全 文 :书犇犗犐:10.11686/犮狔狓犫2015431 犺狋狋狆://犮狔狓犫.犾狕狌.犲犱狌.犮狀
殷雨洋,刘玉洁,张瑞阳,朱伟云,毛胜勇.高精料日粮下添加阿卡波糖对奶牛瘤胃及后肠发酵的影响研究.草业学报,2016,25(6):198203.
YINYuYang,LIUYuJie,ZHANGRuiYang,ZHUWeiYun,MAOShengYong.Theeffectofacarboseadditiononrumenandhindgutfermenta
tionindairycowsfedhighconcentratediets.ActaPrataculturaeSinica,2016,25(6):198203.
高精料日粮下添加阿卡波糖对奶牛
瘤胃及后肠发酵的影响研究
殷雨洋1,2,刘玉洁1,张瑞阳1,朱伟云1,毛胜勇1
(1.南京农业大学动物科技学院,江苏 南京210095;2.湖州市农业科学研究院湖羊研究所,浙江 湖州313000)
摘要:本试验旨在探讨高精料日粮下添加阿卡波糖对奶牛瘤胃和后肠发酵的影响。试验选用3头干奶期荷斯坦奶
牛,采用3×3拉丁方试验设计,阿卡波糖添加剂量为0,0.5和1.0g/d,试验分3期进行,每期21d。结果表明,与
对照组比较,添加阿卡波糖显著降低了奶牛瘤胃液中丙酸浓度(犘<0.05),提高了乙丙比(犘<0.05),但对瘤胃pH
值、乳酸、乙酸、异丁酸、丁酸、异戊酸、戊酸、总挥发性脂肪酸和氨氮浓度无显著影响(犘>0.05);与对照组比较,添
加阿卡波糖显著降低了粪便pH值和氨氮浓度(犘<0.05),提高了乳酸、丁酸和异戊酸浓度(犘<0.05),但对乙酸、
丙酸、异丁酸、戊酸、总挥发性脂肪酸和乙丙比无显著影响(犘>0.05)。结果说明,高精料日粮下长期添加阿卡波糖
虽可影响瘤胃液中个别挥发性脂肪酸的浓度,但对瘤胃整体发酵和瘤胃pH值无显著影响,此外,添加阿卡波糖可
增加后肠发酵,并可能对后肠健康带来潜在危害。
关键词:阿卡波糖;奶牛;瘤胃;后肠;挥发性脂肪酸
犜犺犲犲犳犳犲犮狋狅犳犪犮犪狉犫狅狊犲犪犱犱犻狋犻狅狀狅狀狉狌犿犲狀犪狀犱犺犻狀犱犵狌狋犳犲狉犿犲狀狋犪狋犻狅狀犻狀犱犪犻狉狔犮狅狑狊犳犲犱
犺犻犵犺犮狅狀犮犲狀狋狉犪狋犲犱犻犲狋狊
YINYuYang1,2,LIUYuJie1,ZHANGRuiYang1,ZHU WeiYun1,MAOShengYong1
1.犜犺犲犆狅犾犾犲犵犲狅犳犃狀犻犿犪犾犛犮犻犲狀犮犲犪狀犱犜犲犮犺狀狅犾狅犵狔,犖犪狀犼犻狀犵犃犵狉犻犮狌犾狋狌狉犪犾犝狀犻狏犲狉狊犻狋狔,犖犪狀犼犻狀犵210095,犆犺犻狀犪;2.犎狌狕犺狅狌犃犮犪犱犲
犿狔狅犳犃犵狉犻犮狌犾狋狌狉犪犾犛犮犻犲狀犮犲狊,犎狌狕犺狅狌313000,犆犺犻狀犪
犃犫狊狋狉犪犮狋:Inthisstudy,threecannulatedHolsteincows(590±48kgliveweight)wereusedtoinvestigatethe
effectofacarbose(glucosidaseinhibitor)addition(0,0.5and1.0g/d)onruminalandhindgutfermentation
characteristicsina3×3Latinsquaredesign.Theresultsshowedthatacarboseadditiondecreasedthepropio
nateconcentrationinrumenfluid(犘<0.05),increasedtheratioofacetatetopropionate(犘<0.05)butdid
notaffecttheconcentrationsoflactate,acetate,isobutyrate,butyrate,isovalerate,valerate,totalvolatilefatty
acid,ammonianitrogen,andpHvaluecomparedwiththecontrol(犘>0.05).Acarboseadditiondecreasedthe
pHvalueandammonianitrogenlevels(犘<0.05)andincreasedtheconcentrationsoflactate,butyrate,
isovalerate(犘<0.05)infeces,butnodifferenceswereobservedintheconcentrationofacetate,propionate,
isobutyrate,valerate,totalvolatilefattyacidandtheratioofacetatetopropionateamongthethreegroups.In
general,ourdatarevealedthatacarboseadditionmaynotbeusefulforpreventingtheoccurrenceofruminalaci
dosisinthelongterm.Additionaly,acarboseadditionmayincreasehindgutfermentationandproducedetri
198-203
2016年6月
草 业 学 报
ACTAPRATACULTURAESINICA
第25卷 第6期
Vol.25,No.6
收稿日期:20150909;改回日期:20151109
基金项目:国家“973”奶业项目(2011CB100801)资助。
作者简介:殷雨洋(1987),男,安徽阜阳人,助理畜牧师,硕士。Email:yinyuyang@163.com
通信作者Correspondingauthor.Email:maoshengyong@163.com
mentaleffectsonthehindguthealthofdairycattle.
犓犲狔狑狅狉犱狊:acarbose;diarycows;rumen;hindgut;volatilefattyacid
在现代奶牛生产中,为提高奶牛产奶性能和经济效益,生产者常在奶牛日粮中使用高比例精料,但大量使用
精料易导致瘤胃内挥发性脂肪酸(volatilefattyacid,VFA)和乳酸等累积,pH 值快速下降,结果诱发瘤胃酸中
毒[1]。瘤胃酸中毒可分为急性酸中毒(acuteruminalacidosis,ARA)和亚急性酸中毒(subacuteruminalacidosis,
SARA),其中SARA在生产中较为常见。有研究显示,即使在美国管理较严格的奶牛场,早期泌乳牛患SARA
的比例约为19%,中期泌乳牛SARA发病率甚至高达26%[2]。由于该病临床症状不明,同时该病常造成其他继
发性疾病如蹄叶炎、腹泻和肝脓肿等的发生[38]。因此,该病已成为影响奶牛生产效益的主要疾病之一。近年来,
许多营养措施被用于防治奶牛瘤胃酸中毒发生,具体包括:增加物理有效纤维含量;降低饲料中谷物类饲料的比
例;使用缓冲剂、添加酵母培养物和应用莫能霉素[910]。这些方式在生产中虽取得了较显著的效果;但也表现出
一些负面效应,如提高物理有效纤维的用量可导致日粮能量浓度下降,最终导致奶牛产奶性能下降;而缓冲剂存
在降低瘤胃pH的作用时间短暂的问题;而应用莫能菌素虽可预防SARA的发生,但也带来瘤胃微生物耐药性
增加和瘤胃纤维降解率下降的风险[11]。因此,寻找新的酸中毒预防措施,已成为当前反刍动物营养研究领域的
一个热点问题。
近年来,一些学者发现,使用阿卡波糖等α葡糖苷酶和α淀粉酶抑制剂可有效控制和缓解奶牛急性瘤胃酸
中毒发生[12];同时可提高采食量和乳脂校正奶产量[13]。我们在以前的体外实验中也发现,阿卡波糖可显著提高
发酵体系中瘤胃pH值[14],但长期饲喂阿卡波糖的效果如何,并不清楚。此外,有报道显示[15],在治疗人糖尿病
过程中,阿卡波糖虽可有效控制人小肠内碳水化合物的降解速度,但同时也提高了后肠中淀粉数量,进而促进了
微生物发酵;由于后肠健康对奶牛生产十分关键,阿卡波糖在影响瘤胃碳水化合物的降解的同时,是否会增加奶
牛后肠消化道负担,并不清楚。由此,本试验基于以上
进展,研究了在高精料日粮下添加阿卡波糖对奶牛瘤
胃及后肠发酵的影响,拟进一步明确阿卡波糖对奶牛
瘤胃与后肠发酵的实际影响效果。
1 材料与方法
实验于2013年11月到2014年1月在南京农业
大学江浦实验基地进行。
1.1 实验动物及日粮
本试验选用3头干奶期装有永久性瘤胃瘘管的健
康多胎奶牛为试验动物,单槽饲喂,自由饮水,每天
8:00和16:00进行饲喂,体重为(590±48)kg。基础
饲粮精粗比为65∶35,满足中国农业行业标准(NY/
T342004)推荐的营养需求,日粮配方及营养水平见
表1。
1.2 试验试剂
阿卡波糖(Acarbose)为美国Bayer公司生产,用
于治疗Ⅱ型糖尿病的药物。
1.3 试验设计
试验采用3×3拉丁方设计,分3期进行,每期21
d。在正式试验前预饲10d。正式试验前1d对奶牛
称重。阿卡波糖添加剂量为0,0.5和1.0g/d。
表1 日粮配方及营养水平
犜犪犫犾犲1 犐狀犵狉犲犱犻犲狀狋犪狀犱狀狌狋狉犻犲狀狋犾犲狏犲犾狊狅犳狋犺犲犱犻犲狋狊
日粮组成
Ingredients
含量
Percentage
(%)
营养成分
Nutrients
composition
含量
Percentage
(%)
玉米 Maizegrain 25 粗蛋白质
Crudeprotein
13.78
小麦 Wheat 20
麸皮 Wheatbran 5.0 瘤胃降解蛋白 Rumen
degradableprotein
8.73
豆粕Soybeanmeal 11.5
碳酸钙
Calciumcarbonate
0.8 中性洗涤纤维Neutral
detergentfiber
27.36
磷酸氢钙Calcium
hydrophosphate
1.2 非纤维性碳水化合物
Nonfibercarbohydrate
46.28
食盐Sodiumchloride 0.5 钙Calcium 0.85
添加剂Premix[1] 1.0 磷Phosphorus 0.62
青贮玉米Cornsilage 15 粗灰分Crudeash 4.77
羊草Chinesewildry 10 粗脂肪Etherextract 3.50
苜蓿干草 Alfalfahay 10
总计 Total 100
[1]每kg添加剂包括Thepremixcontainsperkilogram:Fe5500mg,
Cu4080mg,Zn17500mg,Mn4980mg,Se110mg,I180mg,Co
88.5mg,VA>2000000IU,VD3600000IU,VE10800mg.
991第25卷第6期 草业学报2016年
1.4 样品采集与分析
1.4.1 干物质采食量的测定 在每期的第18,19和20天,分别对饲喂量和剩余料量进行称重,取样测定干物
质重,计算干物质采食量。
1.4.2 瘤胃和后肠发酵参数的测定 在每期的第18,19和20天,分别采集饲喂阿卡波糖后0和2h瘤胃内
容物,并在晨饲前直肠采集300g粪便;在每期第21天采集饲喂阿卡波糖后0,2,4,6,8,10和12h的瘤胃内容
物。所采集瘤胃内容物经4层纱布过滤获得瘤胃液,立即测定瘤胃液和粪便pH值。取200g粪便与200mL去
离子水混合均匀后,15000r/min下离心,取上清液于-20℃冻存备用。采用比色法测定瘤胃液和粪便中乳酸[16]
和氨氮浓度[17],采用气相色谱法 (GC14B气相色谱仪,日本岛津,柱温110℃,气化室温度180℃,检测室温度
180℃)测定挥发性脂肪酸 (volatilefattyacid,VFA)浓度[18]。
1.5 数据处理
试验各期数据采用SPSS(17.0)软件中GLM 模型中 Multivariate程序进行主效应分析,以牛体重为协变
量,当阿卡波糖的处理效应达显著水平时,对阿卡波糖各处理间的差异进一步进行多重比较,多重比较采用LSD
法。显著性水平为犘<0.05。
2 结果与分析
图1 添加阿卡波糖对奶牛干物质采食量的影响
犉犻犵.1 犈犳犳犲犮狋狊狅犳犪犮犪狉犫狅狊犲犪犱犱犻狋犻狅狀狅狀狋犺犲
犱狉狔犿犪狋狋犲狉犻狀狋犪犽犲狅犳犱犪犻狉狔犮狅狑狊
2.1 添加阿卡波糖对奶牛干物质采食量的影响
图1为添加阿卡波糖对奶牛干物质采食量的影
响。与对照组比较,添加阿卡波糖有提高奶牛干物质
采食量的趋势(犘<0.1)。
2.2 添加阿卡波糖对奶牛瘤胃发酵的影响
由表2可见,较对照组相比,添加阿卡波糖显著降
低了瘤胃液中丙酸含量(犘<0.05),提高了乙丙比
(犘<0.05),但对瘤胃pH、乳酸、乙酸、异丁酸、丁酸、
异戊酸、戊酸、总挥发性脂肪酸(totalvolatilefatty
acid,TVFA)和氨氮浓度无显著影响(犘>0.05)。饲
表2 添加阿卡波糖对瘤胃微生物发酵的影响
犜犪犫犾犲2 犈犳犳犲犮狋狊狅犳犪犮犪狉犫狅狊犲犪犱犱犻狋犻狅狀狅狀狋犺犲犳犲狉犿犲狀狋犪狋犻狅狀犻狀狉狌犿犲狀狅犳犱犪犻狉狔犮狅狑狊
指标Index
阿卡波糖Acarbose(g/d)
0 0.5 1.0
标准误
SEM
显著性Significance(犘)
处理效应Acarbose 周期Period 互作效应Acarboseperiod
pH 6.43 6.48 6.47 0.038 0.687 0.020 <0.001
乳酸Lactate(mmol/L) 1.46 1.38 1.40 0.139 0.898 0.089 0.941
乙酸Acetate(mmol/L) 67.84 65.14 68.34 1.644 0.345 0.002 0.072
丙酸Propionate(mmol/L) 19.10 17.21 17.09 0.587 0.035 <0.001 <0.001
异丁酸Isobutyrate(mmol/L) 1.15 1.18 1.14 0.037 0.718 <0.001 0.247
丁酸Butyrate(mmol/L) 12.39 12.43 12.96 0.475 0.642 0.010 <0.001
异戊酸Isovalerate(mmol/L) 2.13 2.33 2.08 0.146 0.443 0.226 0.159
戊酸Valerate(mmol/L) 1.46 1.53 2.10 0.261 0.182 0.535 0.625
乙/丙A/P 3.55b 3.79b 4.00a 0.079 0.006 <0.001 <0.001
总挥发性脂肪酸TVFA(mmol/L)104.07 99.81 103.70 2.610 0.449 0.001 0.018
氨氮NH3N(mmol/L) 11.65 10.40 9.52 0.655 0.083 0.184 0.025
SEM,standarderrorofthemean;A/P,ratioofacetatetopropionate;TVFA,totalvolatilefattyacid.不同字母表示差异显著(犘<0.05)。Val
ueswithdifferentlettersmeansignificantlydifference(犘<0.05).下同。Thesamebelow.
002 ACTAPRATACULTURAESINICA(2016) Vol.25,No.6
喂期对瘤胃pH值、乙酸、丙酸、异丁酸、丁酸和TVFA浓度及乙丙比有显著影响(犘>0.05);在对瘤胃pH值、丙
酸、丁酸、TVFA、氨氮浓度和乙丙比的影响上,饲喂期和阿卡波糖剂量之间有显著的互作效应(犘<0.05)。
2.3 添加阿卡波糖对奶牛瘤胃发酵指标动态变化的影响
较对照组相比,添加阿卡波糖对瘤胃pH的动态变化无显著影响(犘>0.05),但在饲喂后0~4h期间,添加
阿卡波糖可减缓瘤胃pH值下降速率,提高最低瘤胃pH值;添加阿卡波糖对乙酸、丙酸和丁酸浓度的动态变化
无显著影响(犘>0.05)。与对照组相比,添加阿卡波糖对总挥发性脂肪酸浓度、乙丙比和乳酸浓度的动态变化无
显著影响(犘>0.05)。此外,添加阿卡波糖显著降低了瘤胃氨氮浓度(犘<0.05)(图2)。
图2 添加阿卡波糖对奶牛瘤胃狆犎值、犞犉犃、乳酸、氨氮浓度及乙丙比动态变化的影响
犉犻犵.2 犈犳犳犲犮狋狊狅犳犪犮犪狉犫狅狊犲犪犱犱犻狋犻狅狀狅狀犮犺犪狀犵犲狊犻狀狋犺犲狉狌犿犻狀犪犾狆犎,狋犺犲犮狅狀犮犲狀狋狉犪狋犻狅狀狊狅犳
犞犉犃,犾犪犮狋犪狋犲犪狀犱犖犎3犖,犪狀犱狋犺犲狉犪狋犻狅狅犳犪犮犲狋犪狋犲狋狅狆狉狅狆犻狅狀犪狋犲
102第25卷第6期 草业学报2016年
2.4 添加阿卡波糖对奶牛后肠发酵的影响
与对照组相比,添加阿卡波糖显著降低了后肠pH值和氨氮水平(犘<0.05),显著提高了乳酸、丁酸和异戊
酸浓度(犘<0.05),但对乙酸、丙酸、异丁酸、戊酸、TVFA浓度及乙丙比没有显著(犘>0.05)影响。饲喂期对瘤
胃pH值、乳酸、丙酸和丁酸浓度有显著影响(犘<0.05),阿卡波糖剂量和饲喂周期对pH值、丁酸和异戊酸浓度
亦有显著的互作效应(犘<0.05)(表3)。
表3 添加阿卡波糖对奶牛后肠发酵的影响
犜犪犫犾犲3 犈犳犳犲犮狋狊狅犳犪犮犪狉犫狅狊犲犪犱犱犻狋犻狅狀狅狀狋犺犲犺犻狀犱犵狌狋犳犲狉犿犲狀狋犪狋犻狅狀犻狀犱犪犻狉狔犮狅狑狊
指标Index
阿卡波糖Acarbose(g/d)
0 0.5 1.0
标准误
SEM
显著性Significance(犘)
处理效应Acarbose 周期Period 互作效应Acarboseperiod
pH 7.02a 6.67b 6.60b 0.059 0.001 <0.001 0.003
乳酸Lactate(mmol/g) 1.95b 2.08b 2.77a 0.133 0.002 0.047 0.089
乙酸Acetate(mmol/g) 53.27 59.99 61.41 5.050 0.497 0.869 0.362
丙酸Propionate(mmol/g) 10.21 9.88 11.36 0.498 0.128 0.007 0.438
异丁酸Isobutyrate(mmol/g) 0.48 0.68 0.64 0.066 0.110 0.345 0.051
丁酸Butyrate(mmol/g) 8.11b 14.54a 15.44a 0.971 <0.001 0.046 0.011
异戊酸Isovalerate(mmol/g) 0.44b 0.81a 0.70a 0.059 0.003 0.060 0.002
戊酸valerate(mmol/g) 0.55 0.65 0.42 0.081 0.182 0.891 0.762
总挥发性脂肪酸TVFA(mmol/g) 73.07 86.55 89.98 6.417 0.186 0.514 0.228
氨氮NH3N(mmol/g) 11.11a 7.54b 6.65b 0.855 0.007 0.239 0.052
3 讨论
随着我国奶牛饲养规模的不断增大与集约化程度的不断提高,以及生产者对经济效益的过度追求,因大量饲
喂高精料日粮而诱发的瘤胃健康紊乱问题已严重影响到我国一些牧场的正常生产。研究发现[1920],高精料日粮
易导致瘤胃pH值过低,进而引发瘤胃内代谢紊乱。因此,如何有效提高瘤胃pH值,对于防止瘤胃过酸带来的
健康隐患意义巨大。Speight和Harmon[21]体外研究发现,添加阿卡波糖能有效防止瘤胃pH下降、TVFA和乳
酸累积,进而有效控制和缓解急性瘤胃酸中毒的发生。Speight等[22]报道,阿卡波糖可能通过降低瘤胃内淀粉的
降解速度来起到预防酸中毒的作用。与上述报道不一致,本试验结果表明,添加阿卡波糖虽可显著降低瘤胃中丙
酸含量,提高乙丙比,但对瘤胃pH值、氨氮、乳酸和总挥发性脂肪酸浓度无显著影响;此外,对瘤胃pH值动态变
化数值的统计结果显示,阿卡波糖对瘤胃pH值也无显著效果。该结果暗示,长期饲喂阿卡波糖不能有效提高瘤
胃pH,暗示其在预防奶牛瘤胃亚急性酸中毒方面的作用效果有限。本研究表明,尽管阿卡波糖对瘤胃和后肠大
多指标影响不显著,但饲喂期对多项指标有显著影响;而且在多项指标上,饲喂期和阿卡波糖剂量之间有显著的
互作效应。我们推测,出现上述结果的根本原因可能在于阿卡波糖在影响微生物发酵方面的短暂效应,即动物初
次使用阿卡波糖可能存在一定效果,但长期使用则效果减弱或消失,原因可能在于瘤胃微生物种类十分丰富,长
期添加阿卡波糖使部分瘤胃微生物对其产生了适应,进而使其生物学效应下降,但该推测仍需试验验证。
近年来,对阿卡波糖的相关研究主要关注于其对瘤胃发酵的影响,对后肠消化有何具体影响,仍不清楚。
Nordlund等[3]报道,饲喂高精料日粮除可显著影响瘤胃健康外,还可促进后肠发酵,导致后肠食糜pH值降低,
进而可能引发气泡粪和腹泻产生。本试验结果显示,饲喂阿卡波糖显著降低了后肠pH值和氨氮浓度,提高了乳
酸、乙酸、丁酸和异戊酸的浓度。试验结果说明,应用阿卡波糖加重了奶牛后肠道的消化负担,可能对奶牛后肠道
健康造成危害。其原因可能与阿卡波糖抑制了奶牛小肠淀粉酶活性,导致奶牛小肠淀粉消化率下降,最终进入奶
牛后肠中的淀粉数量增加,进而使奶牛后肠微生物发酵增强,导致部分VFA浓度增加,pH值下降。
综上所述,奶牛日粮中长期添加阿卡波糖对瘤胃pH值、乳酸和TVFA浓度未产生显著影响,但显著降低了
后肠pH值,提高了乳酸含量。因此,高精料日粮下长期添加阿卡波糖不能改善奶牛瘤胃健康,并可能增加奶牛
后肠发酵,影响奶牛后肠健康。
202 ACTAPRATACULTURAESINICA(2016) Vol.25,No.6
犚犲犳犲狉犲狀犮犲狊:
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302第25卷第6期 草业学报2016年