作 者 :丁玲 孟小林 徐进平 王健 鲁伟
期 刊 :西北植物学报 2005年 12期
关键词:hrpZ蛋白;高效表达;可溶性蛋白;超敏反应;
Keywords:hrpZ protein, high-efficiency expression, soluble protein, hypersensitive response,
摘 要 :PCR扩增hrpZ基因片段,克隆到pGEM-T载体中,经EcoRI/Xho1酶切、连接将hrpZ基因插人大肠杆菌表达载体pET32b(+)硫氧还蛋白下游,构建重组表达质粒pET-hrpZ,再将其转化至E.coli BL21(DE3)中,经筛选得到阳性克隆子,IPTG诱导表达HrpZ蛋白。SDS-PAGE显示,目的蛋白在重组菌株中得到了可溶性高效表达。该重组蛋白分子量为55.8kD,与理论值大小相符。采用叶片穿刺法,融合蛋白具有诱导烟草过敏反应的生物功能。