全 文 ：摇 核 农 学 报摇 圆园员圆袁圆远渊猿冤院园源缘源 耀 园源远园允燥怎则灶葬造 燥枣 晕怎糟造藻葬则 粤早则蚤糟怎造贼怎则葬造 杂糟蚤藻灶糟藻泽
文章编号院员园园园鄄愿缘缘员渊圆园员圆冤园猿鄄园源缘源鄄园苑
铁炮百合的胚性愈伤组织诱导和植株再生
袁摇 雪摇 钟雄辉摇 李晓昕摇 辛海波摇 连青龙摇 义鸣放
渊中国农业大学观赏园艺与园林系袁北京摇 员园园员怨猿冤
摘摇 要院以铁炮百合渊又称麝香百合冤杂种系品种耶宰澡蚤贼藻 澡藻葬增藻灶忆的组培苗叶片为外植体袁研究了不同种类
和浓度的激素对愈伤组织诱导和植株再生的影响袁并通过叶片位置尧接种方式以及光暗等不同处理进一
步优化胚性愈伤组织的诱导遥 结果表明院以组培苗基部叶片为外植体袁采用叶片近轴面向上的接种方
式袁在 酝杂 垣员郾 园皂早窑蕴 原员 圆袁源 原 阅 垣园郾 员皂早窑蕴 原员 远鄄月粤的培养基上暗培养可诱导出胚性愈伤组织袁诱导率
可达 远缘郾 苑源豫 曰经石蜡切片鉴定可观测到球形胚和心形胚遥 最佳分化和生根培养基分别为 酝杂 垣 园郾 员皂早
窑蕴 原员 晕粤粤和 员 辕 圆酝杂 垣园郾 缘皂早窑蕴 原员 陨月粤袁分化率达 愿员郾 源愿豫 袁生根率达 怨员郾 远苑豫 遥 结果还显示 圆袁源鄄阅在百
合胚性愈伤组织的诱导中起到了关键作用遥
关键词院铁炮百合曰 组织培养曰 石蜡切片曰 胚性愈伤组织曰 植株再生
耘酝月砸再韵晕陨悦 悦粤蕴蕴哉杂 陨晕阅哉悦栽陨韵晕 粤晕阅 孕蕴粤晕栽 砸耘郧耘晕耘砸粤栽陨韵晕 韵云 蕴蚤造蚤怎皂 造燥灶早蚤枣造燥则怎皂
再哉粤晕 载怎藻摇 在匀韵晕郧 载蚤燥灶早鄄澡怎蚤摇 蕴陨 载蚤葬燥鄄曾蚤灶摇 载陨晕 匀葬蚤鄄遭燥摇 蕴陨粤晕 匝蚤灶早鄄造燥灶早摇 再陨 酝蚤灶早鄄枣葬灶早
渊阅藻责葬则贼皂藻灶贼 燥枣 韵则灶葬皂藻灶贼葬造 匀燥则贼蚤糟怎造贼怎则藻 葬灶凿 蕴葬灶凿泽糟葬责藻粤则糟澡蚤贼藻糟贼怎则藻袁 悦澡蚤灶葬 粤早则蚤糟怎造贼怎则葬造 哉灶蚤增藻则泽蚤贼赠袁 月藻蚤躁蚤灶早摇 员园园员怨猿冤
粤遭泽贼则葬糟贼院栽澡藻 藻枣枣藻糟贼泽 燥枣 凿蚤枣枣藻则藻灶贼 噪蚤灶凿泽 葬灶凿 糟燥灶糟藻灶贼则葬贼蚤燥灶泽 燥枣 责造葬灶贼 早则燥憎贼澡 则藻早怎造葬贼燥则 燥灶 糟葬造造怎泽 蚤灶凿怎糟贼蚤燥灶 葬灶凿 责造葬灶贼造藻贼
则藻早藻灶藻则葬贼蚤燥灶 憎藻则藻 蚤灶增藻泽贼蚤早葬贼藻凿 憎蚤贼澡 造藻葬增藻泽 燥枣 泽藻藻凿造蚤灶早 燥枣 蕴蚤造蚤怎皂 造燥灶早蚤枣燥则怎皂 耶 憎澡蚤贼藻 澡藻葬增藻灶爷 枣则燥皂 贼蚤泽泽怎藻 糟怎造贼怎则藻 葬泽
藻曾责造葬灶贼泽援 栽澡藻 蚤灶凿怎糟贼蚤燥灶 燥枣 藻皂遭则赠燥灶蚤糟 糟葬造造怎泽 憎葬泽 枣怎则贼澡藻则 燥责贼蚤皂蚤扎藻凿 遭赠 贼则藻葬贼皂藻灶贼泽 燥枣 凿蚤枣枣藻则藻灶贼 责葬则贼泽 燥枣 造藻葬增藻泽袁 蚤灶燥糟怎造葬贼蚤灶早
憎葬赠泽 葬灶凿 造蚤早澡贼 糟燥灶凿蚤贼蚤燥灶泽援 栽澡藻 则藻泽怎造贼泽 泽澡燥憎藻凿 贼澡葬贼 怎泽蚤灶早 贼澡藻 遭葬泽藻 燥枣 造藻葬增藻泽 葬灶凿 蚤灶燥糟怎造葬贼蚤灶早 燥灶 皂藻凿蚤怎皂 憎蚤贼澡 葬遭葬曾蚤葬造 泽蚤凿藻
凿怎则蚤灶早 糟怎造贼蚤增葬贼蚤燥灶袁贼澡藻 则葬贼藻 燥枣 糟葬造造怎泽 蚤灶凿怎糟贼蚤燥灶 憎葬泽 远缘郾 苑源豫 蚤灶 凿葬则噪 贼则藻葬贼皂藻灶贼 燥灶 贼澡藻 皂藻凿蚤怎皂 皂燥凿蚤枣蚤藻凿 酝杂 憎蚤贼澡 员郾 园皂早 辕
蕴 圆袁源鄄阅 葬灶凿 园郾 员皂早 辕 蕴 远鄄月粤援 郧造燥遭怎造葬则 藻皂遭则赠燥 葬灶凿 澡藻葬则贼 泽贼葬早藻 藻皂遭则赠燥 憎藻则藻 燥遭泽藻则增藻凿 遭赠 责葬则葬枣枣蚤灶 泽藻糟贼蚤燥灶 蚤凿藻灶贼蚤枣蚤糟葬贼蚤燥灶援
栽澡藻 遭藻泽贼 皂藻凿蚤怎皂泽 枣燥则 凿蚤枣枣藻则藻灶贼蚤葬贼蚤燥灶 葬灶凿 则燥燥贼蚤灶早 憎藻则藻 皂燥凿蚤枣蚤藻凿 酝杂 皂藻凿蚤怎皂 憎蚤贼澡 园郾 员皂早 辕 蕴 晕粤粤 葬灶凿 员 辕 圆酝杂 憎蚤贼澡 园郾 缘皂早 辕
蕴 陨月粤 则藻泽责藻糟贼蚤增藻造赠袁凿蚤枣枣藻则藻灶贼蚤葬贼蚤燥灶 则葬贼藻 憎葬泽 愿员郾 源愿豫 袁 葬灶凿 则燥燥贼蚤灶早 则葬贼藻 憎葬泽 怨员郾 远苑豫 援 栽澡藻 则藻泽怎造贼泽 葬造泽燥 蚤灶凿蚤糟葬贼藻凿 贼澡葬贼 圆袁源鄄
阅 责造葬赠藻凿 葬 噪藻赠 则燥造藻 蚤灶 藻皂遭则赠燥灶蚤糟 糟葬造造怎泽 蚤灶凿怎糟贼蚤燥灶 燥枣 蕴蚤造赠援
运藻赠 憎燥则凿泽院 蕴蚤造蚤怎皂 造燥灶早蚤枣燥则怎皂曰 贼蚤泽泽怎藻 糟怎造贼怎则藻曰 责葬则葬枣枣蚤灶 泽藻糟贼蚤燥灶曰 藻皂遭则赠燥灶蚤糟 糟葬造造怎泽曰 责造葬灶贼 则藻早藻灶藻则葬贼蚤燥灶
收稿日期院圆园员员鄄园愿鄄员怨摇 接受日期院圆园员圆鄄园员鄄园远
基金项目院国家自然科学基金项目渊猿园怨苑圆园圆源冤袁农业部野怨源愿冶引进项目渊圆园员员鄄郧员苑冤
作者简介院袁摇 雪渊员怨愿苑鄄冤袁女袁回族袁河南信阳人袁在读研究生袁研究方向为百合的栽培生理与组培技术遥 栽藻造院园员园鄄远圆苑猿猿愿员苑曰耘鄄皂葬蚤造院泽灶燥憎赠怎葬灶责糟岳
员圆远援 糟燥皂
通讯作者院义鸣放渊员怨缘苑鄄冤袁女袁北京人袁教授袁研究方向为观赏植物栽培生理与生物技术遥 栽藻造院园员园鄄远圆苑猿猿愿员苑曰耘鄄皂葬蚤造院赠皂枣葬灶早岳 糟葬怎援 藻凿怎援 糟灶
摇 摇 百合 渊 蕴蚤造蚤怎皂 泽责责冤是百合科 渊 蕴蚤造蚤葬糟藻葬藻冤百合属
渊蕴蚤造蚤怎皂冤多年生草本球根花卉袁世界四大切花之一袁因
其花大色艳尧姿态优美尧气味芳香袁并且兼具药用和食
用价值袁深受世界各国人民的喜爱袁具有广阔的市场前
景遥 传统的百合杂交育种方法具有年限长尧变异大尧操
作复杂等局限性遥 分子育种技术的快速发展为百合品
种改良提供了一条新途径袁而建立稳定高效的植株再
生体系是利用基因工程培育新品种的基础遥
因百合直接再生较为容易袁故研究较多咱员袁圆暂 曰以快
繁为目的的非胚性愈伤组织诱导也很普遍袁早在 员怨怨苑
年 粤则扎葬贼藻 云藻则灶葬灶凿藻扎咱猿暂等就从麝香百合耶耘葬泽贼藻则 造蚤造赠爷中
诱导出愈伤组织并获得再生苗曰姚绍嫦等咱源暂对铁炮百
源缘源
摇 猿 期 铁炮百合的胚性愈伤组织诱导和植株再生
合愈伤组织再生进行了一定研究袁通过细胞学手段观
察到了不定芽的形成袁但并未对愈伤组织的胚性进行
鉴定曰近年袁张艺萍等咱缘暂对东方百合杂种系的 猿 个品种
进行了愈伤组织诱导的研究袁但仅凭外观观察初步判
断愈伤组织的胚性袁而未作任何细胞学鉴定袁此方法并
不可靠遥 吴若菁尧杨柏云和 栽则蚤遭怎造葬贼燥 粤 等咱远 耀 愿暂虽分别
以东方百合耶悦葬泽葬遭造葬灶糟葬爷尧龙牙百合和麝香百合为材
料诱导出了胚状体袁但由于胚状体诱导的基因型依赖
性强袁不同品种间差异很大袁故目前未见对 耶宰澡蚤贼藻
澡藻葬增藻灶爷胚性愈伤组织研究的报道遥 因此本研究选择
从组培苗到开花生长期相对较短的铁炮百合杂种系品
种耶宰澡蚤贼藻 澡藻葬增藻灶爷为材料袁通过诱导尧分化尧生根培养
基的筛选和优化以及细胞学鉴定的系统研究袁建立了
百合的高效胚性愈伤组织再生体系袁为进一步诱导体
胚产生打下基础袁并为研究遗传转化提供良好的材料遥
员摇 材料与方法
员郾 员摇 试验材料
试验材料为铁炮百合 渊 蕴蚤造蚤怎皂 造燥灶早蚤枣造燥则怎皂冤品种
耶宰澡蚤贼藻 澡藻葬增藻灶爷的种球袁周径 员园 耀 员圆糟皂袁购自辽宁丹东
天赐花卉有限公司遥
员郾 圆摇 试验方法
员郾 圆郾 员摇 材料处理摇 清洗百合种球袁取中层无病斑尧健
壮的鳞片袁洗净后用多菌灵浸泡 猿澡袁流水冲洗过夜遥
超净工作台上用 苑缘豫的酒精浸泡 猿园泽袁后用 缘豫的次氯
酸钠溶液振荡处理 员缘皂蚤灶袁再无菌水漂洗 缘 次袁每次漂
洗时振荡 员皂蚤灶袁并用无菌滤纸吸干表面水分遥 将消毒
后的鳞片切成 员糟皂 伊员糟皂的小块接种于酝杂培养基袁培
养 圆 个月后形成直径 园郾 缘糟皂 左右的小鳞茎袁将其切下
移至 酝杂培养基上袁形成无菌组培苗备用遥
员郾 圆郾 圆摇 愈伤组织的诱导摇 将组培苗叶片切成长 圆糟皂尧
宽 园郾 缘糟皂 的小段袁分别取叶片的正反面随机接种于
酝杂 垣 渊园郾 缘袁员郾 园袁员郾 缘冤皂早窑蕴 原员圆袁源鄄阅 垣 渊园袁园郾 园员袁园郾 园圆袁
园郾 园缘袁园郾 员袁员冤皂早窑蕴 原员远鄄月粤 培养基上暗培养袁进行胚
性愈伤组织的诱导遥 以不加任何激素的 酝杂 培养基为
对照袁共 员怨 个处理袁每处理接种 猿远 个外植体袁重复 猿
次遥 每隔 员缘凿更换 员 次培养基袁远园凿 后统计不同处理
对百合不同外植体愈伤组织的诱导率遥
员郾 圆郾 猿摇 胚性愈伤组织的石蜡切片鉴定 摇 取培养 远园凿
生长状态良好的新鲜愈伤组织袁将其浸于 云粤粤 渊福尔
马林 原酒精 原醋酸混合固定液的简称冤中固定 源愿澡袁依
次进行冲水尧媒染尧染色尧脱水尧透明尧浸蜡尧包埋尧切片尧
展片尧脱蜡尧封片等程序袁然后进行石蜡切片遥 最后将
切片置于 韵造赠皂责怎泽 显微镜下观察拍照遥
员郾 圆郾 源摇 胚性愈伤组织诱导条件的优化摇 光照条件院取
组培苗叶片切成长 圆糟皂尧宽 园郾 缘糟皂 的小段正反随机接
种于最适培养基上袁设置 猿 个处理即院淤全光照曰于全
黑暗曰盂先将组培苗放置黑暗环境中暗培养 员 周袁再用
得到的白化苗叶片接种于最适培养基遥
接种方式院将组培苗叶片切成长 圆糟皂尧宽 园郾 缘糟皂的
小段袁设置 圆 个处理院淤正接渊近轴面朝上袁远轴面接
触培养基冤曰于反接渊远轴面朝上袁近轴面接触培养
基冤袁接种于筛选出的最适宜培养基上袁暗培养遥
叶片部位院切取组培苗叶片的 猿 个部位院淤基部曰
于中部曰盂尖部袁以正接方式分别接种于筛选出的最适
宜培养基上袁暗培养遥
以上 猿 组条件的优化共计 愿 个处理袁每处理接种
猿远 个外植体袁重复 猿 次遥 每隔 员缘凿 更换 员 次培养基袁
远园凿后统计各种优化处理下铁炮百合胚性愈伤组织的
诱导率遥
员郾 圆郾 缘摇 胚性愈伤组织的植株再生摇 取生长状态良好
的胚性愈伤组织袁接种在 酝杂 垣 渊园袁园郾 缘袁圆冤皂早窑蕴 原员运栽
垣 渊园袁园郾 园缘袁园郾 员袁园郾 圆冤皂早窑蕴 原员晕粤粤的培养基上光照培
养袁每处理 圆苑 个外植体袁重复 猿 次遥 以不加任何激素
的 酝杂培养基为对照袁每隔 员缘凿 更换 员 次培养基袁源园凿
后统计不定芽再生率遥
将不定芽切下袁移至不同的生根培养基 员 辕 圆酝杂 垣
渊园袁园郾 圆袁园郾 缘袁员郾 园冤皂早窑蕴 原员 陨月粤 上进行光照培养袁圆缘凿
后统计生根率尧平均单苗根数和最长根长度遥
员郾 猿摇 数据统计及分析
愈伤组织诱导率渊豫 冤 越 渊愈伤组织分化的外植体
数 辕接种外植体数冤 伊 员园园豫
不定芽分化率渊豫 冤 越 渊再生不定芽的外植体数 辕
接种的外植体数冤 伊 员园园豫
外植体平均再生芽数 越再生芽总数 辕再生不定芽
的外植体数
生根率渊豫 冤 越 渊生根苗数 辕接种苗数冤 伊 员园园豫
平均单苗根数 越生根数 辕生根苗数
试验数据用 耘曾糟藻造 软件处理袁差异显著性分析采
用 阅怎糟葬灶新复极差多重比较分析遥
圆摇 结果与分析
圆郾 员摇 愈伤组织的诱导和培养基的筛选
培养 员园凿 后袁叶片开始膨大尧变硬袁源园凿 后可见到
愈伤组织先从切口处形成袁逐渐在外植体的边缘也有
发生袁之后愈伤组织不断变大增多遥 试验中观察到两
缘缘源
核摇 农摇 学摇 报 圆远 卷
种类型的愈伤组织院员冤白色袁致密且坚硬袁无颗粒状结
构的愈伤组织曰圆冤淡黄色袁疏松袁具有颗粒状的愈伤遥
前者为畸形发育的非胚性愈伤组织袁而后者则具有胚
性愈伤组织的基本特点渊图 员 原 粤袁月冤遥
从表 员 可以看出袁当 圆袁源鄄阅的浓度一定时袁愈伤组
织诱导率随 远鄄月粤浓度的升高而呈现先升高再降低的
趋势袁尽管单独使用 圆袁源鄄阅 时愈伤组织的诱导率高于
圆袁源鄄阅与低浓度 远鄄月粤配合的诱导率袁但当 圆袁源鄄阅和 远鄄
月粤的比值达到最优配比时袁愈伤组织的诱导率也达到
最大值遥 由此可见袁在 圆袁源鄄阅浓度不变时袁一定浓度的
远鄄月粤有利于愈伤组织的诱导遥 逐渐提高 圆袁源鄄阅 的浓
度发现袁在一定范围内袁圆袁源鄄阅浓度的增加有利于愈伤
组织的诱导袁但当其浓度达到 员郾 缘皂早窑蕴 原员时袁愈伤组
织诱导率呈现下降趋势袁且有部分出现水渍化的情况遥
说明低浓度的 圆袁源鄄阅 有利于愈伤组织的诱导袁浓度太
高则不利于其生长遥 虽然处理 员圆渊酝杂 垣 员郾 园皂早窑蕴 原员
圆袁源鄄阅 垣 员郾 园皂早窑蕴 原员 远鄄月粤冤的愈伤组织诱导率达到最
大值袁但此时得到的愈伤组织为非胚性愈伤袁所以最佳
的培养基应该选择处理 员员袁即生长素 圆袁源鄄阅 与细胞分
裂素 远鄄月粤浓度的比值为 员园颐 员遥
综上所述袁叶片诱导愈伤组织的最佳培养基为 酝杂
垣员郾 园皂早窑蕴 原员圆袁源 原 阅 垣园郾 员皂早窑蕴 原员远鄄月粤遥
表 员摇 不同激素组合对铁炮百合叶片愈伤组织诱导的影响
栽葬遭造藻 员 耘枣枣藻糟贼泽 燥枣 凿蚤枣枣藻则藻灶贼 澡燥则皂燥灶藻泽 燥灶 造藻葬枣 糟葬造造怎泽 蚤灶凿怎糟贼蚤燥灶 燥枣 蕴蚤造蚤怎皂 造燥灶早蚤枣造燥则怎皂
处理
贼则藻葬贼皂藻灶贼
植物生长调节剂
责造葬灶贼 早则燥憎贼澡 则藻早怎造葬贼燥则 渊皂早窑蕴 原员 冤
圆袁源鄄阅 远鄄月粤
愈伤组织诱导率
则葬贼藻 燥枣 糟葬造造怎泽
蚤灶凿怎糟贼蚤燥灶 渊豫 冤
愈伤组织状态
泽贼葬贼怎泽 燥枣 糟葬造造怎泽
对照 原 原 园澡 褐化死亡
员 园郾 缘 园 猿圆郾 源员糟凿藻 淡黄色袁较疏松袁部分颗粒状
圆 园郾 缘 园郾 园员 员员郾 员员早 淡黄色袁致密袁坚硬袁颗粒状明显
猿 园郾 缘 园郾 园圆 员猿郾 愿怨枣早 淡黄色袁较疏松袁部分颗粒状
源 园郾 缘 园郾 园缘 猿缘郾 员怨遭糟凿 淡黄色袁疏松袁颗粒状明显
缘 园郾 缘 园郾 员 圆猿郾 员缘藻枣 淡黄色袁疏松袁部分颗粒状
远 园郾 缘 员郾 园 员苑郾 缘怨枣早 白色袁致密袁坚硬袁无颗粒结构
苑 员郾 园 园 猿愿郾 愿怨遭糟 淡黄色袁致密袁坚硬袁颗粒状较少
愿 员郾 园 园郾 园员 员苑郾 员猿枣早 淡黄色袁较疏松袁部分颗粒状
怨 员郾 园 园郾 园圆 圆怨郾 远猿糟凿藻 淡黄色袁半透明袁较坚硬袁部分颗粒状
员园 员郾 园 园郾 园缘 猿怨郾 愿员遭糟 淡黄色袁较疏松袁部分颗粒状
员员 员郾 园 园郾 员 缘源郾 远猿葬 淡黄色袁疏松袁颗粒状明显
员圆 员郾 园 员郾 园 缘怨郾 圆远葬 白色袁致密袁坚硬袁无颗粒结构
员猿 员郾 缘 园 圆苑郾 苑愿凿藻 淡黄色袁半透明袁水渍化袁颗粒状明显
员源 员郾 缘 园郾 园员 苑郾 源员早澡 淡黄色袁坚硬袁部分颗粒状
员缘 员郾 缘 园郾 园圆 员源郾 愿员枣早 淡黄色袁较坚硬袁无颗粒结构
员远 员郾 缘 园郾 园缘 猿圆郾 源员糟凿藻 淡黄色袁较疏松袁部分颗粒状
员苑 员郾 缘 园郾 员 源猿郾 缘圆遭 淡黄色袁疏松袁颗粒状明显
员愿 员郾 缘 员郾 园 猿怨郾 愿员遭糟 淡黄色偏白袁致密袁坚硬袁无颗粒结构
摇 摇 注院表中同列数据后标注的小写英文字母袁表示处理间差异显著渊孕 约 园郾 园缘冤遥 下表同遥
晕燥贼藻院灾葬造怎藻泽 憎蚤贼澡 凿蚤枣枣藻则藻灶贼 造藻贼贼藻则泽 蚤灶 藻葬糟澡 糟燥造怎皂灶 皂藻葬灶 泽蚤早灶蚤枣蚤糟葬灶贼造赠 凿蚤枣枣藻则藻灶贼 葬贼 孕 约 园郾 园缘 造藻增藻造援 栽澡藻 泽葬皂藻 葬泽 枣燥造造燥憎蚤灶早 贼葬遭造藻泽援
圆郾 圆摇 愈伤组织的细胞学观察
通过对愈伤组织进行石蜡切片观察发现袁白色尧致
密尧坚硬尧无颗粒结构的愈伤组织细胞体积较大袁形状
不规则袁排列松散袁无细胞核袁染色较浅袁为非胚性愈伤
组织渊图 圆 原 粤冤曰淡黄色尧疏松尧颗粒状明显的愈伤组
织中出现许多体积较小袁形状规则袁排列紧密袁细胞核
大袁染色较深袁分裂旺盛的胚性细胞袁为胚性愈伤组织
渊图 圆 原 月袁悦冤遥 经切片观察还发现袁叶片诱导产生的
愈伤组织有 圆 种类型的胚性细胞袁一种起源于胚性愈
伤组织的内部细胞渊图 圆 原 月冤袁另一种则起源于其表层
细胞渊图 圆 原 悦冤袁这些胚性细胞继续发育袁则会形成体
细胞胚遥 同时还观察到了刚形成尚未脱离母体的球形
胚渊图 圆 原 阅冤及已经完全脱离母体的心形胚渊图 圆 原
耘冤袁由于每个细胞接受外源激素转变成胚性细胞的能
力不同袁所以有些已经发育成体胚袁而一些仍然处于胚
性细胞团的阶段袁正是这种不同步的现象进一步验证
了 圆袁源鄄阅对诱导体胚发生具有关键作用遥
圆郾 猿摇 光照和叶片接种方式尧部位对愈伤组织诱导的影
响
从表 圆 和图 员 原 悦尧阅尧耘可看出袁全光照条件下袁叶
远缘源
摇 猿 期 铁炮百合的胚性愈伤组织诱导和植株再生
图 员摇 百合叶片愈伤组织的诱导
云蚤早援 员 陨灶凿怎糟贼蚤燥灶 燥枣 糟葬造造怎泽 枣则燥皂 造藻葬增藻泽 燥枣
蕴蚤造蚤怎皂 造燥灶早蚤枣造燥则怎皂
粤院非胚性愈伤组织曰月院胚性愈伤组织曰悦院光培养下叶片诱导的愈伤组
织曰阅院暗培养下叶片诱导的愈伤组织曰 耘院白化苗叶片诱导的愈伤组
织曰云院叶片近轴面朝上诱导的愈伤组织曰郧院叶片远轴面朝上诱导的愈
伤组织曰匀院叶基诱导的愈伤组织曰陨院叶中部诱导的愈伤组织曰允院叶尖诱
摇 摇 导的愈伤组织
粤院 灶燥灶鄄藻皂遭则赠燥灶蚤糟 糟葬造造怎泽曰 月院 藻皂遭则赠燥灶蚤糟 糟葬造造怎泽曰 悦 院糟葬造造怎泽 蚤灶凿怎糟藻凿 遭赠 造藻葬增藻泽
蚤灶 造蚤早澡贼 糟燥灶凿蚤贼蚤燥灶曰 阅院 糟葬造造怎泽 蚤灶凿怎糟藻凿 遭赠 造藻葬增藻泽 蚤灶 凿葬则噪灶藻泽泽 糟燥灶凿蚤贼蚤燥灶曰 耘院
糟葬造造怎泽 蚤灶凿怎糟藻凿 遭赠 造藻葬增藻泽 燥枣 葬造遭蚤灶燥 泽藻藻凿造蚤灶早曰 云院 糟葬造造怎泽 蚤灶凿怎糟藻凿 遭赠 造藻葬增藻泽
憎蚤贼澡 贼澡藻蚤则 葬遭葬曾蚤葬造 泽蚤凿藻 贼燥憎葬则凿 贼澡藻 皂藻凿蚤怎皂曰 郧 院糟葬造造怎泽 蚤灶凿怎糟藻凿 遭赠 造藻葬增藻泽 憎蚤贼澡
贼澡藻蚤则 葬凿葬曾蚤葬造 泽蚤凿藻 贼燥憎葬则凿 贼澡藻 皂藻凿蚤怎皂曰 匀院 糟葬造造怎泽 蚤灶凿怎糟藻凿 遭赠 贼澡藻 遭燥贼贼燥皂 燥枣
造藻葬枣曰 陨院糟葬造造怎泽 蚤灶凿怎糟藻凿 遭赠 贼澡藻 皂蚤凿凿造藻 责葬则贼 燥枣 造藻葬枣曰 允院糟葬造造怎泽 蚤灶凿怎糟藻凿 遭赠 贼澡藻
摇 摇 贼燥责 燥枣 造藻葬枣
片 猿园凿左右即可获得愈伤组织袁状态为黄绿色袁异常疏
松袁一碰即碎袁且叶片褐化严重遥 白化苗 源缘凿左右有大
量愈伤产生袁但由于其在黑暗条件下培养导致叶片徒
长袁叶基部极细弱袁诱导所得的愈伤组织小且少袁诱导
率也低于黑暗条件下的 缘圆郾 苑愿豫 遥 所以黑暗条件最适
宜进行愈伤组织的诱导遥
反接的叶片于接种 圆园凿后开始从切口处有颗粒状
的愈伤组织产生袁而正接叶片在 源园凿 后才开始发生愈
伤袁但随着培养时间的延长袁叶片正接的愈伤组织生长
量要明显大于反接袁且状态更优遥 表明袁由于极性现
象袁叶片正接比反接更有利于愈伤组织的诱导遥 其结
果见表 猿 和图 员 原 云尧郧遥
叶片各部分诱导的愈伤组织状态无明显差别袁但基
部叶片的愈伤组织诱导率达到 远缘郾 苑源豫袁明显高于叶中
部和叶尖遥 说明基部叶片细胞分生能力强袁是诱导愈伤
组织的最佳外植体遥 如表 源和图 员 原 匀尧陨尧允所示遥
圆郾 源摇 胚性愈伤组织的再生
将胚性愈伤组织转入不定芽分化培养基并置于光
下培养袁苑凿后愈伤组织由浅黄色变成绿色袁员缘凿时开始
观察到有芽萌发袁圆园凿 进入生长高峰期遥 从表 缘 可以
看出袁不加任何外源激素时袁愈伤组织虽也可分化成不
定芽袁但分化率低且芽的生长很缓慢遥 单独添加 晕粤粤
的分化率要高于单独使用 运栽 和配合使用 运栽尧晕粤粤袁
虽然在 酝杂 垣园郾 缘皂早窑蕴 原员运栽 垣 园郾 园缘皂早窑蕴 原员晕粤粤 时的
芽分化率高达 苑园郾 猿苑豫 袁但苗生长很纤弱袁玻璃化现象
严重遥 综合考虑芽分化率和每块愈伤组织分化不定芽
数等因素袁选择 酝杂 垣 园郾 员皂早窑蕴 原员 晕粤粤 的培养基作为
不定芽分化的最佳培养基袁分化率可达到 愿员郾 源愿豫 遥
如表 远 所示袁不定芽在各生根培养基中的生根率
无明显差异袁都达到 愿缘豫 以上袁在 员 辕 圆酝杂培养基中甚
至达到了 员园园豫 遥 酝杂 培养基中袁 虽然根系粗壮袁 但没
有侧根发生袁且单苗根数最少袁最长根长度也最小遥 员 辕
圆酝杂 培养基中芽虽全部生根袁但苗很纤弱袁单苗根数
和最长根长度均居中遥 在 员 辕 圆酝杂 培养基中添加 陨月粤
后袁 单苗根数明显增多袁 根系更粗壮袁 但根系生长变
慢袁 且侧根发生减少遥 说明高盐和 陨月粤都有促进根系
增粗尧抑制根系伸长和侧根发生的作用遥 综合各项指
标认为 员 辕 圆酝杂 垣 园郾 缘皂早窑蕴 原员 陨月粤 是生根最适的培养
基遥 见图 猿遥
猿摇 讨论
国内外虽有不少关于百合遗传转化的研究袁但转
化效率都很低袁制约其转化率的一个重要原因就是缺
少稳定高效的再生体系遥 在采用直接再生体系进行百
合遗传转化研究时袁转化率极低甚至为 园咱怨袁员园暂 袁而以愈
伤组织作为受体系统的转化率则明显提高咱员园 耀 员圆暂 袁胚性
愈伤组织又因其具有发育成体胚的可能性而更具优
势袁可见一个优良的百合再生系统对于建立百合遗传
转化的重要性遥 本文以铁炮百合耶宰澡蚤贼藻 澡藻葬增藻灶爷组培
苑缘源
核摇 农摇 学摇 报 圆远 卷
摇 摇 摇 摇 摇 摇
图 圆摇 愈伤组织的细胞结构及体细胞胚的发生
云蚤早援 圆摇 栽澡藻 糟藻造造怎造葬则 泽贼则怎糟贼怎则藻 燥枣 糟葬造造怎泽 葬灶凿 则藻早藻灶藻则葬贼蚤燥灶 燥枣 泽燥皂葬贼蚤糟 藻皂遭则赠燥早藻灶藻泽蚤泽
粤院非胚性细胞曰月院内起源的胚性细胞曰悦院外起源的胚性细胞曰阅院球形胚曰耘院心形胚
粤院 灶燥灶鄄藻皂遭则赠燥灶蚤糟 糟藻造造曰 月院 藻皂遭则赠燥灶蚤糟 糟藻造造 燥枣 藻灶凿燥早藻灶燥怎泽 燥则早蚤灶曰 悦院 藻皂遭则赠燥灶蚤糟 糟藻造造 燥枣 藻曾燥早藻灶燥怎泽 燥则早蚤灶曰 阅院早造燥遭怎造葬则 藻皂遭则赠燥曰 耘院 澡藻葬则贼 泽贼葬早藻 藻皂遭则赠燥
表 圆摇 光暗对铁炮百合叶片愈伤组织诱导的影响
栽葬遭造藻 圆摇 耘枣枣藻糟贼泽 燥枣 造蚤早澡贼 葬灶凿 凿葬则噪灶藻泽泽 燥灶 造藻葬枣 糟葬造造怎泽 蚤灶凿怎糟贼蚤燥灶 燥枣 蕴蚤造蚤怎皂 造燥灶早蚤枣燥则怎皂
处理贼则藻葬贼皂藻灶贼 光照条件造蚤早澡贼 糟燥灶凿蚤贼蚤燥灶 愈伤组织诱导率则葬贼藻 燥枣 糟葬造造怎泽 蚤灶凿怎糟贼蚤燥灶 渊豫 冤 愈伤组织状态泽贼葬贼怎泽 燥枣 糟葬造造怎泽
员 全光照造蚤早澡贼 糟燥灶凿蚤贼蚤燥灶 圆缘郾 怨猿糟 黄绿色袁过于疏松袁无明显颗粒状
圆 全黑暗凿葬则噪灶藻泽泽 糟燥灶凿蚤贼蚤燥灶 缘圆郾 苑愿葬 淡黄色袁疏松袁颗粒状明显
猿 白化苗葬造遭蚤灶燥 泽藻藻凿造蚤灶早 源猿郾 缘圆遭 淡黄色袁疏松袁颗粒状明显
表 猿摇 叶片的形态学位置对铁炮百合愈伤组织诱导的影响
栽葬遭造藻 猿摇 耘枣枣藻糟贼泽 燥枣 皂燥则责澡燥造燥早蚤糟葬造 责燥泽蚤贼蚤燥灶 燥枣 造藻葬增藻泽 燥灶 糟葬造造怎泽 蚤灶凿怎糟贼蚤燥灶 燥枣 蕴蚤造蚤怎皂 造燥灶早蚤枣燥则怎皂
处理贼则藻葬贼皂藻灶贼 接种方式皂藻贼澡燥凿 燥枣 蚤灶燥糟怎造葬贼蚤燥灶 愈伤组织诱导率则葬贼藻 燥枣 糟葬造造怎泽 蚤灶凿怎糟贼蚤燥灶 渊豫 冤 愈伤组织状态泽贼葬贼怎泽 燥枣 糟葬造造怎泽
员 正接渊远轴面接触培养基冤葬遭葬曾蚤葬造 泽蚤凿藻 贼燥憎葬则凿 贼澡藻 皂藻凿蚤怎皂 缘愿郾 猿猿葬 淡黄色袁疏松袁颗粒状明显
圆 反接渊近轴面接触培养基冤葬凿葬曾蚤葬造 泽蚤凿藻 贼燥憎葬则凿 贼澡藻 皂藻凿蚤怎皂 猿圆郾 源员遭 淡黄色偏白色袁颗粒状明显
表 源摇 叶片不同部位对铁炮百合愈伤组织诱导的影响
栽葬遭造藻 源摇 耘枣枣藻糟贼泽 燥枣 凿蚤枣枣藻则藻灶贼 责葬则贼泽 燥枣 造藻葬增藻泽 燥灶 糟葬造造怎泽 蚤灶凿怎糟贼蚤燥灶 燥枣 蕴蚤造蚤怎皂 造燥灶早蚤枣燥则怎皂
处理贼则藻葬贼皂藻灶贼 叶片位置责葬则贼 燥枣 造藻葬枣 愈伤组织诱导率则葬贼藻 燥枣 糟葬造造怎泽 蚤灶凿怎糟贼蚤燥灶 渊豫 冤 愈伤组织状态泽贼葬贼怎泽 燥枣 糟葬造造怎泽
员 叶基贼澡藻 遭燥贼贼燥皂 燥枣 造藻葬枣 远缘郾 苑源葬 淡黄色袁疏松袁颗粒状明显
圆 叶中贼澡藻 皂蚤凿凿造藻 责葬则贼 燥枣 造藻葬枣 员苑郾 缘怨遭 淡黄色袁颗粒状明显
猿 叶尖贼澡藻 贼燥责 燥枣 造藻葬枣 园郾 怨猿遭 淡黄色袁颗粒状明显
愿缘源
摇 猿 期 铁炮百合的胚性愈伤组织诱导和植株再生
表 缘摇 不同激素组合对铁炮百合胚性愈伤组织分化不定芽的影响
栽葬遭造藻 缘摇 耘枣枣藻糟贼泽 燥枣 凿蚤枣枣藻则藻灶贼 澡燥则皂燥灶藻 糟燥皂遭蚤灶葬贼蚤燥灶泽 燥灶 凿蚤枣枣藻则藻灶贼蚤葬贼蚤燥灶 燥枣 葬凿增藻灶贼蚤贼蚤燥怎泽 遭怎凿泽
枣则燥皂 藻皂遭则赠燥灶蚤糟 糟葬造造怎泽 燥枣 蕴蚤造蚤怎皂 造燥灶早蚤枣燥则怎皂
运栽浓度
运栽 糟燥灶糟藻灶贼则葬贼蚤燥灶
渊皂早窑蕴 原员 冤
晕粤粤浓度
晕粤粤 糟燥灶糟藻灶贼则葬贼蚤燥灶
渊皂早窑蕴 原员 冤
不定芽分化率
则葬贼藻 燥枣 葬凿增藻灶贼蚤贼蚤燥怎泽 遭怎凿
渊豫 冤
每块愈伤组织分化
不定芽数渊个冤
灶怎皂遭藻则 燥枣 葬凿增藻灶贼蚤贼蚤燥怎泽
遭怎凿 责藻则 糟葬造造怎泽
不定芽状态
泽贼葬贼怎泽 燥枣 葬凿增藻灶贼蚤贼蚤燥怎泽 遭怎凿
园 园 员圆郾 猿源枣 圆郾 源圆遭 绿色袁生长缓慢
园 园郾 园缘 猿怨郾 缘员凿 圆郾 猿园遭 绿色袁健壮
园 园郾 员 愿员郾 源愿葬 圆郾 园源糟 绿色袁健壮
园 园郾 圆 源怨郾 猿愿糟凿 员郾 愿怨糟藻 绿色袁健壮
园郾 缘 园 猿缘郾 愿园凿藻 圆郾 苑圆葬 绿色袁健壮
园郾 缘 园郾 园缘 苑园郾 猿苑葬遭 员郾 苑苑凿 玻璃化严重袁纤细
园郾 缘 园郾 员 猿苑郾 园源凿藻 圆郾 园员糟 绿色袁健壮
园郾 缘 园郾 圆 远员郾 苑猿遭糟 员郾 猿愿藻枣 绿色袁健壮
圆郾 园 园 圆猿郾 源远藻枣 员郾 员苑枣 绿色袁健壮
圆郾 园 园郾 园缘 员圆郾 猿缘枣 圆郾 源员遭 绿色袁健壮
圆郾 园 园郾 员 圆园郾 怨怨枣 员郾 圆猿藻枣 玻璃化严重袁纤细
圆郾 园 园郾 圆 员远郾 园缘枣 员郾 源苑藻 绿色袁健壮
表 远摇 不同培养基对百合苗生根的影响
栽葬遭造藻 远摇 耘枣枣藻糟贼泽 燥枣 凿蚤枣枣藻则藻灶贼 皂藻凿蚤怎皂泽 燥灶 则燥燥贼蚤灶早 燥枣 蕴蚤造蚤怎皂 造燥灶早蚤枣燥则怎皂
培养基
皂藻凿蚤怎皂
生根率
则葬贼藻 燥枣 则燥燥贼蚤灶早
渊豫 冤
单苗根数渊条冤
灶怎皂遭藻则 燥枣 则燥燥贼
责藻则 责造葬灶贼造藻贼
最长根长度
造藻灶早贼澡 燥枣 贼澡藻 造燥灶早藻泽贼
则燥燥贼渊糟皂冤
根长势
早则燥憎贼澡 贼则藻灶凿
燥枣 则燥燥贼
酝杂 愿愿郾 愿怨遭 猿袁员苑葬 圆郾 圆园遭 粗壮袁无侧根袁生长快
员 辕 圆酝杂 员园园郾 园园葬 猿郾 源圆葬 圆郾 愿员葬遭 纤细袁有侧根袁生长快
员 辕 圆酝杂 垣 陨月粤 园郾 圆 愿猿郾 猿猿遭 源郾 缘愿葬 猿郾 园园葬遭 纤细袁侧根多袁生长快
员 辕 圆酝杂 垣 陨月粤 园郾 缘 怨员郾 远苑葬遭 源郾 圆缘葬 源郾 员苑葬 粗壮袁侧根较多袁生长较慢
员 辕 圆酝杂 垣 陨月粤 员郾 园 愿远郾 员员遭 源郾 缘园葬 圆郾 缘苑遭 粗壮袁侧根较多袁生长慢
图 猿摇 百合胚性愈伤组织的再生
云蚤早援 猿摇 砸藻早藻灶藻则葬贼蚤燥灶 燥枣 藻皂遭则赠燥灶蚤糟 糟葬造造怎泽 燥枣 蕴蚤造蚤怎皂 造燥灶早蚤枣造燥则怎皂
粤院胚性愈伤组织分化不定芽曰月院百合组培苗的生根
粤 院凿蚤枣枣藻则藻灶贼蚤葬贼蚤燥灶 燥枣 葬凿增藻灶贼蚤贼蚤燥怎泽 遭怎凿泽曰月院 则燥燥贼蚤灶早 燥枣 蕴蚤造蚤怎皂 造燥灶早蚤枣燥则怎皂 责造葬灶贼造藻贼泽
苗叶片作为外植体建立了胚性愈伤组织再生体系袁并
用细胞形态学的方法确定了其胚性袁为建立稳定的遗
传转化系统提供了良好的受体材料遥
百合的胚性愈伤组织诱导袁不同的基因型差异很
大袁采用的外植体也不尽相同遥 其中以花梗尧花柱尧花
丝尧花被片等花器官作为外植体诱导胚性愈伤的最
多咱缘袁愿袁员猿暂 袁也有采用叶片尧生长点尧鳞片和种子萌发形成
的胚轴等营养器官进行试验咱缘袁员源暂 遥 由于组培苗可打破
时空的局限袁具有充足的外植体来源袁且与实生苗相比
具有取材方便尧污染小的优点袁所以本研究选取铁炮百
合杂种系品种耶宰澡蚤贼藻 澡藻葬增藻灶爷的组培苗叶片为外植体
进行愈伤组织诱导袁最终获得大量的胚性愈伤组织遥
怨缘源
允燥怎则灶葬造 燥枣 晕怎糟造藻葬则 粤早则蚤糟怎造贼怎则葬造 杂糟蚤藻灶糟藻泽
圆园员圆袁圆远渊猿冤院园源缘源 耀 园源远园
圆袁源鄄阅对体细胞胚的发生具有双重效应袁既能促
进百合外植体产生胚性愈伤组织袁又进一步抑制其发
育成体胚遥 这可能是由于它既能启动胚状体发生中胚
胎蛋白合成的早期反应袁又能阻止胚状体发育成熟过
程中必需蛋白质的进一步合成咱远暂 遥 另有学者认为袁圆袁
源鄄阅与基因的甲基化有关袁导致了双重效应咱员缘暂 遥 除百
合外袁在对日本臭崧尧匍匐剪股颖和中华结缕草等植物
愈伤组织的研究中袁也都证实了 圆袁源鄄阅 的双重效
应咱员远 耀 员愿暂 遥 本研究在得到胚性愈伤后袁并未去除 圆袁源鄄阅
作进一步诱导体胚发生的试验袁虽然通过切片也观察
到了胚胎的发育过程袁但若想获得大量体胚袁仍需尝试
去除 圆袁源鄄阅或改用 运栽的方法咱员怨暂 遥
从图 圆 可以看出袁胚性细胞与非胚性细胞的形态
结构有很大差别袁在显微镜下很容易将二者区分开袁且
胚性细胞与周围的薄壁细胞有一个很明显的界限袁这
与前人提出的体细胞与周围组织间生理上的隔离是其
进行体细胞胚发生的前提条件相吻合咱圆园暂 遥 研究人员
在其他植物体细胞胚的研究上也印证了这一点遥 体细
胞胚既可起源于愈伤组织表层细胞袁也可起源于其内
部细胞袁起源方式因植物种类不同而异遥 伊贝母的体
细胞胚是由内起源的胚性细胞发育而来的咱圆员暂 袁文冠果
则是由外层细胞发育而来咱圆圆暂 袁在魔芋和菠萝中这两种
起源方式并存袁其中菠萝的内起源方式占 愿园豫 以
上咱圆猿袁圆源暂 遥 本研究中这 圆 种起源方式均可观察到遥
百合愈伤组织的诱导有明显的极性现象袁叶片的
接种方式和部位对愈伤组织的诱导差异明显袁即愈伤
组织主要形成于近轴面和形态学下端遥 杨倩等咱圆缘暂报
道认为愈伤组织多发生于叶片近轴面可能与植物组织
中某些化学物质出现梯度有关遥 同时也有学者认为该
现象由外植体细胞的生理状态差异所致咱圆远暂 遥 王丽
等咱圆苑暂推测愈伤组织多发生于形态学下端是内源激素
陨粤粤在其中起到了关键性作用遥 吴顺等咱圆愿暂对水稻愈
伤组织的研究也表明袁内源 陨粤粤 水平与愈伤组织的转
化率成正相关袁也从一个侧面反映出 陨粤粤 对愈伤组织
的保存起到积极的作用遥
参考文献院
咱 员 暂 摇 栽葬灶 晕澡怎贼 阅袁 灾葬灶 蕴藻 月袁 栽葬灶葬噪葬 酝袁 栽则葬灶 栽澡葬灶澡 灾葬灶 运援 杂澡燥燥贼
蚤灶凿怎糟贼蚤燥灶 葬灶凿 责造葬灶贼 则藻早藻灶藻则葬贼蚤燥灶 枣则燥皂 则藻糟藻责贼葬糟造藻 贼蚤泽泽怎藻泽 燥枣 蕴蚤造蚤怎皂
造燥灶早蚤枣造燥则怎皂咱允暂 援 杂糟蚤藻灶贼蚤葬 匀燥则贼蚤糟怎造贼怎则葬藻袁圆园园员袁愿苑渊员 原 圆冤院 员猿员 原 员猿愿
咱 圆 暂 摇 月葬糟糟澡藻贼贼葬 蕴袁 砸藻皂燥贼贼蚤 孕 悦袁 月藻则灶葬则凿蚤灶蚤 悦袁 杂葬糟糟葬则凿燥 云援 粤凿增藻灶贼蚤贼蚤燥怎泽
泽澡燥燥贼 则藻早藻灶藻则葬贼蚤燥灶 枣则燥皂 造藻葬枣 藻曾责造葬灶贼泽 葬灶凿 泽贼藻皂 灶燥凿藻泽 燥枣 蕴蚤造蚤怎皂咱 允暂 援
孕造葬灶贼 悦藻造造 袁栽蚤泽泽怎藻 葬灶凿 韵则早葬灶 悦怎造贼怎则藻袁圆园园猿袁苑源渊员冤院 猿苑 原 源源
咱 猿暂摇 粤则扎葬贼藻 云藻则灶葬灶凿藻扎 粤 酝袁 晕葬噪葬扎葬噪蚤 栽袁 韵噪怎皂燥贼燥 再袁 栽葬灶蚤泽葬噪葬 栽援
耘枣枣蚤糟蚤藻灶贼 糟葬造造怎泽 蚤灶凿怎糟贼蚤燥灶 葬灶凿 责造葬灶贼 则藻早藻灶藻则葬贼蚤燥灶 枣则燥皂 枣蚤造葬皂藻灶贼泽 憎蚤贼澡
葬灶贼澡藻则 蚤灶 造蚤造赠渊蕴蚤造蚤怎皂 造燥灶早蚤枣造燥则怎皂 栽澡怎灶遭冤 咱 允暂 援 孕造葬灶贼 悦藻造造 砸藻责燥则贼泽袁
员怨怨苑袁员远渊员圆冤院愿猿远 原 愿源园
咱 源 暂摇 姚绍嫦袁艾素云袁杨美纯援 铁炮百合组培中不定芽形成的细胞学
观察咱允暂 援亚热带植物科学袁圆园园缘袁猿源渊圆冤院缘 原 苑
咱 缘 暂摇 张艺萍袁吴丽芳袁吴学尉袁崔光芬袁丁 丁袁王继华援 东方百合胚性
愈伤组织诱导和植株再生研究 咱 允暂 援 江西农业学报袁圆园园愿袁圆园
渊员圆冤院猿猿 原 猿远
咱 远 暂摇 吴若菁袁阮少宁援百合胚状体形成途径及植株的再生研究咱允暂 援福
建林学院学报袁圆园园猿袁圆猿渊源冤院猿圆圆 原 猿圆缘
咱 苑 暂摇 杨柏云袁杨慧琴袁蔡奇英袁管毕财袁罗丽萍援 龙牙百合体细胞胚的
诱导及植株再生咱允暂 援南昌大学学报渊理科版冤袁圆园园缘袁圆怨渊远冤院缘猿远
原 缘猿怨
咱 愿 暂摇 栽则蚤遭怎造葬贼燥 粤袁 砸藻皂燥贼贼蚤 孕 悦袁 蕴燥枣枣造藻则 匀 允 酝袁 灾葬灶 栽怎赠造 允 酝援 杂燥皂葬贼蚤糟
藻皂遭则赠燥早藻灶藻泽蚤泽 葬灶凿 责造葬灶贼 则藻早藻灶藻则葬贼蚤燥灶 蚤灶 蕴蚤造蚤怎皂 造燥灶早蚤枣造燥则怎皂 栽澡怎灶遭
咱允暂 援 孕造葬灶贼 悦藻造造 砸藻责袁员怨怨苑袁员苑院员员猿 原 员员愿
咱 怨 暂摇 李邱华袁洪摇 波袁仝摇 征袁杨英杰袁马 摇 超袁于静娟袁高俊平援 新铁
炮百合遗传转化体系的建立及 在皂源园员 基因的导入咱 允暂 援 农业生
物技术学报袁圆园园愿袁员远渊员冤院怨远 原 员园圆
咱员园暂摇 张建鑫袁刘雅莉袁孟摇 芮袁王跃进援农杆菌介导的 粤悦韵 反义基因
遗传转化的研究西北农业学报 咱 允暂 援 西北农业学报袁圆园园愿袁员苑
渊远冤院员缘愿 原 员远猿
咱员员暂摇 匀燥泽澡蚤 再袁运燥灶凿燥 酝袁酝燥则蚤 杂袁粤凿葬糟澡蚤 再袁晕葬噪葬灶燥 酝 袁运燥遭葬赠葬泽澡蚤 匀援
孕则燥凿怎糟贼蚤燥灶 燥枣 贼则葬灶泽早藻灶蚤糟 造蚤造赠 责造葬灶贼泽 遭赠 粤早则燥遭葬糟贼藻则蚤怎皂 原 皂藻凿蚤葬贼藻凿
贼则葬灶泽枣燥则皂葬贼蚤燥灶咱允暂 援 孕造葬灶贼 悦藻造造 砸藻责燥则贼 袁圆园园源 袁圆圆 院猿缘怨 原 猿远源
咱员圆暂摇 刘摇 岚袁夏秀英袁徐品三援农杆菌介导东方百合野西伯利亚冶遗传
转化体系建立咱允暂 援大连理工学报袁圆园园愿袁源愿渊缘冤院远源员 原 远源缘
咱员猿暂摇 柳玉晶袁龚束芳袁樊金萍袁王金刚袁车代弟援 百合愈伤组织的诱导
及植株再生咱允暂 援东北农业大学学报袁圆园园苑袁猿愿渊猿冤院猿缘圆 原 猿缘缘
咱员源暂摇 运藻凿则葬 酝袁 月葬糟澡 粤援 酝燥则责澡燥早藻灶藻泽蚤泽 燥枣 蕴蚤造蚤怎皂 皂葬则贼葬早燥灶 蕴援 藻曾责造葬灶贼泽 蚤灶
糟葬造造怎泽 糟怎造贼怎则藻 咱 允 暂 援 粤糟贼葬 月蚤燥造燥早蚤糟葬 悦则葬糟燥增蚤藻灶泽蚤葬 杂藻则蚤藻泽 月燥贼葬灶蚤糟葬袁
圆园园缘袁源苑渊员冤院远缘 原 苑猿
咱员缘暂摇 蕴燥泽糟澡蚤葬增燥 云袁 孕蚤贼贼燥 蕴袁 郧蚤怎造蚤葬灶燥 郧袁 栽燥则贼蚤 郧袁 晕怎贼蚤 原 砸燥灶糟澡蚤 灾袁
酝葬则葬扎扎蚤贼蚤 阅袁 灾藻则早葬则葬 砸袁 韵则泽藻造造蚤 杂袁 栽藻则扎蚤 酝援 阅晕粤 皂藻贼澡赠造葬贼蚤燥灶 燥枣
藻皂遭则赠燥早藻灶蚤糟 糟葬则则燥贼 糟藻造造 糟怎造贼怎则藻泽 葬灶凿 蚤贼泽 增葬则蚤葬贼蚤燥灶 葬泽 糟葬怎泽藻凿 遭赠
皂怎贼葬贼蚤燥灶袁 凿蚤枣枣藻则藻灶贼蚤葬贼蚤燥灶袁 澡燥则皂燥灶藻泽 葬灶凿 澡赠责燥皂藻贼澡赠造葬贼蚤灶早 凿则怎早泽咱 允暂 援
栽葬早 栽澡藻燥则藻贼蚤糟葬造 葬灶凿 粤责责造蚤藻凿 郧藻灶藻贼蚤糟泽袁 员怨愿怨袁 苑苑渊猿冤院 猿圆缘 原 猿猿员
咱员远暂摇 姜云天袁陈艳秋袁朱俊义袁李玉梅袁曲柏宏援 日本臭崧体细胞胚胎
发生及植株再生体系的建立咱允暂 援核农学报袁圆园园怨袁圆猿渊员冤院愿缘 原 愿怨
咱员苑暂摇 王培佳袁贾玉芳袁陈逸锋袁陈摇 曙袁柴明良援 匍匐剪股颖匍匐茎愈
伤组织的诱导咱允暂 援核农学报袁圆园园怨袁圆猿渊源冤院远圆员 原 远圆缘
咱员愿暂摇 钱永强袁孙振元袁韦善君袁李摇 云袁韩摇 蕾援 中华结缕草成熟胚再
生影响因素研究咱允暂 援核农学报袁圆园园缘袁员怨渊远冤院源猿远 原 源源园
咱员怨暂摇 詹祥灿援植物体细胞胚状体与器官发生的激素调节咱 允暂 援植物生
理学报袁员怨愿猿袁怨渊猿冤院猿员苑 原 猿圆源
咱圆园暂摇 杂贼藻憎葬则凿 云 悦袁 酝葬则蚤燥灶 韵袁 酝葬责藻泽袁 酝藻葬则泽 运援 郧则燥憎贼澡 葬灶凿 燥则早葬灶蚤扎藻凿
凿藻增藻造燥责皂藻灶贼 燥枣 糟怎造贼怎则藻凿 糟藻造造泽援 域韵则早葬灶蚤扎葬贼蚤燥灶 蚤灶 糟怎造贼怎则藻泽 早则燥憎灶 枣则燥皂
枣则藻藻造赠 泽怎泽责藻灶凿藻凿 糟藻造造泽 咱 允暂 援 粤皂藻则蚤糟葬灶 允燥怎则灶葬造 燥枣 月燥贼葬灶赠袁员怨缘愿袁源缘
渊员园冤院苑园缘 原 苑园愿
渊下转第 源苑苑 页冤
园远源
允燥怎则灶葬造 燥枣 晕怎糟造藻葬则 粤早则蚤糟怎造贼怎则葬造 杂糟蚤藻灶糟藻泽
圆园员圆袁圆远渊猿冤院园源苑员 耀 园源苑苑
糟燥皂遭蚤灶葬贼蚤燥灶 燥枣 贼澡藻 粤则葬遭蚤凿燥责泽蚤泽 阅砸耘月员粤 早藻灶藻 葬灶凿 泽贼则藻泽泽鄄蚤灶凿怎糟蚤遭造藻
则凿圆怨粤 责则燥皂燥贼藻则 蚤皂责则燥增藻凿 凿则燥怎早澡贼鄄葬灶凿 造燥憎鄄贼藻皂责藻则葬贼怎则藻 泽贼则藻泽泽
贼燥造藻则葬灶糟藻 蚤灶 贼燥遭葬糟糟燥 遭赠 早藻灶藻 贼则葬灶泽枣藻则 咱 允 暂 援 孕造葬灶贼 葬灶凿 悦藻造造
孕澡赠泽蚤燥造燥早赠袁 圆园园源袁 源缘院 猿源远 原 猿缘园
咱苑员暂摇 月藻澡灶葬皂 月袁 运蚤噪怎糟澡蚤 粤袁 悦藻造藻遭蚤鄄栽燥责则葬噪 云袁 运葬泽怎早葬 酝袁 再葬皂葬早怎糟澡蚤鄄
杂澡蚤灶燥扎葬噪蚤 运袁 宰葬贼葬灶葬遭藻 运 晕援 粤则葬遭蚤凿燥责泽蚤泽 则凿圆怨粤院院 阅砸耘月员粤
藻灶澡葬灶糟藻泽 枣则藻藻扎蚤灶早 贼燥造藻则葬灶糟藻 蚤灶 贼则葬灶泽早藻灶蚤糟 责燥贼葬贼燥 咱 允暂 援 孕造葬灶贼 悦藻造造
砸藻责袁 圆园园苑袁 圆远院 员圆苑缘 原 员圆愿圆
咱苑圆暂摇 杂怎 悦 云袁 宰葬灶早 再 悦袁 匀泽蚤藻澡 栽 匀袁 蕴怎 悦 粤袁 栽泽藻灶早 栽 匀袁 再怎 杂 酝 援 粤
灶燥增藻造 酝再月杂猿鄄凿藻责藻灶凿藻灶贼 责葬贼澡憎葬赠 糟燥灶枣藻则泽 糟燥造凿 贼燥造藻则葬灶糟藻 蚤灶 则蚤糟藻咱允暂 援
孕造葬灶贼 孕澡赠泽蚤燥造袁 圆园员园袁 员缘猿院员源缘 原 员缘愿
咱苑猿暂摇 粤责藻造 运袁 匀蚤则贼 匀援 砸藻葬糟贼蚤增藻 燥曾赠早藻灶 泽责藻糟蚤藻泽院 酝藻贼葬遭燥造蚤泽皂袁 燥曾蚤凿葬贼蚤增藻
泽贼则藻泽泽袁 葬灶凿 泽蚤早灶葬造 贼则葬灶泽凿怎糟贼蚤燥灶 咱 允暂 援 粤灶灶怎 砸藻增 孕造葬灶贼 月蚤燥员袁 圆园园源袁
缘缘院 猿苑猿 原 猿苑怨
咱苑源暂摇 杂燥怎皂藻灶 月援 砸藻葬糟贼蚤增藻 燥曾赠早藻灶 泽责藻糟蚤藻泽 葬灶凿 燥曾蚤凿葬贼蚤增藻 遭怎则泽贼 砸燥造藻泽 蚤灶
泽贼则藻泽泽 泽藻灶藻泽糟藻灶糟藻 葬灶凿 泽蚤早灶葬造 贼则葬灶泽凿怎糟贼蚤燥灶 蚤灶 责造葬灶贼泽 咱 允暂 援 悦怎则则 杂糟蚤袁
圆园园缘袁 愿怨院 员员员猿 原 员员圆员
咱苑缘暂摇 运憎燥灶 杂 再袁 允藻燥灶早 再 允袁 蕴藻藻 匀 杂袁 运蚤皂 允 杂袁 悦澡燥 运 再袁 粤造造藻灶 砸 阅袁
运憎葬噪 杂 杂援 耘灶澡葬灶糟藻凿 贼燥造藻则葬灶糟藻泽 燥枣 贼则葬灶泽早藻灶蚤糟 贼燥遭葬糟糟燥 责造葬灶贼泽
藻曾责则藻泽泽蚤灶早 遭燥贼澡 泽怎责藻则燥曾蚤凿藻 凿蚤泽皂怎贼葬泽藻 葬灶凿 葬泽糟燥则遭葬贼藻 责藻则燥曾蚤凿葬泽藻 蚤灶
糟澡造燥则燥责造葬泽贼泽 葬早葬蚤灶泽贼 皂藻贼澡赠造 增蚤燥造燥早藻灶鄄皂藻凿蚤葬贼藻凿 燥曾蚤凿葬贼蚤增藻 泽贼则藻泽泽 咱 允暂 援
孕造葬灶贼袁 悦藻造造 驭 耘灶增蚤则燥灶皂藻灶贼袁 圆园园圆袁 圆缘渊苑冤院 愿苑猿 原 愿愿圆
咱苑远暂摇 杂葬皂蚤泽 运袁 月燥憎造藻赠 杂袁 酝糟运藻则泽蚤藻 月援 孕赠则葬皂蚤凿蚤灶早 酝灶鄄泽怎责藻则燥曾鄄蚤凿藻
凿蚤泽皂怎贼葬泽藻 贼则葬灶泽早藻灶藻泽 贼燥 蚤皂责则燥增藻 责藻则泽蚤泽贼藻灶糟藻 葬灶凿 遭蚤燥皂葬泽泽 责则燥则藻泽怎造贼泽
蚤灶 葬造枣葬造枣葬 咱允暂 援 允 耘曾责 月燥贼袁 圆园园圆袁 缘猿院员猿源猿 原 员猿缘园
咱苑苑暂摇 蕴造燥则藻灶贼藻 云袁 蕴佼责藻扎鄄悦燥遭燥造造燥 砸 酝袁 悦葬贼葬造佗 砸袁 酝葬则贼侏灶藻扎鄄在葬责葬贼藻则 允 酝袁
杂葬造蚤灶葬泽 允援 粤 灶燥增藻造 糟燥造凿鄄蚤灶凿怎糟蚤遭造藻 早藻灶藻 枣则燥皂 粤则葬遭蚤凿燥责泽蚤泽袁 砸悦陨猿袁
藻灶糟燥凿藻泽 葬 责藻则燥曾蚤凿葬泽藻 贼澡葬贼 糟燥灶泽贼蚤贼怎贼藻泽 葬 糟燥皂责燥灶藻灶贼 枣燥则 泽贼则藻泽泽 贼燥造藻则葬灶糟藻
咱允暂 援 栽澡藻 孕造葬灶贼 允燥怎则灶葬造袁 圆园园圆袁 猿圆渊员冤院 员猿 原 圆源
渊责任编辑摇 王媛媛冤
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渊上接第 源远园 页冤
咱圆员暂摇 王仑山袁杨汉民袁王亚馥袁康文隽袁贾廷跃援 伊贝母组织培养中体
细胞胚的形成及细胞组织学观察咱 允暂 援 西北植物学报袁员怨愿怨袁怨
渊圆冤院苑远 原 愿员
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