全 文 ：［收稿日期］ 20110915(014)
［第一作者］ 李喜凤，教授，硕士生导师，从事中药新药及质量
标准研究，Tel:0371-65575823，E-mail:lxf _52 @
yeah． net
［通讯作者］ * 朱艳琴，教授，硕士生导师，从事肿瘤病理研究，
Tel:13526581155，E-mail:jc． zyqin@ 163. com
不同产地禹州漏芦 HPLC指纹图谱研究
李喜凤1，胡春月1，胡利欣1，朱艳琴1* ，余云辉2，邱天宝1
(1. 河南中医学院，郑州 450008;2. 濮阳市中医院，河南 濮阳 457000)
［摘要］ 目的:建立不同产地禹州漏芦药材的高效液相指纹图谱。方法:采用 HPLC，测定了 14 批不同产地的禹州漏芦
样品。Hypersil C18色谱柱(4. 6 mm × 250 mm，5 μm) ;流动相乙腈-0. 1%醋酸水溶液，梯度洗脱;柱温 25 ℃，检测波长 280
nm，流速 0. 9 mL·min －1，记录色谱图 75 min。结果:建立了禹州漏芦药材指纹图谱，确定了 10 个共有峰。结论:该法重复性
好、可靠、简便，为禹州漏芦药材的质量控制提供依据。
［关键词］ 禹州漏芦;高效液相色谱法;指纹图谱;相似度;质量控制
［中图分类号］ R284. 1 ［文献标识码］ A ［文章编号］ 1005-9903(2012)15-0096-04
Studies on HPLC Fingerprint of Echinopsis Radix from Different Drigin
LI Xi-feng1，HU Chun-yue1，HU Li-xin1，ZHU Yan-qin1* ，YU Yun-hui2，QIU Tian-bao1
(1. Henan College of Traditional Chinese Medicine，Zhengzhou 450008，China;
2. Puyang Hospital of Traditional Chinese Medicine，Puyang 457000，China)
［Abstract］ Objective:To study the fingerprint of Echinopsis Radix from different habitats by high
performance liquid chromatography． Method:Fourteen batches Echinopsis Radix samples were determined with
the HPLC method． The separation was carried out at 25 ℃on a Hypersil C18 column (4. 6 mm ×250 mm，5 μm)
with acetonitrile-0. 1% acetic acid solution as mobile phase by gradient elution． The detective wavelength was at
280 nm with the flow rate of 0. 9 mL·min －1 ． Result:The fingerprint of Echinopsis Radix was estabtisned，a
total of 10 fingerprint peaks had been marked out． Conclusion:This method was reliable and simple good
repeatability，which can be the method of quality control for Echinopsis Radix．
［Key words］ Echinopsis Radix;HPLC;fingerprint;similarity;quality control
禹州漏芦为菊科植物蓝刺头或华东蓝刺头的干
燥根，具有清热解毒、排脓止血、消痈下乳的功效，用
于治疗诸疮痈肿、乳痈肿痛、乳汁不通、瘰疬疮毒等
症［1］。《中国药典》1995 年版首次将禹州漏芦和漏
芦作为两个中药品种收载。祁州漏芦称为漏芦，禹
州漏芦和漏芦实为同科不同属的两种植物，现代科
学研究也已充分证实了禹州漏芦与漏芦的化学成
分、药理活性、临床作用明显不同［2］，但受历史用药
习惯的影响，目前二者仍多混在一起使用，品种十分
混乱［3］，禹州漏芦药材的质量控制研究迫在眉睫。
中药指纹图谱是一种综合的可量化的评价方
法，它实现了中药由单一成分测定上升为对内在质
量的全面控制，是中药质量评价的发展趋势［4］。本
实验收集了 14 批不同产地的禹州漏芦药材，采用
HPLC 进行禹州漏芦的指纹图谱分析，并进行了相
似度评价，为更好的控制禹州漏芦质量提供参考
依据［5］。
1 仪器与试药
超声波清洗器，DIONEX 高效液相色谱仪，
CHROMELON 工作站，相似度软件为“中药色谱指
纹图谱相似度评价系统”(中国药典委员会 2004
A)。α-三联噻吩对照品(美国 Sigma 公司提供，批
号 371073) ;色谱乙腈(天津四友) ，水(超纯水) ，其
他试剂均为分析纯;共采集 10 个产地 14 批禹州漏
芦样品，经本学院生药教研室董诚明教授鉴定为菊
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第 18 卷第 15 期
2012 年 8 月
中国实验方剂学杂志
Chinese Journal of Experimental Traditional Medical Formulae
Vol． 18，No． 15
Aug．，2012
DOI:10.13422/j.cnki.syfjx.2012.15.039
科蓝刺头属植物蓝刺头 Echinops Latifolius Tausch单 个品种。样品来源、编号见表 1。
表 1 蓝刺头样品来源及编号
序号 样品编号 产地 采集时间 品种 样品部位
S1 A-001 济源市下冶镇 2010-07 蓝刺头 根
S2 A-006 南阳市西峡县伏牛山 2010-07 蓝刺头 根
S3 A-007 湖北省蕲春县吕河村 2010-07 蓝刺头 根
S4 A-008 焦作市博爱县寨豁乡 2010-08 蓝刺头 根
S5 A-009 南阳(饮片) 2010-08 蓝刺头 根
S6 A-010 陕西省太白县咀头镇 2010-07 蓝刺头 根
S7 A-011 山东省沂南县张庄镇 2010-07 蓝刺头 根
S8 A-012 山西省广灵县南村镇 2010-07 蓝刺头 根
S9 A-013 洛阳市栾川县重渡沟 2010-07 蓝刺头 根
S10 A-014 新乡市辉县百泉镇 2010-07 蓝刺头 根
S11 A-016 新乡市辉县万仙山南坪村 2010-08 蓝刺头 根
S12 A-017 新乡市辉县万仙山丹汾沟 2010-08 蓝刺头 根
S13 A-018 新乡市辉县万仙山磨剑峰 2010-08 蓝刺头 根
S14 A-019 内蒙古鄂尔多斯市东胜区 2010-07 蓝刺头 根
2 方法与结果
2. 1 色谱条件 Hypersil C18色谱柱(4. 6 mm × 250
mm，5 μm) ，检测波长 280 nm，柱温 25 ℃，流动相
乙腈(A)-0. 1% 醋酸水(B) ，梯度洗脱，流速 0. 9
mL·min －1，记录色谱图 75 min，进样量为 10 μL。流
动相梯度见表 2。
表 2 流动相梯度
t /min 0. 1%醋酸 /% 乙腈 /%
0 95 5
30 80 20
70 15 85
75 15 85
2. 2 对照品溶液的制备 精密称取 α-三联噻吩对
照品适量，加甲醇制成每 1 mL 中含 α-三联噻吩
0. 245 8 mg的溶液，摇匀，0. 45 μm微孔滤膜滤过即
得。进样 10 μL，见图 1。
1. α-三联噻吩
图 1 α-三联噻吩对照品色谱图
2. 3 供试品溶液的制备 称取过 65 目筛的不同产
地的禹州漏芦样品细粉 2 g，精密称定，精密加入甲
醇 50 mL，称定质量，超声提取 30 min，取出放至室
温，加甲醇补足质量，过滤，取续滤液，0. 45 μm微孔
滤膜滤过即得，进样 10 μL，见图 2。
1. α-三联噻吩
图 2 禹州漏芦样品色谱图
2. 4 方法学考察
2. 4. 1 稳定性考察 取同一批供试品(S5)溶液，
每 4 h 进样 1 次，连续 24 h，测定指纹图谱，结果相
似度均 ＞ 0. 997，以 α-三联噻吩色谱峰为参照峰，各
共有峰的相对保留时间的 RSD 均 ＜ 1. 8%，相对峰
面积的 RSD均 ＜ 2. 3%，表明供试品溶液在 24 h 内
性质稳定。
2. 4. 2 精密度考察 取同一批次供试品溶液，连续
进样 5 次，测定指纹图谱，结果 5 次的相似度均 ＞
0. 993，各共有峰的相对保留时间的 RSD 均 ＜
2. 5%，相对峰面积的 RSD 均 ＜ 3. 0%，表明仪器精
密度良好。
2. 4. 3 重复性考察 取同一批次样品 5 份，按 2. 3
项制备供试品溶液，测定指纹图谱，结果相似度均 ＞
0. 989，各共有峰的相对保留时间的 RSD 均 ＜
1. 9%，相对峰面积的 RSD 均 ＜ 2. 3%，表明该方法
重复性好。
2. 5 指纹图谱的建立
2. 5. 1 指纹图谱共有模式的建立 取 14 批禹州漏
芦样品，按 2. 3 项方法制备供试品溶液，分别进样
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李喜凤，等:不同产地禹州漏芦 HPLC指纹图谱研究
10 μL，记录 HPLC图。将药材指纹图谱导入中药色
谱指纹图谱相似度评价系统软件(2004A 版) ，设定
匹配模板，进行谱峰自动匹配，并生成禹州漏芦药材
HPLC指纹图谱共有模式，见图 3。14 批样品共有
峰相对保留时间和相对峰面积见表 3。
2. 5. 2 共有峰的确定 14 批禹州漏芦样品生成的
对照指纹图谱，有 10 个共有峰，通过与对照品对照，
指认 10 号峰为 α-三联噻吩。
2. 5. 3 指纹图谱的相似度评价 对上述 14 批样品
进行相似度评价，分别采用 SPSS 软件的相关系数
法、夹角余弦法以及国家药典委员会中药色谱指纹
图谱相似度评价系统软件(2004A 版) ，不同产地的
图 3 14 批禹州漏芦药材 HPLC指纹图谱共有模式
禹州漏芦样品进行相似度计算。结果见表 4。
表 3 禹州漏芦 HPLC指纹图谱共有峰相对保留时间和相对峰面积
批次 1 2 3 4 5 6 7 8 9 10
相对保留时间 0. 365 0. 461 0. 487 0. 496 0. 528 0. 568 0. 675 0. 706 0. 779 1. 000
1 0. 759 0. 987 2. 356 0. 231 0. 572 0. 975 1. 951 2. 462 0. 682 1. 000
2 0. 851 0. 453 1. 564 0. 360 0. 617 0. 666 1. 231 1. 515 0. 934 1. 000
3 0. 932 0. 365 1. 313 0. 473 0. 853 0. 753 0. 891 1. 306 0. 533 1. 000
4 0. 935 0. 473 1. 768 0. 530 0. 672 0. 926 1. 136 1. 966 0. 607 1. 000
5 0. 805 0. 526 1. 551 0. 385 0. 560 0. 765 1. 318 1. 671 1. 037 1. 000
6 0. 828 0. 173 1. 246 0. 527 0. 671 0. 448 0. 938 1. 298 0. 576 1. 000
7 0. 765 0. 632 1. 443 0. 256 0. 654 0. 574 1. 378 1. 497 1. 056 1. 000
8 0. 808 0. 435 1. 283 0. 171 0. 646 0. 569 1. 356 1. 547 0. 684 1. 000
9 0. 678 0. 158 1. 309 0. 506 0. 342 0. 838 1. 107 2. 127 1. 073 1. 000
10 1. 129 0. 635 1. 469 0. 550 1. 497 1. 295 2. 467 3. 281 0. 287 1. 000
11 1. 126 0. 241 1. 314 0. 454 0. 620 0. 945 1. 066 1. 578 0. 782 1. 000
12 0. 814 0. 640 1. 540 0. 532 1. 080 1. 033 1. 644 2. 562 0. 734 1. 000
13 0. 801 0. 661 1. 592 0. 233 1. 361 0. 471 1. 395 1. 701 0. 505 1. 000
14 0. 987 0. 364 1. 284 0. 360 1. 149 0. 914 1. 206 1. 768 0. 813 1. 000
表 4 14 批禹州漏芦样品相似度数据
No．
统计方法
相关系数法 夹角余弦法 相似度软件
No．
统计方法
相关系数法 夹角余弦法 相似度软件
1 0． 905 0． 973 0． 959 8 0． 889 0． 934 0． 929
2 0． 949 0． 992 0． 972 9 0． 971 0． 971 0． 911
3 0． 891 0． 914 0． 935 10 0． 956 0． 940 0． 968
4 0． 956 0． 992 0． 962 11 0． 945 0． 975 0． 964
5 0． 948 0． 934 0． 945 12 0． 908 0． 990 0． 958
6 0． 899 0． 910 0． 924 13 0． 953 0． 975 0． 992
7 0． 909 0． 951 0． 911 14 0． 874 0． 909 0． 904
3 讨论
3. 1 指纹图谱评价 14 批不同产地禹州漏芦药材
的指纹图谱相似度均 ＞ 0. 90，表明 14 批药材的质量
具有一定的稳定性，符合国家药典委的要求，可作
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第 18 卷第 15 期
2012 年 8 月
中国实验方剂学杂志
Chinese Journal of Experimental Traditional Medical Formulae
Vol． 18，No． 15
Aug．，2012
檶檶檶檶檶檶檶檶檶檶檶檶檶檶檶檶檶檶檶檶檶檶檶檶檶檶檶檶檶檶檶檶檶檶檶檶檶檶檶檶檶檶檶檶檶檶
为禹州漏芦药材的特征指纹图谱。但是 14 批药材
的共有峰相对峰面积的比值存在差异，表明不同产
地禹州漏芦成分含量也存在一定的差异性，其原因
可能是受气候或土壤等因素的影响，有必要对禹州
漏芦的生长环境进行考察，建立禹州漏芦的 GAP基
地，从源头上保证禹州漏芦药材的质量。
3. 2 检测波长的选择 采用光电二极管陈列检测
器(DAD)对禹州漏芦药材的供试品溶液在
200 nm ～400 nm 进行全波长扫描，发现在 280 nm
处的色谱峰基线平稳，能体现较多的吸收峰且强度
较大，故选择 280 nm作为检测波长。
3. 3 梯度洗脱的优化 通过对不同比例乙腈-
0. 1%醋酸水溶液的流动相进行反复试验，尝试了等
度洗脱以及多种梯度洗脱的比例，最后确定以乙腈-
0. 1%醋酸水溶液(5∶ 95)洗脱至乙腈-0. 1%醋酸水
溶液(85 ∶ 15)为最佳，各色谱峰分离度好，峰型尖
锐，保留时间适中。
［参考文献］
［1］ 中国药典．一部［S］． 2010:244．
［2］ 汪毅，李冼，张鹏． 禹州漏芦化学成分及药理活性的
研究进展［J］．中草药，2005，36(2) :309．
［3］ 石铸编著． 中国植物志． 78 卷［M］． 北京:科学出版
社，1987:1．
［4］ 詹雪艳，史新元，段天璇，等．色谱指纹图谱相似度方
法的研究进展［J］． 中国实验方剂学杂志，2011，17
(2) :248.
［5］ 周锐．现代中药质量标准体系与中药指纹图谱［J］．
中医中药，2007，4(7) :221．
［责任编辑 顾雪竹］
［收稿日期］ 20111201(005)
［第一作者］ 张庆贺，硕士研究生，从事药物化学研究，E-mail:zhangqh10@ mails． jlu． edu． cn，Tel:15043026122
［通讯作者］ * 刘金平，副教授，从事天然药物化学成分及生物活性的研究，E-mail:liujp@ jlu． edu． cn，Tel:0431-85619803
银花泌炎灵片挥发油化学成分的 GC-MS分析
张庆贺，刘海宇，林美妤，李平亚，刘金平*
(吉林大学再生医学科学研究所，长春 130021)
［摘要］ 目的:采用气相色谱-质谱联用法对银花泌炎灵片的挥发油成分进行分析，以丰富该制剂的化学成分研究，并为
其质量控制提供理论基础。方法:采用《中国药典》一部(2010 年版)附录 XD挥发油测定法对银花泌炎灵片的挥发油进行提
取，用气相色谱-质谱法对化学成分进行鉴定，以毛细管柱进行分析，面积归一化法测定其相对含量。色谱柱为 Agilent
19091M-436 弹性石英毛细管色谱柱(0. 25 mm ×30 m，0. 25 μm) ;程序升温，起始温度为 60 ℃，以 10 ℃·min －1升温至 280 ℃，
保持 12 min;进样口温度为 280 ℃。质谱条件:电子轰击(EI)离子源，电离电压 70 eV，离子源温度 230 ℃，扫描范围 m/z 20 ～
500。结果:共分离出 30 个化学成分，鉴定出其中的 21 种成分，相对含量超过 5%的成分有棕榈酸(34. 15%)、棕榈酸乙酯
(21. 01%)、1，5，9-三甲基-12-异丙烯基-1，5，9-十四烷环三烯(10. 82%)、(Z，Z，Z)-9，12，15-亚油酸乙酯(7. 71%)。结论:银花
泌炎灵片中挥发油成分主要包含棕榈酸，棕榈酸乙酯，亚油酸乙酯类成分等。
［关键词］ 银花泌炎灵片;挥发油;化学成分;气相色谱-质谱联用仪
［中图分类号］ R284. 1 ［文献标识码］ A ［文章编号］ 1005-9903(2012)15-0099-03
GC-MS Analysis of Volatile Oil Constituents of Yinhua Miyanling Tablet
ZHANG Qing-he，LIU Hai-yu，LIN Mei-yu，LI Ping-ya，LIU Jin-ping*
(Institute of Frontier Medical Science of Jilin University，Changchun 130021，China)
［Abstract］ Objective:GC-MS was used to analyze the volatile oil components in Yinhua Miyanling tablet
to enrich the study of chemical composition and provide a theoretical basis for quality control． Method:The volatile
·99·
第 18 卷第 15 期
2012 年 8 月
中国实验方剂学杂志
Chinese Journal of Experimental Traditional Medical Formulae
Vol． 18，No． 15
Aug．，2012