全 文 ：植物生理学通讯 第41卷 第6期，2005年12月788
雪里蕻的组织培养和植株再生
杨文新* 李博 崔博 姜长阳
辽宁师范大学生命科学学院，辽宁大连 116029
Tissue Culture and Plantlet Regeneration of Brassica juncea var. multiceps
Tsen et Lee
YANG Wen-Xin, LI Bo, CUI Bo, JIANG Chang-Yang
College of Life Science, Liaoning Normal University, Dalian, Liaoning 116029, China
收稿 2004-12-22 修定 　2005-04-25
*E-mail: ywxin168@163.com, Tel: 0411-84258472
1 植物名称 雪里蕻(Brassica juncea var. multiceps
Tsen et Lee)。
2 材料类别 无菌苗的下胚轴。
3 培养条件 培养基：(1) 1/2MS；(2) MS+AgNO3
0.8 mg·L-1 (单位下同)+6-BA 0.5+2,4-D 0.25；(3)
MS+AgNO3 0.8+6-BA 0.5+2,4-D 0.5；(4) MS+
AgNO3 0.8+6-BA 1+2,4-D 0.25；(5) MS+AgNO3
0.8+6-BA 1+2,4-D 0.5；(6) MS+6-BA 0.25+IAA 0.1;
(7) MS+6-BA 0.25+IAA 0.5; (8) MS+6-BA 0.5+IAA
0.1；(9) MS+6-BA 0.5+IAA 0.5；(10) MS+6-BA
1+IAA 0.1；(11) MS+6-BA 1+IAA 0.5；(12)
1/2MS+IAA 0.2。上述 MS培养基中加30 g·L-1 蔗
糖，1/2MS 培养基中加 15 g·L-1 蔗糖。固体培养
基的胨力强度均为 160 g·cm-2，pH 5.8。种子萌
发于光照培养箱中26℃恒温培养，光照12 h·d-1，光
强 60 mmol·m-2·s-1；其它培养温度为15~26℃，光
照13 h·d-1，光强 60~80 mmol·m-2·s-1。
4 生长与分化情况
4.1 无菌苗的培养 将种子用自来水振荡洗涤5 min，
加 0.05% 安利洗涤液振荡洗涤2~3 min，自来水
冲洗干净。移至超净工作台上，用 7 0 % 乙醇振
荡灭菌 20 s，无菌水洗2次，再以0.05% HgCl2
灭菌 10 min，无菌水振荡洗5次，接种到1/2MS
培养基上。3 d 后种子萌发，15 d 可获得高 2~3
c m 的无菌苗。
4.2 愈伤组织的诱导 将无菌苗下胚轴剪成约0.5 cm
的切段，分别于培养基(2)~(5)上进行愈伤组织的
诱导培养。50 d后统计观察表明，不同浓度6-BA
与 2,4-D 配合使用时，下胚轴茎段均可形成愈伤
组织。其中，1 mg·L-1 6-BA与 0.25 mg·L-1 2,4-D
配合使用时，诱导率为 85%。不仅愈伤组织诱导
率高，且生长速度快，表面呈绿色颗粒状(细胞
团)。将该愈伤组织在相同的条件下继代培养，生
长速度、色泽和其它外部性状仍然保持不变。可
见，培养基(4)是诱导愈伤组织的理想培养基。
4.3 分化培养 将上述愈伤组织接种到培养基(6)~
(11)上进行分化培养。60 d时观察，在同时附加
6-BA、IAA 的培养基上愈伤组织可以分化，而在
其它的培养基上未分化。其中，附加 0.5 mg·L-1
6-BA 和 0.5 mg·L-1 IAA 时分化率达96%，而且该
愈伤组织60 d左右可形成大量的丛生不定芽。这
说明培养基(9)是诱导愈伤组织分化的理想培养基。
4.4 试管苗的生根 将上述丛生不定芽从基部剪下
后，接种到附加不同浓度 IAA 的 1/2MS 培养基上
进行生根培养。7~10 d形成根源基，随后根迅速
生长。25 d时，附加0.2 mg·L-1 IAA 的平均生根
数为5.1，平均根长为2.2 cm，生根率为96.5%，
并且试管苗生长旺盛。由此可见，生根的理想培
养基是：1/2MS+IAA 0.2 mg·L-1。
4.5 试管苗的移栽与扦插 将培养生根试管苗瓶打
开，在100~160 mmol·m-2·s-1 的光强下炼苗4 d后
取出，洗去根部培养基，移栽到以炉灰渣为基质
的花盆或苗床中，保持 20~28℃、湿度 90% 以上
和只有散射光的条件，7 d 可成活，12 d 开始正
常生长，成活率为 98%。将其中高 2 cm 以上的
无根苗基部剪去，剪口插到70 mg·L-1 IAA 溶液中
处理 5 min，扦插到移栽基质中，并保持与移栽
相同的环境条件，12 d 后扦插成活率为 93.2%。
移栽苗和扦插苗长势一致，生长旺盛，根系发达。
5 意义与进展 雪里蕻属十字花科、芸苔属，为叶
用荠菜的一个变种，适于腌制咸菜。本文探索了
影响雪里蕻无性系建立和植株再生的主要因素，
并建立起一个较高频率的再生体系，可供雪里蕻
良种选育和工厂化育苗参考。迄今未见雪里蕻组
织培养和无性系建立的研究报道。