全 文 ：HPLC法测定香青百草油中丁香酚的含量
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吴运莉，舒 阳，孟小夏，张 敏，王鹏娇，高秀丽*
(贵阳医学院 药学院，贵州 贵阳 550004)
［摘 要］目的:建立一种测定香青百草油中丁香酚含量的方法。方法:采用高效液相色谱法，色谱柱 Dia-
monsil-C18(250 mm ×4. 6 mm，5 μm) ，流动相为甲醇 －水(65∶ 35) ，流速为 1. 0 ml /min，柱温为 25 ℃，检测波长为
280 nm。结果:丁香酚在 0. 034 ～ 0. 549 μg 范围呈良好线性关系，平均回收率为 97. 63%，RSD 为 1. 22%(n =
9)。结论:高效液相色谱法简便、快速、准确、重复性好，可用于香青百草油中丁香酚的含量测定。
［关键词］色谱法，高压液相;香青百草油;丁香酚
［中图分类号］R927． 2 ［文献标识码］A ［文章编号］1000-2707(2011)05-0488-03
A HPLC Method for Content Determination of
Eugenol in Xiangqingbaicao Oil
WU Yunli，SHU Yang，MENG Xiaoxia，ZHANG Min，WANG Pengjiao，GAO Xiuli*
(School of Pharmacology，Guiyang Medical College，Guiyang 550004，Guizhou，China)
［Abstract］Objective:To establish a method for content determination of eugenol in Xiangqingbaicao
oil． Methods:The HPLC method was carried out on Diamonsil-C18(250 mm × 4． 6 mm，5 μm)col-
umn using methanol-water (65∶ 35)as mobile phase，and flow rate was 1． 0ml /min． Temperature of
the column was 25 ℃ ． Detection wavelength was 280 nm． Results:The calibration curve for eugenol
was linear in the range of 0． 034 ～ 0． 549 μg． The average recovery was 97． 63%，and RSD was
1. 22% (n = 9)． Conclusions:The method is simple，effective，accurate and reproducible for content
determination of eugenol in Xiangqingbaicao oil．
［Key words］chromatography，high pressure liquid;Xiangqingbaicao oil;eugenol
香青百草油主要是由丁香油、水杨酸甲酯、香
茅油、松节油、樟油、薄荷油等组成的油状搽剂，具
有驱风止痛，解毒止痒等功效，可用于辅助治疗关
节疼痛，跌打损伤，感冒头痛，蚊虫叮咬等症。香青
百草油中丁香油含量较高，宜进行质量监控。丁香
油的主要成分是丁香酚，目前测定丁香酚含量的方
法主要有气相色谱法［1 ～ 4］和液相色谱法［5 ～ 7］。在
有关文献的基础上，于 2011 年 5 ～ 7 月采用高效液
相色谱法测定丁香酚的含量。结果表明，该方法简
单、结果准确、专属性强，可用于香青百草油中丁香
酚的含量测定。
1 材料
仪器和试药:Agilent 1100 系列高效液相色谱
仪;香青百草油搽剂(贵州长生药业有限责任公司
提供，批号 101113，101114，101115) ;丁香酚标准
品(中国药品生物制品检定所，批号 110725 －
200610) ;甲醇为色谱纯，水为娃哈哈纯净水，其余
试剂均为分析纯。
2 方法和结果
2. 1 色谱条件
Diamonsil-C18 色谱柱 (250 mm × 4. 6 mm，
5 μm) ，流动相为甲醇 － 水(65 ∶ 35) ，流速为
1. 0 ml /min，柱温为 25 ℃，检测波长为 280 nm，进
样量 10 μl。在选定的色谱条件下各组分分离良
好，空白对照对测定无干扰。色谱图见图 1。
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第 36 卷 第 5 期
2011 年 10 月
贵 阳 医 学 院 学 报
JOURNAL OF GUIYANG MEDICAL COLLEGE
Vol． 36 No． 5
2011. 10
* * 通讯作者 E-mail:xiuligao@ hotmail． com
A. 标准品;B. 空白;C. 样品;D. 阴性对照
图 1 丁香酚的 HPLC图
Fig． 1 HPLC chromatograms of eugenol
2. 2 色谱系统适用性实验
在上述色谱条件下，丁香酚在 14. 686 min 出
峰，且与丁香酚和其他组分峰的分离度 ＞ 1. 5，分离
效果好。以丁香酚峰计算，其理论塔板数为 6 749。
2. 3 溶液制备
2. 3. 1 对照品制备 精密称取丁香酚对照品
0. 429 0 g，加甲醇定容至 5 ml为贮备液，精密吸取
贮备液 1. 0 ml，用甲醇稀释至 100 ml，摇匀;精密量
取 1. 0 ml置 50 ml容量瓶中，加甲醇溶解并稀释至
刻度，摇匀，即得对照品溶液，其中丁香酚的浓度为
0. 017 16 g /L。
2. 3. 2 供试品制备 精密量取样品 1. 0 ml 置
100 ml容量瓶中，加甲醇溶解并稀释至刻度，摇匀;
精密量取 0. 5 ml置 10 ml容量瓶中，加甲醇溶解并
稀释至刻度，摇匀，即得供试品。
2. 3. 3 阴性对照液制备 按处方取除丁香酚外的
其他各药材，依处方工艺制成制剂，按样品溶液制
备方法制备阴性对照溶液。
2. 4 线性关系考察
精密吸取对照品溶液 5、15、20、25、30 μl，分别
注入液相色谱仪中，测定其峰面积值;以峰面积为
横坐标，含量为纵坐标进行线性回归，得到回归方
程为 y = 0. 000 8x － 0. 004 1(r = 0. 999 7，n = 5) ，
在 0. 034 ～ 0. 549 μg范围呈良好线性关系。
2. 5 精密度试验
精密吸取 10 μl对照品溶液连续进样 5 次，测
得丁香酚峰面积的 RSD为 1. 27%。
2. 6 重复性试验
吸取同一批号的样品 5 份，按供试品溶液制备
的方法分别制备供试品溶液。按“2. 1”项下的方
法进行测定，结果样品中丁香酚 RSD为 1. 31%。
2. 7 稳定性实验
吸取香青百草油供试品溶液，在 0、2、4、6、10、
24 h这 6 个时间点内分别进样 10 μl，结果表明供
试品溶液中丁香酚在 24 h 内基本稳定，测得丁香
酚峰面积的 RSD为 1. 35%。
2. 8 回收率试验
精密量取 0. 5 ml 同一批号样品(批号 101113)9
份，分别加入丁香酚对照品溶液，参照“2. 3. 2”项
下的方法处理。从表 1 可以看出:丁香酚的平均回
收率为 97. 63%，RSD为 1. 22%。
表 1 丁香酚加样回收率结果
Tab． 1 Test results of eugenol spotting recovery
编号
样品中的
量(mg)
加入量
(mg)
测得量
(mg)
回收率
(%)
平均回收率
(%)
RSD
(%)
1 51. 81 41. 30 91. 82 98. 61
2 51. 81 41. 30 90. 00 96. 66
3 51. 81 41. 30 93. 28 100. 18
4 51. 81 51. 62 99. 92 96. 61
5 51. 81 51. 62 100. 81 97. 47 97. 63 1. 22
6 51. 81 51. 62 99. 37 96. 07
7 51. 81 61. 95 113. 58 99. 84
8 51. 81 61. 95 109. 28 96. 06
9 51. 81 61. 95 110. 50 97. 13
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5 期 吴运莉等 HPLC法测定香青百草油中丁香酚的含量
2. 9 样品含量测定
精密量取 3 个不同批号的样品 1. 0 ml，按照
“2. 3. 2”的方法处理，每个批号处理 3 份，测丁香
酚的峰面积，从标准曲线回归方程算出丁香酚的含
量，结果见表 2。
表 2 香青百草油样品测定结果
Tab． 2 Eugenol contents in Xiangqingbaicao
oil samples tested
批号 平均含量(g /L) RSD(%)
101113 114. 06 1. 24
101114 106. 60 1. 40
101115 103. 69 1. 33
3 讨论
实验考察了提取溶剂的选择，本品不溶于水，
易溶于醇、醚或冰醋酸中，结果甲醇直接溶解效果
最好。溶剂空白显示对测定结果无影响。方法专
属性强，方法简单易行。
本实验同时考察了色谱条件中的流动相甲醇
－水系统［8］、甲醇 － 0. 2%醋酸系统、甲醇 － 2%醋酸
系统［9］、乙腈－水系统、乙腈 － 0. 2%醋酸系统和乙
腈 － 2%醋酸系统等流动相，根据分离情况，甲醇－
水系统分离效果较好。
4 参考文献
［1］曾惠芳，黄耀海，李湘力，等 . 百草油中薄荷脑、肉桂
醛、丁香酚的含量测定［J］. 中成药，2007(29) :558 －
560.
［2］王海英．气相色谱法测定丁香油中丁香酚含量［J］．哈
尔滨医药，2009(29) :20 － 21．
［3］王喆桅，金城，焦懿，等．气相色谱法测定行军散中丁香
酚的含量［J］．解放军药学学报，2010(26) :137 － 138．
［4］武爱玲，赵新杰．气相色谱法测定接骨止痛酊中水杨酸
甲酯和丁香酚的含量［J］． 中医药报，2011(17) :75 －
76．
［5］牛瑞仙．高效液相色谱法测定八味檀香散中丁香酚的
含量［J］．泰山医学院学报，2009(30) :695 － 696．
［6］张少彦，饶华孟．高效液相色谱法测定丁硼乳膏中丁香
酚的含量［J］．海峡药学，2009 (10) :41 － 42．
［7］吴军侠，赵红侠．高效液相色谱法测定蒙药暖宫七味散
中丁香酚含量［J］．中国业，2010(17) :31．
［8］王也，裘国丽，黄华．高效液相色谱法测定丁桂儿脐贴
中丁香酚和桂皮醛含量［J］．中国药业，2011(20) :43．
［9］谢友良，曾宝，吴燕红，等． HPLC 法测定参香养胃胶囊
中橙皮苷、丁香酚和厚朴酚的含量测定［J］．中药新药
与临床药理，2006(1) :12 － 14．
(2011 － 07 － 14 收稿，2011 － 09 － 16 修回

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［4］王晓春，甘怡群． 国外关于工作倦怠研究的现状述评
［J］．心理科学进展，2003(5) :567 － 572．
［5］李小妹，刘彦君． 护士工作压力源及工作疲惫感的调
查研究［J］．中华护理学杂志，2000(11) :645 － 649．
［6］李超平，时勘，罗正学，等． 医护人员工作家庭冲突与
工作倦怠的关系［J］． 中国心理卫生杂志，2003(12) :
807 － 809．
［7］李永鑫，时金献，李艺敏．医院护士工作倦怠及其影响
因素的调查研究［J］．护理研究，2007(3A) :602 － 604．
［8］Huberman M． Burnout in teaching caress［J］． European
Education，1991 (3) :47 － 49．
(2011 － 05 － 31 收稿，2011 － 06 － 27 修回)
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贵 阳 医 学 院 学 报 36 卷