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表油菜素内酯对苦参愈伤组织生长的影响



全 文 :生物杖术通银
研 究报 告  刀云口r E 日阴叭笼刀心Y 2 X为 年 增 刊
表油菜素内醋对苦参愈伤组织生长的影响
金荣  赵东利 2
( 辽宁省大连市四十二中学 ,大连 1 以洲X) ;2大连大学医学院 , 大连 1 肠22
摘 要: 在苦参t 伤组织生长的最佳培养基:改良 M s+ T D z 1 0 川创L+2,4一D 0.s mg /L十C ysZo 哪 /L 上分别添加表油莱
紊内. (eP ib ras in oli de , ePi 一B R )0 10-, 10 一10 10一, m名/L结果表明 ,愈伤组织鲜重随 eP i一B R 浓度升高而升高,呈正相关, 而
千重则在 10, 堪 /L eP i一BR 浓度下达到最高,之后随 ePi 一BR 浓度升高i 下降趁势
关. 词: 苦参 念伤姐织 表油莱素内始 组织培养
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苦参(&护力 瓜 ve sc ens )系豆科槐树的药用植
物 , 是我国历史悠久的传统药物之一 , (本草纲目)
中既有记载 其药用部分为根 , 具有清热操湿 杀
虫 利尿之功效 用于热痢 便血 黄疽尿闭 赤白带
下 阴肿阴痒 湿疹 湿疮 皮肤骚痒 疥癣麻风 ,外
治滴虫性阴道炎1 其有效成分为以苦参碱为代表
的生物碱 ,具有抗菌 抗病毒 抗癌 杀虫等多种功
效[2l , 目前苦参碱制剂在医药临床 卫生保健 农药
领域等都有广泛应用 
对苦参根的大量采挖已经造成对该物种资源
的毁灭性打击 ,因而寻求其他的生产途径将成为保
护该物种资源并实现可持续利用的最佳途径 通过
细胞 组织和器官的大规模培养来获得植物次生代
谢物已经成为一种有效途径 ,并在部分植物次生代
谢物生产领域实现了商业化 ,如通过大规模培养紫
草细胞生产紫草宁 ,大规模培养人参细胞生产人参
皂贰等l3] 为实现苦参碱类生物碱的长期可持续利
用 ,本课题一直致力于探索苦参愈伤组织生长及次
生代谢物积累的最佳培养基筛选 ,前期已经得到了
适合苦参愈伤组织生长的最佳培养基组合 ,本文即
是在此基础上进一步探讨表油菜素内酸对苦参愈
伤组织生长的影响 
油菜素内醋 (Bras sinolide ,简称为 BR )最早从
油菜的花粉中分离提取出 , 是在植物的受精过程
中 ,促进花粉管快速伸长的物质 ,因而具有极高的
生物活性t, 5由于天然的 BR 含量极低 ,满足不了
应用 , 后来不同国家的科学家研究了其类似物 :表
油菜素内醋(ePi bras inol ide ,简称 epi一BR )的化学合
收稿 日期 :2(X玲一03一23
作者简介 :金荣(196 9一),男 ,内象赤峰人 ,研究方向:生物学
通讯作者 :赵东利.E一m目:跳以日67 娥 i二.~
2 (X 为 年 增 刊 金荣等 :表油菜素内醋对苦参愈伤组织生长的影响 15 5
成阳], 目前 , epi一BR 已经实现了大规模工厂化生产
18]
1 材料与方法
通过苦参下胚轴诱导愈伤组织发生 ,已获得适
合苦参愈伤组织生长的最佳培养基 , 即改良 M S+
, 2 1.0 叱 /L +2 ,4一D o.5 毗 IL +Cys20 m glL (改良
M S 即是将 M S [9](M ur as hi罗 and Sko g , 196 2) 中的
N H 4N 0 3 改为 3.3 glL ,其余成分不变),将该培养基
组合简写为 M DT (另文发表 ) ,本研究在 M DT 培养
基基础上分别添加表油菜素内醋(epi一BR )0 10一, 
ro 巧10 一, 10 一, mg lL ,每处理 3 瓶重复 ,每瓶 20 块左
右外植体 均在 30d 后统计鲜重增加倍数(鲜重增
加倍数= (收获时鲜重一接种量 )/接种量 ) 干重增加
量(干重增加量二收获时干重/接种量 ) 对结果分析
采用 o rigi n 数据分析软件作图 
培养条件为 :26土1  , 光照 巧 hld , 光强 24
卜m ol m 魂 s一l
2 结果与分析
不同浓度的 eP 卜BR 对愈伤组织生长量的影响
见图 1 从图 1反映出 , eP i一B R 对苦参愈伤组织鲜
重增加及干重增加的影响效果不同 ,鲜重增加倍数
随 eP i一B R 浓度升高呈现逐步升高趋势 , 即二者为
正相关 , 但是对干重增加量的影响却较为复杂 ,从
0 m glL 至 10一, mg 几 范围区间内 ,随浓度升高 ,干重
逐步增加 ,也显示为正相关 ,但是随 eP i一BR 浓度进
一步升高至 10一, m glL 时 ,干重增加却明显下降 ,且降至对照之下 ,从愈伤组织外观来看 ,呈极度水样
化 ,说明细胞已经呈现一种虚增长 ,鲜重的增加是
细胞含水量的增高导致的 ,实际细胞对干物质的消
耗大于积累 ,因此干重呈现下降 
3 讨论
类似于大多数植物激素 , BR s具有促进细.胞分
裂和生长的作用 , 但其生理活性浓度极小 , 常为
p b 级 (十亿分之一)浓度就有生理效应 浓度过高
反而起到抑制作用 陈瑛的实验结果表明 , sxl o一9
m glL BR 即可显著促进烟草叶片愈伤组织的生长 ,
但浓度升高 2 倍到 10 一 m glL 时 , 即可对愈伤组织
生长产生抑制作用 ,且愈伤组织愈发变褐 ,电导率
升高 ,过氧化物酶及超氧化物歧化酶 (SO D )活性均
升高 ,表明该浓度下的 BR 已经开始促进愈伤组织
衰老 l0] 多数研究表明 BR 需与其它激素配合使
用 ,可诱导愈伤组织的产生 ,且往往与这些激素存
在加合作用 如张华等报道 , BR 与 IA A N AA BA
组合使用 , 可促进滇紫草悬浮培养的细胞生长 ,而
单独使用 BR 时 ,则不及其它生长素效果好 , BR 似
乎在调节植物体内激素平衡和细胞生长方面起着
某种特殊作用阴 张会曦等报道表油菜素内醋可以
促进大麦胚芽鞘内源 IA A 含量升高 ,从而促进胚芽
生长[,,l
研究结果表明 , epi一BR 在与 TD z 2, 4一D 等配
合使用下 , 可显著促进苦参愈伤组织细胞生长 ,但
是浓度过高时 ,细胞对干物质的消耗增加 ,积累下
将 , 细胞鲜重的增加是一种含水量升高的虚增长 ,
在后续研究中 , 我们将进一步分析 eP i一BR 单独使
用情况下 ,对苦参愈伤组织生长的影响 ,以及 eP i-
BR 对苦参愈伤组织细胞中苦参碱含量的影响 
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圈 1 ePi 一B R 对苦, 愈伤组级鲜l 增加倍傲及干, 增加
t 的影晌(x 轴C 点为对照)
今考文暇
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