全 文 :植物生理学通讯 第 43卷 第 2期,2007年 4月308
五柱绞股蓝的组织培养和快速繁殖
刘世彪 *,陶民,姜业芳,黄衡宇
吉首大学生态研究所,湖南吉首 416000
Tissue Culture and Rapid Propagation of Gynostemma pentagynum Z. P. Wang
LIU Shi-Biao*, TAO Min, JIANG Ye-Fang, HUANG Heng-Yu
Institute of Ecology, Jishou University, Jishou, Hunan 416000, China
收稿 2006-11-27 修定 2007-01-29
资助 湖南省自然科学基金(04JJ3071)和吉首大学博士启动基金。
* E-mail:liushibiao_1@163.com;Tel:0743-8564416
1 植物名称 五柱绞股蓝(Gynostemma pentagynum
Z. P. Wang)。
2 材料类别 茎尖。
3 培养条件 愈伤组织诱导培养基:(1) MS+6-BA
1.0 mg·L-1 (单位下同)+NAA 0.2;丛生芽分化、
增殖继代培养基:(2) MS+6-BA 1.0+NAA 0.2;
生根培养基:(3) 1/2MS+NAA 1.0。以上培养基
均附加 3%的蔗糖和 0.7%琼脂,pH 5.8。培养
温度(25±1) ℃,光照时间 12 h·d- 1,光照强度
40 µmol·m-2·s-1。
4 生长与分化情况
4.1 无菌材料的获得与愈伤组织的诱导 取五柱绞
股蓝当年生新枝茎尖用自来水冲洗 3次,5%洗衣
粉漂洗 5 min,自来水冲洗 30 min。在超净工作
台上用 75%酒精漂洗 30 s,0.1%升汞漂洗 8~10
min,无菌水清洗 5次。材料接种到愈伤组织诱
导培养基(1 )上,光照培养室中培养。12 d后,
愈伤组织明显增生。
4.2 增殖与继代培养 将愈伤组织接种到丛生芽分
化培养基(2)上,第 6天即有丛生芽出现,25 d后
丛生芽的诱导率可达 93%。将丛生芽用镊子分开
成单芽,接种到继代培养基(2)上。25 d后,丛
生芽的芽丛诱导率达 97%,增殖系数达 6~8。
4.3 生根培养 当不定芽增殖到一定数量后,将不
定芽切下,转接在培养基(3)中,进行生根培养。
五柱绞股蓝在培养基中表现出良好的生根特点,
25 d时的不定根达 5条以上,生根率在 93%以
上 。
4.4 炼苗与移栽 组培苗根长 3~5 cm、具 6~8片
叶时,将培养瓶移至室内散射光处,打开瓶盖
3~4 d,进行炼苗,适当补加无菌水。然后将小
苗取出培养瓶,自来水冲洗小苗根部粘连的培养
基,移栽到装有灭菌河沙的花钵中,浇透水,移
至温室中培养,25 d后的移栽成活率达 95%。当
幼苗长达 15 cm,叶片达 20多片时,可移入大
田 。
5 意义与进展 五柱绞股蓝为葫芦科绞股蓝属植
物,1 98 9 年首次发现于湖南张家界市(王正平
1 9 8 9 ),分布于湖南、贵州、湖北和重庆四省
(市)边区交界的武陵山区,是这一地区的特有
种。与同属植物绞股蓝(Gynostemma pentaphyllum)
一样,五柱绞股蓝含有人参皂苷 ( 刘世彪等
2 0 0 6 ),具有降血脂血压、助消化、抗衰老和
抗肿瘤等生理功效,极具开发前景。五柱绞股
蓝常用分株繁殖,但繁殖系数低。本文所建立
的组织培养和快繁技术为其扩大种植提供了可能
有效的一条途径。绞股蓝的组织培养已有报道
(黄群声和麦鹤云 1986;杨宁生等 1994),但五
柱绞股蓝的组织培养与快速繁殖尚未见报道。
参考文献
黄群声, 麦鹤云(1986). 绞股蓝的快速繁殖. 植物生理学通讯, 22
(3): 226~227
刘世彪, 林如, 胡正海(2006). 绞股蓝属 5种植物的茎叶结构和总
皂苷含量差异. 福建农林大学学报(自然科学版) , 3 5 (5) :
495~499
王正平(1989). 绞股蓝属及苔草属的四新种. 云南植物研究, 11
(2): 165~170
杨宁生, 张馥, 钟青萍, 张发根(1994). 有机锗对绞股蓝愈伤组织
生长及皂苷含量的影响. 植物生理学通讯, 30 (4): 313