全 文 :紫外分光光度法测定当归藤中儿茶素含量
管海波,银小玲,覃江克,梁 敏,杨瑞云*
(广西师范大学药用资源化学与药物分子工程教育部重点实验室,广西桂林 541004)
摘要 [目的]建立当归藤中儿茶素含量的测定方法。[方法]利用紫外分光光度法,在检测波长 280 nm处测定样品吸光度,计算儿茶素
含量。[结果]儿茶素对照品在0. 007 81 ~0. 046 86 mg /ml浓度范围内与吸光度呈良好的线性关系(r =0. 999 2),平均回收率为98. 72%,
RSD值为 0. 09%(n =5)。当归藤样品中儿茶素平均含量为 2. 88%。[结论]该方法简单、快捷、准确,可用于当归藤中儿茶素的质量
控制。
关键词 当归藤;儿茶素;紫外分光光度法
中图分类号 O657. 3 文献标识码 A 文章编号 0517 -6611(2011)18 -10854 -02
Determination of Catechin in Embelia parviflora Wall. by UV Spectrophotometry
GUAN Hai-bo et al (Key Laboratory for Chemistry and Molecular Engineering of Medicinal Resources,Ministry of Education of China,Guan-
gxi Normal University,Guilin,Guangxi 541004)
Abstract [Objective]To establish a method for the content determination of catechin in Embelia parviflora Wall. .[Methods]UV Spectropho-
tometry was adopted to determine content of catechin with the detection wavelength of 280 nm.[Results]The absorbance and concentration of cat-
echin showed a good linear relationship when the concentration ranged from 0. 007 81 to 0. 046 86 mg /ml (r =0. 999 2)with average recovery of
98. 72% and RSD value of 0. 09%(n = 5). Mean content of catechin in Embelia parviflora Wall. was 2. 88% .[Conclusion]This method which
was simple,rapid and accurate,could be used to the quality control of catechin in Embelia parviflora Wall. .
Key words Embelia parviflora Wall.;Catechin;UV Spectrophotometry
基金项目 973 计划前期研究专项(2007CB516805) ;广西科技厅应用
基础研究(桂科基 0731050) ;药用资源化学与药物分子工程
教育部重点实验室主任基金(桂科能 0630006 - 5D08) ;广
西自然科学基金创新团队项目资助(2010GXNSFF013001)。
作者简介 管海波(1984 - ) ,男,安徽蚌埠人,在读硕士,研究方向:天
然有机化学。* 通讯作者,副教授,博士,硕士生导师,E-
mail:yang_rui_yun@ 163. com。
收稿日期 2011-03-14
当归藤(Embelia parviflora Wall.)系紫金牛科酸藤子属
植物,别名小花酸藤子、筛其蔃、大力王,主要分布在广西、广
东、浙江、福建、西藏、贵州、云南等地[1]。其根与藤供药用,
用于治疗月经不调、闭经、白带、萎黄病、不孕症等妇科疾病,
有当归的作用,因此得名;此外亦用于贫血、跌打损伤、骨折
等症状[2 -3]。笔者在对当归藤化学成分的研究过程中,分离
得到大量的儿茶素。儿茶素具有抑菌、消炎、抑制肿瘤、抗氧
化、抗衰老、抗畸变、降血压、降血脂、降血糖、防辐射等多种
保健功能[4 -5],作为健康食品、天然化妆品的添加剂及抗氧
化保鲜剂,其已在食品、医药、化工等领域得到广泛应用。目
前,对当归藤中儿茶素含量测定的研究尚未见报道。检测儿
茶素的主要方法为高效液相色谱法(HPLC)[6 -8],笔者利用
紫外分光光度法测定当归藤中儿茶素的含量,以期为当归藤
的开发和应用提供有价值的参考。
1 材料与方法
1. 1 材料
1. 1. 1 研究对象。当归藤,2009年 7 月购于桂林药材市场,
自然风干后在 60 ℃真空干燥箱中干燥至恒重,粉碎,备用。
1. 1. 2 主要试剂。儿茶素对照品(纯度 > 98%) ,自制;其他
试剂均为国产市售分析纯。
1. 1. 3 主要仪器。TU-1901双光束紫外可见分光光度计(北
京普析通仪器有限公司) ;BS124S型电子天平(赛多利斯(北
京)科学有限公司) ;R-1001型旋转蒸发仪(郑州长城科工贸
有限公司) ;DZF-1B型真空干燥箱(上海跃进医疗器械厂)。
1. 2 方法
1. 2. 1 对照品品溶液的制备。精确称取干燥至恒重的儿茶
素标准品 7. 81 mg,用无水乙醇溶解,并定容至 100 ml的容量
瓶中,即得到浓度为 0. 078 1 mg /ml的儿茶素对照品溶液。
1. 2. 2 供试品溶液的制备。准确称取干燥至恒重的当归藤
粗粉 1. 000 0 g,加入 15. 0 ml 80%乙醇溶液,在 70 ℃水浴中
提取 30 min,冷却,将提取液过滤减压浓缩,用无水乙醇定容
至 50 ml。精密量取一定量的样品液于 10 ml的容量瓶中,用
无水乙醇定容,摇匀,即得供试品溶液。
1. 2. 3 方法学考察。
1. 2. 3. 1 测定波长的选择。精密量取儿茶素对照品溶液
2. 0 ml于 10 ml容量瓶中,用无水乙醇定容。用无水乙醇作
对照,于紫外可见分光光度计上在 200 ~ 600 nm波长范围内
进行扫描,确定最大吸收波长。
1. 2. 3. 2 线性关系考察。分别精密吸取 0. 078 1 mg /ml 的
儿茶素对照品溶液 1. 0、2. 0、3. 0、4. 0、5. 0、6. 0 ml 置于 10 ml
容量瓶中,用无水乙醇定容至,摇匀,以无水乙醇作对照,分
别测定各对照品溶液的吸光度。以儿茶素对照品浓度(x)为
横坐标,吸光度(y)为纵坐标绘制标准曲线,考察线性关系。
1. 2. 3. 3 稳定性试验。取同一供试品溶液,分别在室温下
于第 0、2、4、6、8、12、24 h后测定吸光度,计算吸光度相对标
准偏差(RSD)值。
1. 2. 3. 4 精密度试验[9]。精密吸取儿茶素对照品溶液 3. 0
ml于 10 ml容量瓶中,用无水乙醇定容,测定其吸光度值,重
复 5次,计算吸光度 RSD值。
1. 2. 3. 5 加样回收率试验。采用加样回收法[10]。精密量取
5份已知浓度的当归藤提取液 5. 0 ml,分别加入已知浓度的
儿茶素对照品溶液,摇匀,测定吸光度,计算回收率及
RSD值。
1. 2. 4 儿茶素含量测定。准确称取当归藤粗粉 5 份,按
“1. 2. 2”项下方法分别配制成供试品溶液,测定其吸光度,并
责任编辑 刘群燕 责任校对 傅真治安徽农业科学,Journal of Anhui Agri. Sci. 2011,39(18):10854 - 10855
DOI:10.13989/j.cnki.0517-6611.2011.18.033
计算儿茶素的含量。
2 结果与分析
2. 1 方法学考察结果
2. 1. 1 检测波长。结果表明,样品在 280 nm波长处有最大
吸收,因此确定检测波长为 280 nm。
2. 1. 2 线性关系。得到线性回归方程:y = 10. 916 4 1x +
0. 006 6,相关系数 r =0. 999 2。结果表明儿茶素对照品溶液
在 0. 007 81 ~0. 046 86 mg /ml 浓度范围内,吸光度与浓度呈
良好的线性关系(图 1)。
图 1 儿茶素标准曲线
Fig. 1 Standard curve of catechin
2. 1. 3 稳定性。吸光度 RSD值为 1. 25%,表明样品在 24 h
内稳定。
2. 1. 4 精密度。5 次测定的吸光度分别为 0. 269、0. 270、
0. 268、0. 271、0. 266,RSD值为 0. 72%(n = 5) ,表明方法精密
度良好。
表 1 儿茶素含量测定结果(n =5)
Table 1 Determination results of catechin content
样品号
Sample No.
质量
Weight∥g
含量
Content∥%
均值
Average∥%
RSD
%
1 1. 000 5 2. 88
2 1. 000 8 2. 89
3 1. 000 4 2. 88 2. 88 1. 11
4 1. 000 9 2. 89
5 1. 000 7 2. 88
2. 1. 5 回收率。结果表明,平均加样回收率为 98. 72%,RSD
值为 0. 09%(n =5)。
2. 2 儿茶素含量测定 由表 1 可知,当归藤中儿茶素平均
含量为 2. 88%。
3 结论与讨论
结果表明,采用紫外分光光度法测定当归藤中儿茶素的
含量,对照品和供试品溶液在 280 nm波长处有最大吸收,故
选择该波长作为儿茶素含量的测定波长;在 0. 007 81 ~
0. 046 86 mg /ml浓度范围内,儿茶素对照品线性关系良好(r
=0. 999 2) ;平均回收率为 98. 72%,RSD值为 0. 09%。分光
光度法简便、快速、准确,测定结果稳定可靠,可作为测定当
归藤中儿茶素含量的一种有效方法。
参考文献
[1]陈家源,卢文杰,王雪芬,等.小花酸藤子化学成分的研究[J].华西药
学杂志,1998,13(2):95 -96.
[2]江苏新医学院.中药大辞典:下册[M].上海:上海科学技术出版社,
1977:879.
[3]江苏植物研究所.新华本草纲要:第一册[M].上海:上海科学技术出版
社,1988:389.
[4]陈镱文,陈开勋.薄层扫描法测定酯型儿茶素的含量[J].西北大学学
报:自然科学版,2005,35(6):751 -753.
[5]杜晓,李宁,周茹娟,等.植物中分离的儿茶素类及其聚合物的抑菌作
用[J].四川农业大学学报,2005,23(3):374 -378.
[6]张丹,曹维国.高效液相色谱法测定大花红景天中没食子酸、红景天苷
及儿茶素的含量[J].时珍国医国药,2009,20(9):2237 -2238.
[7]栾娜,常平,庄丽影,等.锁阳中儿茶素的富集及含量测定[J].安徽农
业科学,2010,38(20):10644 -10645.
[8]徐晓明,徐大勇,纪晓芳,等. HPLC法测定复方儿茶胶囊中儿茶素的含
量[J].中国中医药咨询,2010,2(2):49.
[9]车京梅,马超,金莉莉,等.紫外分光光度法测定水红花子中槲皮素的
含量[J].时珍国医国药,2006,17(3):369.
[10]郑湘娟,余淑娴,徐晓芳,等.紫外分光光度法测定虎杖中白藜芦醇的
含量[J].时珍国医国药,2008,19(8):1881 -1882.
[11]吴警,刘春莹,郭久宁,等.绿茶和发酵茶的茶多酚组成比较[J].安徽
农业科学,2011,39(9):5343 -5345,5419.
[12]朱云芬,陈宽维,葛庆联,等.比色法测定鸡蛋中苏丹红残留的研究
[J].江西农业学报,2010(5):125 -127.
[13]王佩华,赵大伟.茶多酚在食品工业中的应用[J].安徽农业科学,
2010,38(33):19075 -19076,
檪檪檪檪檪檪檪檪檪檪檪檪檪檪檪檪檪檪檪檪檪檪檪檪檪檪檪檪檪檪檪檪檪檪檪檪檪檪檪檪檪檪檪檪檪檪檪
19089.
(上接第 10853页)
标准(45. 000 %) ;阿魏酸含量分别为 0. 053%和 0. 050%,稍
低于岷县道地当归(0. 055%) ,但均达到了《中国药典》(2005
版)标准(0. 050%) ;多糖含量分别为 24. 700%、20. 300%,甘
肃岷县产道地当归多糖含量为 25. 500%。
在大别山区海拔1 000 m以上的地区栽培的当归质量符
合《中国药典》标准,且在烂泥滩生长的当归Ⅰ质量好于在试
验地生长的当归Ⅱ,表明当归更适宜于在生地栽培。因此可
以在大别山地区扩大当归的引种栽培以满足市场的需求,但
在种植区域的选择上既要考虑海拔因素的影响,也要考察土
壤情况的影响,最好选择没有种植过其他作物的生地,以提
高当归的品质。
参考文献
[1]国家药典委员会.中国药典:2005版一部[S].北京:化学工业出版社,
2005:89,附录56.
[2]欧仕益,包惠燕,蓝志东.阿魏酸及其衍生物的药理作用研究进展[J].
中药材,2001,24(3):220 -221.
[3]王凯平,张玉,戴立泉.当归多糖的研究与进展概况[J].中国药师,
2002,5(5):292.
[4]张中朋,肖年生,刘秀芬.当归药材出口现状及挑战[J].中国现代中
药,2009,11(1):39 -40.
[5]杨明君,郭忠贤,陈有清.苦荞引种试验[J].内蒙古农业科技,2006(2):
39 -40.
[6]谢楠,赵海明,刘贵波,等.河北低平原区饲用黑麦、小黑麦的引种筛选
试验[J].华北农学报,2006(S2):77 -80.
[7]左秀霞.天缘奇葡萄在辽宁阜新的引种表现[J].内蒙古农业科技,2006
(2):57,59.
[8]符秀梅,韩淑梅,朱红林,等.一种有效的红树根部总 RNA 提取方法
[J].华北农学报,2009(S2):13 -15.
[9]杨强胜,唐晓蓉,邬晓红,等.金叶莸在包头地区的引种栽培[J].内蒙
古农业科技,2006 (6):63 -64.
[10]雷玲,王红霞,张志华,等.河北核桃叶片DNA提取方法的比较[J].华
北农学报,2010(2):145 -148.
5580139 卷 18 期 管海波等 紫外分光光度法测定当归藤中儿茶素含量