全 文 ：华西药学杂志
W C J·P S 2015，30(2)∶253 ～ 254
得大于自身对照溶液主峰峰面积(1%)。3 批样品
中异维 A酸含量均 ＜ 5%，其他杂质总量均 ＜ 1%。
2 讨论
采用 DAD检测器对混合对照品溶液进行全波
长扫描，山梨酸和 BHT均在 280 nm处有最大吸收，
维 A 酸和异维 A 酸在 355 nm 处有最大吸收。因
此，检测波长设定为 280(山梨酸、BHT)、355 nm(维
A酸、异维 A酸)。《中国药典》2010 年版中维 A 酸
乳膏含量测定的流动相条件为甲醇 － 2%冰乙酸
(81∶19)［4］，对此流动相系统进行优化时，先调节
醇水比来降低保留时间，再调节冰乙酸的比例，但发
现无法保证异维 A酸与主药有较大的分离度，于是
引入四元体系，将一半比例的甲醇替换为乙腈，再进
一步调节乙腈比例，从而得到流动相为甲醇 － 乙
腈 － 4%冰乙酸(39∶42∶19)，在此条件下色谱的
分离效果较好。
参考文献:
［1］ 张强，郑继海．实用临床药物手册［M］． 郑州:郑州大学出版
社，2009:213 － 213．
［2］ 吕建民，卢建华． HPLC 测定酸牛乳和蜜饯中苯甲酸，山梨酸
和糖精钠的试样处理方法［J］．中国公共卫生，2002，18(5):
6121．
［3］ 万素英，赵亚军，李琳，等． 食品抗氧化剂［M］． 北京:中国轻
工业出版社，1998．
［4］ 中华人民共和国国家药典委员会． 中国药典［S］． 北京:中国
医药科技出版社，2010:894．
收稿日期:2013 － 11 － 05
作者简介:杨书阁(1972 ―) ，女，主管药师，从事医院药学工作。
* 通信作者(Correspondent author) ，Email:983179087@ qq． com
HPLC测定六味丁香丸中的土木香内酯
杨书阁1，霍生青2，彭 艳2*
(1．青海省红十字医院，青海 西宁 810000;2．青海省海西州食品药品检验所，青海 海西 817099)
摘要:目的 采用 ＲP － HPLC法测定六味丁香丸中的土木香内酯。方法 采用 EClipse XDB － C18色谱柱，乙腈 － 0． 05%磷酸
溶液(50∶50)为流动相，柱温 40 ℃，流速 1． 0 mL·min －1，检测波长 194 nm。结果 土木香内酯 0． 293 ～ 3． 51 μg与峰面积的
线性关系良好(r = 0． 9999) ，平均加样回收率为 98． 74% ，ＲSD = 0． 57% (n = 6)。结论 所用方法准确、简便、灵敏、可靠，可
用于六味丁香丸的质量控制。
关键词:高效液相色谱法;六味丁香丸;土木香内酯;含量测定;质量控制
中图分类号:Ｒ917 文献标志码:A 文章编号:1006 － 0103(2015)02 － 0253 － 02
DOI:10． 13375 / j． cnki． wcjps． 2015． 02． 046
Determination of alantolactone in Liuwei Dingxiang pills by HPLC
YANG Shu － ge1，HUO Sheng － qing2，PENG Yan2*
(1． Qinghai Ｒed Cross Hospital，Xining，Qinghai，810000 P． Ｒ． China;2． Haixi State Institute for Drug Control of Qinghai，Haixi，
Qinghai，817099 P． Ｒ． China)
Abstract:OBJECTIVE To detect the alantolactone content in Liuwei Dingxiang pill by HPLC．METHODS The EClipse XDB －
C18 column was used，with the column temperature of 40 ℃ and the acetonitrile － 0． 05% phosphoric acid solution(50∶50)as the
mobile phase． The flow rate was 1 mL·min －1 with the detection wavelength of 194 nm． ＲESULTS The linear range of alantolactone
was 0． 293 － 3． 51 μg(r = 0． 9999)，and the average recovery was 98． 74% with the ＲSD of 0． 57%(n = 6)． CONCLUSION The
method is accurate，simple，sensitive，reliable，and can be used for the quality control of this preparation．
Key words:HPLC;Liuwei Dingxiang pill;Alantolactone;Determination;Quality control
CLC number:Ｒ917 Document code:A Article ID:1006 － 0103(2015)02 － 0253 － 02
藏药六味丁香丸由丁香、藏木香、石灰华、甘草、
白花龙胆、诃子等六味药材组成，具有清热解毒的功
效。其质量标准仅规定了性状、鉴别和检查项，方中
主药藏木香的主要活性成分是土木香内酯和异土木
香内酯，具有抗炎、保肝等活性，可抑制感染人型结
核杆菌，还能清除活性氧自由基［1 － 2］。现采用 ＲP －
HPLC法测定了复方中的土木香内酯，方法简便、灵
敏、准确、重复性好。
1 实验部分
1． 1 仪器与试药
LC －20A型液相色谱仪(日本岛津)。土木香
内酯(中国药品生物制品鉴定所，批号:110760 －
200507);六味丁香丸(自制) ;乙腈为色谱纯;水为
超纯水;其余试剂为分析纯。
1． 2 方法与结果
1． 2． 1 溶液的制备 精密称取 3． 66 mg 土木香内
酯对照品，置 25 mL 棕色量瓶中，加甲醇溶解定容，
得 0． 146 mg·mL －1对照品溶液;精密称取 0． 041 g土
木香内酯对照品，置 10 mL棕色量瓶中，加甲醇溶解
并定容，得 4． 1 mg·mL －1对照品贮备液。取六味丁
香丸细粉 5 g，精密称定，置 100 mL 具塞锥形瓶中，
加甲醇 50 mL，称重，超声提取 40 min，放冷，称重，
用甲醇补足减失的重量，摇匀，过滤，取续滤液作为
供试品溶液。按处方比例制成不含藏木香药材的阴
性样品，同法制成阴性溶液。
1． 2． 2 色谱条件与专属性试验［3］ 色谱柱为
EClipse XDB － C18柱(250 mm × 4． 6 mm，5 μm) ，流
动相为乙腈 － 0． 05%磷酸溶液(50∶50) ，流速 1. 0
mL·min －1，检测波长 194 nm，柱温 40 ℃。理论板数
按土木香内酯峰计不低于 8 × 103，土木香内酯与相
邻峰间的分离度符合要求。取对照品、供试品和阴
性溶液，分别进样 10 μL，记录色谱图(图 1)。
0 5 10 15 20 25 30
t/min
0 5 10 15 20 25 30 0 5 10 15 20 25 30
A B C
图 1 土木香内酯对照品(A)、供试品(B)和阴性(C)溶液的色谱图
Figure 1 Chromatograms of alantolactone control solution(A)，
sample solution(B)and negative solution(C)
1． 2． 3 标准曲线的制备 取土木香内酯对照品溶
液，分别进样 2、4、8、16、24 μL，记录峰面积。以峰
面积为纵坐标、进样量为横坐标进行线性回归，得回
归方程为:Y = 4． 0549 × 103X + 1． 6986 × 104(r =
0. 9999)，土木香内酯 0． 293 ～ 3． 51 μg 与峰面积的
线性关系良好。
1． 2． 4 精密度、重复性与稳定性试验 精密吸取土
木香内酯对照品溶液 10 μL，连续进样 5 次，记录峰
面积。计算得峰面积的 ＲSD = 0． 63%(n = 5) ，表明
方法的精密度良好。精密称取同一批供试品 5 份，
按“1． 2． 1”项下方法制备供试品溶液，在“1． 2． 2”色
谱条件下进样 10 μL，记录峰面积，计算得平均含量
为 1． 69 mg·g －1，ＲSD = 0． 73%(n = 5)。取同一供
试品溶液，放置 0、2、4、7 h后，分别进样 10 μL，记录
峰面积，计算得土木香内酯峰面积的 ＲSD = 0. 53%，
表明供试品溶液在 7 h内稳定。
1． 2． 5 回收率试验 取一已知含量的样品，精密平
行称取 6 份，每份 2． 5 g，分别精密加入 1 mL土木香
内酯对照品贮备液，按“1． 2． 1”“1． 2． 2”项下方法制
备供试品溶液并分别进样 10 μL，记录峰面积，外标
法计算土木香内酯的含量及回收率(表 1)。
表 1 土木香内酯加样回收率试验的结果(mg，n =6)
Table 1 Ｒesults of recovery tests of alantolactone(mg，n =6)
Original Added Detected Ｒecovery /% 珔X /% ＲSD /%
4． 24 4． 10 8． 26 98． 05 98． 74 0． 57
4． 21 4． 10 8． 30 99． 76
4． 18 4． 10 8． 22 98． 54
4． 27 4． 10 8． 32 98． 78
4． 12 4． 10 8． 17 98． 78
4． 23 4． 10 8． 27 98． 54
1． 2． 6 含量的测定 取 3 批六味丁香丸，按
“1. 2. 1”项下方法制备供试品溶液，分别进样 10
μL，记录峰面积。按外标法计算土木香内酯的含
量。3 批六味丁香丸中土木香内酯的平均含量分别
为 1． 69、1. 63、1． 66 mg·g －1，ＲSD 分别为 0． 34%、
0. 94%、0. 60%(n = 3)。
2 讨论
曾采用乙腈 － 0． 05%磷酸水溶液(55∶45)流
动相系统，该条件下虽可提前出峰，但阴性干扰严
重，且分离度差，因此，选择乙腈 － 0． 05%磷酸溶液
(50∶50)为流动相，既能得到较好的峰型，又可排
除阴性干扰。实验中还发现:采用甲醇作为提取溶
剂，虽然提取方便、简单，但在色谱分析时产生了一
个溶剂峰，今后实验中需要改进。
参考文献:
［1］ 中华人民共和国卫生部颁标准．藏药［S］． 1995:284．
［2］ 罗达尚．中华藏本草［M］．北京:民族出版社，1997:254．
［3］ 曾锐，瞿燕，高宇明，等． ＲP － HPLC 测定藏药六味能消胶囊
中土木香内酯和异土木香内酯的含量［J］．西南大学学报:自
然科学版，2009，31(5) :121．
收稿日期:2013 － 10 － 31
452 华 西 药 学 杂 志 第 30 卷