全 文 : 万方数据
·26· 娥物加工过程 第4卷第2期
谱柱照VP_ODs(150Lx4.6),流动棚为y(乙腈):
y(水)=30:70,流速l删蕊n,检测波长362黼,采
用面积归一化法定量。
1。6.3酶活力定义
在p壬{8.5,溢度30℃下,每小时转仡丙酮醇生
成1邶L氨基丙醇所需的酶量为1个活力单位
(U)。
1.7菌体量测定方法
干重法:取发酵液30mL,9000r/min离心10
商n,蒸馏水水洗3次沥于后,于105℃烘箱中干燥
至恒燕。
1.8培养基pH测定方法
p粥.3B型碟测定仪(上海理达仪器厂)。
2结果与讨论
2.1产酶培养基中碳源的选择
按照“1.3.2”中产酶培养基的配方(除碳源外)
配裁蜷养基分别加入l%的甘油、葡萄糖、麦芽糖、
柠檬酸和乳糖作为碳源,邋过48h摇瓶培养后测生
物量和酶活力。结果见图1。
{=|‘油 葡萄糖 麦芽糖 柠檬酸 乳糖
日 穰鼹鏊体于重渤 一藤黠懿活腻
图l各种碳源对茵体量和酶活的影晌
F远.1 E=旺&ts0fdi£fjrentc越bohydralesourcesonthe
璇勰ass箍靛矗程lz弦eae量量V呈ty
从图1中可以看出甘油,葡萄糖,麦芽糖和乳糖
都可以促进菌体生长,其中以甘油最为理想,谶体量
达8。霹6∥L。丽柠檬酸不能作为该菌种培养的碳
源。此外碳源中甘油对酶活力的促进最为理想,酶
活力达18。55u,L,远高予其他碳源。因此选用甘油
为优化后的培养基碳源。
2.2产酶培养基中氮源的选择
按照“1.3.2”中产酶培养基的配方(除氮源外)
配制培养基并分男4加入l%的酵母粉、蛋由胨、
(NH4):s04、牛肉膏、N谢03和尿素作为氮源,通过48
h摇瓶墙养后测生物羹稀酶活力,结果觅图2。
厂1. ●. .一 .n
黪蹲粉蜜璺瓣溉酸锾2#逡臀鹾酸镧绻黍
嬲楣对菌体干蘑,% ■相对酶活/%
圈2各种氮源对菌体量鞠酶活的影响
Fig.2E珏宅ets《磋鞋宅rentni讯秽nsouI℃es
on出ebiomassndem”neactivity
从图2中可以看出有机氮源对酶活促进较为理
糠,其中牛肉膏和蛋渤胨效果明显,菌体壁分另4达到
达8.00g/L和8.30∥L,酶活力分别达21.89u/L和
18.85u,L,但酵母粉糨尿素效果较差。当使用无枧
氮硫酸铵时,菌体生长良好,但酶活较低,故硝酸钠
不能作为该菌种培养的氮源。
2。3曹浊翔入量及碳氮毙对蘸体生长和璐活的影
响
按照“1.3.2”中产酶培养基的配方(除碳源外)
配制培养蒸并分别嬷入o。5%,l%,2%,3%,4%的
甘油作为碳源。通过在产酶培养基中使用不同浓度
的甘油,来测定甘油浓度对菌体生长的影响。结果
见表l。
表1 甘油加入量对培养液中菌体生长和酶潘的影响
‰lel c鲥Ip撕sonofmedi啪enlployingdi雎rem甜ycerin
eo毛lcen狂嚣tio驻
从表l中可见该菌种适应C/N比较低的培养
基,甘油质量分数以l%为最佳。大于2%时菌体量
稚酶活力都显著下降。
2.4磷酸盐浓度对菌体生长和酶活的影响
按照“1.3。2”中产酶培养基的配方(除磷酸盐
外)配裁墙养基,并按表2所示加入磷酸盐。磷酸盐
∞
瓣
∞
∞
加
0
瓣
∞
鼢
∞
∞
勰
0
万方数据
万方数据
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利用微生物转氨基生产氨基丙醇过程中产酶条件的初步研究
作者: 孙泽宇, 汪钊, 陈东之, 赵炎君, SUN Ze-yu, WANG Zhao, CHEN Dong-zhi, ZHAO
Yan-jun
作者单位: 浙江工业大学,生物与环境工程学院,杭州,310014
刊名: 生物加工过程
英文刊名: CHINESE JOURNAL OF BIOPROCESS ENGINEERING
年,卷(期): 2006,4(2)
被引用次数: 1次
参考文献(12条)
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引证文献(1条)
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本文链接:http://d.g.wanfangdata.com.cn/Periodical_swjggc200602005.aspx