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两面针的组织培养和快速繁殖



全 文 :植物生理学通讯 第42卷 第1期,2006年2月 73
两面针的组织培养和快速繁殖
韦大器1,2 吴红英2,* 何贵整2 陈丽文2 时群3 李永华3
1 湖南农业大学作物基因工程湖南省重点实验室,长沙410128;2 广西钦州市林业科学研究所,广西钦州535000;3 广
西钦州市中医院,广西钦州 535000
Tissue Culture and Rapid Propagation of Zanthoxylum nitidum
WEI Da-Qi1,2, WU Hong-Ying2,*, HE Gui-Zheng2, CHEN Li-Wen2, SHI Qun3, LI Yong-Hua3
1Crop Gene Engineering Key Laboratory of Hunan Province, Hunan Agricultural University, Changsha 410128, China; 2Qinzhou
Forestry Research Institute, Qinzhou, Guangxi 535000, China; 3Qinzhou Hospital of Traditional Chinese Medicine, Qinzhou,
Guangxi 535000, China
收稿 2005-05-13 修定   2005-08-03
资助 广西钦州市科学技术局。
*通讯作者(E-mail: wuhongying2000@21cn.com, Tel:
0777-2808915)。
1 植物名称 两面针(Zanthoxylum nitidum),又名
入地金牛、上山虎、下山虎、双面针、山椒。
2 材料类别 顶芽、腋芽和带芽茎段。
3 培养条件 基本培养基为 MS。芽诱导培养基:
(1)MS+6-BA 1.0 mg·L-1(单位下同)+NAA 0.1;(2)
MS+6-BA 1.0+IBA 0.1;(3)MS+6-BA 0.4+NAA 0.2;
(4)MS+6-BA 0.4+IBA 0.2。芽继代增殖培养基:
(5)MS+6-BA 1.0+NAA 0.5;(6)MS+6-BA 2.0+NAA
1.0;(7)MS+6-BA 0.6+NAA 0.5。生根培养基:(8)
1/2MS+生根粉1号(ABT1) 0.6+IBA 0.4; (9)1/2
MS+ABT1 0.8+IBA 0.4; (10)1/2MS+ABT1 0.8+IBA
0.6。培养基均加 3% 白砂糖、0.35% 琼脂,pH
5.8。培养温度为(26±1)℃,光照时间 12 h·d-1,
光强约为40 mmol·m-2·s-1。
4 生长与分化情况
4.1 无菌材料的获得 于晴天选取生长健壮、无病
虫害的植株,剪取幼嫩枝条,剪除叶片,用自来
水冲洗干净,剪成6~10 cm 的茎段,在超净工作
台上用75% 酒精浸泡5 min,再用 0.1% 升汞溶液
灭菌 5 min,无菌水冲洗 3~4 次,并浸泡在无菌
水中备用。在无菌条件下切成1.0~1.5 cm长的带
芽茎段或茎尖,接种在培养基(1)~(4)上。10~15
d后,茎段均能诱导出腋芽,诱导率分别为62.3%、
58.4%、46.7%、41.7%。在培养基(1)和(2)上诱
导的芽短,芽玻璃化严重;(3)上诱导的芽较长,
芽黄绿、部分芽玻璃化;(4)上诱导的每个腋芽都
能长出 2 个芽,芽黄绿,较长,基本无玻璃化
苗。可见,培养基(4)为最佳,其次为(3)。
4.2 芽继代增殖培养 将约1 cm长的腋芽分别接种
到培养基(5)~(7)上继代培养。结果表明,在培养
基(5)上的芽分化繁殖系数为 2.5,但芽未见长
长,叶片绿;在(6)上的芽的分化系数为1.8,芽
未见长长,叶片黄绿;在(7)上的芽分化繁殖系
数为 3 . 6 ,叶片绿,芽伸长较好,长势强。可
见,培养基(7)较适合继代繁殖。
4.3 生根的诱导 待幼芽长至约2 cm,分别转接到
培养基(8)~(10)上诱导生根。在培养基(8)上生根
率为 75%,平均生根数为 2.8,根系粗壮,但根
系木质化程度过高,易将苗顶出培养基,平均出
根天数为 10 d;在(9)上生根率为 90%,平均出
根数为 4.2,根系粗壮,质量高,平均出根天数
为 7 d;在(10)上生根率为 65%,平均出根数为
3.0,根系质量粗壮,但质量不高,平均出根天
数为13 d。据上认为培养基(9)为最佳生根培养基。
4.4 试管苗移栽 将生根试管苗在自然光下炼苗约
20 d,等苗高约 2 cm 且木质化程度较高,即可
移栽。移栽时,取出小苗,洗去培养基,移植
于经 0.1% 高锰酸钾消毒过的大棚苗床上,浇透
水,保持一定的温度和湿度,成活率达 9 0 % 。
5 意义与进展 两面针为芸香科花椒属植物,是广
西地道大宗主产的药材之一,药用部位为根,具
有行气止痛、活血化瘀、祛风通络作用,主要
用于跌打损伤,风湿痹痛,胃痛、牙痛,毒蛇
咬伤。两面针药材来源一直都是依靠采集野生资
源,近年来野生资源日益减少。本文结果可能有
助于解决人工栽培的种苗问题。两面针的组织培
养快速繁殖尚未见报道。