全 文 ：　　收稿日期:2000-07-10
基金项目:教育部博士基金资助项目(编号:9914)
作者简介:俞敏倩(1963-),女 ,助理研究员 ,电话:(010)62899730。
高效液相色谱法测定 11种雪莲花中的紫丁香甙及芦丁
俞敏倩 , 　陈建民
(中国医学科学院中国协和医科大学药用植物研究所 , 北京 100094)
摘要:采用高效液相色谱法测定凤毛菊属植物雪莲花中的紫丁香甙和芦丁。用乙醇超声提取 , 以乙腈(流动相 A)
和水-质量分数为 36%的乙酸水溶液(体积比为 100∶4)(流动相 B)进行梯度洗脱。结果表明 , 紫丁香甙线性范围为
0.052 5μg～ 1.05μg ,芦丁线性范围为 0.065 8μg～ 1.32 μg;不同种的雪莲花植物中紫丁香甙和芦丁的含量差异较
大 ,应用雪莲花药材替代品时应慎重。
关键词:高效液相色谱法;雪莲花;紫丁香甙;芦丁
中图分类号:O658　　　文献标识码:B　　　文章编号:1000-8713(2001)03-0243-02
1　前言
　　雪莲花为凤毛菊属植物 ,多生长于海拔 4 000 m
以上的高山流石滩上 ,为民间传统药物[ 1] 。它具有
散寒除湿 、活血通经 、抗炎镇痛等作用 ,民间主要用
于治疗风湿性关节炎 、妇科病等 。药理实验显示雪
莲花还具有抗癌 、降压和平喘作用[ 2] 。由于民间习
用的雪莲花品种较多 ,品质不同 ,其所含化学成分差
异较大[ 3 ,4] 。我们采用高效液相色谱法对雪莲花中
的紫丁香甙和芦丁两种有效成分进行了测定 ,为该
类药材的质量评价提供了新的依据 。同时也提醒人
们应用雪莲花药材替代品时应慎重 。
2　实验部分
2.1　仪器与实验材料
　　Waters 2690型高效液相色谱仪 , 996 二极管矩
阵检测器 , Waters M illennium 32 色谱工作站 。水
(双蒸水),乙腈(色谱纯),质量分数为 36%的乙酸
(分析纯)。紫丁香甙和芦丁均由本所李君山同志分
离并鉴定 ,纯度 98%以上;雪莲花(植物样品由李君
山同志采集并经本所朱兆仪研究员鉴定)。
2.2　色谱条件
　　色谱柱:Zorbax ODS(4.6 mm i.d.×150 mm , 5
μm);流动相 A:乙腈 , 流动相 B:水-质量分数为
36%的乙酸(体积比为 100∶4);梯度洗脱程序:流动
相A 15%(2 min)20 min 流动相 A 30%,线性梯度
变化。柱温:25 ℃;流速:0.6 mL/min;检测波长:
260 nm 。
2.3　样品液的制备
　　精密称取样品粉末约 0.30 g ,置于 50 mL 具塞
三角瓶中 ,加入 30 mL 体积分数为 70%的乙醇 ,称
重 ,浸泡过夜 。超声提取 30 min(2 ～ 3次),称重并
补足损失的溶剂。过滤 ,弃去初滤液。定量吸取续
滤液 15 mL 置于烧杯中 ,于 70 ℃水浴中蒸干。用
甲醇溶解残渣并定容于 5 mL 容量瓶中。进样 20
μL 进行色谱分析 。当个别样品组分含量过高 ,超出
线性范围时 ,为保证进样量一致 ,则应进一步稀释。
3　结果与讨论
3.1　标准曲线
　　精密称取紫丁香甙 1.00 mg ,用甲醇定容于 1
mL容量瓶中;称取芦丁 2.00 mg ,用甲醇定容于 10
mL 容量瓶中 , 得到紫丁香甙和芦丁对照品溶液。
精密吸取紫丁香甙对照液 0.100 mL 、芦丁对照液
0.500 mL 于 2.0 mL 容量瓶中 , 用甲醇定容至刻
度 ,得到混合对照品溶液 。分别取 1 μL , 2 μL , 4
μL , 8μL ,10 μL 和 20 μL 混合对照品溶液进样分
析 。测定结果表明 ,当紫丁香甙进样量在 0.052 5μg
～ 1.05 μg ,芦丁进样量在 0.065 8 μg ～ 1.32 μg 时 ,
进样量(X , μg)与峰面积(Y )呈良好的线性关系。
回归方程如下:Y =6.96×10-5 X +3.51×10-4 ,
r=0.998 8(紫丁香甙);Y =8.46 ×10-5 X -
1.20×10-3 , r=0.999 9(芦丁)。
3.2　样品提取方法的选择
　　曾比较用不同方法提取样品(热回流 1 h 和超
声提取 30 min),两种方法无明显差异 。超声提取
30 min已提取完全 ,且简便易行 ,故选用此法 。
3.3　回收率试验
　　在已知含量样品中定量加入对照品溶液 ,自然
风干后 ,按“2.3”节方法制备样品液 ,测定回收率。
结果见表 1。
第 19卷第 3期
2001年 5月
色 谱
CHINESE JOU RNAL OF CHROMATOGRAPHY
Vol.19 No.3
M ay 2001
表 1　回收率测定结果
Table 1　Resul ts of recovery
Compound Added(μg) Found(μg) Recovery(%)
Syringin 0.131 0.128 97.8
0.262 0.255 97.3
Rutin 0.229 0.218 95.3
0.344 0.332 96.5
3.4　精密度试验
　　取同一生药样品 5 份(n =5),依照“2.3”节方
法制备样品液 ,测定紫丁香甙和芦丁的含量 , 其
RSD在 2.45%～ 2.72%。
制备样品液 ,进样 20 μL ,在 260 nm 波长处检
测 ,重复进样 7次(n =7)。根据测得数据计算样品
中紫丁香甙和芦丁的含量(μg),其相对标准偏差分
别为 2.25%和 0.331%。
3.5　样品分析
　　选择不同品种不同产地共 11个雪莲花样品 ,对
其中的紫丁香甙和芦丁含量进行分析 ,结果见表 2 ,
其中一个样品的色谱图见图 1-b。
表 2　样品测定结果
Table 2　Determination results of samples mg/ g
Species Habitat S yringin Rutin
　S .involucrata Xinjiang 0.232 0.704
　S .gnapha loides Xinjiang 0.327 0.557
　S .pulchel la Xinjiang 0.138 2.15
　S .p rostrata Xinjiang 0.636 1.09
　S .n igrescens Qinghai 0.059 0.051
　S .superba Qinghai 0.304 -
　S .graminea Xinjiang 0.154 0.515
　S .pavi f lora Neimeng 0.176 0.564
　S .amara f i sch Xinjiang 0.241 0.723
　S .phaeantha Qinghai 0.102 -
　S .soroseris Xizang 0.044 0.043
图 1　对照液(a)和样品(b)的色谱图
Fig.1　Chromatograms of the control sample(a)and the sample(b)
1.syringin;2.rutin.
参考文献:
[ 1] 　ZHANG Qi , WU Hong , ZHANG Chang.West China
Journal o f Pharmaceutical Science, 1997 , 12(3):145-147
张　琦 ,伍　红 ,张　嫦.华西药学杂志 , 1997 , 12(3):
145-147
[ 2] 　ZHAO De-xiu , ZHAO Li-li.Chinese T raditional and
Herbal Drug s , 1996 , 27(6):372-374
赵德修 ,赵丽丽.中草药 , 1996 , 27(6):372-374
[ 3] 　LI Jun-shan , CAI Shao-qing.Chinese Pharmaceutical
Journal , 1998 , 33(8):449-452
李君山 ,蔡少青.中国药学杂志 , 1998 , 33(8):449-452
[ 4] 　WANG Wen-zhi.Chinese T raditional and Herbal Drugs ,
1997 , 28(11):654-655
王文芝.中草药 , 1997 , 28(11):654-655
Determination of Syringin and Rutin in 11 Species of Saussurea
by High Performance Liquid Chromatography
YU Min-qian , CHEN Jian-min
(Insti tute of Medicinal Plant Development , Chinese Academy of Medical Science and
Peking Union Medical Col lege , Bei jing 100094 , China)
Abstract:Zorbax ODS column and g radient elution of acetonit rile-acetic acid solution as mobile phase w ere
employed to determine the content of syringin and rutin in 11 species of Saussurea by RP_HPLC.The detect ion
w aveleng th w as 260 nm .The results show ed that standard curves of sy ringin and rutin were linear in the range
of 0.052 5 μg-1.05 μg and 0.065 8 μg-1.32 μg , respectively.The correlation coefficients were 0.998 8 and
0.999 9.The method provides new indices for quali ty cont rol of Saussurea.
Key words:high performance liquid chromatography;Saussurea;syringin;rutin
·244· 色 谱 第 19卷