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紫外分光光度法测定当归藤中儿茶素含量



全 文 :紫外分光光度法测定当归藤中儿茶素含量
管海波,银小玲,覃江克,梁 敏,杨瑞云*
(广西师范大学药用资源化学与药物分子工程教育部重点实验室,广西桂林 541004)
摘要 [目的]建立当归藤中儿茶素含量的测定方法。[方法]利用紫外分光光度法,在检测波长 280 nm处测定样品吸光度,计算儿茶素
含量。[结果]儿茶素对照品在0. 007 81 ~0. 046 86 mg /ml浓度范围内与吸光度呈良好的线性关系(r =0. 999 2),平均回收率为98. 72%,
RSD值为 0. 09%(n =5)。当归藤样品中儿茶素平均含量为 2. 88%。[结论]该方法简单、快捷、准确,可用于当归藤中儿茶素的质量
控制。
关键词 当归藤;儿茶素;紫外分光光度法
中图分类号 O657. 3 文献标识码 A 文章编号 0517 -6611(2011)18 -10854 -02
Determination of Catechin in Embelia parviflora Wall. by UV Spectrophotometry
GUAN Hai-bo et al (Key Laboratory for Chemistry and Molecular Engineering of Medicinal Resources,Ministry of Education of China,Guan-
gxi Normal University,Guilin,Guangxi 541004)
Abstract [Objective]To establish a method for the content determination of catechin in Embelia parviflora Wall. .[Methods]UV Spectropho-
tometry was adopted to determine content of catechin with the detection wavelength of 280 nm.[Results]The absorbance and concentration of cat-
echin showed a good linear relationship when the concentration ranged from 0. 007 81 to 0. 046 86 mg /ml (r =0. 999 2)with average recovery of
98. 72% and RSD value of 0. 09%(n = 5). Mean content of catechin in Embelia parviflora Wall. was 2. 88% .[Conclusion]This method which
was simple,rapid and accurate,could be used to the quality control of catechin in Embelia parviflora Wall. .
Key words Embelia parviflora Wall.;Catechin;UV Spectrophotometry
基金项目 973 计划前期研究专项(2007CB516805) ;广西科技厅应用
基础研究(桂科基 0731050) ;药用资源化学与药物分子工程
教育部重点实验室主任基金(桂科能 0630006 - 5D08) ;广
西自然科学基金创新团队项目资助(2010GXNSFF013001)。
作者简介 管海波(1984 - ) ,男,安徽蚌埠人,在读硕士,研究方向:天
然有机化学。* 通讯作者,副教授,博士,硕士生导师,E-
mail:yang_rui_yun@ 163. com。
收稿日期 2011-03-14
当归藤(Embelia parviflora Wall.)系紫金牛科酸藤子属
植物,别名小花酸藤子、筛其蔃、大力王,主要分布在广西、广
东、浙江、福建、西藏、贵州、云南等地[1]。其根与藤供药用,
用于治疗月经不调、闭经、白带、萎黄病、不孕症等妇科疾病,
有当归的作用,因此得名;此外亦用于贫血、跌打损伤、骨折
等症状[2 -3]。笔者在对当归藤化学成分的研究过程中,分离
得到大量的儿茶素。儿茶素具有抑菌、消炎、抑制肿瘤、抗氧
化、抗衰老、抗畸变、降血压、降血脂、降血糖、防辐射等多种
保健功能[4 -5],作为健康食品、天然化妆品的添加剂及抗氧
化保鲜剂,其已在食品、医药、化工等领域得到广泛应用。目
前,对当归藤中儿茶素含量测定的研究尚未见报道。检测儿
茶素的主要方法为高效液相色谱法(HPLC)[6 -8],笔者利用
紫外分光光度法测定当归藤中儿茶素的含量,以期为当归藤
的开发和应用提供有价值的参考。
1 材料与方法
1. 1 材料
1. 1. 1 研究对象。当归藤,2009年 7 月购于桂林药材市场,
自然风干后在 60 ℃真空干燥箱中干燥至恒重,粉碎,备用。
1. 1. 2 主要试剂。儿茶素对照品(纯度 > 98%) ,自制;其他
试剂均为国产市售分析纯。
1. 1. 3 主要仪器。TU-1901双光束紫外可见分光光度计(北
京普析通仪器有限公司) ;BS124S型电子天平(赛多利斯(北
京)科学有限公司) ;R-1001型旋转蒸发仪(郑州长城科工贸
有限公司) ;DZF-1B型真空干燥箱(上海跃进医疗器械厂)。
1. 2 方法
1. 2. 1 对照品品溶液的制备。精确称取干燥至恒重的儿茶
素标准品 7. 81 mg,用无水乙醇溶解,并定容至 100 ml的容量
瓶中,即得到浓度为 0. 078 1 mg /ml的儿茶素对照品溶液。
1. 2. 2 供试品溶液的制备。准确称取干燥至恒重的当归藤
粗粉 1. 000 0 g,加入 15. 0 ml 80%乙醇溶液,在 70 ℃水浴中
提取 30 min,冷却,将提取液过滤减压浓缩,用无水乙醇定容
至 50 ml。精密量取一定量的样品液于 10 ml的容量瓶中,用
无水乙醇定容,摇匀,即得供试品溶液。
1. 2. 3 方法学考察。
1. 2. 3. 1 测定波长的选择。精密量取儿茶素对照品溶液
2. 0 ml于 10 ml容量瓶中,用无水乙醇定容。用无水乙醇作
对照,于紫外可见分光光度计上在 200 ~ 600 nm波长范围内
进行扫描,确定最大吸收波长。
1. 2. 3. 2 线性关系考察。分别精密吸取 0. 078 1 mg /ml 的
儿茶素对照品溶液 1. 0、2. 0、3. 0、4. 0、5. 0、6. 0 ml 置于 10 ml
容量瓶中,用无水乙醇定容至,摇匀,以无水乙醇作对照,分
别测定各对照品溶液的吸光度。以儿茶素对照品浓度(x)为
横坐标,吸光度(y)为纵坐标绘制标准曲线,考察线性关系。
1. 2. 3. 3 稳定性试验。取同一供试品溶液,分别在室温下
于第 0、2、4、6、8、12、24 h后测定吸光度,计算吸光度相对标
准偏差(RSD)值。
1. 2. 3. 4 精密度试验[9]。精密吸取儿茶素对照品溶液 3. 0
ml于 10 ml容量瓶中,用无水乙醇定容,测定其吸光度值,重
复 5次,计算吸光度 RSD值。
1. 2. 3. 5 加样回收率试验。采用加样回收法[10]。精密量取
5份已知浓度的当归藤提取液 5. 0 ml,分别加入已知浓度的
儿茶素对照品溶液,摇匀,测定吸光度,计算回收率及
RSD值。
1. 2. 4 儿茶素含量测定。准确称取当归藤粗粉 5 份,按
“1. 2. 2”项下方法分别配制成供试品溶液,测定其吸光度,并
责任编辑 刘群燕 责任校对 傅真治安徽农业科学,Journal of Anhui Agri. Sci. 2011,39(18):10854 - 10855
DOI:10.13989/j.cnki.0517-6611.2011.18.033
计算儿茶素的含量。
2 结果与分析
2. 1 方法学考察结果
2. 1. 1 检测波长。结果表明,样品在 280 nm波长处有最大
吸收,因此确定检测波长为 280 nm。
2. 1. 2 线性关系。得到线性回归方程:y = 10. 916 4 1x +
0. 006 6,相关系数 r =0. 999 2。结果表明儿茶素对照品溶液
在 0. 007 81 ~0. 046 86 mg /ml 浓度范围内,吸光度与浓度呈
良好的线性关系(图 1)。
图 1 儿茶素标准曲线
Fig. 1 Standard curve of catechin
2. 1. 3 稳定性。吸光度 RSD值为 1. 25%,表明样品在 24 h
内稳定。
2. 1. 4 精密度。5 次测定的吸光度分别为 0. 269、0. 270、
0. 268、0. 271、0. 266,RSD值为 0. 72%(n = 5) ,表明方法精密
度良好。
表 1 儿茶素含量测定结果(n =5)
Table 1 Determination results of catechin content
样品号
Sample No.
质量
Weight∥g
含量
Content∥%
均值
Average∥%
RSD
%
1 1. 000 5 2. 88
2 1. 000 8 2. 89
3 1. 000 4 2. 88 2. 88 1. 11
4 1. 000 9 2. 89
5 1. 000 7 2. 88
2. 1. 5 回收率。结果表明,平均加样回收率为 98. 72%,RSD
值为 0. 09%(n =5)。
2. 2 儿茶素含量测定 由表 1 可知,当归藤中儿茶素平均
含量为 2. 88%。
3 结论与讨论
结果表明,采用紫外分光光度法测定当归藤中儿茶素的
含量,对照品和供试品溶液在 280 nm波长处有最大吸收,故
选择该波长作为儿茶素含量的测定波长;在 0. 007 81 ~
0. 046 86 mg /ml浓度范围内,儿茶素对照品线性关系良好(r
=0. 999 2) ;平均回收率为 98. 72%,RSD值为 0. 09%。分光
光度法简便、快速、准确,测定结果稳定可靠,可作为测定当
归藤中儿茶素含量的一种有效方法。
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19089.
(上接第 10853页)
标准(45. 000 %) ;阿魏酸含量分别为 0. 053%和 0. 050%,稍
低于岷县道地当归(0. 055%) ,但均达到了《中国药典》(2005
版)标准(0. 050%) ;多糖含量分别为 24. 700%、20. 300%,甘
肃岷县产道地当归多糖含量为 25. 500%。
在大别山区海拔1 000 m以上的地区栽培的当归质量符
合《中国药典》标准,且在烂泥滩生长的当归Ⅰ质量好于在试
验地生长的当归Ⅱ,表明当归更适宜于在生地栽培。因此可
以在大别山地区扩大当归的引种栽培以满足市场的需求,但
在种植区域的选择上既要考虑海拔因素的影响,也要考察土
壤情况的影响,最好选择没有种植过其他作物的生地,以提
高当归的品质。
参考文献
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