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糯米香茶的生物活性研究



全 文 :食品研究与开发2009 年 3 月第 30 卷第 3 期
糯米香茶,又名巍山香科科(Teucriummanghuaense
Sun ex S. Ghow),属唇形科香科科属多年生草本植物[1]。
原产于我国云南省的景洪、临沧等地,从 1992 年开始
在海南省的多处开始引种 [2]。 糯米香茶是一种名贵的
天然保健茶,全株芳香油含量在 0.7 %~4 %之间,含香
草醇多种芳香成分和对人体有益的氨基酸。 除可供调
配香精,亦可作茶叶配料,香气清雅,滋味醇正爽口,并
且有独特的糯米清香。 糯米香茶具有清热解毒、 养颜
抗衰、补肾健胃的功效,是理想的天然饮料,被誉为“美
容茶”[3]。 为了深入地开发糯米香茶的利用价值,对其
乙醇提取物进行了抗氧化和抗肿瘤的生物活性研究,
以期为开发新的保健食品资源和其进一步深入研究
提供理论依据。
1 材料、试剂与仪器
1.1 材料
糯米香茶叶采自中国热带农业科学院香料饮料
研究所兴隆植物园,采集时间 2007年 8月。 叶经阴干
后,过 40目筛,备用。
1.2 试剂与仪器
小鼠白血病细胞株(L1210):中国科学院上海细
胞研究所;人结肠癌细胞株(LOVO):上海交通大学药
理研究室惠赠;DPPH:Sigma 公司; 二甲基四氮唑盐
(MTT):Sigma公司;VC: 上海源聚生物科技有限公司;
甲氨喋呤(Methotrexate,MTX):上海华联制药有限公
司; 其他试剂为国产分析纯;Beckman Coulter DU 800
型紫外可见分光光度计。
2 方法
2.1 提取方法
称取 500 g 经粉碎的糯米香茶叶,用 3 倍量 95 %
乙醇加热回流提取 3次,过滤,合并滤液。 真空浓缩至
浸膏,保存于 4℃冰箱内待用。
2.2 抗氧化能力的测定方法
2.2.1 DPPH自由基清除率的测定
吸取浓度为 1 g/L 的提取物甲醇溶液 0.6、0.8、1.0、
尹桂豪 1,章程辉 1,史海明 2,李晓波 2
(1.中国热带农业科学院分析测试中心,海南 海口 571101;2.上海交通大学 药学院,上海 200240)
糯米香茶的生物活性研究
作者简介: 尹桂豪(1975—),男(汉),工程师,学士,研究方向:食品
安全及分析。
STUDY ON THE BIOLOGICAL ACTIVITIES OF ETHANOL EXTRACT OF TEUCRIUM MANGHUAENSE
YIN Gui-hao1, ZHANG Cheng-hui1, SHI Hai-ming 2, LI Xiao-bo2
(1. Analysis and Testing Center, Chinese Academy of Tropical Agricultural Sciences, Haikou 571101, Hainan, China;
2. School of Pharmacy, Shanghai Jiao Tong University, Shanghai 200240, China)
Abstract: Ethanol extract of Teucrium manghuaense was tested with DPPH and hydroxy radical model for
evaluation the anti-oxidation activities. The anti-tumor activities on L1210 and LOVO cells were tested by MTT
methods. Ethanol extract of Teucrium manghuaense showed significant anti-oxidation activities with IC50 values
as 0.22 g/L and 0.99 g/L, respectively. Ethanol extract of Teucrium manghuaense showed slightly anti-tumor
activities with IC50 values as 122.8 mg/L and 106.0 mg/L, respectively.
Key words: nuomixiangcha; Teucrium manghuaense; biological activities; anti-oxidation; anti-tumor
摘 要:利用 DPPH 和羟自由基模型来研究糯米香茶乙醇提取物的抗氧化活性。采用 MTT 法研究糯米香茶乙醇提取
物对 L1210 (小鼠白血病)和 LOVO (人类大肠癌)细胞的抑制活性。 结果表明糯米香茶乙醇提取物对 DPPH 和羟自由
基均有明显的清除作用,IC50值分别为 0.22 g/L 和 0.99 g/L。 糯米香茶乙醇提取物对 L1210 (小鼠白血病)和 LOVO (人
类大肠癌)细胞也有一定的抑制活性,IC50值分别为 122.8 mg/L 和 106.0 mg/L。
关键词:糯米香茶;巍山香科科;生物活性;抗氧化;抗肿瘤
科学研究
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食品研究与开发 2009 年 3 月第 30 卷第 3 期
1.5、2、 2.5、 3 mL, 分别加入 0.5 mL浓度为 2×10-4mol/L
的 DPPH溶液,再加入甲醇配成 4 mL 待测液,混匀,在
室温避光反应 0.5 h,在 517 nm下测定吸光度。DPPH自
由基清除率用以下方程式计算:清除率 = (1 - As /Ao) ×
100 %。 式中,As和 Ao分别为样品和对照品在 517 nm
下的吸光度[4]。
2.2.2 羟自由基清除能力的测定
移取 7.5×10-3 mol/L FeSO4 溶液,9×10-3 mol/L 水
杨酸-乙醇溶液,1 % H2O2各 1 mL,分别加入浓度为 1、
3、5、8、10、15 g/L 的提取物甲醇溶液 1 mL, 在 37 ℃水
浴中恒温反应 0.5 h, 然后在 510 nm 下测定吸光度 A。
羟自由基清除率用以下方程式计算:清除率= (1-As /Ao)
× 100%。 式中,As和 Ao分别为样品和对照品在 510 nm
下的吸光度[5]。
2.3 抗肿瘤活性的测定方法
肿瘤细胞株:L1210 (小鼠白血病)和 LOVO (人类
大肠癌)。
测试方法:改良 MTT 法 [6]。 取处于对数生长周期
的上述细胞,将细胞浓度调整为 105/mL~106/mL,加入
96 孔培养板,80 μL/孔。 阴性对照为等体积的 DMSO,
阳性对照为 MTX。 加样组及对照组均设 3 个复孔,每
块板均设 3 个空白对照孔(加 100 μL 培养基)。 样品
的终浓度为 100、20、4、0.8、0.16 mg/L。 细胞在 37 ℃,
5 % CO2 培养箱中分别孵育 48 h,加入 MTT(5 g/L),
20 μL/孔。 继续培养 4 h 后,加入三联液,100 μL/孔。
过夜后,在 590 nm 下测定各孔的 OD 值。 肿瘤细胞抑
制率用以下方程式计算:抑制率 = (1-加药孔的实际
OD 值/阴性对照孔的 OD 值) × 100 %。
3 结果与分析
3.1 糯米香茶乙醇提取物对 DPPH 自由基的消除作
用(见表 1)
从表 1 试验数据可知糯米香茶乙醇提取物对
DPPH 自由基有明显的清除作用, 在浓度为 0.15 g/L~
0.63 g/L 间其清除率与浓度间存在明显的量效关系,
IC50值为 0.22 g/L, 而阳性对照 VC在浓度为 1.0 g/L 时
清除率为 71.0 %。
3.2 糯米香茶乙醇提取物对羟自由基的清除作用(见
表 2)
从表 2试验数据可知糯米香茶乙醇提取物对羟自
由基有一定的清除作用,在浓度为 0.25 g/L~2.5 g/L间其
清除率与浓度间存在明显的量效关系, 其羟自由基清除
率有随着浓度先增大后减小的趋势,IC50值为0.99 g/L,而
阳性对照 VC在浓度为 1.0 g/L时自由基清除率为 97.5%。
3.3 糯米香茶乙醇提取物对肿瘤细胞的抑制作用(见
有 3)
从表 3 试验数据可知糯米香茶乙醇提取物对
L1210 (小鼠白血病)和 LOVO (人类大肠癌)细胞均有一
定的抑制作用,IC50值分别为 122.8 mg/L和 106.0 mg/L,
且在 10 mg/L~1 000 mg/L 间其抑制率与浓度间存在明
显的量效关系, 而阳性对照药甲氨喋呤的 IC50值分别
为 0.41 mg/L和 0.26 mg/L。
4 结论
随着人民生活水平的不断提高,保健食品受到老
百姓的日益重视。 近年来不少新的保健食品被开发出
来, 并具有多种良好的生物活性。 糯米香茶已在海南
省有一定的种植规模,并在民间作为香料和茶叶的重
要原料 [7]。 通过以上的试验结果证明了其具有抗氧化
和抗肿瘤活性,这为其作为保健食品提供了强有力的
理论依据, 因此糯米香茶具有极大的市场开发潜力。
本文涉及的工作只是糯米香茶活性成分研究的开始,
其活性物质的进一步分离纯化以及结构解析将有助
于人们更好地了解和利用这一植物资源。
参考文献:
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分册[M]. 北京:科学出版社, 1977:45-46
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(2):41-42
表 1 不同浓度糯米香茶乙醇提取物的 DPPH 自由基清除率
Table 1 The scavenging ratio of ethanol extract of Teucrium
manghuaense with different concentration on DPPH radical
g/L
0.15
33.0
0.20
49.6
0.25
55.1
0.38
78.7
样品浓度
Sample concentration
清除率
Scavenging ratio
0.50
83.6
0.63
93.6
VC (1.0 g/L)
71.0
表 2 不同浓度糯米香茶乙醇提取物的羟自由基清除率
Table 2 The scavenging ratio of ethanol extract of Teucrium
manghuaense with different concentration on hydroxyl radical
g/L
表 3 不同浓度糯米香茶乙醇提取物的肿瘤细胞抑制率
Table 3 The anti-tumor ratio of ethanol extract of Teucrium
manghuaense with different concentration
mg/L
注:“-”代表未见抑制活性。
0.25
24.5
0.73
39.3
1.25
59.6
2.0
67.7
样品浓度 Sample concentration
清除率 Scavenging ratio
2.5
85.2
3.73
55.2
VC (1.0 g/L)
97.5
10 mg/L
-
11.2
40 mg/L
36.6
39.3
100 mg/L
48.2
44.7
200 mg/L
61.5
71.8
1000 mg/L
76.9
76.6
样品浓度 Sample concentration
小鼠白血病细胞(L1210)
人类大肠癌细胞(LOVO)
科学研究
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食品研究与开发2009 年 3 月第 30 卷第 3 期
[3] 张翠林,陈怀中,陈鹏 . 海南省发展糯米香茶前景分析 [J].热带
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品卫生杂志,2007,19(5):407-410
收稿日期:2008-02-25
王瑞 1,张健斌 2,马俪珍 1,*,孔保华 2,方长发 1,孙长霞 1
(1.天津农学院,天津 300384;2.东北农业大学 食品学院,黑龙江 哈尔滨 150030)
腊肠工艺中理化因素与亚硝胺含量的相关性
基金项目:天津农学院青年科学技术项目(2007010 )
作者简介:王瑞(1979—),男(汉),实验师,硕士,主要从事食品营养
与分析教学及科研工作。
* 通讯作者:马俪珍(1963—),女,教授,博士,主要从事肉类研究工作。
摘 要:以广式腊肠为例,通过分析加工过程中产品失重率、pH、亚硝酸盐残留、脂肪氧化等理化因素来研究其与亚硝
胺形成之间的关系。 在烘烤开始阶段,水分失去的较多,亚硝酸钠的浓度增大,促进了亚硝胺的快速产生。 pH值在烘烤
时也从 6.41下降到 6.2,促进亚硝酸钠分解产酸,这也有利于亚硝胺形成,随着加热时间延长,脂肪氧化值也越来越大,
这一现象和亚硝胺形成具有相关性,对控制亚硝胺有指导意义。 在烘烤期间细菌生理活动受控制,表征腐败的 TVB-N
值很小,也有可能是细菌产生的胺类参与亚硝化反应使得 TVB-N值很小。 在腊肠的成熟阶段,虽然亚硝胺含量的总趋
势是下降的,但到成熟末期亚硝胺含量仍然很高,达到 139 μg/kg。 脂肪氧化在此期间对亚硝胺形成影响不大,而 pH值
继续下降证明腊肠中存在的乳酸菌可能在起作用,这一作用不仅使亚硝胺含量下降,也使 TVB-N值有所下降。
关键词:腊肠;工艺;理化因素;亚硝胺
N-亚硝胺类化合物是强致癌物质,可由亚硝酸盐 和胺类合成而来[1],这两种合成前体物质在食物中普遍
存在。工艺过程及饮食习惯对食品中的亚硝胺生成有重
要影响。 熟制时加热温度越高,产生的 N-亚硝胺越多,
这一现象已经被许多人的试验结果证明[2-3],亚硝基吡咯
烷(NPYR)被发现于油炸熏肉及其蒸气中,在烹饪过的
RELATIONSHIP OF PHYSICAL AND CHEMICAL FACTORS AND NITROSAMINES IN SAUSAGE PROCESSING
WANG Rui1, ZHANG Jian-bin2, MA Li-zhen1,*, KONG Bao-hua2, FANG Chang-fa1, SUN Chang-xia1
(1. Tianjin Agricultural University, Tianjin 300384, China;
2. College of Food Science, Northeast China Agricultural University, Harbin 150030, Heilongjiang, China)
Abstract: The experiment took the Guangzhou-style sausage as an example, analyzed the relationship of factors
and nitrosamines in processing, these factors included lose of weight, pH, residual nitrite, TBARS and so on.At
beginning of baking stage, lots of water was lost, it made the concentration of sodium nitrite increasing,
accelerated the formation of nitrosamines, pH value was changed from 6.41 to 6.2, helped sodium nitrite
decomposing to nitrite acid, this had advantages for the formation of nitrosamines, as prolong of heating time,
TBARS was bigger than ever, this was relative with the formation of nitrosamines, it could direct to decrease
nitrosamine. Bacterial physiologic action was controlled at roast stage, TVB-N value was very small, and the
cause could be that amines were reacted to nitrosamines.At the mature stage, the content of nitrosamines
decreased, but at last of mature stage, concentration of nitrosamine was still big, it was 139 μg/kg, fat oxidation
had less effect on the formation of nitrosamines in this stage, but the fall of pH value helped the action of lactic
acid bacterial , the action made decline of nitrosamine, TVB-N value also went down.
Key words: sausage; processing; physical and chemical factors; nitrosamines
!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!
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