全 文 ：［收稿日期］ 20111205(001)
［基金项目］ 贵州省科技创新人才团队建设项目［黔科合人才
团队(2011)4008］
［第一作者］ 甘秀海，讲师，硕士，从事中药化学成分及质量控
制研究;E-mail:gxh200719@ 163． com
［通讯作者］ * 赵超，副研究员，硕士，从事天然产物化学研究，
Tel:0851-6700494，E-mail:chaozhao@ 126． com
火棘不同药用部位中槲皮素含量的比较
甘秀海1，赵杨2，周欣2，赵超2* ，梁志远1
(1. 贵州师范学院化学与生命科学学院，贵阳 550018;
2. 贵州师范大学 天然药物质量控制研究中心，贵阳 550001)
［摘要］ 目的:建立反相高效液相色谱法测定火棘中槲皮素含量的方法，并比较火棘不同部位中槲皮素的含量。方法:
采用 90%甲醇-25%盐酸(4∶ 1)为溶剂提取样品，利用反相高效液相色谱法测定火棘不同部位样品中槲皮素的含量。色谱柱
Hypersil ODS (4. 6 mm × 250 mm，5 μm) ，流动相甲醇-0. 1%磷酸水溶液(40∶ 60) ，流速 1. 0 mL·min － 1，检测波长 360 nm，柱温
25 ℃。结果:槲皮素在 0. 048 5 ～ 1. 552 0 μg 线性关系良好，平均回收率为 96. 18%。结论:火棘不同部位中槲皮素的含量差
异较大。
［关键词］ 火棘;反相高效液相色谱;黄酮类化合物;含量测定
［中图分类号］ R284． 1 ［文献标识码］ A ［文章编号］ 1005-9903(2012)11-0100-03
Comparison of the Contents of Quercitin in Various Medicinal Parts
of Pyracantha fortuneana
GAN Xiu-hai1，ZHAO Yang2，ZHOU Xin2，ZHAO Chao2* ，LIANG Zhi-yuan1
(1. The School of Chemistry and Life Science，Guizhou Normal College，Guiyang 550018，China;
2. The Research Center for Quality Control of Natural Medicine，Guizhou Normal
University，Guiyang 550001，China)
［Abstract］ Objective:To established an RP-HPLC method for determination of quercetin in Pyracantha
fortuneana and to compare quercetin contents in different medicinal parts． Method: 90% methanol-25%
hydrochloride aqeous solution (4∶ 1)was used to extract quercetin and Hypersil ODS (4. 6 mm × 250 mm，5 μm)
column was used to analyze quercetin content with methanol-0. 1% phosphoric acid aqueous solution as mobile
phases． Flow rate was 1. 0 mL·min － 1 ． Detection wavelength was set at 360 nm． Result:The standard curve of
quercetin was linear in the range of 0. 048 5-1. 552 0 μg. The average recovery of quercetin was 98. 44% ．
Conclusion:Quercetin contents in different medicinal parts of P． fortuneana was different．
［Key words］ Pyracantha fortuneana;RP-HPLC;quercetin;content detemination
火棘为蔷薇科火棘属植物，异名赤阳子、救军
粮、火把果等，产于江苏、四川、贵州、云南等地。火
棘不仅极具观赏价值，而且其果实具有很高的食用
价值和药用保健价值，也是一种重要的天然色素、
果胶及饲料资源。其果实、叶和根都可药用，火棘果
提取物具有抗氧化、增强免疫力、增强体力、降血脂
等作用，具有健脾消食、收涩止痢、止痛的功效［1-2］。
关于火棘果和叶的化学成分均有报道［3-8］，但在质
量控制方面的研究未见报道。药理研究表明火棘具
有明显的抗氧化和消除自由基的作用，据推测这与
其含有大量黄酮类化合物有关［9-11］，黄酮类化合物
包括槲皮素及其苷类［4，6-7］。因此，本文采用反相高
效液相色谱(RP-HPLC)法测定火棘不同药用部位
中槲皮素的含量，为火棘药材的质量控制及资源的
·001·
第 18 卷第 11 期
2012 年 6 月
中国实验方剂学杂志
Chinese Journal of Experimental Traditional Medical Formulae
Vol． 18，No． 11
Jun．，2012
DOI:10.13422/j.cnki.syfjx.2012.11.036
合理开发与利用提供参考。
1 仪器与试药
Aglient1100 型高效液相色谱仪(DAD 检测器，
自动进样器) ，梅特勒-托利多 AL204 型电子分析天
平，KQ-50B 型超声波清洗机，Direct-Q3 型超纯水制
备系统，HH-S4 型电热恒温水浴锅。
槲皮素对照品(中国药品生物制品检定所，批
号为 111521-200303，供含量测定用) ;火棘样品(采
自贵州师范学院后山)经贵州师范学院化学与生命
科学学院朱富寿教授鉴定为为蔷薇科火棘属植物
Pyracantha fortuneana (Maxim．)Li 的全株。
甲醇为色谱纯，水为超纯水，其余试剂均为分
析纯。
2 方法与结果
2. 1 色谱条件 Hypersil ODS 色谱柱(4. 6 mm ×
250 mm，5 μm) ，甲醇-0. 1%磷酸水溶液(40∶ 60)为
流动相，检测波长 360 nm，进样量 10 μL，流速
1 g·L － 1，柱温 25 ℃。
2. 2 溶液的制备
2. 2. 1 对照品溶液的制备 精密称取槲皮素对照
品适量，置 25 mL 量瓶中，加甲醇稀释至刻度，摇匀
得质量浓度为 0. 194 0 g·L － 1的溶液，作为对照品溶
液，置于 4 ℃冰箱，备用。
2. 2. 2 样品溶液的制备 分别取火棘果实、叶、根
茎药材粉末约 2. 0 g，精密称定，置 50 mL 磨口三角
瓶中加入 90%甲醇-25%盐酸(4 ∶ 1)溶液 25 mL，称
定质量，加热回流 2 h，取出，过滤，挥去溶剂，用甲醇
溶解，定容至 10 mL 量瓶中，摇匀，作为供试品溶液。
2. 3 系统适应性考察 分别量取 2. 2 项下对照品
溶液、供试品溶液 10 μL 注入色谱仪，记录按 2. 1 项
下色谱条件进行测定，结果槲皮素峰与样品中其他
成分峰能较好分离。
2. 4 线性关系的考察 分别精密量取上述对照品
溶液(0. 194 0 g·L － 1)0. 25，0. 5，1. 0，2. 0，4. 0，
8. 0 mL，置于 10 mL 量瓶中，加甲醇定容至刻度，按
2. 1 项下色谱条件精密进样 10 μL 测定峰面积。以
进样量(μg)为横坐标，峰面积为纵坐标绘制标准曲
线，得槲皮素回归方程为 Y = 2 890. 45X － 285. 61
(r = 0. 999 8)。结果表明槲皮素在 0. 048 5 ～ 1. 552
0 μg 峰面积与进样量具有良好的线性关系。
2. 5 精密度试验 在 2. 1 项色谱条件下，精密吸取
对照品溶液 10 μL，重复进样 6 次，测得峰面积的
RSD 0. 94%(n = 6)。结果表明仪器精密度良好。
2. 6 稳定性试验 在 2. 1 项色谱条件下，精密量取
火棘果实供试品溶液 10 μL，分别于 0，2，4，6，8，12
h 进行测定。供试品中槲皮素峰面积的 RSD 为
1. 02%(n = 6)。结果表明样品溶液在 12 h 内稳定。
2. 7 重复性试验 取火棘果实样品约 2. 0 g，精密
称取 6 份，按 2. 2. 2 项下方法制备供试品溶液，按
2. 1 项下色谱条件测定槲皮素的含量。结果 RSD 为
1. 62%(n = 6) ，表明此方法重复性良好。
2. 8 加样回收率试验 精密称定 6 份已知含量为
0. 561 2 mg·g － 1的样品约 1. 0 g，分别精密加入对照
品储备液 2 mL，按 2. 2. 2 项下方法制备样品溶液，
按 2. 1 项下色谱条件测定，计算回收率，结果平均回
收率为 98. 44%，RSD 为 0. 65%。见表 1。
表 1 槲皮素加样回收率试验(n = 6)
No．
取样量
/ g
原有量
/mg
加入量
/mg
测得量
/mg
回收率
/%
平均
回收率
/%
RSD
/%
1 1. 012 0 0. 568 0 0. 388 0 0. 944 6 97. 06
2 0. 997 4 0. 559 7 0. 388 0 0. 932 8 96. 16
3 0. 989 6 0. 555 4 0. 388 0 0. 934 8 97. 78
96. 18 1. 63
4 1. 021 5 0. 573 3 0. 388 0 0. 951 2 97. 40
5 1. 015 4 0. 569 8 0. 388 0 0. 933 5 93. 74
6 0. 998 5 0. 560 4 0. 388 0 0. 928 7 94. 92
2. 9 样品测定 分别精密称取 3 批火棘的不同药
用部位样品(过 40 目筛)2. 0 g。按 2. 2. 2 项下方法
制备样品溶液，按 2. 1 项下色谱条件测定。火棘果、
叶样品中槲皮素含量测定结果见表 2。火棘根茎中
无槲皮素色谱峰，槲皮素对照品、火棘果及叶样品色
谱图见图 1。
表 2 样品的含量测定(n = 3)
部位
槲皮素 /mg·g － 1
1 2 3
平均含量
/mg·g － 1
RSD
/%
火棘果 2. 115 4 2. 153 2 2. 125 6 2. 131 4 0. 92
火棘叶 0. 553 6 0. 546 1 0. 561 2 0. 553 6 1. 35
3 讨论
3. 1 提取方法的选择 由文献［4，6-7］可知火棘
中除含有槲皮素之外，还有槲皮素-3-鼠李糖苷、芦
丁、芒苷、异槲皮苷;同时文献［8］报道了从火棘提
取物分离得到 5 个黄酮斑点。在提取方法的研究中
分别考察了用乙醇、甲醇、醋酸乙酯作为提取溶剂超
声、加热回流、微波及索氏提取，但发现火棘果中槲
皮素的含量均较低。后参照文献［12-13］的基础上
分别考察了甲醇及盐酸浓度、甲醇-盐酸体积比，超
·101·
甘秀海，等:火棘不同药用部位中槲皮素含量的比较
图 1 槲皮素对照品(A)与火棘样品果(B)、叶(C)的 HPLC
声、加热回流、微波、索氏提取及提取时间对槲皮素
含量测定结果的影响，通过单因素及正交试验得到
火棘中槲皮素的最佳提取工艺为 90%甲醇-25%盐
酸(4∶ 1)加热回流 2 h。
3. 2 色谱条件的选择 在色谱条件考察中先采用
了甲醇-0. 05%磷酸水溶液(45∶ 55)［12］为流动相，但
槲皮素峰与杂质峰未能很好地分离且峰型对称性
差;以甲醇-0. 1%三氟乙酸水溶液(65 ∶ 45)［14］为流
动相，槲皮素峰的保留时间过小且与杂质峰难以分
离，且对色谱柱损害较大。为了得到分离度较好的
色谱峰，考察了磷酸的浓度及甲醇与磷酸水溶液的
体积比对色谱峰的影响，结果发现流动相为甲醇-
0. 1%磷酸水溶液(40 ∶ 60)时，可以得到分离度较好
及峰型对称的色谱图。
3. 3 不同部位槲皮素含量的比较 由表 2 可知，在
火棘不同部位中槲皮素的含量差异较大，未检测出
火棘根茎中含有槲皮素，同时测得火棘果中槲皮素
的含量最高，高于叶中约 4 倍。由测定结果可推断
火棘提取物具有抗氧化等药理作用与其黄酮类化合
物有关;另外火棘很容易繁殖、生长，且野生资源丰
富，因此可考虑从火棘尤其是火棘果中提取槲皮素
及总黄酮，进而深层次开发火棘的食用价值和药用
价值。
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［责任编辑 蔡仲德］
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