全 文 ：摇 核 农 学 报摇 圆园员猿袁圆苑渊员圆冤院员愿员苑 耀 员愿圆苑允燥怎则灶葬造 燥枣 晕怎糟造藻葬则 粤早则蚤糟怎造贼怎则葬造 杂糟蚤藻灶糟藻泽
收稿日期院圆园员猿鄄园缘鄄圆圆摇 接受日期院圆园员猿鄄员园鄄员猿
基金项目院转基因生物新品种培育重大专项渊圆园园怨在载园愿园园员 原 园园愿月冤
作者简介院李素娟袁女袁主要从事植物生物技术和作物遗传改良研究遥 耘鄄皂葬蚤造院 泽怎躁怎葬灶造蚤圆园园员岳 员远猿援 糟燥皂
樊秀霞袁女袁主要从事植物抗逆遗传改良研究遥 耘鄄皂葬蚤造院苑缘源远苑源圆缘猿岳 择择援 糟燥皂遥 同为第一作者遥
通讯作者院钱前袁男袁研究员袁主要从事水稻经典遗传尧分子遗传育种研究遥 耘鄄皂葬蚤造院 择蚤葬灶择蚤葬灶员愿愿岳 澡燥贼皂葬蚤造援 糟燥皂
文章编号院员园园园鄄愿缘缘员渊圆园员猿冤员圆鄄员愿员苑鄄员员
水稻不同品种组培再生和转基因频率研究
李素娟员袁圆 摇 樊秀霞猿 摇 王摇 华圆 摇 邵健丰圆 摇 赵摇 辉源 摇 解摇 芳圆 摇 钱摇 前员袁缘 摇 陶跃之圆
渊员 浙江大学农业与生物技术学院袁浙江 杭州摇 猿员园园缘愿曰圆 浙江省农业科学院作物与核技术利用
研究所袁浙江 杭州摇 猿员园园圆员曰猿 杭州师范大学生命与环境科学学院袁浙江 杭州摇 猿员园园员愿曰
源浙江师范大学化学与生命科学学院袁浙江 金华摇 猿圆员园园源曰
缘中国水稻研究所水稻生物学国家重点实验室袁浙江 杭州摇 猿员园园园远曰冤
摘摇 要院本研究选取 圆员 个渊包括 员远 个籼稻品种和 缘 个粳稻品种冤在农业生产上具有重要应用价值的水稻
品种袁对它们进行成熟胚的组培再生能力以及转基因效率的考察遥 结果表明院以 晕月皂 诱导培养基进行
愈伤诱导时袁各水稻品种的愈伤诱导率介于 猿园郾 猿苑豫和 苑圆郾 源远豫之间曰以 晕月皂和 阅蕴猿 分化培养基对各水
稻品种不同日龄愈伤分别进行植株再生培养袁并以植株再生率渊责造葬灶贼 则藻早藻灶藻则葬贼蚤燥灶 则葬贼藻袁砸砸冤和每粒愈伤
平均出苗数渊 贼澡藻 皂藻葬灶 灶怎皂遭藻则 燥枣 则藻早藻灶藻则葬贼藻凿 泽澡燥燥贼泽袁晕砸杂冤对再生能力进行考察时袁不同水稻品种的组培
再生能力表现较为复杂袁同时受到基因型尧愈伤日龄和培养基成分的重大影响遥 在 晕月皂分化培养基上袁
以日龄 员缘凿的 栽燥怨苑源 愈伤 砸砸渊愿源郾 园园豫 冤和 晕砸杂渊圆郾 怨远冤最高袁在 阅蕴猿 分化培养基上袁以日龄 员缘凿的 栽燥怨苑源
愈伤 砸砸渊苑猿郾 猿猿豫 冤和粤泰 月愈伤 晕砸杂渊猿郾 缘缘冤分别为最高遥 此后袁利用根癌农杆菌介导的转基因方法对
其中 员圆 个水稻品种进行 月贼基因转化实验袁经 孕悦砸验证后发现袁共成功实现 苑 个品种的 月贼基因转化袁各
水稻品种的转化效率介于 园 耀 圆缘豫之间袁且与其再生能力相关遥
关键词院水稻曰愈伤曰再生能力曰转化效率
摇 摇 水稻是全世界最重要的粮食作物之一袁传统育种
方法一直是水稻育种的主要途径遥 近年来袁科技的发
展也促使其他各种水稻育种技术逐渐被开发和运用袁
如 耘酝杂渊甲基磺酸乙酯冤尧杂粤渊叠氮化钠冤化学诱变育
种尧电子流注入和 酌 射线辐照诱变育种等袁并且这些
技术也被广泛的与组织培养技术相结合袁以筛选各种
突变体咱员 原 缘暂 遥 随着生物技术在农业生产中的应用袁转
基因育种已被使用于水稻生产的各个方面袁主要包括
抗虫咱远 原 苑暂 尧抗病咱愿 原 怨暂 尧抗逆境咱员园暂 尧抗除草剂咱员员暂以及高品
质水稻的培育咱员圆暂等相关方面遥 籼稻凭借其高产的特
性和地域适应性袁在我国有广泛的种植面积遥 目前有
关粳稻成功转基因育种的报道有很多袁但仅有少数籼
稻品种成功实现转基因的报道咱员猿 原 员缘暂 袁在一定程度上限
制了籼稻转基因育种技术的发展步伐遥
植株再生是植物组织培养过程的一个重要环节袁
也是植物基因转化得以进行的重要前提袁但是水稻的
组培再生能力受供体基因型尧培养基组成尧外植体类型
及其生理状态等诸多因素影响袁其中与离体再生能力
密切相关的因素要基因型差异袁被认为是限制转基因
效率的最关键因素咱员远 原 员苑暂 遥
近年来袁各种优化的植物组织培养基配方不断涌
现袁培养方法也不断改进袁使得水稻的组织再生能力和
基因转化效率都得到提高遥 利用不同植物组织培养基
对生产上具有重要经济和实用价值的优良水稻品种
渊尤其是籼稻品种冤进行愈伤特性尧组培再生能力和基
因转化效率的考察袁将为水稻转基因育种提供更多的
理论依据和实验数据袁促进水稻遗传改良技术的发展遥
本研究选取在农业生产上具有重要价值的水稻品
种袁其中多为水稻杂交育种中常用的籼稻恢复系袁通过
对它们进行成熟胚的组织培养特征尧植株再生能力和
抗虫基因 月贼渊月葬糟蚤造造怎泽 贼澡怎则蚤灶早蚤藻灶泽蚤泽冤转化效率的考察袁
试图揭示院渊员冤不同基因型尧愈伤日龄和培养基组成成
苑员愿员
核摇 农摇 学摇 报 圆苑 卷
分对水稻组培再生能力的影响曰渊圆冤不同基因型对基
因转化率的影响曰渊猿冤组培再生能力与基因转化效率
之间的关系曰同时希望获得更多抗虫转基因水稻品种袁
以促进水稻转基因育种技术发展和在抗虫遗传改良中
的有效应用遥
员摇 材料与方法
员郾 员摇 试验材料
共选取 圆员 份水稻品种进行考察袁包括 缘 份粳稻材
料渊孕园怨尧砸员员员尧耘员园愿缘尧闵恢 员圆愿尧耘远远苑冤和 员远 份籼稻材
料渊桂 怨怨尧栽燥怨苑源尧粤泰 月尧辐恢 愿猿愿尧广恢 怨怨愿尧岳恢
怨员员猿尧匝远员员尧黄华占尧蜀恢 缘圆苑尧密阳 源远尧茂恢 愿远尧中恢
愿园园远尧中浙 月尧明恢 愿圆尧砸远园愿尧成恢 苑圆苑冤袁水稻种子由浙
江省农业科学院病毒与生物技术研究所周波博士提
供遥 每个品种挑选健康饱满的成熟种子胚作为外植体
进行组培实验遥
员郾 圆摇 培养基配制
以 晕远咱员愿暂 袁月缘咱员怨暂 袁粤粤咱圆园暂 袁蕴猿 咱圆员暂和 阅造咱圆员暂等培养基
元素为基本成分袁配制各种培养基并调节 责匀 值袁
员圆员益高温高压灭菌 圆园皂蚤灶遥 各培养基的详细组成见
表 员遥
员郾 猿摇 试验过程
员郾 猿郾 员摇 愈伤诱导和继代培养摇 分别挑选各水稻品种
健康饱满的成熟种子 圆园园 粒袁用 苑园豫 渊增 辕 增冤酒精消毒
猿园泽袁园郾 员豫 渊皂 辕 增冤匀早悦造圆 溶液摇床震荡消毒 员园皂蚤灶袁无
菌蒸馏水清洗 缘 原 远 遍并晾干后依次接种至 晕月皂 诱导
培养基上袁每皿 圆园 粒袁均匀摆放袁封口膜渊酝蚤糟则燥责燥则藻栽酝
杂怎则早蚤糟葬造 栽葬责藻冤封口后 圆愿益 渊员远澡 光照 辕 愿澡 黑暗冤培养袁
并对培养 员缘凿后诱导出的愈伤仍用 晕月皂 愈伤诱导培
养基每隔 员园凿继代培养一次遥
员郾 猿郾 圆摇 愈伤分化和植株再生摇 分别将已经诱导培养
员缘凿袁继代 员 次共培养了 圆缘凿 和继代 圆 次共培养了 猿缘凿
的 圆员 份水稻品种的愈伤转接至两种分化培养基渊晕月皂
和 阅蕴猿冤上袁每个品种各日龄段渊员缘凿尧圆缘凿尧猿缘凿冤愈伤分
别接种至少 缘 个分化瓶袁统一按照每瓶 缘 粒愈伤的标
准均匀放置培养基上袁圆愿益 渊员远澡 光照 辕 愿澡 黑暗冤培养
源园凿遥
员郾 猿郾 猿摇 植株生根摇 将上述长出的再生幼苗转接至生
根培养基 渊晕月皂冤上袁圆愿益 渊员远澡 光照 辕 愿澡 黑暗冤培养
圆园凿左右袁至幼苗生长健壮袁移出组培室袁常温室内炼
苗一周后袁栽植于大田中遥
从愈伤诱导尧继代直至愈伤分化和植株再生的整
个培养过程均严格保证无菌操作袁同时定期观察愈伤
长势尧及时处理污染现象袁并进行拍照记录遥
表 员摇 培养基的具体组成
栽葬遭造藻 员摇 悦燥皂责燥泽蚤贼蚤燥灶 燥枣 皂藻凿蚤葬 怎泽藻凿 蚤灶 贼澡蚤泽 泽贼怎凿赠
培养阶段
杂贼葬早藻
培养基
酝藻凿蚤怎皂
具体组成
悦燥皂责燥泽蚤贼蚤燥灶
愈伤诱导
悦葬造造怎泽 蚤灶凿怎糟贼蚤燥灶
晕月皂 晕远 大量 垣 月缘 微量 垣 月缘 有机 垣 园郾 缘早窑蕴 原员谷氨酰胺 垣 圆郾 愿早窑蕴 原员脯氨酸 垣 园郾 猿早窑蕴 原员水解酪蛋白 垣 圆皂早窑蕴 原员 圆袁源 原
阅 垣 猿园早窑蕴 原员蔗糖 垣 猿郾 远早窑蕴 原员孕澡赠贼葬早藻造渊责匀值 缘郾 愿冤
愈伤继代
悦葬造造怎泽 泽怎遭糟怎造贼怎则藻
晕月皂 同上
抗性愈伤筛选
砸藻泽蚤泽贼葬灶贼 糟葬造造怎泽 泽藻造藻糟贼蚤燥灶
蕴猿 蕴猿 大量 垣 蕴猿 微量 垣 蕴猿 有机 垣 园郾 缘早窑蕴 原员谷氨酰胺 垣 园郾 缘早窑蕴 原员脯氨酸 垣 园郾 猿早窑蕴 原员水解酪蛋白 垣 圆皂早窑蕴 原员圆袁源 原
阅 垣 猿园早窑蕴 原员麦芽糖 垣 猿郾 远早窑蕴 原员 孕澡赠贼葬早藻造渊责匀值 缘郾 怨冤渊缘缘益添加潮霉素 缘园皂早窑蕴 原员和头孢拉定 缘园园皂早窑蕴 原员 冤
愈伤分化
悦葬造造怎泽 凿蚤枣枣藻则藻灶贼蚤葬贼蚤燥灶
晕月皂 晕远 大量 垣 月缘 微量 垣 月缘 有机 垣 园郾 缘早窑蕴 原员谷氨酰胺 垣 园郾 缘早窑蕴 原员脯氨酸 垣 园郾 猿早窑蕴 原员水解酪蛋白 垣 猿皂早窑蕴 原员远 原 月粤
垣 园郾 缘皂早窑蕴 原员晕粤粤 垣猿园早窑蕴 原员蔗糖 垣 愿早窑蕴 原员琼脂渊责匀值 缘郾 愿冤
阅蕴猿 阅造大量 垣 阅造微量 垣 蕴猿 有机 垣 园郾 缘早窑蕴 原员谷氨酰胺 垣 园郾 缘早窑蕴 原员脯氨酸 垣 园郾 愿早窑蕴 原员水解酪蛋白 垣 圆皂早窑蕴 原员远 原 月粤
垣 圆皂早窑蕴 原员运蚤灶藻贼蚤灶 垣 园郾 圆皂早窑蕴 原员 陨粤粤 垣 园郾 圆皂早窑蕴 原员晕粤粤 垣猿园早窑蕴 原员麦芽糖 垣 愿早窑蕴 原员琼脂渊责匀值 缘郾 怨冤
生根
砸燥燥贼蚤灶早
晕月皂 员 辕 圆 晕远 大量 垣 员 辕 圆 月缘 微量 垣 员 辕 圆 月缘 有机 垣 圆园早窑蕴 原员蔗糖 垣 愿早窑蕴 原员粤早葬则渊责匀值 缘郾 愿冤
农杆菌侵染
粤早则燥遭葬糟贼藻则蚤怎皂 蚤灶枣藻糟贼蚤燥灶
粤粤酝 粤粤大量 垣 月缘 微量 垣 月缘 有机 垣 猿郾 怨早窑蕴 原员乙磺酸 垣 园郾 缘早窑蕴 原员水解酪蛋白 垣 猿园早窑蕴 原员麦芽糖渊责匀 缘郾 缘冤渊缘缘益添加
乙酰丁香酮至 圆园园滋酝冤
共培养
悦燥鄄糟怎造贼怎则藻
晕月皂 晕远 大量 垣 月缘 微量 垣 月缘 有机 垣 员郾 怨早窑蕴 原员肌醇 垣 猿郾 怨早窑蕴 原员乙磺酸 垣 园郾 缘早窑蕴 原员水解酪蛋白 垣 猿园早窑蕴 原员麦芽糖 垣
猿郾 远早窑蕴 原员 孕澡赠贼葬早藻造渊责匀 值 缘郾 缘冤渊缘缘益添加乙酰丁香酮至 圆园园滋酝冤
愿员愿员
摇 员圆 期 水稻不同品种组培再生和转基因频率研究
员郾 猿郾 源摇 月贼 基因转化摇 采用根癌农杆菌介导的转基因
方法对选定的 员圆 个水稻品种的愈伤进行含 月贼 基因的
农杆菌 耘匀粤员园缘 转化实验袁并采用 晕月皂共培养培养基
和 蕴猿 选择培养基进行农杆菌的侵染和抗性愈伤的筛
选袁源园凿的抗性愈伤选择培养后袁采用 阅蕴猿 分化培养基
和 晕月皂生根培养基进行转基因植株的再生培养遥 期
间通过控制菌悬液浓度和各操作过程的一致性以减少
人为因素带来的误差遥 载体为含有 月贼 基因和 郧云孕 标
记的 粤悦鄄阅杂 月贼 载体渊 责悦粤酝月陨粤员猿园园袁载体结构见图
员冤遥
图 员摇 粤悦鄄阅杂 月贼 载体渊责悦粤酝月陨粤员猿园园冤结构简图
云蚤早援 员摇 阅蚤葬早则葬皂 燥枣 贼澡藻 粤悦鄄阅杂 月贼 增藻糟贼燥则 渊责悦粤酝月陨粤员猿园园冤
员郾 猿郾 缘摇 植物叶片总 阅晕粤 提取 摇 采用传统的 悦栽粤月
法咱圆圆暂并略作修改袁剪取各水稻品种转基因株系的幼苗
叶片进行植物总 阅晕粤提取遥
员郾 猿郾 远摇 转基因植株的 孕悦砸 鉴定摇 使用 圆 伊 杂责藻糟蚤枣蚤糟栽酝
栽粤匝 酝葬泽贼藻则 酝蚤曾渊杂蚤灶燥月蚤燥袁中国上海冤对各水稻品种的
转基因株系进行目的基因 月贼的扩增检测袁月贼基因的上
游引物序列为 郧郧悦悦栽郧郧栽郧郧粤悦粤栽悦粤栽悦栽郧袁下游引物
为 栽悦悦栽郧粤栽栽郧郧郧栽粤郧郧栽悦悦栽郧悦袁孕悦砸 产物长度 远园员
遭责遥 孕悦砸反应体系为院杂蚤灶燥月蚤燥 圆 伊 栽葬择 酝葬泽贼藻则 酝蚤曾袁员圆郾 缘
滋蕴曰正向引物渊员园 滋酝冤袁员 滋蕴曰反向引物渊员园 滋酝冤袁员
滋蕴曰阅晕粤模板袁园郾 缘 滋蕴渊源园园灶早冤曰凿凿匀圆韵补充至 圆缘 滋蕴遥孕悦砸反应条件为院怨源益预变性 源皂蚤灶曰怨源益 变性 猿园泽袁
远园益退火 源缘泽袁苑圆益延伸 源缘泽袁循环 猿圆 次曰苑圆益终延伸
苑皂蚤灶曰源益保存遥 孕悦砸产物在 员豫 渊皂 辕 增冤琼脂糖凝胶上
圆园园灾电压电泳 圆缘皂蚤灶袁凝胶成像仪渊 粤造责澡葬 陨灶灶燥贼藻糟澡袁
粤造责澡葬陨皂葬早藻则砸 耘孕冤下拍照分析遥
员郾 源摇 表型考察和数据统计
员郾 源郾 员摇 愈伤诱导和继代培养阶段 摇 愈伤诱导培养
员缘凿 时统计各水稻品种出愈伤情况袁并计算愈伤诱导
率渊糟葬造造怎泽 蚤灶凿怎糟贼蚤燥灶 则葬贼藻袁悦陨砸冤院愈伤诱导率 越 渊诱导出
愈伤的外植体数 辕接种的全部外植体数冤 伊 员园园豫 遥
愈伤继代培养过程袁从愈伤的颜色尧质地尧散生和
褐化程度等方面进行愈伤生长特点的观察和记录遥
员郾 源郾 圆摇 愈伤分化和植株再生阶段摇 愈伤分化过程中
观察愈伤的增殖和褐化情况袁培养 源园凿 时统计各水稻
品种每一分化瓶中每粒愈伤的出苗数目袁并选取平均
度 最好的 猿 瓶进行表型考察袁 以植株再生率
渊则藻早藻灶藻则葬贼蚤燥灶 则葬贼藻袁砸砸袁豫 冤 渊即出苗愈伤率冤和单粒愈
伤平均出苗数渊 贼澡藻 皂藻葬灶 灶怎皂遭藻则 燥枣 则藻早藻灶藻则葬贼藻凿 泽澡燥燥贼泽袁
晕砸杂冤两个指标进行植株再生能力的考察咱圆猿暂 遥
为保证实验结果的可靠性袁从愈伤诱导尧继代直至
愈伤分化和植株再生的整个培养过程均重复 猿 次袁并
以最终的均值进行数据分析遥
员郾 源郾 猿摇 月贼 基因转化率摇 统计各水稻品种的转基因阳
性株系数袁并计算其相应的 月贼基因转化效率袁其中院
转化率 越 渊转基因阳性株系数 辕侵染愈伤总数冤 伊
员园园豫
圆摇 结果与分析
圆郾 员摇 诱导率
圆员 个水稻测试品种在经过 晕月皂 愈伤诱导培养基
上 员缘凿的培养后袁尽管所有品种愈伤诱导率均大于
猿园豫 袁但是不同基因型之间袁水稻愈伤诱导率仍存在较
大差异袁其中粳稻品种中闵恢 员圆愿 的诱导率最高
渊苑圆郾 源远豫 冤袁耘员园愿缘 和 耘远远苑 愈伤诱导率也接近 苑园豫 袁
孕园怨渊缘员郾 愿愿豫 冤和 砸员员员渊缘员郾 圆怨豫 冤的愈伤诱导率稍低曰
籼稻品种中 匝远员员袁黄华占袁中恢 愿园园远袁中浙 月 和成恢
苑圆苑 的愈伤诱导率较高 渊近 远园豫 冤袁辐恢 愿猿愿 最低
渊猿园郾 源苑豫 冤袁其它大部分籼稻测试品种的愈伤诱导率
都集中在 猿园豫 耀 远园豫之间渊图 圆冤遥 研究中发现各水
稻品种在愈伤诱导率这一考察指标上均取得较好的重
复性袁且部分粳稻品种愈伤诱导率相对高于籼稻遥 但
同时也观察到袁多数籼稻材料愈伤出现较早袁多在培养
远凿 以内出现袁而粳稻出愈时间均在培养一周以后袁相
对较晚遥
圆郾 圆摇 愈伤诱导和继代培养后的形态特征
将 圆员 个水稻品种不同时期的愈伤渊生长 员缘尧圆缘尧
怨员愿员
核摇 农摇 学摇 报 圆苑 卷
注院方形框内为粳稻品种袁其余为籼稻品种遥
晕燥贼藻院 栽澡藻 躁葬责燥灶蚤糟葬 增葬则蚤藻贼蚤藻泽 蚤灶 贼澡藻 泽择怎葬则藻 遭燥曾 灶藻曾贼 贼燥 葬造造 蚤灶凿蚤糟葬 增葬则蚤藻贼蚤藻泽援
图 圆摇 不同水稻品种的愈伤诱导率渊悦陨砸冤
云蚤早援 圆摇 悦葬造造怎泽 蚤灶凿怎糟贼蚤燥灶 则葬贼藻 燥枣 凿蚤枣枣藻则藻灶贼 则蚤糟藻 增葬则蚤藻贼蚤藻泽
图 猿摇 不同日龄的闵恢 员圆愿尧密阳 源远 和桂 怨怨 的愈伤状态
云蚤早援 猿摇 栽澡藻 糟葬造造怎泽 糟澡葬则葬糟贼藻则 燥枣 贼澡则藻藻 则蚤糟藻 增葬则蚤藻贼蚤藻泽 渊酝蚤灶澡怎蚤 员圆愿袁 酝蚤赠葬灶早 源远袁 葬灶凿 郧怎蚤 怨怨冤 蚤灶
凿蚤枣枣藻则藻灶贼 渊员缘袁 圆缘 葬灶凿 猿缘 凿葬赠泽鄄燥造凿冤 糟葬造造怎泽 葬早藻泽
猿缘凿冤进行形态学观察比较袁发现愈伤的颜色尧质地和
生长状态不仅受基因型影响袁也随时期的不同存在较
大差异遥 对它们的愈伤培养特征可简单概括为院粳稻
愈伤普遍颜色鲜黄尧质地致密袁随继代培养过程易散生
出许多新鲜致密的小颗粒愈伤袁并随后得到迅速繁殖袁
受继代培养时间影响较小袁不会发生褐化袁可连续继代
园圆愿员
摇 员圆 期 水稻不同品种组培再生和转基因频率研究
培养渊如闵恢 员圆愿冤渊图 猿冤曰籼稻愈伤多鲜黄或者淡黄袁
在继代培养过程中不易散生出致密的小愈伤袁产生的
散生愈伤质地相对松软袁颜色淡黄发白渊如密阳 源远冤袁
且随培养时间的延长多数籼稻品种的愈伤出现严重褐
化尧甚至死亡渊如桂 怨怨冤渊图 猿冤遥
圆郾 猿摇 愈伤分化和植株再生情况
各测试水稻品种的愈伤在分化培养基上的生长状
态亦出现明显差异袁部分品种在分化过程中随培养时
间延长袁愈伤大量增殖袁散生出数目繁多的鲜黄致密愈
伤袁并逐渐出现绿点袁成长为苗且出苗繁多曰但另一些
品种的愈伤在分化培养基上不仅得不到大量繁殖袁且
颜色日趋转暗袁直至褐化死亡袁不出苗或出苗极少遥 采
用参数植株再生率 渊 砸砸冤和单粒愈伤平均出苗数
渊晕砸杂冤对愈伤的植株再生能力进行考察袁发现基因型尧
培养基组成和接种愈伤的日龄对愈伤的再生能力均有
较大影响遥
注院粤院不同水稻品种在 晕月皂分化培养基上的植株再生率曰月院不同水稻品种在 阅蕴猿 分化培养基上的植株再生率
渊方形框内为粳稻品种袁其余为籼稻品种冤遥
晕燥贼藻院粤院 砸砸 燥枣 凿蚤枣枣藻则藻灶贼 则蚤糟藻 增葬则蚤藻贼蚤藻泽 燥灶 晕月皂 凿蚤枣枣藻则藻灶贼蚤葬贼蚤燥灶 皂藻凿蚤怎皂曰 月院 砸砸 燥枣 凿蚤枣枣藻则藻灶贼 则蚤糟藻 增葬则蚤藻贼蚤藻泽 燥灶
阅蕴猿 凿蚤枣枣藻则藻灶贼蚤葬贼蚤燥灶 皂藻凿蚤怎皂 渊栽澡藻 躁葬责燥灶蚤糟葬 增葬则蚤藻贼蚤藻泽 蚤灶 贼澡藻 泽择怎葬则藻 遭燥曾 灶藻曾贼 贼燥 葬造造 蚤灶凿蚤糟葬 增葬则蚤藻贼蚤藻泽冤援
图 源摇 不同水稻品种愈伤的植株再生率渊砸砸冤
云蚤早援 源摇 孕造葬灶贼 则藻早藻灶藻则葬贼蚤燥灶 则葬贼藻 早藻灶藻则葬贼藻凿 枣则燥皂 贼澡藻 糟葬造造怎泽 燥枣 凿蚤枣枣藻则藻灶贼 则蚤糟藻 增葬则蚤藻贼蚤藻泽
圆郾 猿郾 员摇 植株再生率渊砸砸冤 摇 图 源 为测试品种在 晕月皂
和 阅蕴猿 两种分化培养基上的植株再生率情况遥 由
图 源 原 粤可见袁在 晕月皂分化培养基上袁测试粳稻品种接
种愈伤日龄为 员缘凿 时袁孕园怨 和闵恢 员圆愿 都不具有植株
再生能力袁砸员员员尧耘员园愿缘 和 耘远远苑 这三者具有 猿缘豫以上
的植株再生率袁又以 耘员园愿缘 为最高渊缘远郾 园园豫 冤曰接种愈
伤日龄为 圆缘凿 时袁缘 个粳稻测试品种均具有一定的植
株再生能力袁仍以 耘员园愿缘 为最高渊苑远郾 园园豫 冤曰但在接种
愈伤日龄为 猿缘凿 时袁仅 耘员园愿缘 渊 缘远郾 园园豫 冤 和 耘远远苑
渊圆园郾 园园豫 冤的愈伤仍具有再生能力遥 综合看来袁测试
的 缘 个粳稻品种中 耘员园愿缘 不仅具有最高的植株再生
率袁且受接种愈伤日龄影响最小遥 而籼稻品种在 晕月皂
分化培养基上的植株再生率差异情况要复杂许多渊图
源 原 粤冤遥 接种愈伤日龄为 员缘凿时袁除广恢 怨怨愿尧黄华占尧
明恢 愿圆尧砸远园愿 和成恢 苑圆苑 之外袁其它 员员 个测试品种均
具有 一 定 的 植 株 再 生 能 力袁 以 栽燥怨苑源 为 最 高
渊愿源郾 园园豫 冤袁 匝远员员 次之 渊 远园豫 冤袁 蜀恢 缘圆苑 又次之
渊源远郾 远苑豫 冤袁其余 愿 个籼稻品种的 砸砸 值相对较低曰接
种愈伤日龄为 圆缘凿时袁有 员圆 个测试籼稻品种具有一定
的植株再生能力袁砸砸值参差不齐袁而 栽燥怨苑源尧辐恢 愿猿愿尧
砸远园愿 和成恢 苑圆苑 的愈伤均不能够长出再生苗曰接种愈
伤日龄为 猿缘凿时袁只有 愿 个籼稻品种的愈伤能够长出
员圆愿员
核摇 农摇 学摇 报 圆苑 卷
再生苗来袁其中以粤泰 月和密阳 源远 最高渊源园豫以上冤袁
中浙 月次之渊猿猿郾 猿猿豫 冤遥 可见袁测试籼稻品种在 晕月皂
分化培养基上的植株再生率受基因型和接种愈伤日龄
影响都较大袁砸远园愿 愈伤完全不具备再生能力袁而粤泰
月再生能力受接种愈伤日龄影响较小遥
各测试品种在 阅蕴猿 分化培养基上的植株生长率
同样存在明显差异渊图 源 原 月冤袁且与 晕月皂 培养基上的
情况明显不同遥 首先袁缘 个粳稻品种在接种愈伤日龄
为 员缘 和 猿缘凿时都具有植株再生能力袁而且均以 砸员员员
的 砸砸值最高袁孕园怨 和闵恢 员圆愿 次之袁耘远远苑 最低曰但是
接种愈伤日龄为 圆缘凿 时袁仅 砸员员员 和 耘员园愿缘 能够再生
出苗袁其它三个测试品种失去再生能力遥 就籼稻而言袁
测试的各品种在 阅蕴猿 培养基上植株再生能力多数高
于它们在 晕月皂培养基上的表现袁如桂 怨怨尧粤泰 月尧辐恢
愿猿愿尧匝远员员尧黄华占尧密阳 源远尧茂恢 愿远尧中恢 愿园园远尧明恢
愿圆遥 接种愈伤日龄 员缘凿 时袁除广恢 怨怨愿尧明恢 愿圆 和
砸远园愿 之外的其它 员猿 个测试籼稻品种都具有再生出苗
注院粤院不同水稻品种在 晕月皂分化培养基上的单粒愈伤平均出苗数曰月院不同水稻品种在 阅蕴猿 分化培养
基上的单粒愈伤平均出苗数渊方形框内为粳稻品种袁其余为籼稻品种冤遥
晕燥贼藻院粤院 晕砸杂 燥枣 凿蚤枣枣藻则藻灶贼 则蚤糟藻 增葬则蚤藻贼蚤藻泽 燥灶 晕月皂 凿蚤枣枣藻则藻灶贼蚤葬贼蚤燥灶 皂藻凿蚤怎皂曰 月院 晕砸杂 燥枣 凿蚤枣枣藻则藻灶贼 则蚤糟藻 增葬则蚤藻贼蚤藻泽 燥灶
阅蕴猿 凿蚤枣枣藻则藻灶贼蚤葬贼蚤燥灶 皂藻凿蚤怎皂 渊栽澡藻 躁葬责燥灶蚤糟葬 增葬则蚤藻贼蚤藻泽 蚤灶 贼澡藻 泽择怎葬则藻 遭燥曾 灶藻曾贼 贼燥 葬造造 蚤灶凿蚤糟葬 增葬则蚤藻贼蚤藻泽冤援
图 缘摇 不同水稻品种的单粒愈伤平均出苗数渊晕砸杂冤
云蚤早援 缘摇 栽澡藻 皂藻葬灶 灶怎皂遭藻则 燥枣 则藻早藻灶藻则葬贼藻凿 泽澡燥燥贼泽 责藻则 糟葬造造怎泽 燥枣 凿蚤枣枣藻则藻灶贼 则蚤糟藻 增葬则蚤藻贼蚤藻泽
能力袁以 栽燥怨苑源 为最高渊苑猿郾 猿猿豫 冤袁中浙 月 和成恢 苑圆苑
最低渊远郾 远苑豫 冤曰接种愈伤日龄 圆缘凿 时袁仍然是 员猿 个测
试籼稻品种拥有再生能力袁以桂 怨怨 和茂恢 愿远 的 砸砸
值为最高 渊 缘园豫 以上冤袁蜀恢 缘圆苑 和中浙 月 最低
渊远郾 远苑豫 冤袁而 栽燥怨苑源袁广恢 怨怨愿 和 砸远园愿 这三个品种不
能够长出再生苗曰随着接种愈伤日龄增加到 猿缘凿袁有 苑
个测试籼稻品种失去再生能力袁能够产生再生苗的 怨
个籼稻品种中袁以粤泰 月植株再生率最高渊缘缘郾 园园豫 冤袁
岳恢 怨员员猿 和茂恢 愿远 最低渊远郾 远苑豫 冤遥 因此袁整体看来袁
即使 阅蕴猿 更有利于多数籼稻品种的再生袁对 砸远园愿 而
言也不具有优势袁基因型仍然是决定植株再生率的一
个重要因素遥 而在 阅蕴猿 分化培养基上袁接种愈伤日龄
对愈伤再生出苗能力的影响仍然是一种显而易见的普
遍存在遥
圆郾 猿郾 圆摇 单粒愈伤平均出苗数渊晕砸杂冤 摇 无论是测试的
粳稻还是籼稻品种袁在 晕月皂和 阅蕴猿 两种培养基上的单
粒愈伤平均出苗数表现渊图 缘冤与其相应的植株再生率
表现渊图 源冤整体上都具有相似之处袁但在具体数值的
相对高低上仍存有一定的差异遥
当愈伤接种于 晕月皂 分化培养基上时渊图 缘 原 粤冤袁
测试的 缘 个粳稻品种中 耘员园愿缘 和 耘远远苑 在接种愈伤的
圆圆愿员
摇 员圆 期 水稻不同品种组培再生和转基因频率研究
注院酝院 员园园遭责 阅晕粤 分子量标记曰 员 原 圆院 中浙 月曰 猿 原 源院 耘员园愿缘曰 缘 原 远院 成恢 苑圆苑曰 苑院 砸员员员曰 愿院 中恢 愿园园远曰 怨 原 员园院
茂恢 愿远曰 员员院 耘远远苑曰 悦运院阴性对照遥
晕燥贼藻院酝院 员园园遭责 阅晕粤 皂燥造藻糟怎造葬则 憎藻蚤早澡贼 皂葬则噪藻则曰 员 原 圆院 在澡燥灶早扎澡藻 月曰 猿 原 源院 耘员园愿缘曰 缘 原 远院 悦澡藻灶早澡怎蚤 苑圆苑曰 苑院 砸员员员曰
愿院 在澡燥灶早澡怎蚤 愿园园远曰 怨 原 员园院 酝葬燥澡怎蚤 愿远曰 员员院 耘远远苑曰 悦运院 灶藻早葬贼蚤增藻 糟燥灶贼则燥造援
图 远摇 部分转基因株系的 孕悦砸检测结果
云蚤早援 远摇 栽澡藻 则藻责则藻泽藻灶贼葬贼蚤增藻 孕悦砸 贼藻泽贼 则藻泽怎造贼泽 燥枣 早藻灶燥皂蚤糟 阅晕粤 蚤灶 责怎贼葬贼蚤增藻 贼则葬灶泽早藻灶蚤糟 责造葬灶贼泽
三个不同日龄段都具有一定的出苗能力袁其中以
耘员园愿缘 单粒愈伤出苗数为各日龄段最高渊员郾 园园 约 晕砸杂
约 圆郾 缘园冤曰砸员员员 在接种愈伤日龄为 员缘 和 圆缘凿 时袁仍具
有 晕砸杂 为 员 左右的出苗能力袁但是日龄 猿缘凿 的 砸员员员
愈伤失去出苗能力曰孕园怨 和闵恢 员圆愿 的再生能力较差袁
仅在接种愈伤日龄 圆缘凿 时产生数目较少的再生苗袁单
粒愈伤平均出苗数为 园郾 员猿遥 在测试的籼稻品种里袁接
种愈伤日龄为 员缘凿时袁除去不具备再生能力的 缘 个籼
稻品种渊广恢 怨怨愿尧黄华占尧明恢 愿圆尧砸远园愿 和成恢 苑圆苑冤
外袁其余 员员 个籼稻材料中 栽燥怨苑源 具有最高单粒愈伤平
均出苗数渊圆郾 怨远冤袁匝远员员 次之渊员郾 园苑冤袁再次为粤泰 月袁
蜀恢 缘圆苑袁密阳 源远 和茂恢 愿远袁而桂 怨怨尧辐恢 愿猿愿尧岳恢
怨员员猿尧中恢 愿园园远 和中浙 月虽具有再生能力袁但 晕砸杂 值
非常低渊园郾 园苑冤曰当接种愈伤日龄为 圆缘凿 时袁员圆 个能够
再生出苗的籼稻品种里袁以岳恢 怨员员猿 具有较高的单粒
愈伤出苗数渊员郾 猿园冤袁广恢 怨怨愿尧中浙 月 和明恢 愿圆 的
晕砸杂值最低渊园郾 园苑冤袁栽燥怨苑源尧辐恢 愿猿愿尧砸远园愿 和成恢 苑圆苑
不具备出苗能力曰接种愈伤日龄为 猿缘凿时袁有 愿 个籼稻
品种失去再生能力袁能够再生出苗的 愿 份材料里以中
浙 月的单粒愈伤平均出苗数最高渊园郾 愿苑冤袁桂 怨怨尧匝远员员
和中恢 愿园园远 的 晕砸杂值最低渊园郾 园苑冤遥
当愈伤接种于 阅蕴猿 分化培养基上时袁水稻各测试
品种的出苗情况与 晕月皂 分化培养基相比显著不同
渊图 缘 原 遭冤遥 测试的 缘 个粳稻品种中以 砸员员员 对各日龄
段接种愈伤都具有较高的单粒愈伤平均出苗数渊园郾 远园
约 晕砸杂 约 圆郾 圆园冤袁耘员园愿缘 虽各日龄段接种愈伤都能够
再生出苗袁但 晕砸杂 值均不太高袁孕园怨尧闵恢 员圆愿 和 耘远远苑
这三个品种接种愈伤日龄为 圆缘凿 时都失去再生能力袁
员缘凿和 猿缘凿日龄时 晕砸杂 值也普遍较低袁尤其是 耘远远苑遥
而测试的籼稻品种里袁接种愈伤日龄为 员缘凿 时袁粤泰 月
渊猿郾 缘缘冤和茂恢 愿远渊猿郾 员远冤具有很高的单粒愈伤出苗数袁
匝远员员渊圆郾 远园冤次之袁中浙 月 和成恢 苑圆苑 的 晕砸杂 值非常
低渊园郾 员园 以下冤袁广恢 怨怨愿尧明恢 愿圆 和 砸远园愿 不能够再
生出苗曰接种愈伤日龄 圆缘凿 时袁茂恢 愿远 的 晕砸杂 最大
渊圆郾 源苑冤袁桂 怨怨尧粤泰 月和 匝远员员 次之袁蜀恢 缘圆苑尧中浙 月
和成恢 苑圆苑 的 晕砸杂极低渊约 园郾 员园冤袁栽燥怨苑源尧广恢 怨怨愿 和
砸远园愿 不能产生再生苗曰接种愈伤日龄为 猿缘凿 时袁愈伤
能再生出苗的 怨 个品种中以粤泰 月 的 晕砸杂 值最高
渊员郾 远圆冤袁岳恢 怨员员猿 最低 渊 园郾 园苑 冤袁其余 苑 份材料
渊栽燥怨苑源尧黄华占尧蜀恢 缘圆苑尧中浙 月尧明恢 愿圆尧砸远园愿 和成
恢 苑圆苑冤均不能再生出苗遥 可见袁基因型尧接种愈伤日
龄和培养基对单粒愈伤平均出苗数同样存在显著影
响遥
圆郾 源摇 月贼基因转化效率
在对各水稻品种的愈伤进行继代培养的过程中发
现袁部分籼稻品种的愈伤在继代培养过程中会发生褐
化死亡的现象袁而这也限制了它们在基因转化试验中
供体愈伤材料的选取袁因而经过仔细挑选最终只选出
状态稍好尧较健康的 员圆 个品种的愈伤进行基因转化遥
这 员圆 个水稻品种又因为愈伤再生能力低下尧愈伤数量
不充足或是基因型的限制等因素袁并没有能全部实现
基因转化遥 最终袁对 月贼基因的 孕悦砸 鉴定结果表明渊图
远冤院源 份粳稻测试品种中有 猿 个品种实现 月贼 基因转
化袁转化率介于 源郾 员苑豫和 圆源郾 缘猿豫之间袁以 耘员园愿缘 最高
渊圆源郾 缘猿豫 冤袁耘远远苑 最低渊源郾 员苑豫 冤曰愿 份籼稻测试品种成
功实现 源 个品种的 月贼基因转化袁转化率介于 圆郾 苑猿豫和
圆缘郾 园园豫之间袁以茂恢 愿远 最高渊圆缘郾 园园豫 冤袁中浙 月 次
之袁中恢 愿园园远 最低渊图 苑冤遥 另有 员 个粳稻品种闵恢
员圆愿 和 源 个籼稻品种渊蜀恢 缘圆苑袁密阳 源远袁明恢 愿圆 和
砸远园愿冤没能获得阳性转基因苗遥 已经获得的各水稻品
种的转 月贼基因阳性株系渊栽园冤现正种植于大田中袁进行
繁种加代袁进一步的抗虫能力测试即将开展遥
猿圆愿员
核摇 农摇 学摇 报 圆苑 卷
注院方形框内为粳稻品种袁其余为籼稻品种遥
晕燥贼藻院栽澡藻 躁葬责燥灶蚤糟葬 增葬则蚤藻贼蚤藻泽 蚤灶 贼澡藻 泽择怎葬则藻
遭燥曾 灶藻曾贼 贼燥 葬造造 蚤灶凿蚤糟葬 增葬则蚤藻贼蚤藻泽援
图 苑摇 不同水稻品种的 月贼基因转化率
云蚤早援 苑摇 栽澡藻 月贼 早藻灶藻 贼则葬灶泽枣燥则皂葬贼蚤燥灶 藻枣枣蚤糟蚤藻灶糟赠 燥枣
凿蚤枣枣藻则藻灶贼 则蚤糟藻 增葬则蚤藻贼蚤藻泽
猿摇 讨论
研究采用 晕月皂 诱导和继代培养基尧晕月皂 和 阅蕴猿
分化培养基袁对 员远 份籼稻材料和 缘 份粳稻材料进行成
熟胚的组织培养能力考察渊包括愈伤诱导率袁形态特
征和再生能力冤袁尽管测试品种范围不够大袁测试培养
基类型偏少袁测试过程中考察指标稍显单一袁但仍然能
从本实验的数据中获取与水稻组培再生和转化相关的
重要信息遥
猿郾 员摇 基因型对水稻愈伤组培再生能力的影响
关于基因型对植物组培能力的决定性影响已在众
多材料中有很多报道咱员远 原 员苑暂 袁本研究结果亦表明袁不管
是在 晕月皂还是 阅蕴猿 分化培养基上袁即使在接种愈伤日
龄相同的情况下袁不同品种间由于基因型的不同袁相应
的植株再生率和单粒愈伤平均出苗数都存在明显差
异袁而品种 砸远园愿 在两种分化培养基上都不具有植株
再生能力渊图 源袁缘冤遥 由于本研究的测试品种既有籼稻
也有粳稻袁既有常规栽培种袁也有非常重要的恢复系材
料袁根据国家水稻数据中心中国水稻品种及其系谱数
据库渊澡贼贼责院 辕 辕 憎憎憎援 则蚤糟藻凿葬贼葬援 糟灶 辕 增葬则蚤藻贼赠 辕 冤信息对它们的
系谱关系进行调查时袁发现品种间系谱关系较为复杂遥
亲缘关系远近不同袁再生能力差异很大袁如闵恢 员圆愿 和
耘远远苑 来源不同亲缘关系较远袁再生能力也显著不同遥
系谱关系相近的品种袁组培再生能力也表现出一定的
相似性遥 如 栽燥怨苑源 和 匝远员员咱圆源暂的选育过程都与强恢复
系测 远源 密切相关袁两者无论在 晕月皂 还是 阅蕴猿 分化培
养基上袁日龄 员缘凿的愈伤均具有较好的再生能力曰再如
砸远园愿 和成恢 苑圆苑 都是以蜀恢 缘圆苑 为父本育成的籼型
水稻恢复系袁它们在 晕月皂和 阅蕴猿 分化培养基上的再生
能力表现的比蜀恢 缘圆苑 更加低下遥 然而这些零散尧初
步的对应分析远不足以解释不同品种间组培能力差异
性的来源袁本实验结果再次提示我们袁只有通过更广
泛尧更精细的遗传关联分析袁发现和定位决定水稻组培
再生能力的关键基因袁才能从根本上理解基因型对水
稻愈伤组培再生能力的决定性影响遥
猿郾 圆摇 培养基成分对水稻愈伤组培再生能力的影响
为提高植物离体再生能力袁多种适用于不同植物
的培养基配方相继被报道推出袁其中水稻上广泛应用
的基本培养基主要有院晕远咱员愿暂 袁月缘咱员怨暂 袁酝杂咱圆缘暂 袁陨咱圆远暂 袁杂咱圆远暂
等遥 晕远 和 月缘 被认为较适宜于粳稻品种的组织培养袁
酝杂则被更多应用于籼稻的组培遥 近年来袁人们对籼稻
的离体再生能力投入了更多的研究袁一些适宜于籼稻
离体再生的培养基配方也随之出现袁其中 蕴猿 和 阅蕴猿 被
认为是更利于籼稻愈伤继代和分化再生培养的两种培
养基咱圆员暂 遥 本研究采用 晕月皂和 阅蕴猿 这两种分别适宜于
粳稻和籼稻的分化培养基进行愈伤的分化再生袁结果
发现院对于大部分籼稻品种而言袁阅蕴猿 分化培养基的确
比 晕月皂有利于籼稻的植株再生渊图 源袁缘冤曰而对粳稻材
料而言袁由于测试品种较少袁未能发现 晕月皂 分化培养
基比 阅蕴猿 分化培养基更适宜其离体再生的普遍性规
律袁但是品种 耘员园愿缘 和 耘远远苑 显然在 晕月皂 分化培养基
上的再生能力更好遥 由此可见袁在对一些难以再生的
籼稻品种进行组培实验时袁培养基的选择和应用很重
要遥 本研究中 晕月皂和 阅蕴猿 两种培养基上 圆员 个测试品
种的再生能力表现就为后续的转基因实验和其它水稻
品种的离体培养实验提供了培养基的选择依据和重要
信息遥
猿郾 猿摇 接种愈伤日龄对水稻愈伤组培再生能力的影响
愈伤培养时间的长短对其再生出苗能力具有一定
影响咱圆苑暂 袁但同时采用分别适宜于粳稻和籼稻的两种不
同分化培养基袁考察具有重要价值的水稻育种材料其
再生能力受愈伤培养时间长短影响的报道尚不多遥 本
研究首次对这些测试水稻品种以 员园凿 为间隔袁进行 猿
个培养阶段愈伤渊员缘尧圆缘尧猿缘凿冤的再生能力的系统调
查袁并且详细揭示了由于接种愈伤日龄不同而引起植
株再生能力存在显著差异的情形渊图 源袁缘冤遥 此外袁本
研究对各水稻测试品种源自成熟胚的愈伤进行继代培
养时袁也在多数籼稻品种中发现愈伤随继代培养时间
延长渊猿缘凿之后冤逐渐褐化并随之导致其植株再生能力
显著下降的现象遥 这可能与前人报道过的由于愈伤在
继代过程中活性降低袁具有体细胞胚发生能力的细胞
源圆愿员
摇 员圆 期 水稻不同品种组培再生和转基因频率研究
比例减少咱圆愿暂 袁或是因为随着继代次数的增加袁 孕哉栽
渊 孕怎贼则藻泽糟蚤灶藻袁 腐胺 冤 的累积以及较高的 孕哉栽 辕 杂孕阅
渊杂藻则皂蚤凿蚤灶藻袁亚精胺冤比例使细胞老化袁未成熟胚向成
熟胚转变受阻咱圆怨暂有关遥 但是一定时间的继代培养对
于转基因过程中抗性愈伤的筛选来说是必不可少的过
程袁因此改善继代培养中愈伤的质量是提高植物离体
再生能力和转基因效率的一条有效途径遥
水稻的两大亚种渊粳稻和籼稻冤一直存在基因转
化难易程度不同的差异袁本研究中 员圆 个测试品种既包
括粳稻也包括籼稻袁它们之间的基因型差异较大袁在将
各品种的 月贼基因转化效率与其植株再生能力进行比
较分析后发现袁虽然拥有植株再生能力不一定就能够
顺利实现基因转化袁但是较好的植株再生能力却是成
功得到转基因株系的前提遥 为提高水稻的基因转化效
率袁除了优化培养基和生长条件袁人们对水稻组织培养
的遗传机制也进行了大量研究袁鉴于组培性状的复杂
性和连续变异的特点袁众多组培相关的主效 匝栽蕴 位点
相继被发现咱猿园 原 猿远暂 遥 未来袁期望通过更深入的科学研究
找到决定组培相关性状的基因袁在阐明水稻组织培养
遗传机制的同时袁对基因转化的内部机理进行深入研
究袁更好的服务于转基因育种和功能基因组学的发展遥
含有 月贼基因的苏云金芽胞杆菌凭借其杀虫效果
高效尧安全等优点已经成为目前应用最为广泛的一种
杀虫微生物袁并且随着分子生物学和转基因技术的发
展袁月贼基因已被广泛的应用于各种农作物的抗病转基
因育种遥 近年来袁在玉米尧棉花尧水稻尧烟草等作物中都
有 月贼转基因的成功报道袁且有一些转 月贼 基因的品种
已经被广泛推广和应用袁转 月贼基因作物已成为世界上
商品化程度最快的抗虫转基因作物遥 本研究中的测试
品种多为水稻杂交育种中的重要恢复系袁在目前籼稻
育种中应用非常广泛遥 对这些重要基因型成功转化
月贼基因袁能够为水稻抗虫作物育种提供重要材料袁促
进水稻转基因育种的发展步伐和推广空间袁为水稻转
基因育种技术带来新的发展机会和应用价值遥
源摇 结论
通过对农业生产上具有重要应用价值的 圆员 个水
稻品种首次进行成熟胚组培再生能力的详细考察袁发
现不同水稻品种的组培再生能力存在显著差异袁并且
受到基因型尧愈伤日龄和培养基成分的重大影响曰通过
对其中 员圆 个水稻品种 月贼 基因转化效率的考察袁发现
各品种的转化效率与其再生能力相关袁转化效率普遍
介于 园 耀 圆缘豫之间袁同时成功获得 苑 个品种的转 月贼 基
因阳性株系遥
参考文献院
咱 员 暂摇 成雄鹰袁 高明尉袁 梁竹青援 酌 射线尧耘酝杂 和 杂粤 处理对水稻体细
胞组织培养的效应咱允暂 援核农学报袁 员怨愿苑袁 员渊员冤院 缘员 原 缘苑
咱 圆 暂 摇 田少华袁梁竹青袁高明尉袁项友斌援 诱变与组织培养相结合诱发
水稻耐盐突变的初步研究咱允暂 援 核农学报袁 员怨愿愿袁圆渊圆冤院 远缘 原 苑圆
咱 猿 暂摇 舒庆尧袁 吴殿星袁 夏英武袁 谢嘉华袁 叶阿宝援 电子流注入幼穗组
织培养效应的研究咱允暂 援 核农学报袁 员怨怨远袁 员园渊圆冤院 愿源 原 愿愿
咱 源 暂摇 斯华敏袁 灾怎 酝 匀 付亚萍袁 陈秋方袁 李西明袁 孙宗修援 辐照后转
移时间对水稻体细胞愈伤组织分化的影响 咱 允暂 援 核农学报袁
圆园园员袁 员缘渊猿冤院 员猿源 原 员源园
咱 缘 暂摇 臧威袁 张淑园袁 张国民袁 李柱刚袁 孙剑秋袁 张兰兰袁 严善春援 用
远园悦燥 酌射线诱导水稻抗瘟突变体的筛选咱 允暂援 核农学报袁 圆园园愿袁
圆圆渊猿冤院 圆源愿 原 圆缘圆
咱 远 暂摇 高方远袁 陆贤军袁 何树林袁 陈晓娟袁 卢代华袁 孙淑霞袁 李治华袁
刘光春袁 张义正袁 任光俊援 转基因抗虫性水稻恢复系选育及特
性分析咱允暂 援 中国水稻科学袁 圆园园愿袁 圆圆渊源冤院 猿缘猿 原 猿缘愿
咱 苑 暂摇 叶水烽袁 李天菲袁 刘国兰袁 罗利军援 转 糟则赠员悦鄢籼型抗虫节水抗
旱稻的获得及鉴定咱允暂 援 上海农业学报袁 圆园员圆袁 圆愿渊圆冤院 员 原 猿
咱 愿 暂摇 李娟袁 常闪闪袁 刘凤权袁 邵敏援 韵泽阅哉云缘园园 基因沉默提高水稻对
白叶枯病的抗性咱允暂 援 中国水稻科学袁 圆园员圆袁 圆远渊源冤院 源苑远 原 源愿园
咱 怨 暂摇 袁红旭袁 刘晚苟袁 刘月廉袁 郭建夫袁 李月仁援 转几丁质酶基因水
稻抗纹枯病性及农艺性状遗传特性咱 允暂 援 南方农业学报袁 圆园员圆袁
源猿渊圆冤院 员缘员 原 员缘源
咱员园暂摇 黑倩袁 张辉袁 黄继斌袁 郭力榕袁 徐源袁 李建粤袁 夏涛援 过量表达
粤贼晕匀载杂员 新基因显著提高水稻的耐盐性咱 允暂援 华中农业大学学
报袁 圆园员圆袁 猿员渊缘冤院 缘圆怨 原 缘猿缘
咱员员暂摇 吴明国袁 黄大年袁 林建荣袁 汪晓玲袁 华志华袁 章善庆袁 薛锐援 抗
除草剂转基因水稻稳定系 栽砸源 的获得及其遗传研究咱 允暂 援 中国
水稻科学袁 员怨怨怨袁 员猿渊猿冤院 员苑猿 原 员苑缘
咱员圆暂摇 张桂云袁 刘如如袁 张鹏袁 徐根袁 朱姜袁 梁国华袁 刘巧泉援 转基因
水稻中过量表达 韵泽匀孕栽提高胚乳中生育酚含量咱 允暂 援 分子植物
育种袁 圆园员圆袁 员园渊缘冤院 缘圆愿 原 缘猿源
咱员猿暂摇 粤造凿藻皂蚤贼葬 砸 砸袁 匀燥凿早藻泽 栽 运援 粤早则燥遭葬糟贼藻则蚤怎皂 贼怎皂藻枣葬糟蚤藻灶泽鄄皂藻凿蚤葬贼藻凿
贼则葬灶泽枣燥则皂葬贼蚤燥灶 燥枣 躁葬责燥灶蚤糟葬 葬灶凿 蚤灶凿蚤糟葬 则蚤糟藻 增葬则蚤藻贼蚤藻泽援 孕造葬灶贼葬袁 员怨怨远袁
员怨怨渊源冤院 远员圆 原 远员苑
咱员源暂摇 运澡葬灶灶葬 匀 运袁 砸葬蚤灶葬 杂 运援 粤早则燥遭葬糟贼藻则蚤怎皂鄄皂藻凿蚤葬贼藻凿 贼则葬灶泽枣燥则皂葬贼蚤燥灶 燥枣
蚤灶凿蚤糟葬 则蚤糟藻 糟怎造贼蚤增葬则泽 怎泽蚤灶早 遭蚤灶葬则赠 葬灶凿 泽怎责藻则遭蚤灶葬则赠 增藻糟贼燥则泽 咱 允 暂 援
粤怎泽贼则葬造蚤葬灶 允燥怎则灶葬造 燥枣 孕造葬灶贼 孕澡赠泽蚤燥造燥早赠袁 员怨怨怨袁 圆远渊源冤院猿员员 原 猿圆源
咱员缘暂摇 运怎皂葬则 运运袁 酝葬则怎贼澡葬泽葬造葬皂 杂袁 蕴燥早葬灶葬贼澡葬灶 酝袁 杂怎凿澡葬噪葬则 阅袁
月葬造葬泽怎遭则葬皂葬灶蚤葬灶 孕援 粤灶 蚤皂责则燥增藻凿 粤早则燥遭葬糟贼藻则蚤怎皂鄄皂藻凿蚤葬贼藻凿
贼则葬灶泽枣燥则皂葬贼蚤燥灶 责则燥贼燥糟燥造 枣燥则 则藻糟葬造糟蚤贼则葬灶贼 藻造蚤贼藻 蚤灶凿蚤糟葬 糟怎造贼蚤增葬则泽 咱 允暂 援
孕造葬灶贼 酝燥造藻糟怎造葬则 月蚤燥造燥早赠 砸藻责燥则贼藻则袁 圆园园缘袁 圆猿渊员冤院 远苑 原 苑猿
咱员远暂摇 匀藻灶则赠 再袁 灾葬蚤灶 孕袁 月怎赠藻则 允 阅援 郧藻灶藻贼蚤糟 葬灶葬造赠泽蚤泽 燥枣 蚤灶 增蚤贼则燥 责造葬灶贼
贼蚤泽泽怎藻 糟怎造贼怎则藻 则藻泽责燥灶泽藻 葬灶凿 则藻早藻灶藻则葬贼蚤燥灶 糟葬责葬糟蚤贼蚤藻泽咱 允暂援 耘怎责澡赠贼蚤糟葬袁
员怨怨源袁 苑怨渊员 原 圆冤院 源缘 原 缘愿
咱员苑暂摇 月燥造蚤遭燥噪 匀袁 砸燥噪燥糟扎赠鄄栽则燥躁葬灶燥憎泽噪葬 酝援 郧藻灶藻贼蚤糟 皂葬责责蚤灶早 燥枣 匝栽蕴泽 枣燥则
贼蚤泽泽怎藻 糟怎造贼怎则藻 则藻泽责燥灶泽藻 蚤灶 责造葬灶贼泽咱 允暂援 耘怎责澡赠贼蚤糟葬袁 圆园园远袁 员源怨渊员 原
圆冤院 苑猿 原 愿猿
咱员愿暂摇 悦澡怎 悦 悦袁 宰葬灶早 悦 悦袁 杂怎灶 悦 杂袁 匀泽怎 悦袁 再蚤灶 运 悦袁 悦澡怎 悦 再袁 月蚤 云
再援 耘泽贼葬遭造蚤泽澡皂藻灶贼 燥枣 葬灶 藻枣枣蚤糟蚤藻灶贼 皂藻凿蚤怎皂 枣燥则 葬灶贼澡藻则 糟怎造贼怎则藻 燥枣 则蚤糟藻
缘圆愿员
核摇 农摇 学摇 报 圆苑 卷
贼澡则燥怎早澡 糟燥皂责葬则葬贼蚤增藻 藻曾责藻则蚤皂藻灶贼泽 燥灶 贼澡藻 灶蚤贼则燥早藻灶 泽燥怎则糟藻咱允暂 援 杂糟蚤藻灶贼蚤葬
杂蚤灶蚤糟葬袁 员怨苑缘袁 员愿渊缘冤院 远缘怨 原 远远愿
咱员怨暂摇 郧葬皂遭燥则早 韵 蕴袁 酝蚤造造藻则 砸 粤袁 韵躁蚤皂葬 运援 晕怎贼则蚤藻灶贼 则藻择怎蚤则藻皂藻灶贼泽 燥枣
泽怎泽责藻灶泽蚤燥灶 糟怎造贼怎则藻泽 燥枣 泽燥赠遭藻葬灶 则燥燥贼 糟藻造造泽 咱 允暂 援 耘曾责藻则蚤皂藻灶贼葬造 悦藻造造
砸藻泽藻葬则糟澡袁 员怨远愿袁 缘园渊员冤院 员缘员 原 员缘愿
咱圆园暂摇 栽燥则蚤赠葬皂葬 运袁 匀蚤灶葬贼葬 运援 悦藻造造 泽怎泽责藻灶泽蚤燥灶 葬灶凿 责则燥贼燥责造葬泽贼 糟怎造贼怎则藻 蚤灶 则蚤糟藻
咱允暂 援 孕造葬灶贼 泽糟蚤藻灶糟藻袁 员怨愿缘袁 源员渊猿冤院 员苑怨 原 员愿猿
咱圆员暂摇 蕴蚤灶 再 允袁 在澡葬灶早 匝 云援 韵责贼蚤皂蚤泽蚤灶早 贼澡藻 贼蚤泽泽怎藻 糟怎造贼怎则藻 糟燥灶凿蚤贼蚤燥灶泽 枣燥则
澡蚤早澡 藻枣枣蚤糟蚤藻灶糟赠 贼则葬灶泽枣燥则皂葬贼蚤燥灶 燥枣 蚤灶凿蚤糟葬 则蚤糟藻咱允暂 援 孕造葬灶贼 悦藻造造 砸藻责燥则贼泽袁
圆园园缘袁 圆猿渊愿冤院 缘源园 原 缘源苑
咱圆圆暂摇 酝怎则则葬赠 酝 郧袁 栽澡燥皂责泽燥灶 宰 云援 砸葬责蚤凿 蚤泽燥造葬贼蚤燥灶 燥枣 澡蚤早澡 皂燥造藻糟怎造葬则
憎藻蚤早澡贼 责造葬灶贼 阅晕粤咱 允暂 援 晕怎糟造藻蚤糟 粤糟蚤凿泽 砸藻泽藻葬则糟澡袁 员怨愿园袁 愿 渊员怨冤院
源猿圆员 原 源猿圆缘
咱圆猿暂摇 孕藻灶早 允 允袁 匀燥凿早藻泽 栽 运援 郧藻灶藻贼蚤糟 葬灶葬造赠泽蚤泽 燥枣 责造葬灶贼 则藻早藻灶藻则葬贼蚤燥灶 蚤灶 则蚤糟藻
渊韵则赠扎葬 泽葬贼蚤增葬 蕴援 冤 咱 允 暂 援 陨灶 灾蚤贼则燥 悦藻造造怎造葬则 葬灶凿 阅藻增藻造燥责皂藻灶贼葬造
月蚤燥造燥造早赠袁 员怨愿怨袁 圆缘渊员冤院 怨员 原 怨源
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