全 文 ：书西北植物学报!
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文章编号$
#"""($"!)
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#
"%("$%&("*
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!"#
$
#"+,*"*
%
-
+.//0+#"""($"!)+!"#$+"%+"$%&
收稿日期$
!"#%(#!("*
&修改稿收到日期$
!"#$("%(",
基金项目$国家
1,%
(计划前期研究专项"
!"#!23,!!!"$
#
作者简介$杨
!
艺"
#1&1
#!女!在读硕士研究生!主要从事植物分子生物学研究)
4(56.7
$
)*%!!*"$1
!88
+9:5
"
通信作者$张富春!博士!教授!主要从事分子生物学与基因工程研究)
4(56.7
$
;<9=
-
>
!?
56.7+9:5
灰绿藜液泡膜焦磷酸酶基因的克隆及表达分析
杨
!
艺!徐
!
莉!张
!
霞!张富春"
"新疆大学 生命科学与技术学院!新疆生物资源基因工程重点实验室!乌鲁木齐
&%""$*
#
摘
!
要$采用同源克隆的方法!获得盐生植物灰绿藜的液泡膜焦磷酸酶基因"
!"#
#全长
9@AB
!命名为
#
$
!"#
)生
物信息学预测分析表明!
#
$
!"#
基因包含一个
!!1!C
D
的开放阅读框!编码
,*%
个氨基酸)
2
?
EF#
不仅具有与植
物液泡膜焦磷酸酶共有的氨基酸序列
@EGB@HEGIE4
!而且
2
?
EF#
与其它植物的
EF#
相似性达
&*J
)跨膜结
构域预测显示!
2
?
EF#
氨基酸序列含有
#!
个跨膜螺旋区!可能定位于细胞膜系统上)
KL(F2K
检测表明!
!""
55:7
%
HA627
条件下萌发生长的灰绿藜!再进行
&""55:7
%
HA627
胁迫处理
!$M
后!
#
$
!"#
基因表达显著增强)
不同浓度
I27
*
2627
!
*
N
?
27
!
分别处理
!$M
!
I27
和
N
?
27
!
浓度增高!
#
$
!"#
基因表达下降!
2627
!
则不影响
#
$
!"#
基因表达)研究结果表明!灰绿藜
#
$
!"#
基因表达对不同种类盐胁迫响应不同!
A627
胁迫可以上调
#
$
!"#
基因表达)该研究结果有助于阐明盐胁迫对盐生植物灰绿藜
#
$
!"#
基因表达的调控作用)
关键词$灰绿藜&液泡膜焦磷酸酶"
EF#
#&基因表达&盐处理
中图分类号$
O,&)
&
O,&*
文献标志码$
B
$%"&(&!)*
+
,--#"&.&(%
/
-#-"0123(45"%(,6
/
,"
+
2"-
+
2(1(-
7&0,"812)/&
3
&.-45
6
*$4"45
PBAGP.
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STBAGU>9M>0
"
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Q.0
-
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IV
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H6C:X6Y:X
W
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.0VVX.0
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!
Q.0
-
.60
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R0.(
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W
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8
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2M.06
#
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D
M:/
D
M6Y6/V
"
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#
D
M
W
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$
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1,- ]6/97:0VZC
W
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$
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D
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D
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#
V09:Z.0
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,*%65.0:69.Z
D
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D
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>V09V:<2
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EF#9:0Y6.0VZ@EGB@HEGIE4
!
69:0/V0/>/V//V
8
>V09V.0
D
760Y!"#
D
X:YV.0/+2
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EF#/M6XVZ5:XVYM60&*J/.5.76X.Y
W
].YMEF#/:YMVX
D
760Y/+LX60/5V5CX60VZ:56.0
D
XVZ.9Y.:0/M:]VZYM6Y2
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EF#9:0Y6.0VZ#!YX60/(5V5CX60VMV7.=XV(
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!
60Z/>C(9V7>76X7
W
7:967.;VZ.09V7>76X5V5CX60V/
W
/YV5+KL(F2KXV/>7Y//M:]VZYM6Y]MV0#2
$
./,0
1,-]6/YXV6YVZ].YM!""55:7
%
HA627Z>X.0
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YMV
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VX5.06Y.:060Z
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X:]YM
!
60ZYMV0YXV6YVZ].YM&""
55:7
%
HA627<:X!$M
!
YMVV=
D
XV//.:0:<#
$
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V0V]6//.
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0.<.960Y7
W
.09XV6/VZ9:5
D
6XVZY:YMV9:0YX:7
]M.9M]6/0:Y
D
XV(YXV6YVZ].YM!""55:7
%
HA627+` MV0#2
$
./,1,-]6/YXV6YVZ].YMZ.<Y.:0/:!
2627
!
60ZN
?
27
!
<:X!$M
!
XV/
D
V9Y.\V7
W
!
YMVV=
D
XV//.:0:<#
$
!"#]6/Z:]0XV
?
>76YVZ].YMYMV
.09XV6/V:?
27
!
!
]MVXV6/2627
!
Z.Z0:Y.0<7>V09VYMVV=
D
XV//.:0:<#
$
!"#+
LMV/VXV/>7Y/.0Z.96YVZYM6YYMVV=
D
XV//.:0/:<#
$
!"#XV/
D
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Y:Z.<WD
V/:YXV6Y5V0Y/
!
60ZA627/YXV//960.0Z>9V.Y/V=
D
XV//.:0+LM.//Y>Z
W
960MV7
D
Y:>0ZVX/Y60ZYMVXV
?
>76Y:X
W
<>09Y.:0:D
M
W
YV#2
$
./,1,->0ZVX/67Y/YXV//+
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/
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$
#%&(
)
(*+,-
$
./,1,-
&
\69>:76X
DW
X:
D
M:/
D
M6Y6/V
"
EF#
#&
?
V0VV=
D
XV//.:0
&
/67YYXV6Y5V0Y
!!
中国盐渍土总面积占全国可利用土地面积的
$+&&J
!盐渍化土壤能够严重影响农作物的产量+#,)
盐生植物受到盐胁迫!液泡膜上
A6
a
%
T
a逆向转运
蛋白能够将细胞质中过多的
A6
a区域化至液泡中!
降低细胞质中盐浓度!从而减轻对细胞器的毒害!提
高植物的耐盐性!因此!
A6
a的区域化分配是盐生植
物对盐渍环境适应的结果)而液泡膜上逆向转运蛋
白能够通过跨液泡膜的
T
a梯度来驱动转运+!(%,!并
且
T
a梯度的形成依赖于液泡膜上的
!
种质子泵$
T
a
(BLF
酶和
T
a
(
焦磷酸酶!它们分别以
BLF
和
焦磷酸为动力!将
T
a泵到胞外和液泡中!从而形成
T
a梯度+$,)研究表明植物细胞液泡膜焦磷酸酶
"
E69>:76X
DW
X:
D
M:/
D
M6Y6/V
!
EF#
#可利用焦磷酸为
动力将
T
a从细胞质转运至液泡内!从而产生电势
梯度+),)
随着分子生物学研究的不断深入!人们相继从
多种植物拟南芥*绿豆*陆地棉*盐地碱蓬*玉米*番
茄*盐穗木等克隆获得了
!"#
基因+*(#!,)
@>
D
:0Y
指出盐胁迫能够通过调节
!"#
基因表达和蛋白合
成促进
T
a 梯度形成+#%,)
6`0
?
等过量表达番茄
!"#
基因增加了番茄植株中离子向液泡膜的转运!
从而缓解盐胁迫对植株的伤害!增强番茄幼苗对盐
胁迫的耐性+#$,)由于不同环境条件或植物发育的
不同阶段中
!"#
基因表达水平主要是在转录水平
上进行调节的!从基因转录水平对
!"#
基因表达特
性进行探讨!有助于进一步阐明植物
!"#
基因的
功能)
藜科植物对盐碱*干旱和贫瘠等逆境的适应特
征!对改良盐渍化土壤有重要意义+#),)灰绿藜
"
#%&(
)
(*+,-
$
./,1,-
#为藜科一年生草本植物!
广泛分布于世界各地!能在干旱贫瘠的土地上生长!
属典型的干旱区盐生植物!在较高浓度的盐胁迫下
能正常完成其生活史)本实验通过灰绿藜细胞液泡
膜焦磷酸酶 "
#
$
!"#
#基因克隆以及盐胁迫下
#
$
!"#
基因表达变化的研究!探讨灰绿藜
#
$
!"#
在抗逆生理中发挥的作用)
#
!
材料和方法
<+<
!
植物材料
野生灰绿藜"
#%&(
)
(*+,-
$
./,1,-
#的种子采
自新疆乌鲁木齐市地区!收集后保存待用)
<=>
!
灰绿藜的
?($%
胁迫处理
选择籽粒饱满的灰绿藜种子均匀撒在用
#
%
&
N[
*
#
%
&N[a!""55:7
%
HA627
的营养液浸润的滤
纸上!使营养液刚刚没过种子!即种子在不同浓度
"*
!""55:7
%
H
#
A627
处理下萌发生长!待种子萌
发后
)Z
!将其转移至蛭石中!并用
#
%
&N[
和
#
%
&
N[a!""55:7
%
HA627
营养液隔
!Z
浇灌
#
次直
至成苗!再进行
&""55:7
%
HA627
胁迫处理
!$M
!
分别检测灰绿藜对照组*经
&""55:7
%
HA627
胁迫
处理
!$M
和
!""55:7
%
H
预处理再经
&""55:7
%
H
A627
盐胁迫处理
!$M
这
%
种处理组
#
$
!"#
基因
的表达差异)
<=@
!
灰绿藜液泡膜焦磷酸酶基因的克隆
<=@=<
!
灰绿藜
1
6
78<
基因核心片段的获得
!
根据
植物总
KAB
提取试剂盒"北京天根公司#操作说明
进行灰绿藜根的总
KAB
提取)依照
L6I6K6KAB
F2KI.Y
"
L6I6K6
#操作指南进行!以
_7.
?
:
"
ZL
#作
为引物进行反转录合成
9@AB
)根据已经报道的拟
南芥液泡膜焦磷酸酶基因的核苷酸序列"
GV0360b
登录号
N&#&1!+#
#!设计液泡膜焦磷酸酶基因的简
并上游引物"
)c(BLGGLGG2G22LG2LLLGLL(
%c
#和下游引物"
)c(G22BLBBG2LL GBL2BG
GBLGLL(%c
#!以
KAB
反转录产物
9@AB
为模板!
进行
KL(F2K
反应)
F2K
反应扩增参数为
1$d
预
变性
!5.0
&
1$d
变性
$)/
!
),+)d
退火
$)/
&
,!d
延伸
!5.0
!
%)
个循环&
,!d
延伸
#"5.0
!反应产物
进行琼脂糖凝胶电泳检测)
<=@=>
!
@A
末端快速克隆
!
根照
%c(U>7KB242:XV
[VY
"
L6I6K6
#操作指南!以灰绿藜根的总
KAB
为
模板!用
%c(KB24
接头引物进行反转录合成
9@(
AB
)根据已获得的核心片段设计
%c
上游特异性外
侧引 物 "
G[F#
#"
)c(GGBLB2BL2LGGB22BL(
2B2(%c
#和
%c
上游特异性内侧引物"
G[F!
#"
)c(
GB22BL2B2L2BB2BL22LG(%c
#)
F2K
反应首
先以
KAB
反转录产物
9@AB
为模板!使用
G[F#
和
%c(KB24
下游外侧引物进行
F2K
扩增!扩增参
数为
1$d
预变性
%5.0
&
1$d
变性
%"/
!
))d
退火
%"/
&
,! d
延伸
#5.0
!
!"
个循环&
,! d
延伸
#"
5.0
)而后以该产物为模板!使用
G[F!
和
%c(
KB24
下游内侧引物进行
F2K
扩增!扩增参数为
1$d
预变性
)5.0
&
1$d
变性
%"/
!
))d
退火
%"/
!
,!d
延伸
#5.0
!
%"
个循环&
,!d
延伸
#"5.0
!
F2K
反应产物进行琼脂糖凝胶电泳检测)
<=@=@
!
灰绿藜
1
6
78<
基因
4B?.
片段的克隆与测
序
!
按
F2KUX6
?
5V0YKV9:\VX
W
I.Y
"
L6I6K6
#说明
书进行
F2K
产物的回收)回收的片段与
D
N@#&(L
载体在
L$@AB
连接酶的作用下
#*d
过夜连接!连
1%$
%
期
!!!!!!!!!!!!
杨
!
艺!等$灰绿藜液泡膜焦磷酸酶基因的克隆及表达分析
接产物转化
321(.+@T)
"
感受态细胞"北京全式金
公司#!酶切鉴定出阳性克隆后!送北京六合华大基
因科技股份有限公司测序)
<=C
!
灰绿藜
$
D
36<
生物信息学分析
对灰绿藜
2
?
EF#
的氨基酸序列利用在线工具
376/Y
"
MYY
D
$%%
C76/Y+09C.+075+0.M+
?
:%
376/Y+9
?
.
#
和
@ABNBA
以及
N4GB$+"
+
#*
,软件!进行氨基酸
序列的序列比对和同源性分析)将
2
?
EF#
的氨基
酸序列输入
LNTNN[VX\VX\+!+"
"
MYY
D
$%%
]]]+
9C/+ZY>+Zb
%
/VX\.9V/
%
LNTNN
%#分析预测其蛋白
跨膜区域)将
2
?
EF#
的氨基酸序列输入
F/:XY
+
#,
,
软件"
MYY
D
$%%
D
/:XY+M
?
9+
-D
%
<:X5+MY57
#进行亚细胞
定位的分析预测)
<=E
!
灰绿藜的
:$%
*
$($%
>
和
F
D
$%
>
的胁迫处理
分别配制
#5:7
%
H
的
I27
*
2627
!
*
N
?
27
!
母液!
加入
#
%
&N[
营养液!使营养液终浓度分别是
I27
为
!""
*
$""
和
*""55:7
%
H
!
2627
!
为
#""
和
!""
55:7
%
H
!
N
?
27
!
为
#""
和
!""55:7
%
H
)待灰绿藜
长至
$
周龄时!用上述浓度盐溶液分别处理
!$M
!对
照为不加盐的
#
%
&N[
营养液处理
!$M
的灰绿藜)
<=G
!
灰绿藜
1
6
78<
基因表达检测
以不同浓度
A627
和不同盐处理下的灰绿藜
#
$
!"#9@AB
为模板!根据
9@AB
下游片段的特异
性!分别在
#
$
!"#
基因
_KU
下游区和
%c(RLK
区
设计上游引物"
)c(GB22BL2B2L2BB2BL22L(
%c
#和下游引物"
)c(L2BG22LLG22LL2LBB2G(
B2G(%c
#!以
!&[
"上游引物
)c(G22GB222LGBL(
2LL2LGLGB(%c
和下游引物
)c(LB222BBGL(
2BGB2GBB2GBLL(%c
#为参照基因)
F2K
反应
条件为
1$d
预变性
!5.0
&
1$d
变性
!"/
!
)$d
退
火
!"/
&
,!d
延伸
!"/
!
%)
个循环&
,!d
延伸
#"
5.0
!反应产物进行琼脂糖凝胶电泳检测)
!
!
结果与分析
>=<
!
灰绿藜
1
6
78<
基因克隆及氨基酸同源性分析
利用
KB24
技术克隆获得了灰绿藜液泡膜焦
磷酸酶基因"
#
$
!"#
!
@O$$%,%#+#
#!包含一个
!!1!
C
D
的开放阅读框!编码
,*%
个氨基酸残基)用
@ABNBA
软件对灰绿藜
2
?
EF#
的氨基酸序列和
其它植物
EF#
部分氨基酸序列进行比对"图
#
#!发
图
#
!
植物
EF#
氨基酸序列比对
红色方框部分为
EF#
与催化相关的保守序列
U.
?
+#
!
B
D
6XY.6767.
?
05V0Y:8
>V09V/:D
XVZ.9YVZEF#
LMVXVZC7:9bZ.6
?
X65./YMV9:0/VX\VZ/V
?
5V0Y60Z
D
>Y6Y.\V96Y67
W
Y.9/.YV:"$$
西
!
北
!
植
!
物
!
学
!
报
!!!!!!!!!!!!!!!!!!!
%$
卷
图
!
!
不同植物基于
EF#
氨基酸序列的系统进化树
分支上的数字表示
3::Y/YX6
D
验证中基于
#"""
次重复该节点的可信度&标尺表示演化距离
U.
?
+!
!
FM
W
7:
?
V0VY.9YXVV:D
760Y/C6/VZ:065.0:69.Z/V
8
>V09V/:LMV0>5CVX/:0YMVCX609MV/XV
D
XV/V0YYMVXV7.6C.7.Y
WD
VX9V0Y:D
/\67>V/C6/VZ:0#"""XV
D
7.96Y.:0/
&
[967V
D
76YVXV
D
XV/V0Y/YMVV\:7>Y.:0Z./Y609V:D
760Y/
现灰绿藜
2
?
EF#
的氨基酸序列也具有植物作为
EF#
的催化位点并且共有保守的氨基酸片段
@E(
GB@HEGIE4
)灰绿藜
2
?
EF#
氨基酸序列同源
性分析表明!其与拟南芥*盐角草*盐爪爪*盐穗木*
烟草*陆地棉*玉米*水稻的
EF#
氨基酸序列相似性
分别为
&,J
*
1%J
*
1%J
*
1"J
*
1"J
*
&1J
*
&*J
和
&*J
)运用
N4GB$+"
软件对
#!
种植物的
EF#
氨
基酸序列构建系统进化树"图
!
#!结果表明
2
?
EF#
与红叶藜
EF#
关系最近并在同一分支上)
>=>
!
灰绿藜
$
D
36<
蛋白的跨膜结构域预测和分析
跨膜结构域是膜内在蛋白与膜脂相结合的主要
部位!它固着于细胞膜上起锚定作用)通过
LN(
TNN[VX\VX\+!+"
工具"
MYY
D
$%%
]]]+9C/+ZY>+
Zb
%
/VX\.9V/
%
LNTNN
%#预测
2
?
EF#
的跨膜螺旋
区)预测结果显示!
2
?
EF#
氨基酸序列中存在
#!
个跨膜螺旋区!可推测
2
?
EF#
蛋白定位于细胞膜系
统!属于跨膜转运蛋白)
>=@
!
灰绿藜
$
D
36<
蛋白的亚细胞定位
应用
F/:XY
工具"
MYY
D
$%%
D
/:XY+M
?
9+
-D
%
<:X5+
MY57
#预测
2
?
EF#
的亚细胞定位"表
#
#!结果表明
其可能定位于细胞膜系统*内质网"膜#*高尔基体和
内质网"腔#)表
#
显示
2
?
EF#
定位于内质网"膜#
的概率最高!为
"+&!"
!定位于细胞质膜其次!为
"+*&)
!定位于高尔基体和内质网"腔#的概率较小)
表明
2
?
EF#
可能定位于细胞膜系统上!作为跨膜转
运蛋白在离子的调控运输中发挥重要作用)
>=C
!
不同浓度盐处理下
1
6
78<
基因的表达
对在不同
A627
浓度"*
!""55:7
%
H
#下萌发生
长的灰绿藜!再进行
&""55:7
%
HA627
不同方式的
胁 迫处理
!$M
!检测
#
$
!"#
基因表达情况)结果
表
<
!
$
D
36<
蛋白亚细胞定位
L6C7V#
!
[>C9V7>76X7:96Y.:0:<
D
X:9M
W
5:/.0:<2
?
EF#
亚细胞定位
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概率
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膜系统
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图
%
!
不同
A627
胁迫处理下灰绿藜
#
$
!"#
基因的表达
U.
?
+%
!
LMVV=
D
XV//.:0:<#
$
!"#>0ZVX
Z.<表明!与对照组相比较!未经
!""55:7
%
HA627
预处
理!直接受到
&""55:7
%
HA627
胁迫的灰绿藜!
#
$
!"#
基因表达受到明显抑制!而
!""55:7
%
H
A627
预处理后!再进行
&""55:7
%
HA627
胁迫的
灰绿藜!
#
$
!"#
基因的表达明显增强"图
%
#)
用不同浓度
I27
处理灰绿藜
!$M
后!检测灰绿
藜
#
$
!"#
基因的表达!结果表明!较低浓度"
!""
55:7
%
H
#
I27
不影响灰绿藜
#
$
!"#
基因的表达!
而较高浓度 "
$""
和
*"" 55:7
%
H
#
I27
则抑制
#
$
!"#
基因的表达"图
$
!
B
#)
用不同浓度
2627
!
处理灰绿藜
!$M
!检测灰绿
藜
#
$
!"#
基因表达情况!结果表明!灰绿藜
#
$
!"#
基因的表达基本不受
2627
!
影响!不同浓度
2627
!
处理后
#
$
!"#
基因的表达没有变化"图
$
!
3
#)
#$$
%
期
!!!!!!!!!!!!
杨
!
艺!等$灰绿藜液泡膜焦磷酸酶基因的克隆及表达分析
图
$
!
不同浓度
I27
"
B
#!
2627
!
"
3
#和
N
?
27
!
"
2
#处理
!$M
后灰绿藜
#
$
!"#
基因的表达
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!!
用不同浓度
N
?
27
!
处理灰绿藜
!$M
!检测灰绿
藜
#
$
!"#
基因表达情况!结果表明!灰绿藜
#
$
!"#
基因表达受
N
?
27
!
的影响很大!随着
N
?
27
!
浓度增
大!
#
$
!"#
基因的表达逐渐减弱"图
$
!
2
#)
%
!
讨
!
论
灰绿藜是广布的盐生植物!对环境的适应能力
强!能够耐受盐的胁迫)对克隆的
#
$
!"#
基因通
过生物信息学分析!明确了所获得的
2
?
EF#
蛋白不
仅具有植物液泡膜焦磷酸酶共有氨基酸序列
@E(
GB@HEGIE4
!而且
2
?
EF#
与其它植物的
EF#
相
似性达
&*J
!是跨膜蛋白)已有的研究表明
EF#
在植物生长发育过程通过调节激素运输对植物的生
理功能起调控作用!并且与植物的耐盐性密切相
关+#,(#1,)
G6=.:76
等+!",在盐敏感的
&/#
酵母突变
体中过量表达拟南芥液泡
4!"#!5
基因 的
&/#
菌株可以恢复耐盐性)
2:7:5C:
等+!#,研究表明
)"
55:7
%
HA627
处理的胡萝卜细胞!
"#
基因在
#"Z
内较对照增加
#
倍)
H.>
等+!!,在拟南芥中过表达角
碱蓬
!"
基因!盐胁迫下与野生型拟南芥相比在叶
和根中积累了更多的
A6
a
!并呈现耐盐性的增加)
本研究将灰绿藜种子在对照培养液"
#
%
&N[
#和添加
!""55:7
%
HA627
的培养液"
#
%
&N[a!""55:7
%
H
A627
#中分别萌发生长!再对正常成长的幼苗和经
过盐胁迫处理的幼苗!继续用高浓度的
A627
"
&""
55:7
%
H
#处理!结果显示后者的
#
$
!"#
基因的表
达明显增强!而不经盐胁迫预处理的灰绿藜幼苗在
高盐胁迫
!$M
后
#
$
!"#
基因的表达则明显受到抑
制!可以表明不经盐预处理的灰绿藜幼苗!在直接受
到
&""55:7
%
HA627
胁迫时!所引起的伤害致使
#
$
!"#
基因表达下降!幼苗的生长也受到了抑制!
从后续的植物生长状况弱小可直观看出来)而经过
盐预处理的灰绿藜幼苗即盐驯化后的幼苗在受到同
样的处理时!表现出
#
$
!"#
基因表达明显增加!说
明灰绿藜幼苗能够耐受盐胁迫而不影响其生长!同
时增加
#
$
!"#
基因的表达减缓盐胁迫造成的伤
害!从而体现了
#
$
!"#
基因的双重作用!不仅与灰
绿藜的生长相关!也与灰绿藜耐盐性提高有关!这表
明盐的驯化能够提高植物的耐盐性)
不同的盐类具有不同的金属离子!对不同盐离
子胁迫表现的
!"#
基因表达活性的研究!表明各种
金属离子在
!"#
基因发挥作用的信号通路中分别
起到不同的调控作用+!%(!$,)
26
!a在植物各种信号
通路中都起到了重要的作用!
T>60
?
等+!),研究表明
"+#55:7
%
H
的
26
!a能显著抑制
!"#
的活性)但
#
$
!"#
基因表达对
2627
!
并不敏感!说明其表达调
控可能是非
26
!a依赖性的)有研究表明
!"#
活性
尤其是
T
a转运活性的形成表现出对
I
a的绝对需
要+!*,!
HVV
等+!,,研究表明
)"55:7
%
H
的
I
a可以使
!"#
的活性提高
*
倍)但较高浓度的
I27
会抑制
!"#
的表达活性!推测这种抑制可能是由较高浓度
27
胁迫造成的&
M`.YV
等+!&,的研究表明
N
?
!a可以
增强
!"#
的活性!这与本研究结果
#
$
!"#
的表达
下降不一致!外加
N
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!a浓度
#
$
!"#
表达活性均受
到抑制!表现出
#
$
!"#
表达对
N
?
!a 的敏感性比
26
!a和
I
a高!表明
!"#
表达受盐离子调控因植物
种类不同尤其是盐生植物种类而表现出明显差异!
!"#
基因表达对不同盐离子的敏感性不同!也许会
影响不同的信号传导通路)研究灰绿藜
#
$
!"#
在
不同盐胁迫下的表达调控!有助于今后从离子转运
基因功能角度阐明灰绿藜耐盐的分子机理)
参考文献!
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