全 文 ：生物杖术通报
· 综述与专论 · 年增刊
天然真菌与人工发酵制品对免疫系统的影响研究概况
游明乐
天德行生物工程厦门有限公司 , 厦门
摘 要 整理分析有关真菌及其生物技术制品生物活性的研究文献 , 发现真菌类中药资源丰富、品种繁多、
成分复杂、 药理作用广泛 。 目前已被动物实验或临床研究证实具有显著生物活性的主要成分是多糖类 、三菇类 、核
等类 以及多肤类等天然化合物 。 尤其是作为真菌细胞结构物质的高分子多糖体对机体免疫系统具有显著的影响 。
如在保护机体免疫器官、增加免疫器官重量 , 以及对单核吞噬细胞 系统 、 细胞、 细胞、 红细胞 、 细胞 、 细
胞 、补体 系统 、 白细胞介素、干扰素 、集落刺激因子 、肿瘤坏死因子及一氧化碳等多项或单项免疫功能具有显著的增
强或调节作用 。 在抗病毒与抗肿瘤免疫等方面显示 出自身特点和优势 。 虽然也有一些真菌及其提取物被证明时
机体免疫功能具有显著的 、与药物剂量相关的抑制作用 , 但并未发现对机体免疫器官或免疫细胞有任何的毒副反
应 。 作者拟将 年来有关真菌及其提取物对机体免疫系统的影响研究文献进行了整理 , 并按免疫功能分类进行
了综述 , 对相关问题在文后还作了讨论 , 以期为真菌类药物在医学上进行深入的临床研究与应用提供思路 。
关健词 天然真菌 子实体 发酵 菌丝体 真菌多糖 免疫系统 免疫活性 讨论
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Im m un e aetivi ty D iseussion
作者简介 :游明乐(19 53一 ) , 男 , 福建 , 中级工程师 ,研究方向为真菌在医学上的应用
生物杖术通报 B 勿te ch n口勿盯 2008 年增刊
引言
随着现代医学 、免疫学、细胞生物学及分子生物
学等的深人发展 , 使人们更加认识到免疫系统的紊
乱 , 不但易发生感染或肿瘤 , 出现自身免疫病 , 而且
与人体衰老及老年人的多发病如高血压 、高血脂 、糖
尿病、心脑血管病甚至精神病等多种疾病的发生与
发展均有密切的关系 。 AI D S 的危害 , 使人们对免疫
缺陷的严重后果有了更深刻的认识 。 而且不少化学
药物和免疫制剂毒副反应加大 , 药源性疾病增多 , 医
源性疾病加重 , 因此 , 从天然产物中尤其是真菌类中
药研究和开发免疫调节剂 , 已经成为当代新药研究
和开发的重要内容〔‘〕。
真菌类中药资源丰富、品种繁多 ,据报道自然界
中现存的真菌约有 20 一 40 万种 , 中国甚少也有 10
万余种 , 经试验具有药效的真菌达 450 余种 , 其中
药 、食兼用的约250 余种 。 目前可供临床应用的药
用真菌约 50 余种 , 常用的不足 30 种 , 仅占天然资源
中的极少部分 , 而大部分尚未得到开发与应用 [2, , 〕。
药用真菌中所含的天然化合物即丰富又复杂 , 其中
已被动物试验或临床研究证实具有显著生物活性的
主要成分是多糖类(包括糖蛋白 、 ) 三菇类 、核昔类 、
多肤类 、街醇类 、色素类 、生物碱类及脂肪酸类等化
合物 , 这些物质对人体心脑血管系统 、消化系统 、中
枢神经系统 、内分泌系统 、生殖系统 、泌尿系统 、呼吸
系统及免疫系统等具有广泛的药理作用〔’,4 , ] 。 尤
其是作为真菌细胞结构物质的高分子多糖体在抗病
毒 、抗肿瘤及抗衰老免疫方面具有显著增强作用或
调节作用的优势 。 此外 , 也有发现一些真菌及其提
取物对机体多项或单项免疫功能表现出显著的 、与
药物剂量相关的抑制作用 , 但这方面的研究相对较
少 。 到目前为止 , 国内外已从担子菌亚门为主的真
菌中筛选出 20 多种具有生物活性的多糖类物质 。
我国发现有重要药用价值的真菌多糖也有 30 余
种【’〕, 其中在各类相关的科技文献中出现频率较高
的且已被证实具有广泛及显著的免疫增强或免疫调
节作用的真菌多糖依次有灵芝 、冬虫夏草 、香菇 、获
菩 、云芝 、银耳 、猪等 、猴头菌 、 蜜环菌 、 阿魏蘑 、灰树
花等 。 现就 20 多年来有关真菌及其提取物对机体
免疫系统的影响研究概况按如下功能分类进行综
述 。
1 对机体免疫系统的增强或调节作用
免疫系统由多个免疫器官 , 多种免疫细胞和众
多免疫分子乃至免疫基因及信号传导系统所组成 。
它们彼此调节 , 相互影响 , 构成了人体完整 、复杂的
免疫调节网络。 在正常情况下 , 免疫系统的结构与
功能一般是机体维持正常免疫稳定性的基础 , 如发
生异常则出现免疫功能紊乱或产生免疫性疾病!’〕。
1
.
1 对免疫器官的作用
许美凤等[e] 研究表明 , 用云芝糖肤(Ps P )2岁
kg 一 ‘连续给大鼠灌 胃(19)sd , 可使脾脏 T 淋巴细胞
增加 , 并引起脾和外周血液 T 淋巴细胞 明显增殖 ,
血中抗体(IgG )滴度明显升高。 并可拮抗大鼠隔日
口服环磷酞胺(Cy )40 m岁kg 一 1 对 自然杀伤细胞
(NK 细胞)的抑制 。 吴宪瑞等[v] 发现 , 黑木耳多糖
可明显增加小鼠脾脏重量 ,脾指数比对照组增加 0.
43 倍。 龚晓健等[51证实 , 人工虫草菌丝体胞内多糖
及发酵液胞外多糖在 14 0m岁kg 剂量下均能显著增
加小鼠脾脏及胸腺重量 ;胞内多糖 70 m岁kg 剂量组
可显著增加脾脏重量 , 与阳性对照组 (云芝多糖)比
较 尸 < 0 .05 ;胞外多糖 70 m岁kg 剂量组也可增加脾
脏重量 , 但与对照组比较无明显差异 。 甘勇等[’〕报
道 , 以阿魏蘑子实体粗多糖 A 与菌丝体粗多糖 B 在
两种剂量上对增加小鼠胸腺重量有极显著效果 ;粗
多糖 A 与粗多糖 B 在 10 m岁kg · d 和 20 m 岁kg · d
两种剂量上都能显著和极显著增加小鼠脾重 。 于敏
等[’。]以蜜环菌菌索多糖(AM P) 对小鼠19 时能显著
地增加脾脏重量 , 降低胸腺重量 。 但 AM P 的剂量大
小对免疫器官的影响程度不同 。 宋玉光等【川证实 ,
滑菇多糖可明显延长荷瘤小鼠的生长期 , 有效促进
荷瘤小鼠和正常小鼠脾脏的生长和分化 , 增加脾脏
的重量 , 能有效地降低肿瘤组 织 中乳酸脱氢酶
(LD H )活性 。 沈新娥等〔”;用不同剂量的复方虫草
精华(Lun幼t)即虫草肤对小鼠 ig10d 后 , 采用 M Tr
法检测 ,结果表明 , 复方虫草精华对正常及 Cy 所致
免疫功能低下小鼠的脾淋巴细胞分裂 、增殖有显著
促进作用 。 杜巍等〔” 〕用灰树花菌丝体多糖 (G · F
一2)3组剂量 (10卜g/ m l、 5 0 林『m l 和 100林g/ nil )
对小鼠进行脾淋巴细胞增殖反应试验表明 , G · F ·
一 2 不仅具有清除氧自由基的活性 , 单独使用也能
显著增加小鼠脾淋巴细胞增殖 , 且随着剂量增加效
年增刊 游明乐等:天然真菌与人工发酵制品对免疫系统的影响研究概况
果更显著 。 张劲松等[“ ]用灵芝子实体提取物 (P。) 倍川 。 陈春霞[z0 ]以 50 m岁kg · d 、 1d 对小鼠皮下 ip
及其纯化所得的组分 P3:和菌丝体提取物(F3)及其 梭甲基获荃多糖 , 能使吞噬率和吞噬指数分别增加
纯化所得的组分 F32、 F 3 3 , 各个组分在 10 林留ml 的 70 .83 % 和 112 % , 证明该多糖能显著提高小鼠腹腔
剂量下进行小鼠脾淋巴细胞增殖的研究表明 , 在没 巨噬细胞的吞噬功能 。 李明春等卿 ]报道 , 灵芝多糖
有T 细胞致丝裂原 Con A (T 细胞致丝裂)的诱导下 , 能降低小鼠腹腔巨噬细胞活性氧的产生 , 拮抗佛波
都能显著刺激小鼠脾淋巴细胞增殖 , 其中 F3和 F32 醋引起的小鼠腹腔巨噬细胞活性氧的产生 , 具有清
的刺激作用最强 , 说明 F:和 F32有直接激活小鼠脾 除氧自由基的作用 , 这是灵芝多糖产生免疫作用和
淋巴细胞增殖作用 。 抗衰老作用的重要途径 。 王道福等阵〕在观察毛木
1.2 对单核吞噬细胞系统 (M PS )的作用 耳多糖体外对小鼠腹腔巨噬细胞蛋白激酶 A( PK A )
王金华等【‘, 〕用金耳发酵液多糖对小鼠分别 19 活性影响时发现 , 毛木耳多糖能导致小鼠 PKA 活性
及皮下 ip (注射) , 以云芝肝泰作阳性对照 , 每 d 给 明显升高 , 从而表明 , 毛木耳多糖的免疫增强作用与
药 1次 , 连续 10 d , 结果表明 , 1 9 给药 ro m 岁kg 就可 其增强巨噬细胞中 PKA 的活性有关 , 且量效关系存
显著提高腹腔 巨噬细胞 的吞噬鸡红细胞功能 , 在一定的浓度依赖性 。 此外 , 阿魏蘑多糖[0] 、 蜜环
30 m 留kg 及 90 m 岁kg 也有提高作用的趋势。 i p 给药 菌多糖[’。〕、冬菇粗多糖阳〕, 以及银耳 、猪荃 、牛肝菌
30 m岁kg及 90 m 酬kg , 均可显著提高巨噬细胞的吞 等川真菌多糖也能明显激活或增强小鼠腹腔巨噬
噬功能 , 作用强度与对照组相似。 贾泰元〔‘6 ]采用不 细胞的吞噬能力 。
同浓度虫草水提液与 J7 74 巨噬细胞一起作细胞培 1.3 对 T 细胞的作用
养 , 发现天然虫草水提物对巨噬细胞的吞噬活性有 王贤惠等[2’] 发现 , 用猴头菌多糖 lo m岁kg · d
明显增强作用 , 在药物浓度 10 林岁m l一 ’时即出现显 、 5d 腹腔 iP , 可使小鼠绵羊红细胞(SR B C) 的细胞
著性增高效应 ;5 o 林岁nil 一’时达峰值 , 与无药对照 免疫 一 迟发型超敏反应 (D TH )增强(尸 < 0 . 05 ) 。
组比较 , 细胞活性增强 2.58 倍;在浓度 100 林岁 也有报道 , 猴头菌子实体粗多糖高剂量组 (1岁kg)
m l一 ’ 、 20 0 卜岁nil 一 ’及 300 林『nil 一 ’时均保持其高效 对小鼠19 , 与对照组相比 , 对 D TH 的影响也有显著
状态 , 分别是对照组的 2.51 、 2 . 39 和 2.45 倍 。 此 性增强作用(尸< 0 . 0 5) [’7 ] 。 曹容华等[川 以灵芝多
外 , 人工虫草胞内及胞外多糖在 140 m留kg 的剂量 糖 25 一 50 m 岁kg · d x s d 腹腔 iP , 结果表明 , 刀豆蛋
下均具有显著性提高碳粒廓清度指数和吞噬指数的 白(Con A )诱导的小鼠脾 T 淋巴细胞增殖反应与对
作用 , 胞内多糖 70 m岁kg 剂量组可显著性增加吞噬 照组相比有极显著性增强 (尸 < 0 . 01 ) ;而用 10 -
指数 , 说明人工虫草多糖能够增强单核巨噬细胞的 Zo m酬kg · d x s d 腹腔 ip 与对照组相比则显著降
吞噬功能仁‘〕。 杨众等【”〕用猴头菌子实体粗多糖对 低( < 0.05 ) 。 另一动物实验也表明 , 灵芝多糖连续
小鼠 19 , 对照组以蒸馏水 19 , 每个实验连续 28d , 结 给药sd , 在大剂量时抑制 T 淋巴细胞增殖反应及 T
果表明 , 猴头菌粗多糖的 3 个剂量组 (0.17 『kg 、 0 . 细胞表面表型的表达和 IL 一 2 的产生 , 而在小剂量
3 留kg 和 1岁kg)对小鼠腹腔巨噬细胞吞噬鸡红细 时则可明显增强 T 淋巴细胞的增殖反应和 T 细胞
胞的吞噬率和吞噬指数均明显高于对照组 , 且高剂 表面表型的表达 , 同时增强小鼠脾细胞产生 IL 一 2
量组 与对 照 组相 比 , 存 在显著性差异 。 吕苏成 的能力 , 其机制可能是通过增强辅助性 T 细胞的数
等t’8,1 9」研 究 发 现 , 以 获荃 多糖 250 m岁kg · d 、 目而实现 的〔’〕。 周 爱武 等[26〕用 国产香 菇多 糖
50 0m 岁kg · d 和 10 00m 岁kg · d 对小鼠 i盯d , 可明显 (LN T )对 Con A 诱导小鼠脾淋 巴细胞增殖反应表
增强正常及荷瘤小鼠腹腔巨噬细胞的吞噬功能 。 用 明 ,
LN
T 在 1 一 25 m g · L 一 ’ · d 浓度范围内 , 可明显
本品 i两d , 吞 噬率提高 35 .5 % , 吞噬指数提高 58 . 促进 Con A 诱导的 T 细胞增殖反应与 IL 一 的产生 。
0 % ;i p lo d
, 吞 噬率提 高 6 . 1% , 吞噬指数 提高 阿魏蘑子实体粗多糖 A 在剂量为 20 m岁kg · d 的条
12 1% 。 此外 , 获菩多糖有抗可的松引起的免疫抑制 件下 , 促进小鼠 DTH 有极显著效果 (尸 < 0 . 01 ) ;菌
作用 , 与对照 组相 比 , 巨噬细胞吞 噬能力提高 2 丝体粗多糖 B 则无明显作用 ;在剂量 40 m 扩kg · d
生物杖术通报 B io te chn o勿盯 2008 年增刊
的条件下 , 粗多糖 B 对小鼠 D TH 有显著效果 (尸 <
0 .05 ) , 粗多糖 A 的效果极显著(尸 < 0 . 01 )[ , 〕。 此
外 , 银耳多糖 、猪菩多糖 、获菩水提液川 以及人工虫
草胞内多糖!s〕、蜜环菌菌索多糖[‘“〕与金耳发酵液多
糖〔” ]等也能增强 T 淋巴细胞活性 , 促进 T 细胞介导
的细胞免疫 。
1
.
4 对 B 细胞及其产生抗体的作用
林志彬等【”〕在研究银耳多糖对绵羊红细胞
(SR BC )致敏小 鼠溶血素形成的影响时发现 , 银耳
多糖 lo m留kg · d x 7d 皮下 ip , 能使正常小鼠和
Cylom 岁kg 腹腔 ip 小鼠的半数溶血值(H C50 )分别
增加 92 .2% 和 112.9% , 表明银耳多糖能促进正常
小鼠和免疫功能受抑制小鼠的溶血素形成 。 国产香
菇多糖(LNT) 的 3 个剂量组和 日本产 LNT 均可显
著促进 Cy 诱导免疫功能低下的小鼠脾细胞溶血素
抗体(IgM )的生成 , 其中以 1m g · k g 一 ’ · d 剂量 LNT
的作用最显著 , 且较等剂量的 日本产 LNT 的作用
强 , 但对正常小鼠的 IgM 生成无明显影响〔’6〕。 用金
耳发酵液多糖50 m岁kg组 , 经 19 和 ip 给药均可显著
促进 Cy所致的免疫抑制小 鼠抗体生成的能力工‘, 〕。
以人工虫草菌丝体多糖 70 m酬kg 与 14 0m岁kg 剂量
组 19给药 , 可显著与极显著提高小鼠溶血素水平(p< 0.05 , p < 0 . 01 ) , 并呈剂量依赖性[s〕。 聂红等[28〕
以复方猪菩多糖(硒十猪等多糖)高剂量组 (25 m 岁
kg · d) 可提高免疫抑制小鼠 IgG 水平 , 使 IgG 量上
升为 4.39 盯L 。 此外 , 获菩多糖 、获荃素(小剂量 ) 、
灵芝多糖 、猴头菌多糖川及蜜环菌多糖〔’。〕等对 B 细
胞及其抗体产生也有相似的增强作用 。
1
.
5 对红细胞(R BC) 的作用
孙云汉等汇”〕发现 , 冬虫夏草口服液能增强红细
胞膜相 C3bR 活性 , 作用机理可能是虫草多糖与红
细胞膜上相应的多糖受体相结合后 , 激活了 C3bR
活性而发挥其免疫粘附和清除功能 。 鲁进宇等[’“3
用云芝多糖(PsP )250 或 soom g · k g 一 ‘给小鼠 19 , 发
现可显著提高正常小鼠经植物血球凝集素(PH A )
刺激的淋巴细胞转化率 , 血清抗绵羊红细胞血凝抗
体效价 , 脾细胞产生 IgM 能力 , N K 及 M 中抗瘤活
性 。 高学军等【川试验表明 , 香菇多糖对雏鸡红细胞
免疫功能具有继发性增强作用 。 江振友等[’2 〕发现 ,
灵芝多糖可提高绵羊红细胞 (SR BC )引起的血凝抗
体(H A A b) 效价 , 表明其能促进特异性抗体产生 。
刘景田等[”〕报道 , 灵芝 、云芝 、获荃 、香菇 、银耳等多
糖也可提高红细胞膜相 C3bR 免疫活性 , 进而促进
细胞与补体致敏酵母 的粘附作用 , 从而使 RBc 、
C 3 b R R ( 红细胞 C3b受体花环率)增高 , 达到调节和
(或)增强其红细胞免疫功能的作用 。
1
.
6 对 N K 细胞的作用
王旭丹等〔’4〕分别用冬虫夏草水提物 0 .5岁kg 、
1 岁kg 、 5 扩kg 和 ro 岁kg 剂量对小鼠分组 19 给药 , 结
果显示冬虫夏草从低剂量到高剂量均能显著增强
N K 细胞的活性 (其增强作用与药物剂量无相关
性) , 提高小鼠 N K 细胞对肿瘤细胞的杀伤率 。 复方
虫草精华也能增强小鼠 NK 细胞活性 , 并能拮抗 C y
对小鼠 N K 细胞活性的抑制作用〔”] 。 周昌艳等[”〕
分别以灵芝酸 600m g/ kg 和 120m g/ kg 给小鼠 口服
10 d 的治疗方案 , 发现灵芝酸成分能明显地激活荷
Le wis 肺癌小鼠的 N K 细胞活性 , 且 NK 细胞活性提
高率与剂量有一定的相关性 。 3 次重复试验显示 ,
灵芝酸 6O0m 岁kg 对 N K 细胞的活性提高率与阳性
对照组(云芝糖肤2岁kg)相当 。 赤芝子实体纯多糖
(P3, 、 P 3 : ) 也表现出较好的提高人外周血 N K 细胞杀
伤活性的作用 ;菌丝体粗多糖(F) 和纯多糖(F3 )也
表现出较强的作用〔’4 { 。 此外 , 以猴头菌子实体粗多
糖 3个剂量组分次定时对小鼠 19 连续 4 周 , 结果表
明 , 猴头菌子实体粗多糖高剂量组 (1岁kg)能明显
提高自然杀伤细胞 (N K 细胞 )活性 , 与对照组比较
有显著性差异(尸 < 0 .05 ) 〔”〕。
1
.
7 对 LA K 细胞的作用
曹容华等[’“1和徐新等仁” , 3s] 在灵芝多糖(G LP )
对人脐血 LA K (CB 一L A K ) 细胞增殖活性的影响研究
表明 , 不同浓度的 G LP 不但能直接刺激单核细胞
(CB M C )增殖 , 而且能协 同 PH A 刺激 CB M C 的增
殖 , 协同 rIL 一2 提高 CB 一 LA K 细胞表面 IL 一R 的表
达 。 特别是在 rI L一 诱导 CB 一 L A K 细胞早期加人不
同浓度的 G廿 , 可使 CB 一LA K 细胞对靶细胞的杀伤
能力明显增强 , 最佳浓度为 10林岁ml 。 同时 , 从超微
结构水平的研究发现用 G廿 处理的 C B 一 LA K 细胞
浆丰富 , 富含线粒体和核糖 , 常见数个 c B 一 LA K 细胞
围绕一个肿瘤靶细胞 。 靶细胞内结构紊乱 , 线粒体
空泡化 , 核膜不清 , 出现松弛 , 靶细胞膜部分破渍 , 内
年增刊 游明乐等:天然真菌与人工发酵制品对免疫系统的影响研究概况
容物外溢 , 呈 “凋零”状坏死 。 这一结果说明 G廿 可
能是通过提高 CB 一 LA K 细胞的代谢水平来增强其杀
伤靶细胞的功能川 。 张昌菊等〔”〕发现不同浓度的
猪荃多糖均能诱导 LA K 细胞 , 当效靶 比为 10 时 ,
25 0
卜留nil 的作用优于其他组 ;不同浓度的猪菩多
糖还能明显增强 IL 一 (50 林岁m l) 所诱导的LA K 细胞
活性 ,诱导 LA K 细胞活性具有增强作用 , 较单用等
量 IL 一2 提高 17 .1% 和 19.5% 。
1
.
8 对补体水平及活性的作用
陶品等闪]报道 , 获荃多糖能激活肿瘤邻近的补
体系统协同吞噬细胞 、淋巴细胞杀伤肿瘤细胞 。 获
菩多糖增强巨噬细胞吞噬功能的机制与激活补体系
统有关 。 也有报道 , 获荃多糖可以激活 C3 、 C5 及 B
因子 , 提高小鼠的体液免疫功能[’8 〕。 香菇多糖能激
活补体系统的经典途径和代替途径 , 导致 M中的非
特异性细胞毒性提高和中性白细胞对肿瘤细胞的浸
润 。
1
.
9 对白细胞介素(IL) 的产生及其活性的作用
刘平等【4‘〕发现 , 在一定剂量 con A 刺激下 , 经虫
草提取物作用后的大鼠肝脏枯否氏细胞 IL 一 1 分泌
量显著增加 , 以 20 m 岁ml 的作用最强 , 增加至 40 m岁
m l时 , 其作用反而减弱 。 提示虫草提取物对 IL 一 1 的
分泌量与用药剂量相关 。 王汉涛等〔4 , 〕以云芝多糖
50 om岁kg · d x 7d 对小鼠 19 , 发现可显著增强腹腔
巨噬细胞分泌 IL 一 1 的能力 。
以云芝多糖 250 一 s o m 岁kg · d x 7 d 进行小鼠
19 , 可显著提高脾 T 细胞产生 IL 一2 和 IF N 一r 的水
平〔4, 〕。 云芝糖肤(Ps P) 也能增加 T 细胞增殖和 IL-
2 的分泌[’〕。 国产与日本产香菇多糖(LNT) 在低浓
度(0 .2 一 0 . s m g · L 一 ’) 时均可促进与增强 c on A 诱
导小鼠脾淋巴细胞产生 IL 一2 , 达峰值后 , 随着 LN T
浓度的增加 , 促进作用逐渐降低 , 两者的双向作用均
呈浓度依赖性【川 。 在阿魏蘑多糖对 IL 一2 的诱生检
测实验中发现各样品的吸光度随浓度的改变 (lm 扩
L 、 s m g/ L 、 2 5 / m g/ L 和 125m g/ L )出现中间高两头低
的变化 , 说明阿魏蘑多糖在促进细胞因子的产生方
面具有双重效应 , 在一定浓度范围内 , 表现为促进机
体免疫活性 , 超过一定浓度范围 , 则表现为抑制机体
免疫活性〔’] 。 灵芝酸对荷 Le wi , 肺癌小鼠 IL 一2 生成
试验结果显示 , 以与测定 NK 细胞活性同样的给药
方案能明显增加 Le wi s肺癌小鼠 IL 一2 的生成 , 其作
用与剂量也有一定的相关性 。 灵芝酸 60 m酬kg 对
IL 一 的刺激指数接近阳性对照组云芝糖肤2岁kg 的
刺激指数〔35J 。 此外 , 猴头菌 、银耳 、获荃等多糖及香
菇菌丝体提取物(LE M )、冬虫夏草水煎液对 IL 一2 的
产生及其活性也有相似的促进和(或)调节作用川 。
1
.
ro 对干扰素(IF N) 的诱生和促诱生作用
杨吉成等〔43 一 ‘, ] 报道 , 在银耳多糖对 51 80 白血
病细胞系分别进行的IF N 诱生与促诱生试验中 , 发
现 125 一 1 0 0 林扩nil 浓度的银耳多糖组 IF N 效价比
常规诱生组高 10 一 25 倍 , 其中以 50 林岁mI 浓度效
果最佳。 发现用不同浓度(1.25 一 1 0 林岁m l) 的梭
甲基获菩多糖对淋巴细胞 IF N 促诱生效价比常规组
高 10 一 20 倍 。 用50 m岁nil 浓度的梭甲基获荃多糖
对 51 80 白血病细胞系进行 IF N 促诱生动力学实验 ,
结果表明梭甲基获荃多糖启动的促诱生动态曲线和
常规诱生及启动的促诱生动态曲线 , 均在4 一 2 0h 上
升 , 20 一 24 h 达高峰 , 后逐渐下降 , 但在各相应时期
的促诱生 IF N 的效价均明显高于常规诱生及启动诱
生组 。 发现云芝多糖 250 m岁kg 和 so m 岁kg 剂量
可显著提高小鼠脾细胞产生 IF N 一 y 水平 。 云芝糖
肤也能增加人脐血细胞促 IF N 一y 和 IF N 一 a 产生量 ,
并发现其促诱生的 IF N 效价比常规组高5 一 7 倍 , 比
启动诱生组高 2.5 一 3 . 5 倍 , 表明其有效成分均为理
想的IF N 促诱生剂 。 李家琦等网〕报道 , 灵芝 、香菇 、
猪菩等也可明显诱导淋巴细胞产生 IF N 一 a 。 庄毅
等[4, ] 用槐耳菌固体发酵物 (槐蔑菌质)制备的清
膏 、粗多糖 、正丁醇萃取部位及残余物4 部位进行动
物血清 IF N 诱生比较实验 , 发现这 4 个部位都有效 。
但清膏部位与其他各有关部位比较 , 占有明显的优
势 。
1
.
n 对集落刺激因子 (C S F) 的作用
李静等〔48」研究从获等中分离并鉴定了具有诱
生 CSF 的活性成分 , 结果从获菩中分离鉴定了两个
四环三菇酸类成分 , 分别是猪荃酸 c 和获荃酸 , 其中
具有诱生 CSF 作用的猪荃酸 c 系首次从获菩中分
离所得 , 发现提取物在小鼠体内具有增强 M 中产生
c sFs 的作用 。 盛伟华等〔‘, 〕研究以梭甲基获荃多糖
(CM P )和 PH A 复合培养诱导健康人外周血淋巴细
胞 (PBL) 产生高效价的 G M 一 C S F , 结果表明 , 在培
健物拭术通报 B to te chn口人, g 梦 2 0 0 8 年增刊
养48 h 时就开始产生 GM 一C S F , 然后逐渐升高 , 于
168h 时效价可达 80 ooou /m l以上 。 何彦丽等[’。]报
道 , 香菇多糖 、云芝多糖可增加淋巴细胞培养上清液
中的C SF 活力 , 促进骨髓细胞和粒/巨噬细胞集落
(eFu 一e M ) 数量的增加。
1
.
12 对肿瘤坏死 因子 (TNF) 的影响
崔金莺等[” 〕报道 , 银耳多糖不仅可增加小鼠脾
细胞培养上清液中 IL 一 2 的活性 , 还可增强小鼠腹
腔巨噬细胞培养上请液中IL 一 6 和 TN F 的活性 , 促
进小鼠脾细胞中IL 一入IL 一 和 IN F 的 m RN A 表达 , 这
一作用呈现出明显的剂量依赖关系 。 缪竞成等[”]
观察了竣甲基获菩多糖(CM P) 对人外周血淋巴细
胞 (H PB L) 产生 TN F 、 IL 石 的促诱生作用 , 结果显
示 , 在 CM p 浓度为 50 、 1 0 、 1 5 0 林留m l时 , 对 H pBL
的 TN F 及 IL 一 均有显著的诱生作用 (尸 < 0 .01 ) , 且
在浓度为 10 林岁耐 时效果最佳 , 说明 CM P 本身就
有较高的 TN F 诱生效应 。 另外 , H P B L 经 C M P 预处
理后再以 PH A 或(和 )C on A 刺激培养后发现 , C M P
促诱生组比仅用 PH A 或(和 )Con A 常规组培养上
清液中的 T NF 效价高 0.5 一 1 . 0 倍 , I L 石 效价高0.5
一 0
.
8 倍;C M P 十 P H A 十 C on A 组对上述两种细胞因
子的促诱生作用更明显 。 说明 CM P 是一种有效的
细胞因子促诱生剂 。 张劲松等〔‘4 〕观察了赤芝子实
体与菌丝体提取物各组分对人外周血分泌 TN F 的
影响 , 发现在 0.lm扩ml 的低浓度时 , 子实体提取物
的各组分随样品纯度的提高 , 其诱导分泌 TN F 一a 的
量也在增加 ;在 ro m岁ml 的高浓度时 , 其对 TN F 一a
的分泌量的影响相差不大 。 在 0.lm扩ml 的低浓度
时 , 菌丝体提取物各组分对 TN F一 a 分泌量的影响与
子实体相当 , 在 10 m岁ml 的高浓度时 , 要明显大于
子实体提取物各组分 。 无论是子实体还是菌丝体各
组分 , 其对 TN F 一 a 释放量的影响均存在剂量依赖关
系 。 此外 , 香菇多糖能直接诱导腹腔巨噬细胞分泌
TN F[ ’] 。 虫草菌丝体酸提取物能促进小鼠或大鼠
TN F 的诱生〔“〕。 虫草菌丝体酸提取物加 C on A 也可
促进大鼠肝枯否氏细胞分泌 TNF 量增多[“〕。 云芝
多糖 so m岁耐 · d x 7 d 对小鼠 19 , 也可显著增强小
鼠腹腔巨噬细胞分泌 TN F 的能力[‘, J 。
1
.
13 对一氧化碳 (N O )产生的作用
庞战军等[” ]考察了云芝多糖(Ps K )及脂多糖
(LPS )对小鼠腹腔巨噬细胞谷胧昔肤过氧化物酶 ,
超氧化物歧化酶(SOD )活性及 N O 释放的作用 , 结
果发现用 PS K 对小鼠腹腔 ip 可以不同程度地提高
小鼠腹腔巨噬细胞上述酶的活性 。 同时在 LP S 作
用下 , 可进一步升高上述酶活性 , 使NO 释放量有较
大增加。 从而说明云芝多糖对免疫活性细胞在受到
抗原 、廿S及细胞因子刺激时 , 可表达 iN O S 并产生
N O , 通过与各种细胞因子复杂的相互作用 , 增强机
体天然免疫功能 , 调节获得性免疫反应[‘〕。
2 对抗病毒感染的免疫增强作用
抗感染是机体免疫防御的重要功能 , 免疫学的
起源最早就是从抗感染研究开始的。 自20 世纪 70
年代起 , 发现某些真菌多糖等天然化合物 , 对感染性
病毒如流感病毒 、人类疤疹病毒(H sv 、 v z v 、 e M v 、
E B V )
、柯萨奇病毒(CV ) 、 乙肝病毒(H B V )和人类
免疫缺陷病毒(HI V )等具有显著的免疫活性引起了
许多学者的高度重视 , 尤其是灵芝 、云芝 、香菇 、银耳
等真菌及其提取物或组分对 HI V 的抗感染免疫活
性成为目前人们关注的焦点 。
项哨等【’4〕研究发现 , 用灰树花多糖 50 、 10 0 、
20 0 m 岁kg · d x 7 d 分别对小 鼠 19 , 待流感病毒
(PR S/34 株 )感染的对照组小鼠 ro o% 死亡时 , 处理
组病死率分别下降 30 % 、 60 % 和 70 % 。 I 型单纯疤
疹病毒小鼠处理组给药方案同流感病毒 , 以阿昔洛
韦 15m岁kg 作为阳性对照组 , 待病毒感染对照组小
鼠 100% 死亡时 , 处理组病死率分别下降70 % 、20 %
和 ro % , 最佳处理剂量为 so m 酬kg · d 。 这一结果
表明灰树花多糖具有较明显的对抗上述两种病毒感
染的作用 , 且与用药剂量相关 。 该作者的另一实验
表明 , 灰树花多糖具有促进病毒诱生干扰素的作用 ,
因此推测 ,灰树花多糖抗病毒效应可能也是通过提
高机体的免疫力而发挥作用 。 也有报道在小鼠感染
巨细胞病毒(CM V )15d前 , 用冬虫夏草脂质体处理 ,
能有效地降低小鼠唾液中的病毒百分率。 说明冬虫
夏草脂质体对小鼠感染 C M V 有一定的抑制或消除
作用 。 冬虫夏草脂质体 + 黄蔑则效果更佳 〔’〕。 张
丽萍等[”」报道 , 将硫酸化金顶侧耳多糖与柯萨奇病
毒(CV 一 B S) 进行体外实验 , 结果发现硫酸化金顶侧
耳多糖具有显著的抗 CV 一 B5 的作用(尸 < 0 . 05 ) 。
张正等〔’6 〕在研究 20 种真菌使用体外试管法测
年增刊 游明乐等:天然真菌与人工发酵制品对免疫系统的影响研究概况
定对 H Bv 一 D N A P 的抑制 、细胞生物学方法及在感
染 H Bv 病毒的幼鸭上进行整体实验中证实 , 试管内
直接抑制 H BV 一 D N A P 的抑制率在 50 % 以上者有虫
草 、树舌 、榆蘑 、白蘑 、多脂磷伞 、黑灵芝 、银耳 、猪荃 、
松生层孔菌、 毛头鬼伞 、竹荪 、薄树芝等 12 种 , 其中
抑制率大于 85 % 者为虫草和树舌 , 它们抑制 PLC/
PR F/ 5 细胞系分泌 H B sA g作用超过 50% , 并能抑制
鸭体内的鸭乙肝病毒(D H B V )感染 。 常德成[5, 3 报
道 , 应用猪菩多糖治疗慢性乙型肝炎取得了较好疗
效 , 降谷丙转氨酶(A LT )总有效率为7 · 4 % , H Be A g
转阴率为 34 .17 % 。 近年来采用猪荃多糖合并乙肝
疫苗的方法 , 更加提高了疗效 , H B e A g 转阴率达
60 % , H B V 一 D N A 转阴率达 67 .5% 。 庄毅等【46] 用
槐蔑菌质提取的清膏对鸭乙肝病毒感染鸭体内进行
治疗实验 , 与无环鸟昔比较结果证实 , 10 9 · k g 一 ‘给
药能显著降低 DH BV 感染鸭血清 D H BV 一D N A 水平 ,
其 HI Be Ae 转阴率达 48 % , 而且无毒性 , 停药后也无
波动 。
吕维柏[’8 , 5 , 〕报道 , 灵芝提取液在体外对 c D4 细
胞有免疫调节作用 , 其作用对受 HI V 感染的细胞较
为显著 。 ro 林岁nil 是增加 CD4 表达的最佳浓度 。
从云芝中分离出云芝多糖(PS K ) , 用 M T 一 4 细胞作
实验证实 , PS K 有抑制 HI V 作用 , 能抑制巨细胞形
成 , 也能阻滞 H W 的播放 , 有抗逆转录酶 (RT )作
用 。 从香菇菌丝体中提取的糖蛋白(砚M )加于感
染 H W 的培养细胞中 , 可抑制 H lv 感染 , 防止 HI V
侵入 T 细胞 , 抑制 HI V 复制 。 从香菇中提取的香菇
多糖则可使 HI V 诱生的细胞病理效应和抗原表达
完全被抑制 , 也能阻滞 H IV 诱生的合胞体形成 , 抑
制H lv 和靶细胞的结合。 李丹等〔60] 发现 , 香菇多糖
体外实验可促进感染/未感染 HI V 的 PBM C 分泌 I
类细胞因子 , 抑制分泌 n 类细胞因子 , 抑制感染
Hl v 一 1 的 PBM c 分泌 TN F 一a 。 由此表明 , 香菇多糖可
以恢复HI V 一 1 感染造成的 I / 1 类细胞因子稳态失
衡 , 并能通过抑制分泌 TNF 一 a 而间接干扰 HI V 的转
录 。 徐文清等〔‘, 〕观察了银耳多糖及其银耳多糖硫
酸脂在抑制牛免疫缺陷病毒(BI V )的作用 , 结果表
明 , 银耳多糖和银耳多糖硫酸脂在 0.Zm 群ml 浓度
时 , 具有抑制 BI V 引起的合胞体形成的作用 。 细胞
毒性实验也证明 , 上述两种药物的毒性较低 , 其
IC 50 均大于 0.Zm酬ml 。 由此说明 , 银耳多糖是一
种优质的免疫功能调节剂 , 加之其毒性极低 , 因此 ,
对于 AI D S 患者的联合药物治疗和 AI DS 高危人群
的预防会有一定的作用 。 刘庆红等[‘, ] 研究了鹿角
炭角菌子实体、茶树菇和香栓菌菌丝体的多糖及其
复合物对 HI V 逆转录酶(HI V 一RT ) 的作用 , 结果表
明 , 在供试的 6 个样品中均表现出较高的抑制 Hl v -
RT 的活性 ;鹿角炭角菌 、香栓菌和茶树菇的多糖复
合物(醇沉部分)在反应浓度为 lm岁ml 时 , 对 Hl v -
RT 的活性抑制率分别为 80 .4 士 1 . 2 % 、 90 . 6 土 1 .
7 % 和 84 .5 , 2 . 1 % 。 而上清液蒸干得到的复合物 ,
在同样浓度下 , 其抑制率分别为25 .6 土 1 . 3 % 、 31 . 7
士 2
.
6 % 和 79 .0 士 1 . 6 % , 只有茶树菇的上清液复合
物表现出较高的抑制活性 , 其余没有明显的抗 Hl v
一 R T 的活性 。 多糖复合物具有增强机体的综合免
疫效应 , 在整体上对 HI V 的增殖和侵染起到抑制作
用 。 也有报道 , 由冬虫夏草菌丝体等组成的艾滋一
号(中国一号)方 , 有明显的细胞免疫促进作用 。 可
提高免疫功能低下的小鼠T 细胞转化功能 , 使诱生
的 IL 一2 活性明显增高 , C D4 细胞增加 , 调节 C D4 /
CD S 比值 , 在体外有一定的抑制 Hl v 作用川 。 此
外 , 香菇多糖 、裂褶菌多糖、灵芝多糖 、灰树花多糖 ,
以及某些食用菌的水提物可以抑制 HI V 一 1 蛋白酶活
性 , 其活性成分主要为高分子量的水溶性的木质素
衍生物 。 有学者研究从云芝中分离的糖蛋白(PSP )
可以有效地抑制 HI V 一 1 gP 1 20 与 C D4 的结合(E C50= 巧0卜岁nil , 抑制体外重组的 H IV 一 1 逆转录酶(RT )
活性 (EC50 = 6.25 林扩ril ) , 且有高的水溶性 、热稳定
性及低毒性等优点仁6, ] 。 香港中文大学也研究证实 ,
P S P 能阻断 H W 病毒与 CD4 十 细胞结合 , 抑制 HI V
病毒的反转录酶及糖基化酶 , 且用药量低 , 因此 ,
PS
P 有望在 AI D S 等疑难危重疾病的综合治疗上发
挥其独特作用[叫 。 最近出版的艾滋病权威 J.Le vy
教授所著的《艾滋病病毒与艾滋病的发病机制》, 作
者已经充分注意到免疫在抗艾滋病治疗中的重要
性 。 他在该书前言中明确地说:“ 过去几年最重要
的倾向是将研究重点转向免疫系统 ” , 并提出有的
长期存活已感染 2 年而不发病 , 虽未经任何治疗 ,
但免疫系统仍未受损 , 主要是得益于免疫系统的作
用 。 宿主免疫反应的恢复将可持久地控制艾滋病毒
生物杖术通报 B 勿te ch noto gy 2008 年增干IJ
的感染[”〕。
3 对肿瘤机体免疫功能的增强作用
现代研究证明 , 肿瘤的发生和发展及预后与带
瘤机体的细胞免疫状态密切相关 。 肿瘤患者的免疫
功能相对低下 。 此外 , 手术 、化疗 、放疗也可能引起
机体免疫功能的进一步下降或失调 。 通过中医药扶
正培本以引导产生或增强机体免疫功能 , 可以阻止
或逆转因手术 、化疗和放疗所致的免疫抑制 , 增强和
提高机体对肿瘤治疗损伤的耐受能力 。 也有利于免
疫系统消灭体内微小肿瘤病灶和瘤细胞总数在 ro s
以下的残余肿瘤 , 并使肿瘤细胞不易转移。 从而提
高肿瘤整体治疗的效果〔“, ,州 。 除以上所述的真菌
及其提取物对正常及肿瘤机体免疫系统具有增强或
调节作用之外 , 对肿瘤机体免疫系统的影响还有以
下几个方面的表现 。
3
.
1 对宿主单核吞噬细胞功能的影响
王新亚等〔剑将荷瘤小鼠分为 3 个实验组与对
照组比较 , 以猪荃多糖与云芝多糖各 Zo m 岁kg · d
x 7 d 腹腔 ip 荷瘤小鼠 , 结果表明 , 不仅能显著提高
巨噬细胞(M中)吞噬率和吞噬指数及 M中酸性磷酸
酶(M中艺A CP) 活性 , 而且较任一单一多糖更有效
(尸 < 0 .0 1 ) 。 由此表明 , 复合多糖可能发挥协同作
用促进 M 中功能 。 有报道用香菇多糖 1 , 5 , 1 0 m 梦kg
·
d3 个剂量组对小鼠 ip , 连续 6d , 以待检 M 中上清
液 (1: 48 稀释)杀伤 L9 29 细胞后的吸光度表示
TNF 活性 , 结果香菇多糖组吸光度明显低于对照组 ,
表明 TN F 活性增强 , 且与剂量相关 , s m 岁kg · d 组
作用最强[“8 〕。 李明春等【69] 用灵芝多糖对小鼠腹腔
M 中信号转录过程的影响进行研究 , 发现灵芝多糖
等物质可在转录方面促进小鼠 M中分泌细胞因子 ,
并影响其蛋白激酶活性 , 如激活 PK C 和 FT K , 进一
步使 NO 产生增多 。 而 N O 在活化的 M 中杀伤肿瘤
细胞效应中起着重要作用 。 有报道灵芝糖肤(多糖
一 蛋白复合物)可明显增强 M PS 的吞噬功能 , 直接
或协同 PH A 刺激 M O。 的增殖 。 温斌等〔’“〕报道 , 灰
树花提取物也能提高 M 中的吞噬功能 , 并促进 M 中
分泌 TN F 一a 和 IL 一 1 。 还有报道 , 人工蛹虫草提取物
两种剂量 (30om 岁kg 和 600m岁kg)对荷 5180 实体
瘤小鼠的 M PS 活性有明显提高 , 吞 噬功能明显增
强仁’〕。
3
.
2 对 N K 细胞和 LA K 细胞活性的影响
王苏等[川观察了 31 例癌症患者治疗前后 N K
细胞活性变化 , 发现单纯化疗组病人的 NK 细胞活
性由治疗前的 18 .25 土 13 . 36 % 降至 8. 16 士 8 . 24 % ,
而化疗十香菇多糖(lm酬ml · 静推) , 每周 2 次 。 共
6 一 8 周 , 可拮抗化疗引起的 NK 细胞活性下降 , 该
组病人 N K 细胞活性达 20 .57 士 8 . 4 % , 略高于正常
人群 , 由此表明 , 香菇多糖对肿瘤化疗具有增敏作
用 。 方哨征等〔” ]发现 , 以金针菇多糖 lo m岁kg · d
x
ro d 给荷瘤小鼠口服 , 能显著地抑制肉瘤 51 80 的
生长 , 抑制率达48 .5% 以上 , 并且 N K 细胞活性有显
著提高 。 活化的 N K 细胞可释放 IL 一2 、 IF N 一y 等细胞
因子 , 而这些细胞因子又能激活 NK 细胞杀伤肿瘤
细胞而增强抗瘤效应 。 由此表明金针菇多糖是免疫
细胞的激活剂 。 阂三弟等〔”〕报道 , 从灵芝子实体提
取的灵芝多糖对 Le wis 肺癌和结肠癌具有相当高的
抑制作用 , 并能增强荷瘤小鼠 NK 细胞活性 , 从而提
高机体细胞的免疫功能 。 陈雪华等〔’‘〕观察了灵芝
抱子粉对荷 HA C 小鼠T 细胞表面分化抗原 , 体外细
胞杀伤功能以及肿瘤抑瘤率的影响 , 结果表明灵芝
抱子粉是一种能激活和提高特异性 (CTL) 和非特异
性杀伤细胞 N K 细胞和 LA K 细胞的抗肿瘤作用 , 抑
制肿瘤细胞的增殖以及调控机体免疫功能的中药 。
李波等[”〕发现 , 猪等多糖(PuPs )能明显增强荷瘤
小鼠脾 LA K 细胞杀伤肿瘤细胞的活性 , 提高红细胞
C3b 受体活性 。 用 PU PS 与 IL一2 协同刺激细胞 , 可
诱导出具有广谱高效抗肿瘤活性和低 IL 一 依赖性
的猪等多糖一 LA K 细胞 , 其杀伤活性明显高于 IL -2
单独诱导的细胞 。 由此说明 , 猪荃多糖与 IL 一2 有协
同作用 , 可作为生物反应调节剂 (BR M )用于 LA 份rlL一2 为主的肿瘤生物疗法 。 冬虫夏草多糖也是一
种 LA K 细胞活性增强剂 , 可降低 晚期恶性肿瘤LA称IL一2 疗法中IL一 的用量[’6 ] 。
3
.
3 对 T 细胞和 B 细胞的影响
有报道国产香菇多糖 (A PS )可提高正常小鼠和
C y 引起的免疫功能低下小鼠经 PH A 3 诱导的 T 细
胞增殖反应 。 香菇多糖是一种典型 的 T 细胞激活
剂 , 可提高肿瘤患者C D4 /CD S 比值而逆转免疫抑制
状态 , 具有调节肿瘤患者细胞免疫功能的作用[7, 〕。
李明春等[’8〕发现 , 灵芝多糖可明显增强 T 细胞信号
年增刊 游明乐等 :天然真菌与人工发酵制品对免疫系统的影响研究概况
转录过程中蛋白激酶A (PK A )及蛋白激酶 C (PK C )
的活性 。 而蛋白激酶的活化是激活 T 细胞的必备
条件 , 增强 T 细胞蛋白激酶活性是灵芝多糖发挥免
疫增强和抗肿瘤作用的重要途径 。 吕苏成等【”〕证
实了一组肺癌患者服用获菩多糖(5岁d )6 个月后 ,
总 E 花环 (Et) 、活性 E 环花 (Ea ) 、淋 巴细胞转化
(LCT ) 、 T 细胞(CD 3十 ) 、 C D ; + 细胞均明显增高 , C D 。
细胞下降 , C D 4 / C D : 比值上升 。 马玲等〔80 )发现 , 虫
草多糖可提高 B 细胞产生抗体的免疫应答 , 随着虫
草多糖剂量的升高 , 全脾抗体形成细胞数(IgM PFC)
存在增高趋势 , 在 6.85 、 13 . 70 m 岁kg · d / 15 d 两个
剂量组 , 与对照组比较 , 血清抗体滴度明显升高。 此
外 , 人工蛹虫草提取物两种剂量 , 对荷瘤小鼠 B 细
胞抗体合成 、脾中T 细胞等分泌 TN F 一 p 和 IL一2 水
平 、 N K 细胞的杀伤活性及脾指数等多项免疫指标
均有提高川 。
3
.
4 对干扰素、集落刺激 因子 、肿瘤坏 死因子的影
响
IF N 、 C S F 与 TN F 等细胞因子不但具有显著的
抗病毒免疫活性 , 而且具有显著的抗肿瘤免疫效应 。
上述银耳 、获荃 、云芝 、灵芝 、香菇、猪荃及虫草等真
菌及其提取物具有显著的抗肿瘤活性 , 其主要机制
可能是通过多项或单项促进 IF N 、 C S F 和 TN F 细胞
因子的诱生与促诱生作用 , 有利于激活或增强机体
内免疫细胞杀伤肿瘤细胞活性 , 或协同其它细胞因
子以加强抗肿瘤作用 , 从而表现出在整体水平上发
挥抗肿瘤免疫效应 。
4 对机体免疫系统的抑制作用
20多年来的研究表明 , 许多真菌及其提取物对
机体免疫系统具有显著的增强作用 。 但另一方面 ,
对免疫系统的抑制作用研究相对较少 , 具有些文献
报道观点不一〔8, ,sz] 。 目前 , 对免疫抑制作用的研究
报告较多的是冬虫夏草 。 如王旭丹等[’4 〕发现 , 冬虫
夏草水提取物给小鼠 i酮.4IllL/只 , 连续 10d , 除了对
N K 细胞活性具有显著增强作用之外 , 对 Con A 诱导
的小鼠脾 T 淋巴细胞增殖 , 以及 LPS 诱导的小鼠脾
B 淋巴细胞的增殖与腹腔 M 中细胞 IL 一1 的诱生有明
显的与药物剂量相关的抑制作用 , 且随着冬虫夏草
的剂量增加 , 其抑制作用越明显 。 当剂量为 0.5 -
1盯kg时 , 对小鼠单向混合淋巴细胞转化及 IL 一 1 、 I L -
2 的合成有降低趋势;当剂量为 l扩kg 时 , 即可显著
抑制 LP S 诱导 的脾淋巴细胞转化;当剂量达 5 -
ro 扩崛 时 , 其对小鼠的多项免疫功能均表现出显著
的抑制作用 。 IL 一 是一种主要由T 细胞分泌的细胞
因子 , 冬虫夏草能明显抑制 T 细胞产生 IL 一2 。 淋巴
细胞对 C on A 或同种抗原发生的增殖性应答需要
IL 一 1 作为始动信号 , 冬虫夏草抑制 IL 一 1 的分泌可
能是其免疫抑制反应的另一种机理 。 林素文等[8, 〕
和孟明等〔叫 报道 , 冬虫夏草对免疫系统的影响研
究 ,其结果也具有与上述相似的抑制作用 。 匡彦德
等〔8, 〕认为 , 冬虫夏草多糖和糖肤对机体产生免疫抑
制作用的机制是 ,冬虫夏草能选择性地增加 T 淋巴
细胞中的抑制细胞亚群而发挥其对免疫应答的负反
馈(反向调节)作用 。 此外也有报道 , 阿魏蘑【’〕子实
体粗多糖 A 和菌丝体粗多糖 B 在小鼠细胞因子(1L
一 2 ) 的产生方面具有双向效应 , 即在一定浓度范围
内(1 一 s m 岁L)表现为促进机体免疫活性 , 超过一定
范围(25 m岁L 以上 ) , 则表现为抑制机体免疫活性 。
用灵芝多糖 10 一 Z o m 岁kg · d x s d 腹腔 ip 小鼠 ,
发现可显著降低 Con A 诱导的脾 T 淋巴细胞增殖反
应(p < 0.05 ) 。 说明灵芝多糖对 Con A 诱导的脾 T
淋巴细胞增殖反应也存在剂量依赖关系[’, 251 。 灵芝
三菇组分 GLEI 也可通过抑制 IL 一2 的释放而抑制人
外周血单核细胞(M on )的增殖 ;灵芝醇 F 、灵芝酮二
醇和灵芝酮三醇能抑制补体激活的经典途径 , 补体
激活在器官移植后是致命的 , 因而此类灵芝三菇具
有发展成为免疫抑制剂的潜能f86〕。 薄盖灵芝的醇
提取物可降低胸腺指数 , 抑制淋巴细胞 D N A 合成及
T 和 B 细胞的增殖 , 抑制小鼠脾脏抗体分泌细胞和
牛血清白蛋白诱导的迟发型超敏反应 , 也可降低血
清抗 SR BC 抗体效价 。 灵芝抱子粉提取物体外可抑
制 C on A 及 LP S 诱导的小 鼠脾细胞增殖及 PH A 和
葡萄球菌 A 蛋白刺激的人扁桃体淋巴细胞增殖 , 抑
制同种异型小鼠脾细胞的 M LR[ ’〕。 蜜环菌菌索多
糖(A M p )在剂量为 200m岁kg · d x 1 2 d 对小鼠 19 ,
可显著降低肝脏及胸腺重量〔’。] 。 国产与 日本产香
菇多糖(LNT )随着浓度的增加(25m g · L 一’以上 ) ,
对 Con A 诱导小鼠脾细胞增殖反应及 IL 一 2 的产生
方面也呈现降低(负反馈)的趋势[2‘二。
5 小结与讨论
生物技术通报 刀勿te chn o勿gy 2008 年增刊
越来越多的研究证实 , 许多中药 , 尤其是补益类
中药的活性成分往往以多糖为主的复合体形式存
在 。 多糖是糖 、蛋白质、核酸这 3 类最基本的生命物
质和结构物质之一 , 在生命活动中具有十分重要的
意义川 。 真菌多糖分结构多糖和活性多糖。 活性
多糖又有纯多糖和杂多糖之分 。 纯多糖一般是由许
多(一般认为 ro 个以上 )单糖通过糖昔键连接起来
的纯多糖链 。 杂多糖除含有多糖链外往往还含有肤
链和(或)其他脂类成分。 如云芝多糖就是一种含
蛋白25 一 30 % 的蛋白多糖 【8, 〕;云芝糖肤(Ps P) 的抗
癌成分也是一种结合蛋白多糖仁叫 。
现代中医学与营养学理论阐明 , 天然植物类及
真菌类中富含常量元素和微量元素 、维生素及生物
素等 , 其中有许多元素是人体细胞正常新陈代谢和
生命运动所必需的物质 。 此外 , 它们在中药提取物
中常与有机大分子在一定条件下形成不同类型的络
合物而起到协同抗病的作用 。 而且有些元素及维生
素也具有显著的免疫活性 , 如锌(Zn) 、 锰 ( M n) 硒
(Se) 、钥 (M o) 、铬(Cr) 、维生素 E 、维生素 B6 及生
物素等[88一” ] 。 例如有作者报道 , 锌缺乏可损害人和
动物的宿主防御能力 , 从而导致患病率和死亡率增
加 。 当锌缺乏使青年小鼠体重下降 25 % 时 , 胸腺的
重量减少 50 % , 而脾和周围血液中的淋巴细胞数则
减少到几乎只有一半 , 也会使 T 和 B 细胞的增殖和
成熟减少 ;抗体和细胞介导的免疫应答能力也大约
只有青年小鼠正常值的一半 , 这与淋巴细胞的绝对
数减少呈相关 。 由于能参与免疫应答的淋巴细胞总
数减少 , 缺锌小鼠对外来攻击所产生的应答总强度
也降低[引 〕。 上述部分研究报告也证实 , 某些真菌粗
提品如粗多糖的免疫活性在整体水平上比纯多糖更
显著 , 这可能是在多糖粗提品中 , 由于某些微量元素
或(和)真菌中的其他有机成分如核昔类 、 多肤类 、
蛋白质类等组成络合物而起协同作用 , 进而发挥和
提高免疫应答效应 。 因此 , 有学者认为 , 在中药有机
成分提取纯化过程中应当注意到 , 并不总是有效成
分的纯度越高 , 其药理活性就越显著 , 相反 , 粗提品
药理活性显著 , 而纯度提高后其活性反而降低 , 有的
甚至无效 。 这给人们一种提示 , 高纯物活性的降低
很可能与纯化过程中的某些被认为是次要的或无效
的有机成分和无机成分 , 特别是微量元素的损失有
关[““, 90] 。 如在阿魏蘑多糖的免疫试验中得到证实 ,
具有显著免疫活性的多糖为粗多糖 A , 而纯化所得
的多糖 Al 活性不显著。 因为粗多糖 A 是由多种组
分的多糖和蛋白质 、核酸等物质组成的混合物 , 可能
纯化所得的多糖 Al 不是活性组分 , 也可能多糖 Al
必须和其他一种或几种有机或无机组分混合 , 或者
与蛋白质、核酸等物质混合成复合物才能表达活
性[’〕。
综上所述 , 免疫促进和免疫调节作用是大多数
真菌及其提取物尤其是真菌多糖的共同特性 , 也是
它们发挥其他生理或药理作用的基础 。 但也有不同
学者对同种真菌(如冬虫夏草 、灵芝 )的不同组分对
机体免疫功能的影响研究较多 , 但报告结果颇不一
致 , 可能与机体免疫系统本身的复杂性 , 同种真菌但
产地不同而存在化学成分种类及含量的不同性 , 以
及制剂技术和用药剂量 , 动物选择与实验方法不同
等多种因素有关。 此外 , 真菌及其提取物对免疫系
统 , 特别是对特异免疫的影响比较复杂 , 是否属于双
向调节 , 即在机体免疫功能低下时表现为免疫增强
作用 (正向调节 ) , 而在正常或免疫功能亢进时表现
为免疫抑制作用 (反向调节)[ ’, s] 。 虽然有一些真
菌及其提取物被研究证明对免疫器官或免疫细胞 、
免疫分子具有显著的 、与药物剂量相关的抑制作用 ,
但同时效果是肯定的 , 而且对免疫器官或免疫细胞
并未发现有任何的毒副作用〔‘, 34 , 83 一 8 , ] 。 目前 , 有关
真菌类中药对机体免疫系统抑制作用的研究同植物
类中药一样已经开始受到重视 , 在器官移植 、 自身免
疫性疾病的多种免疫功能增高(免疫亢进 )的病例
中 , 可望开发成为新的免疫抑制剂【’, 86] 。 因此 , 深人
研究 、探讨真菌类药物对机体免疫系统的影响具有
重要的学术价值及深远的临床应用前景 。
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