全 文 ：翻白草中熊果酸的含量测定
沈德凤1　杨　波1　付红伟2
(1.佳木斯大学化学与药学院 , 黑龙江佳木斯 154002;2.哈尔滨医药集团制药总厂 ,黑龙江哈尔滨 151000)
　　摘　要　本实验以 95%乙醇为溶剂 , 采用超声波提取法对翻白草进行了提取 , 并用双波长薄层扫描法测定其
含量。结果表明 ,翻白草中熊果酸的平均含量为 0.13%。该方法简便 、准确 、经济 、安全 、数据可靠。
　　关键词　翻白草 ,薄层扫描 , 熊果酸 ,含量测定
Determination of Ursolic Acid Content in Potentilla discolor
Shen Defeng1 , Yang Bo1 , Fu Hongwei2
(1.Department of Pharmacy , University of Jiamusi , Heilongjiang Jiamusi 154002;
2.The First Pharmacy Factory of Harbin Pharmaceutical Group ,Harbin 151000)
Abstract　In the paper , ulracsonic extraction method was used to extract ursolic acid from Potentilla discolor
with 95% alcohol.And the content of ursolic acid in Potentilla discolor was determined with double thin layer
scanning method.The result indicated that the recovery content was 0.13%.The method was simple , accu-
rate , economical , secure and the data was reliable.
Key words　Potentilla discolor , thin layer scanning , ursolic acid ,determination
　　翻白草 Potentilla discolor Bge.系蔷薇科植物翻
白草的带根全草。具有清热 、解毒 、止血消肿的作
用 ,可治疗痢疾 、疟疾 、肺痈 、疖痈 、咳血 、崩漏 、疮
癣[ 1] 。国内外文献已有报道 ,从翻白草中分离的成
　　(1)抗病毒作用
(2)抑菌作用
(3)可暂时性降血压;有抑制心脏作用
(4)对中枢神经的作用:实验采用光电法 ,转棒
法 ,化学物质致惊法和直接观察等手段 ,验证苦地丁
总生物碱对中枢神经的作用 ,结果表明苦地丁生物
碱有镇静催眠和抗惊厥作用[ 2] 。
(5)苦地丁胶囊对是热壅滞型痔疮有显著的疗
效 ,对多种炎症有较好的疗效[ 11] 。
(6)其它用于抗感染性疾病 ,如 流感 、支气管
炎 ,支气管肺炎 、扁桃体炎 、急性肾炎 、急慢性肾盂肾
炎等[ 2] 。
(7)毒性药理:本品注射液分别给小白鼠 0.
4ml/kg 0.8ml/kg 剂量做亚急性毒性实验 。动物的
外观 、体重及内脏组织检查均未见异常。但分别给
孕鼠口服 120 mg/kg 、 60mg/kg 连续 10天可引起胎
鼠外观畸形。主要畸形为脑露 、小头畸形 ,并引起骨
骼畸形 ,主要表现为顶骨 、顶间骨 、枕骨 、胸骨分化不
全和缺失及胸骨错位 。各给药组对孕鼠的体重 、生
殖机能和胎鼠的生长发育没有明显的影响[ 12] 。
(8)民间用于治疗急性传染性肝炎 、痢疾 、淋巴
管炎红肿性痛 、疔肿 、湿性疮等[ 2] 。
4　小结
从上所述苦地丁有诸多药效 ,是一种很有开发
价值的中药材 ,但由于客观和主观的种种原因没有
得到广泛的关注 。苦地丁对生境的要求不高 ,其来
源丰富 ,应该有更好的发展空间 。
参 考 文 献
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55翻白草中熊果酸的含量测定
分有石竹皂甙元 、d-儿茶素[ 2] 、5种可水解鞣质 [ 3]、没
食子酸 、原儿茶酸 、槲皮黄素和熊果酸[ 4] 。熊果酸(ur-
solic acid ,UA)又名乌苏酸 、乌索酸 ,属三萜类化合物 ,
它在自然界中分布广泛。近年来研究表明熊果酸具
有广泛的药理作用 ,包括:对中枢神经系统的作用方
面 ,能显著降低大鼠的正常体温 ,减少小鼠的活动 ,有
协同巴比妥的催眠作用和对抗戊四唑的惊厥作用[ 5] ;
在抗菌方面 ,体外对革兰氏阳性菌 、革兰氏阴性菌 、酵
母菌均有活性[ 6] ;在抗癌作用方面 ,经研究表明其对
癌症的各阶段均有作用 ,可以抗突变 、抗氧化 、抗血管
生成和诱导癌细胞分化[7] 。熊果酸以其毒性小 ,尤其
具有抗肿瘤活性广的特点 ,1990年 ,日本将其列为最
有希望的抗癌药物之一[ 8] ,因此引起我们广泛的关
注 ,是一个很有前途并有待于进一步开发的药物 。本
实验采用超声波提取法对翻白草进行了提取 ,并采用
双波长薄层扫描法对其中熊果酸的含量进行测定。
该提取方法提取完全 、测定方法准确 。为翻白草的进
一步开发利用提供了理论依据。
1　实验部分
1.1　材料 、仪器和试剂
翻白草(Potentilla discolor Bge.)全草(市售);日本
岛津CS-930型薄层扫描仪;KQ-1000E型医用超声
波清洗器(昆山市超声仪器有限公司);定量毛细管
(2μl ,4μl , 8μl , 10μl);硅胶 G(青岛海洋化工厂);熊果
酸标准品(购自北京生物制品检定所);95%乙醇(沈阳
化学试剂厂);其他试剂均为分析纯。
1.2　色谱系统
薄层板:0.2%羧甲基纤维素钠的硅胶 G板(0.
3mm 15×20cm)使用前先进行 105℃活化 30分钟 ,备
用。展开剂:石油醚-丙酮(2:1)显色剂:10%硫酸乙醇
溶液。色谱扫描参数:λs=520nm λR=700nm 。反射式
吸收法锯齿扫描 ,狭缝 0.2×0.2 mm ,记录峰面积。
2　方法与结果
2.1　标准品溶液的配制　精密称取熊果酸 1mg ,置
于5ml容量瓶中 ,加乙醇稀释至刻度 ,得浓度为 0.
2mg/ml的熊果酸标准品溶液 。
2.2　样品溶液的配制　取翻白草全草适量 ,在 50
～ 60℃于干燥 8h ,粉碎 ,精密称取三份 ,重量分别为
10.01g 、10.02g 、10.01g ,分别置于 250ml锥形瓶中 ,
95%乙醇浸泡 12 h 后 ,50℃超声波提取三次 ,每次
0.5h ,合并提取液 ,回收乙醇得浸膏 ,浸膏用氯仿萃
取 3次 ,合并萃取液 ,回收氯仿 ,残渣用石油醚萃取
3次 ,剩余物用少量乙醇分别转移至 100ml容量瓶
中 ,用 95%乙醇定容至刻度。
2.3　标准曲线的绘制　精密称取 1mg 熊果酸标准
品 ,溶解于甲醇中 ,移至 5ml容量瓶中 ,定容至刻度。
用定量毛细管分别精密吸取 2 、4 、8 、12 、16 、20μl的标
准品溶液点于同一硅胶板上 ,按上述色谱条件进行
展开 、显色 、扫描测定 。熊果酸在 0.6 ～ 3.6ug 范围
内呈线性关系。回归方程为 Y=252.149 1+517.
873 9X r=0.9988。
2.4　样品含量测定　将三份样品点于同一硅胶板
上 ,每份样品点 3个样 ,每个样点 8μl。按上述色谱
条件下进行熊果酸的测定。结果见表 1。
表 1　样品中熊果酸的含量测定结果
编　号 翻白草重量(g) 样品含量(%) RSD %
1 10.01 0.161 7 2.17
2 10.02 0.099 7 2.34
3 10.01 0.132 3 1.16
平均含量 0.1312
2.5　回收率的测定　精密称取三份已干燥粉碎过
的翻白草 ,质量分别为 2.01g 、2.03g 、2.01g ,将其分
别用95%乙醇 50ml 浸泡 12 小时 , 在每份中加入
1mg 标准品 ,按如前所述的方法提取 、点样 、测定 ,平
均加样回收率为 99.98% ,RSD=1.58%(n=3)。
3　讨论
本实验采用超声波提取法提取 ,与传统的方法
如乙醇回流法 、氯仿-水双向提取法 、半仿生提取法
进行比较 ,超声波法使溶剂更易进入药材 ,不需高温
条件就能提取出熊果酸。提取液所含杂质少 ,安全
方便 、快捷准确。
熊果酸因其众多的药理作用在临床上具有广泛
的应用价值 。本次实验测得翻白草中熊果酸的含量
为0.13%。翻白草在全国各地均有分布 ,资源广
阔 ,这为熊果酸的开发提供了丰富的药材资源。本
次实验为进一步开发利用翻白草奠定了理论基础。
参 考 文 献
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56　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　中国野生植物资源　　　　　　　　　　　　　　　2002年第 21 卷第 4 期