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黑籽南瓜的组织培养与快速繁殖



全 文 :植物生理学通讯 第 40 卷 第 4期,2004 年 8 月 459
黑籽南瓜的组织培养与快速繁殖
刘栓桃1,* 赵智中1 苗前2
1 山东省农业科学院蔬菜研究所,济南 250100;2 山东省农业科学院产业处,济南 250100
Tissue Culture and Rapid Propagation of Cucurbita ficifolia
LIU Shuan-Tao1,*, ZHAO Zhi-Zhong1, MIAO Qian2
1Vegetable Research Institute,Shandong Academy of Agricultural Sciences, Jinan 250100; 2Department of Domain, Shandong
Academy of Agricultural Sciences, Jinan 250100
收稿 2003-05-23 修定   2004-02-12
* E-mail:liushuantao870@sohu.com, Tel:0531-3179467
1 植物名称 黑籽南瓜(Cucurbita ficifolia)。
2 材料类别 成熟种子。
3 培养条件 芽诱导培养基:(1) MS+6-BA 1.0 mg·L-1
(单位下同) ;(2) MS+6-BA 2.0;(3) MS+6-BA 3.0。
芽增殖培养基:(4) MS+6-BA 1.0。生根培养基:
(5) 1/2MS+NAA 0.2;(6) 1/2MS+NAA 0.02;(7)
1/2MS+IBA 0.02;(8) 1/2MS+IBA 0.2;(9) 1/2MS(不
加任何激素)。上述培养基均添加2%蔗糖、0.6%琼
脂,pH 值调至5.8~6.0。培养条件:白天25℃,
夜间18.5℃,光照 16 h·d-1,光照度4 000 lx,
由培养箱自动控制。
4 生长与分化情况
4.1 无菌苗的获得 将黑籽南瓜的种子在55~60℃
的热水中烫种 10 min,待水温降至 30℃,保持
温度 6 h,使种子充分吸水;将吸水膨胀的种子
于 28~30℃的温箱中催芽 24~36 h。取发芽的种
子,以 70% 酒精消毒 3~5 min,于超净工作台上
剥出种胚,用0.1%升汞消毒8 min,灭菌蒸馏水
冲洗 5 次,每次间隔 3 min。将灭菌的种胚接种
在MS0 培养基上,2 周后下胚轴伸长,子叶展开,
获得无菌苗。
4.2 不定芽的增殖与快繁 取上述无菌苗,将下胚
轴和子叶去掉,分别接种在培养基(1)~(3)上。2
周后观察,发现在 3 种培养基上的茎尖子叶间均
能形成一簇腋芽。培养基(1)上的培养物顶芽继续
生长,腋芽产生的数目少,平均有3~4 个;培养
基(2)、(3)上的培养物顶芽停止生长,腋芽产生的
数目没有明显的区别,平均有8~9 个。将生长健
壮的腋芽切下,分别转移至培养基(3)和(4)使其进
一步增殖。培养基(3)能使芽进一步增殖,产生的
芽多,平均达 18 个,但经继续继代培养后芽发
黄,难以进行下一步的生根诱导实验。将激素水
平降低至6-BA 1 mg·L-1[培养基(4)],则增殖的芽
虽较前者少,平均有 8 个,但芽生长健壮,颜
色嫩绿,经 2 ~ 3 代继代培养后增殖的芽仍呈绿
色。所以,适宜的芽增殖培养基为(4)。
4.3 根的诱导 将健壮的芽转移至生根培养基(5)~
(9)上,诱导芽生根,2 周后,5种生根培养基均
能使芽生根。附加 NAA 的培养基(5)、(6)上,首
先是在芽的基部诱导产生愈伤组织,然后才从愈
伤组织上产生不定根,形成的根多且粗短,不正
常;添加IBA的培养基(7)、(8)都能使芽产生正常
的不定根,培养基(7)平均产生2.7条根,培养基
(8)茎基部木质化程度高,平均产生4条根,生根
率均为 100%;不加任何激素的培养基(9)也能使
芽产生正常的不定根,但生根率低,只有 60%。
所以,适宜的生根培养基为MS+6-BA 0.02~0.2。
5 意义与进展 云南黑籽南瓜属于葫芦科南瓜属,
在我国主要分布于云南省海拔1 900~2 400 m的山
区,其根系发达,耐低温寒害,具高抗病性,
所以,被广泛用作冬季日光温室黄瓜栽培的主要
砧木。但生产中发现,黑籽南瓜存在发芽率低,
发芽不整齐,单株之间对低温和病害的耐受能力
存在较大差异。选择长势健壮的黑籽南瓜幼苗,
在低温胁迫或接种病害条件下筛选耐受能力强的单
株,采用茎尖快繁技术,将一株植物繁殖成几十
甚至上百株的无性系,可望培育更优良的黑籽南
瓜砧木品种。该快繁实验的成功为解决上述生产
中的不足之处可能有一定的参考价值。黑籽南瓜
的茎尖快繁国内外尚未见报道。