全 文 ：生物技术通报
研 究 报 告 石叮口r召C 阴W 笼刀 G Y B U L L E TI N 2 00 9 年 增 刊
大球盖菇硒多糖体内抗氧化能力检测
苗元振 ,2 马继波 贾乐 2 宋振 2
泰山学院 , 泰安 271 仪犯;2山东农业大学生命科学学院 , 泰安271 018)
摘 要: 采用液体发酵的方法对大球盖菇菌丝进行富硒培养,提取硒多糖进行抗氧化能力测定 结果表明 ,大球盖菇硒
多糖能明显提高小炙血中SO D G SH 一Px 的含贵 ,能在一定程度上显著降低血中M lA 的含黄 ,具有显著的杭氧化功能
关扭词: 大球盖菇 硒多糖 体内抗氧化
T h e A nti oxid an t A cti vity D ete rm in ati on of S e一Polysacch arid e fr om
r叨罗招o一a朋 u拍 ta SQ 一01 刀月 V V 0
M iao Y uanz h en ,2 M a Jib o J认Le Song Z h en
( 口之跄岁 of ,恤shan , 明 271000; 2Colle乎of L诉 & icnc e, 5瓜如如啥A乎名c心u耐 成创ers i仃, 叛an 271018)
A bstra ot : Th e obj eedve s ofthi s wo rk w ere to extllet the Se一po lysa eehari de of se一en ehe d 叫 eelia by StroPhan a 0 90 50 一an nu一
lat SQ 一01 in liqul d m edi a, an d to evaluate th e an tio范山nt ac tiv ties of se一Po咖 cchari de fro m 5. ru go ,o一an uhta sQ 一01 in vi vo in
terms of th e valu es of glu ta thi one Pero 范das e (G SH 一Px ), suP ero 万de dis mu tas e (SO D ) an d ma londi al dehyde (M D A ). T he re sults obta,ned
show ed that th e Se一Po娜ac ehi 州de of 5.ru go so一an ula ta SQ 一01 eoul d obvi ously elevare G SH 一Px an d so D aetivities and deereas e M l)A
eonte ntin 而ee blood , indi eati ng tha t th e Se一po ysa cehari de has Potenti铆 an tio范dalt activi ties.
K ey w ord s : Stro Pharia rtlgoso 一an ula ta SQ 一01 Se一Polys ac eha ride An tio范山nt a由vi ty in vi vo
硒 (Se len iuln )是人体必需微量矿质营养元素之
一 ,是人体生理功能红细胞谷胧甘肤过氧化物酶和
磷脂过氧化氢谷脱甘肤过氧化物酶的重要组成成
分川而硒多糖作为一种有机硒化合物兼有多糖和
硒二者的活性 ,是生物体将无机硒转化成有机硒的
有效形式之一 食用菌对微量元素具有较强的富集
和转化作用 , 能将微量元素从无机态转化为有机
态 研究表明 ,食用菌硒多糖的生物活性普遍高于
多糖和硒 ,更易于机体吸收和利用[2l
采用液体发酵的方法对大球盖菇 (Stro phari a
ru 即50一 annulata SQ 一01)菌丝进行富硒培养 ,研究大
球盖菇硒多糖对小鼠全血抗氧化能力的影响 , 旨在
为富硒大球盖菇的深人研究和开发利用提供参考 ,
目前国内外尚未见相关报道
1 材料与方法
1.1 材料
1.1.1 供试材料 大球盖菇 (St代护ha 痴 川9050一an -
nu la ta SQ一01 ) ,本实验室保藏 供试雄性小鼠体重
25土2 9 ,购 自山东米歇尔生物制品有限公司 所用
试剂均为分析纯
1.1.2 培养基 摇瓶培养基 :马铃薯 1509几 ,麦芽
糖 209/L ,酵母膏 lgzL , K H Zp04 lgzL , M gso4 2.59/L ,
pH 6 .5
1.1.3 动物分组 小鼠随机分为 3 组 , 即空白组
大球盖菇多糖组 大球盖菇硒多糖组 实验样品用
蒸馏水配制后按照 so m g/kg 给予灌胃 , 空白组给
收稿 日期 :2以拍一03一30
项 目墓金 :山东省 自然基金资助项 目(Y Z(拓D0 8 ) ,山东省优秀中青年科学家科研奖励墓金(2加7B S() 202 l)
作者简介:苗元振(1972 一),男 ,硕士研究生 ,主要从事应用真菌学研究; E一m 1:m yzh @t su .ed u.cn
通讯作者: 贾乐 ,教授 ;E一m ail:jial eq0 15@ 163.oom
182 性物技术通橄丑勿姗加诚恻 刀以翻咖 2(X 为 年增 刊
予同样体积燕馏水 实验期间各组动物饲喂基础饲
料 , 自由饮水 ,每 3 d 灌胃一次 ,共 6 次 分别于 3
6 9 12 15 18 d , 灌胃前每组随机抽取 3 只小鼠 ,
眼眶内毗取血并脱臼处死
1.2 方法
1.2.1 富硒大球盖菇菌丝的制备 取经活化的菌
种块 (0 .5 cm勺接人装有 10 耐/25 0 耐摇瓶培养基 ,
28 , 160 rl而n 振荡培养 6 d ,得液体菌种 液体菌
种按 10 % 接种量再接人 lo d /25 O nil 摇瓶培养基
和富硒培养基中 ,使硒在富硒培养基中终浓度达到
150 林gzLI,]25 , l印 rlm in 振荡培养 6 d ,分别得
到液体培养液和富硒液体培养液 3 (X 刃rl m in 离心
10 m in 后得菌丝体 , 60 烘至恒重 , 研磨至粉末得
到菌粉
1.2. 2 硒多糖的分离 称取富硒大球盖菇菌粉
59 , 按 1:10 比例加入蒸馏水于沸水浴中提取 l h ,
4 仪X) :/m in 离心 巧 而n , 收集上清液 , 残渣加 25
耐 蒸馏水于沸水浴再提取 l h ,4 (X力 rlm in 离心
15 m in ,残渣再重复提取一次 ,合并三次上清液浓
缩汁至体积约 75 耐 , 加 4 倍体积 95 % 乙醇静置过
夜 离心后 ,用 80% 乙醉洗三追再用丙酮洗两遍 ,烘
干得大球盖菇粗硒多糖样品
将粗硒多糖样品 , 反复溶解于约 80 耐 蒸馏
水 ,按 se ve g 法(多糖溶液 :sev eg 试剂二5 :l) 脱蛋白 ,
先流水透析一昼夜 ,再换蒸馏水透析 12 h ,用 4 倍
乙醉沉淀多糖 ,离心后将沉淀烘干称重 ,得到大球
盖菇硒多糖 ,备用
按上述方法得到大球盖菇多糖 ,备用
1.2. 3 硒多糖抗氧化能力测定 G SH 一Px 活性检
测:DTN B 直接法14 1闪 小鼠全血在 37 , pH 6. 5 条
件下反应 1 m in , 扣除非酶反应后 , GSH 浓度下降
l卜m ol 为 1 个酶活力单位 SO D 活性检测:氮蓝四哇
(N BT )还原法l,币]SO D 活性以抑制 N BT 光化还原
的 50% 为 1 个醉活性单位 (U )表示 M D A 含量检
测 :, A 比色法lv
2 结果与分析
2.1 大球盖菇硒 多箱对小鼠血液 Gs H 一Px 活性
的影响
从图 1可以得知 ,相对于空白组和大球盖菇多
糖组 ,大球盖菇硒多糖组的小鼠全血 C SH 一Px 的活
性明显增加 ,而在第 g d 时最高 (2 .359 U) 方差分析
表明 ,大球盖菇硒多糖组的小鼠全血 GS H 一Px 变化
极显著 (p < 0.01)
忿 4
2 .
2 盖
t 盆
盆
1 ,
~川卜~月. .
一.一奋. .
~山~ . 启. .
日曰份.口搜肠留吕臼.
I含 3乞 1.
圈 1 大球益菇硒多摘对谷胶甘肚过妞化物. 的影晌
- . ~ 对翻妞
. . ~ 挤. .
~ . ~ . 娜. .
俐.0,翔彻2洲
扣自口日.习拼召璐
9 渔之 1. 1.
时门 询
圈2 大球益菇晒多箱对超权化物歧化醉的形晌
2. 2 大球盖菇硒 多枪对小鼠血液 SO D 活性的影
响
从图 2 可以看出 , 小鼠全血 SO D 的活性呈现
出先增加后减弱的变化趋势 相对于空白组和大球
盖菇多糖组 , 大球盖菇硒多糖组的小鼠全血 so D
的活性明显增加 ,在第 g d 时最高(47 2 U) 方差分
析表明大球盖菇硒多搪组的小鼠全血 SO D 的变化
极显著 ( P< 0. ol )这可能是因为 SO D 是非硒酶 ,
增加机体硒水平对该酶的活力无明显影响
2. 3 大球盖菇硒 多菇 对小鼠血液 M D A 的活性影
响
大球盖菇多糖组 大球盖菇硒多糖组的小鼠全
血 M D A 含量随着时间延长明显降低(图 3 ) 与空
白组 大球盖菇多糖组相比 ,大球盖菇硒多糖组的
小鼠全血 M D A 含量降幅最大 ,在第 18 d 时达最低
值 (0 .68 8 林mo l/L )随着时间增加 ,小鼠全血 M DA
含量不断减少 , 这可能是因为实验小鼠处于青年
期 ,随着年龄的增长 , 自身机体内脂质过氧化的程
度减小
2 (X 为 年 增 刊 苗元振等:大球盖菇硒多糖体内抗氧化能力检测 183
- 心~ 对翻妞
州. ~ , . 粗
.叫卜~ . 书. 姐
糖组 ,大球盖菇硒多糖组小鼠全血 GSH 一Px 活性和
SO D 活性明显增加 ,均在第 g d 达最大 ;M D A 含量
明显减少 ,第 18 d 达最低 因而表明 ,大球盖菇硒
多糖具有较强的抗氧化能力 ,为富硒大球盖菇硒多
糖的深人研究和开发利用提供了重要参考
弓.觅)翻和.盆日
. 12 [肠 1.
时 一 (肉
圈 3 大球益菇晒多箱对丙二睦含 , 的影晌
3 讨论
大球盖菇多糖与大球盖菇硒多糖均可减少器
官中 M DA 的生成 ,且硒多糖效果优于多糖 ,说明它
们能对抗自由基对生物膜的损害 ,维护细胞正常的
生理机能 SO D 和 G SH 一Px 是机体内的抗氧化酶 ,
其主要作用是清除 自由基 ,防止自由基对细胞结构
的损伤 在本实验中 ,相对于空白组和大球盖菇多
今考文献
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