers of Gentiana［J］． Phytochemistry，1997，45
(1) :167 － 171．
［5］ 邹琼宇，梁健，廖循，等． 蓝玉簪龙胆的化学成分研究［J］．华
西药学杂志，2010，25(5):512 － 514．
［6］ 宋萍，康志强，于军． ＲP － HPLC测定藏药川西獐芽菜中的龙
胆苦苷［J］．华西药学杂志，2007，22(5):564 － 565．
收稿日期:2015 － 04 － 07
615 华 西 药 学 杂 志 第 31 卷