全 文 ：植物生理学通讯 第 40 卷 第 3期，2004 年 6 月330
野牛草成熟胚离体培养及植株再生
钱永强1 孙振元2,* 冯霞2 李云1 韩蕾2
1北京林业大学生物学院，北京 100083； 2中国林业科学研究院林业研究所，北京 100091
In vitro Culture and Plantlet Regeneration from Mature Embryo of Buchloe
dactyloides (Nutt.) texoka
QIAN Yong-Qiang1, SUN Zhen-Yuan2,*, FENG Xia2, LI Yun1, HAN Lei2
1College of Biological Sciences, Beijing Forestry University, Beijing 100083; 2Research Institute of Forestry, Chinese Academy
of Forestry, Beijing 100091
收稿 2003-11-21 修定 　 2004-03-29
资助　 国家高技术研究发展计划(863计划)“优质抗逆草坪草早
熟禾等新品种选育”(2002AA24061)。
*通讯作者(E-mail: sunzy@forestry.ac.cn, Tel: 010-62889626)。
1 植物名称 野牛草 [Buchloe dactyloides (Nutt.)
texoka]。
2 材料类别 成熟胚 。
3 培养条件 (1)愈伤组织诱导培养基：MS+2,4-D
1.5~6.0 mg·L-1(单位下同)+6-BA 0.1+脯氨酸1 000+
水解酪蛋白(CH) 500+谷氨酰胺500+ a-酮戊二酸
100+硫代硫酸银(STS) 5；(2)愈伤组织继代培养
基：MS+3/2MS(有机)+2,4-D 2.5+6-BA 0.1+CH
1 000+聚乙烯吡咯烷酮(PVP) 200或维生素C(VC)
200；(3)再生培养基：不附加任何植物生长调节
物质的 MS 基本培养基(MS0)。所有培养基中均添
加 3% 蔗糖、0.56% 琼脂，pH 5.8。愈伤组织诱
导及继代培养为暗培养，不定芽分化及植株再生
过程中光照12 h·d-1，光照度为1 500 lx，培养温
度为(25±1)℃。
4 生长与分化情况
4.1 无菌材料的获得 以成熟种子为外植体，剥除
颖后，用洗涤剂将种子洗刷干净，70% 酒精浸泡
60 s 后，无菌水冲洗，再用 75% NaClO 原溶液
(含有效氯7%~10%)浸泡 15~30 min，无菌水冲洗
5~6 次，接种到愈伤组织诱导培养基中。
4.2 愈伤组织的诱导与继代培养 在诱导培养基中
培养 3 d 后，种子发芽，将芽切成长约 3 mm 的
组织块，转接到原诱导培养基中。暗培养 10 d
后，各组织块两端形成暗白色、结构疏松的愈伤
组织。培养 15 d 后，愈伤组织明显增大，并有
部分愈伤组织开始褐化。将愈伤组织转移到添加
PVP 200 或 VC 200 的继代培养基中暗培养 20 d
后，添加 STS 所诱导的愈伤组织表面长出淡黄色
松脆的新愈伤组织。
4.3 愈伤组织分化及植株再生 将继代培养20 d 后
的愈伤组织转入再生培养基MS0中，光下培养30 d
后发现，有 10% 的愈伤组织形成芽点，单块愈伤
组织形成芽点数平均为 15 个。继续培养至第 40
天，芽点发育成健壮的不定芽，并均有少量不定
根形成。
4.4 生根与移栽 将丛生芽转入新鲜MS0培养基中，
培养10 d左右，每个不定芽基部长出3~4条长约
2 cm的白色根。生根再生植株炼苗7 d 后，将小
苗移出，洗净再生苗根部残留培养基，栽植到珍
珠岩、蛭石、草炭土各1/3的基质中，适当遮阴，
保持湿度为80%~90%，温度控制在25℃左右。20 d
后即可成活，成活率达 9 2 % 。
5 意义与进展 野牛草属禾本科野牛草属，又名
水牛草，原产北美中部半干旱地区。是一种耐
寒、耐热、抗旱，且在低护养水平下能保持优
良品质的重要暖季型多年生低矮草坪草。极具抗
旱性是其最突出的特征之一，它能在极端干旱时
进入休眠状态，一旦条件适宜又迅速恢复生长。
在我国华北、西北和东北等地都有大面积成功引
种。以野牛草成熟胚为外植体建立再生体系，外
植体取材可不受季节及采集时间限制。野牛草成
熟胚获得再生植株尚未见报道。