全 文 ：收稿日期：２０１３－１１－０７
基金项目：教育部“春晖计划”资助项目（Ｚ２０１１００９）；青海省科技厅资助项目（２０１２－Ｚ－７１２）
作者简介：杨君丽（１９６２－），女，山西寿义人，研究员，研究方向为植物病理学．Ｅ－ｍａｉｌ：ｑｈｄｘｙａｎｇｊｕｎｌｉ＠１６３．ｃｏｍ
＊通讯作者：Ｅ－ｍａｉｌ：ｄｏｎｇｈｕｉｚｅ＠１２６．ｃｏｍ
纳米Ｃｕ２Ｏ原药与悬浮液对菜瓜灰霉
病菌的抑制作用
杨君丽，董汇泽＊
（青海大学，青海 西宁　８１００１６）
摘　要：　为比较纳米Ｃｕ２Ｏ原药与悬浮液对菜瓜灰霉病菌的抑制作用，研究采用含药培养基法进
行了毒力测定．试验结果表明：同一质量浓度的纳米Ｃｕ２Ｏ悬浮液对菜瓜灰霉病菌的抑菌效果明显
优于纳米Ｃｕ２Ｏ原药，抑制作用与质量浓度呈正相关；毒力回归方程的相关系数分别为０．８９２　２和
０．９９６　１，纳米Ｃｕ２Ｏ原药与悬浮液对菜瓜灰霉病菌的有效中浓度ＥＣ５０分别为３　９４８．９ｍｇ／ｋｇ和
１６７．９ｍｇ／ｋｇ．因此纳米Ｃｕ２Ｏ原药对菜瓜灰霉病菌有一定的抑制作用，而纳米Ｃｕ２Ｏ悬浮液对菜瓜
灰霉病菌的抑制作用非常明显．
关键词：　纳米Ｃｕ２Ｏ；菜瓜灰霉病菌；抑制作用
中图分类号：　Ｑ５９９　　　文献标志码：　Ａ　　　文章编号：１００４－０３６６（２０１４）０２－０００６－０３
　　菜瓜是青海冬季日光温室中的主栽蔬菜品种之
一，而菜瓜灰霉病是对菜瓜比较严重的危害．据调查
菜瓜灰霉病严重度可达＋＋＋，会导致减产２０％～
４０％，严重时高达６０％以上，对菜瓜生产造成了较
大的损失［１，２］．长期使用一类化学药剂病菌易产生
抗药性，只有不断研发新型杀菌制剂，并采取杀菌剂
轮换使用才能提高药效、有效缓解病原真菌的抗药
性［３，４］．纳米Ｃｕ２Ｏ是一种新型的能被可见光激发的
Ｐ型氧化物半导体光催化材料，具有极强的吸附性
和良好的光催化活性，纳米材料与技术应用于病害
防治已有报道，且对辣椒疫霉菌、辣椒根腐病菌、番
茄早疫病菌具有良好的抑菌效果［５－８］．试验采用含药
培养基法进行毒力测定，比较研究了纳米Ｃｕ２Ｏ原
药与悬浮液对菜瓜灰霉病菌的抑制作用．
１　材料与方法
１．１　供试菌种
菜瓜灰霉病菌（Ｂｏｔｒｙｔｉｓ　ｃｉｎｅｒｅａ）由青海大学农
林科学院园艺所提供，并经过了致病性鉴定．
１．２　试验材料
氧化亚铜纳米粉，分子式：Ｃｕ２Ｏ，分子量：
１４３．０９，平均粒径２０～３０ｎｍ，２０１２年购于南京冠
业化工有限公司．十六烷基三甲基溴化铵，分子式：
ＣＨ３（ＣＨ２）１５Ｎ（ＣＨ３）３Ｂｒ，分子量：３６４．４５，规格为
分析纯，２０１２年购于西宁美达化玻仪器公司．
１．３　试验方法
（１）悬浮液的制备　Ｃｕ２Ｏ纳米粉与阳离子型
分散剂ＣＨ３（ＣＨ２）１５Ｎ（ＣＨ３）３Ｂｒ按１∶０．５比例直
接加入到去离子水中，乳化１５ｍｉｎ，采用常州国华
电器有限公司生产的 ＨＪ－６Ａ多头磁力加热搅拌器
（最大转速１　４００ｒ／ｍｉｎ）进行搅拌，将搅拌器转速置
于高档位搅拌６０ｍｉｎ，制备各不同质量浓度的纳米
Ｃｕ２Ｏ悬浮液．
（２）含药培养基的制备　参照方中达［９］的方法
配制ＰＤＡ培养基，按照悬浮液与培养基为１∶９的
容积比配制含药培养基．试验共设６个处理，含药培
养基中Ｃｕ２Ｏ纳米粉分别设５００ｍｇ／ｋｇ、４００ｍｇ／ｋｇ、
３００ｍｇ／ｋｇ、２００ｍｇ／ｋｇ、１００ｍｇ／ｋｇ　５个质量浓度，
以不加任何药剂为对照（ＣＫ），每个重复处理３次．
将培养好的菜瓜灰霉菌用无菌打孔器打成直径为
３ｍｍ的菌饼数枚待用，把配制好的含药培养基装在
第２６卷　第２期
２０１４年４月 　　　 　　　　　　　　　　　　　
甘肃 科 学 学 报
Ｊｏｕｒｎａｌ　ｏｆ　Ｇａｎｓｕ　Ｓｃｉｅｎｃｅｓ
　　　　　　　　　　　　　　　　
Ｖｏｌ．２６　Ｎｏ．２
Ａｐｒ．２０１４
DOI:10.16468/j.cnki.issn1004-0366.2014.02.005
三角瓶中高温灭菌３０ｍｉｎ，当温度降至约５０℃时
倒入平皿中，凝固后接入菌饼一枚．将培养皿置入上
海琅玕实验设备有限公司生产的ＳＰＸ－２５０－ＧＢ智能
型光照培养箱中培养，温度２５℃．
（３）数据的采集与统计　采用十字交叉法于第
５天（１２０ｈ）测量菌落直径，按照（菌落增长直径＝
菌落直径－菌饼直径）求出菌落增长直径，参照幕立
义［１０］的方法计算纳米Ｃｕ２Ｏ各质量浓度对菌丝生
长的抑制率．以药剂有效成分浓度对数值为自变量
（ｘ），抑制机率值为因变量（ｙ），计算出毒力回归方程
式和相关系数，再由毒力回归方程中，令ｙ＝５（即抑
制５０％的机率值），求出反常用对数ｘ即为ＥＣ５０值．
抑制率＝［（对照菌落增长直径－处理菌落
增长直径）／对照菌落增长直径］×１００％．
２　结果与分析
２．１　纳米Ｃｕ２Ｏ原药对灰霉病菌的抑制作用
将纳米Ｃｕ２Ｏ原药粉直接加入到培养基，当含
药培养基中纳米粉的质量浓度分别为１００ｍｇ／ｋｇ、
２００ｍｇ／ｋｇ、３００ｍｇ／ｋｇ、４００ｍｇ／ｋｇ、５００ｍｇ／ｋｇ时，
其对菜 瓜 灰 霉 病 菌 的 抑 制 率 分 别 为 ３．５１％、
７．０２％、１０．５３％、１２．２８％和１５．７９％（见表１）．
表１　纳米Ｃｕ２Ｏ原药对菜瓜灰霉病菌的抑制作用
Ｔａｂｌｅ　１　Ｉｎｈｉｂｉｔｏｒｙ　ｅｆｆｅｃｔｓ　ｏｆ　ｏｒｉｇｉｎａｌ　ｎａｎｏ－Ｃｕ２Ｏ　ｄｒｕｇ　ｏｎ　ｂｏｔｒｙｔｉｓ　ｃｉｎｅｒｅａ
质量浓度
／（ｍｇ·ｋｇ－１）
浓度对数ｘ
菌落平均
直径／ｍｍ
抑制率／％ 抑制机率ｙ
毒力回归式
ｙ＝ａ＋ｂｘ
相关系数ｒ
５００　 ２．６９９　 ４８　 １５．７９　 ３．９９７　３　 ｙ＝０．９１４　４＋１．１３６ｘ　 ０．９９６　１
４００　 ２．６０２　 ５０　 １２．２８　 ３．８３９　９
３００　 ２．４７７　 ５１　 １０．５３　 ３．７４６　４
２００　 ２．３０１　 ５３　 ７．０２　 ３．５２４　２
１００　 ２．０００　 ５５　 ３．５１　 ３．１８８　１
ＣＫ － ５７ － －
　　由表１的毒力回归方程ｙ＝０．９１４　４＋１．１３６ｘ
可知，当ｙ＝５时，ｘ＝３．５９６　５，有效中浓度ＥＣ５０值
为３　９４８．９ｍｇ／ｋｇ．纳米Ｃｕ２Ｏ原药对菜瓜灰霉病菌
有一定的抑制作用，但抑菌效果不明显．
２．２　纳米Ｃｕ２Ｏ悬浮液对灰霉病菌的抑制作用
将纳米Ｃｕ２Ｏ配制成悬浮液加入到培养基，当含
药培养基中纳米粉的质量浓度分别为１００ｍｇ／ｋｇ、
２００ｍｇ／ｋｇ、３００ｍｇ／ｋｇ、４００ｍｇ／ｋｇ、５００ｍｇ／ｋｇ时，
其对菜瓜灰霉病菌的抑制率分别为 １５．７９％、
７５．４４％、８２．４６％、８７．７２％和８９．４７％（见表２）．
由表２的毒力回归方程ｙ＝－２．０２３　９＋３．１５６　６ｘ
可知，当ｙ＝５时，ｘ＝２．２２５　１，有效中浓度ＥＣ５０值
为１６７．９ｍｇ／ｋｇ．纳米Ｃｕ２Ｏ悬浮液对菜瓜灰霉病菌
有明显的抑制作用，抑菌效果与纳米粉的质量浓度
表２　纳米Ｃｕ２Ｏ悬浮液对菜瓜灰霉病菌的抑制作用
Ｔａｂｌｅ　２　Ｉｎｈｉｂｉｔｏｒｙ　ｅｆｆｅｃｔｓ　ｏｆ　ｎａｎｏ－Ｃｕ２Ｏ　Ｓｕｓｐｅｎｓｉｏｎ　ｏｎ　ｂｏｔｒｙｔｉｓ　ｃｉｎｅｒｅａ
质量浓度
／（ｍｇ·ｋｇ－１）
浓度对数ｘ
菌落平均
直径／ｍｍ
抑制率／％ 抑制机率ｙ
毒力回归式
ｙ＝ａ＋ｂｘ
相关系数ｒ
５００　 ２．６９９　 ６　 ８９．４７　 ６．２５３　６ ｙ＝－２．０２３　９＋３．１５６　６ｘ ０．８９２　２
４００　 ２．６０２　 ７　 ８７．７２　 ６．１３５　９
３００　 ２．４７７　 １０　 ８２．４６　 ５．９３４　６
２００　 ２．３０１　 １４　 ７５．４４　 ５．６８７　１
１００　 ２．０００　 ４８　 １５．７９　 ３．９９７　３
ＣＫ － ５７ － －
呈正相关．
３　结论
纳米Ｃｕ２Ｏ原药对菜瓜灰霉病菌有一定的抑制
作用，纳米Ｃｕ２Ｏ悬浮液对菜瓜灰霉病菌有非常明
显的抑制作用；同一质量浓度的纳米Ｃｕ２Ｏ悬浮液
对菜瓜灰霉病菌的抑菌效果明显优于纳米Ｃｕ２Ｏ原
药，当纳米Ｃｕ２Ｏ质量浓度为５００ｍｇ／ｋｇ时，悬浮液
与原药对菜瓜灰霉病菌抑制率分别为８９．４７％和
１５．７９％；抑制作用与质量浓度呈正相关，毒力回归
７第２６卷　　　　　　　　　　　　　　杨君丽等：纳米Ｃｕ２Ｏ原药与悬浮液对菜瓜灰霉病菌的抑制作用　　　　　　　　　　　　　　
方程的相关系数分别为０．８９２　２和０．９９６　１，纳米
Ｃｕ２Ｏ悬浮液与原药对菜瓜灰霉病菌的有效中浓度
ＥＣ５０值分别为１６７．９ｍｇ／ｋｇ和３　９４８．９ｍｇ／ｋｇ，表
明纳米Ｃｕ２Ｏ悬浮液对菜瓜灰霉病菌的抑制能力是
纳米Ｃｕ２Ｏ原药对菜瓜灰霉病菌的２３．５倍．
含药培养基中纳米Ｃｕ２Ｏ以悬浮液加入和原药
粉直接加入，同一质量浓度的抑菌效果有显著差异．
将纳米Ｃｕ２Ｏ配制成悬浮液来抑制植物病原真菌，
可以充分发挥和利用纳米材料与技术的特性及功
能，同时提高药效降低用药量，这将成为新型农药杀
菌制剂开发研制的重要发展方向．
参考文献：
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２０１２，４１（２）：３８－４０．
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农林科技，２００２，３１（１）：２６－２８．
［３］　于永学，王英姿．灰霉病菌抗药性发生概况及机理研究进展
［Ｊ］．现代农业科技，２００９，３７（１１）：１１７－１１８．
［４］　纪明山，齐文秋，王英姿，等．番茄灰霉病菌对嘧霉胺的抗药
性［Ｊ］．植物保护学报，２００３，３０（４）：３９６－４００．
［５］　刘吉平．纳米科学与技术［Ｍ］．北京：科学出版社，２００２．
［６］　罗元香，汪信，陆路德，等．纳米Ｃｕ２Ｏ的制备及应用研究进展
［Ｊ］．上海化工，２００３，３１（２）：２４－２８．
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腐病菌的抑制作用［Ｊ］．中国蔬菜，２０１２，３１（６）：７９－８１．
［８］　姜华，董汇泽，杨君丽，等．纳米Ｃｕ２Ｏ对番茄早疫病菌的抑制
作用研究［Ｊ］．北方园艺，２０１３，３６（８）：１２５－１２６．
［９］　方中达．植病研究方法［Ｍ］．第３版．北京：中国农业出版社，
２００７．
［１０］　幕立义．植物化学保护研究方法［Ｍ］．北京：中国农业出版社，
１９９４．
Ｉｎｈｉｂｉｔｏｒｙ　Ｅｆｆｅｃｔｓ　ｏｆ　Ｏｒｉｇｉｎａｌ　Ｎａｎｏ－Ｃｕ２Ｏ　Ｄｒｕｇ　ａｎｄ　Ｎａｎｏ－Ｃｕ２Ｏ
Ｓｕｓｐｅｎｓｉｏｎ　ｏｎ　Ｓｎａｋｅ　Ｍｅｌｏｎ　Ｂｏｔｒｙｔｉｓ　Ｃｉｎｅｒｅａ
ＹＡＮＧ　Ｊｕｎ－ｌｉ，ＤＯＮＧ　Ｈｕｉ－ｚｅ＊
（Ｑｉｎｇｈａｉ　Ｕｎｉｖｅｒｓｉｔｙ，Ｘｉｎｉｎｇ８１００１６，Ｃｈｉｎａ）
Ａｂｓｔｒａｃｔ：　Ｔｈｅ　ｄｒｕｇ－ｃｏｎｔａｉｎｉｎｇ　ｃｕｌｔｕｒｅ　ｍｅｄｉｕｍ　ｍｅｔｈｏｄ　ｆｏｒ　ｔｈｅ　ｔｅｓｔ　ｏｆ　ｔｏｘｉｃｉｔｙ　ｗａｓ　ａｄｏｐｔｅｄ　ｔｏ　ｃｏｍｐａｒｅ　ｉｎ－
ｈｉｂｉｔｉｖｅ　ｅｆｆｅｃｔｓ　ｏｆ　ｏｒｉｇｉｎａｌ　ｎａｎｏ－Ｃｕ２Ｏ　ｄｒｕｇ　ａｎｄ　ｎａｎｏ－Ｃｕ２Ｏ　ｓｕｓｐｅｎｓｉｏｎ　ｏｎ　ｓｎａｋｅ　ｍｅｌｏｎ　Ｂｏｔｒｙｔｉｓ　ｃｉｎｅｒｅａ．Ｔｈｅ
ｒｅｓｕｌｔｓ　ｓｈｏｗ　ｔｈａｔ　ｎａｎｏ－Ｃｕ２Ｏ　ｓｕｓｐｅｎｓｉｏｎ　ｈａｓ　ｂｅｔｔｅｒ　ｉｎｈｉｂｉｔｉｖｅ　ｅｆｆｅｃｔｓ　ｏｎ　ｓｎａｋｅ　ｍｅｌｏｎ　Ｂｏｔｒｙｔｉｓ　ｃｉｎｅｒｅａ　ｔｈａｎ
ｏｒｉｇｉｎａｌ　ｎａｎｏ－Ｃｕ２Ｏ　ｄｒｕｇ　ｗｉｔｈ　ｔｈｅ　ｓａｍｅ　ｍａｓｓ　ｃｏｎｃｅｎｔｒａｔｉｏｎ，ａｎｄ　ｉｎｈｉｂｉｔｏｒｙ　ｅｆｆｅｃｔｓ　ａｒｅ　ｐｏｓｉｔｉｖｅｌｙ　ｃｏｒｒｅｌａｔｅｄ
ｗｉｔｈ　ｃｏｎｃｅｎｔｒａｔｉｏｎ；ｃｏｒｒｅｌａｔｉｏｎ　ｃｏｅｆｆｉｃｉｅｎｔｓ　ｏｆ　ｔｈｅ　ｔｏｘｉｃｉｔｙ　ｒｅｇｒｅｓｓｉｏｎ　ｅｑｕａｔｉｏｎ　ａｒｅ　０．８９２　２ａｎｄ　０．９９６　１，ｅｆ－
ｆｅｃｔｉｖｅ　ｃｏｎｃｅｎｔｒａｔｉｏｎ　ＥＣ５０ｏｆ　ｏｒｉｇｉｎａｌ　ｎａｎｏ－Ｃｕ２Ｏ　ｄｒｕｇ　ａｎｄ　ｔｈａｔ　ｏｆ　ｎａｎｏ－Ｃｕ２Ｏ　ｓｕｓｐｅｎｓｉｏｎ　ａｒｅ　３　９４８．９ｍｇ／ｋｇ　ａｎｄ
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ｈｉｂｉｔｉｏｎ　ｏｆ　ｎａｎｏ－Ｃｕ２Ｏ　ｓｕｓｐｅｎｓｉｏｎ　ｉｓ　ｍｏｒｅ　ｏｂｖｉｏｕｓ．
Ｋｅｙ　ｗｏｒｄｓ：　Ｎａｎｏ－Ｃｕ２Ｏ；Ｓｎａｋｅ　ｍｅｌｏｎ　Ｂｏｔｒｙｔｉｓ　ｃｉｎｅｒｅａ；Ｉｎｈｉｂｉｔｏｒｙ　ｅｆｆｅｃｔｓ
８　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　甘 肃 科 学 学 报　　　　　　　　　　　　　　　　　２０１４年　第２期