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Selection of Appropriate Explants for Multiplication,Shoot and Root Induction in Tissue Culture of Daemonorops margaritae

黄藤继代增殖培养和成苗的繁殖体选择



全 文 :  1996—08—29收稿。
刘英工程师,曾炳山,尹光天(中国林业科学研究院热带林业研究所 广州 510520)。
* 本项研究为“八五”国家攻关“棕榈藤种苗快速繁殖工艺研究”专题的内容之一,许煌灿研究员对本文作了详尽的修正
和指导,特此致谢!
黄藤继代增殖培养和成苗的繁殖体选择*
刘 英 曾炳山 尹光天
  摘要 试验结果表明, 黄藤组培生长健壮、形态正常的不同高度繁殖体,在继代增殖培养和成
苗培养过程中, 其间存在显著差异; 母芽和子芽增殖培养过程中,亦存在着显著差异。高度为 1. 1~
2. 0 cm 的子芽为继代增殖培养的最适繁殖体; 高度在 2. 1~4. 0 cm 的未展叶芽体为伸长培养的理
想繁殖体, 4 cm 以上的繁殖体最适于生根诱导。
  关键词 黄藤 组织培养 繁殖体选择
  黄藤( Daemonor op s mar garitae ( Hance) Becc. ] , 又名红藤,属棕榈科丛生攀缘藤本植物,
是我国主要商品藤种之一, 具有较高的经济价值。许煌灿等已对黄藤的生物学和生态学特性及
栽培技术进行了深入研究[ 1~3]。随着社会对藤产品需要的日益增长,人工栽培已成为发展资源
的有效途径。然而,种质资源严重短缺,研究种苗快繁技术, 生产优良种苗已迫在眉睫。80年
代,国内外研究者相继开展棕榈藤的组织培养研究, 并取得一定的进展[ 4, 5]。张方秋报道了白藤
( Calamus tet radacty lus Hance)等对 3个藤种的组织培养研究结果, 育出试管丛芽苗,移植大
田成功[ 6]。作者曾于 1996年报道了黄藤和单叶省藤( Calamus simp licif ol ius Wei)等多个藤种
继代培养增殖和成苗过程的特性 [ 7]。为了完善黄藤种苗快繁工艺技术,实现规模生产, 安排了
黄藤继代增殖和成苗的繁殖体选择试验,选择继代增殖和伸长培养及生根诱导的最适繁殖体。
1 试验材料和方法
1. 1 试验材料
以 1992年采集于广东省高州市伦道藤场的种胚为外植体,经胚培养和 7代增殖培养后生
长健壮、形态正常的繁殖体为试验材料。
1. 2 方法
1. 2. 1 培养基 采用增殖培养基RA1、伸长培养基 RA 0和生根诱导培养基 SG 2 ,为自行研制
的黄藤专用培养基。
1. 2. 2 增殖培养 经过一次增殖培养的繁殖体芽为“母芽”, 上一次增殖培养新产生的芽为
“子芽”。开展以下 3项繁殖体选择实验:
试验 1:不同苗高的繁殖体芽增殖效果,按芽苗高度将繁殖体划分成: A 组 0. 5~1. 0 cm,
B组 1. 1~2. 0 cm , C组 2. 1~4. 0 cm ,采用单因素完全随机试验设计。
试验 2:“母芽”和“子芽”培养效果。
林业科学研究 1998, 11( 2) : 152~155
Forest Research     
试验 3:以“母芽”为繁殖体的剪根处理的培养效果, 对已生根的芽苗繁殖体进行剪根处
理,并观测其芽苗伸长情况。
以上各组实验观察,样本数> 30个,重复数> 20次。培养 1个月后,调查各处理繁殖体其
各代增殖培养的增殖芽数。
1. 2. 3 伸长培养 同增殖培养试验 1,按芽苗高度将繁殖体分成 3组,连续培养观测 2个月,
调查伸长情况。
1. 2. 4 生根诱导培养 按芽苗高度将其分成 3组: D 组 1. 1~2. 0 cm , E 组 2. 1~4. 0 cm, F
组> 4 cm。连续培养观测 3个月, 统计生根、生长和萌芽等情况。
1. 2. 5 资料统计分析 按常规统计方法, 计算各观测指标值,对生根率作反正弦变换;对增殖
芽倍数和生根条数作平方根变换后, 再进行方差分析及 L SD 检验,比较各处理的差异。
2 结果分析
2. 1 增殖培养的最适繁殖体选择
不同苗高繁殖体选择试验结果表明: B 处理, 即苗高 1. 1~2. 0 cm 组,繁殖体的增殖芽最
多,增殖倍数最高,为原繁殖体芽数的 6. 4倍, A 处理的繁殖体次之,而 C 处理,即苗高> 4 cm
的繁殖体,增殖芽最少,增殖倍数最低。方差分析和 L SD 检验结果表明,处理间繁殖体的增殖
芽倍数呈极显著差异(表 1)。由此可见,黄藤增殖培养, 应选择 1. 1~2. 0 cm 高度的芽苗为繁
殖体。
表 1 不同芽苗高度繁殖体在增殖培养中增殖倍数的方差分析和 L SD 差异显著性检验( 1 个月)
变异来源  自由度 均方 均方比 F 组别 平均增殖芽倍数 相似组
繁殖体高度 2 1. 473 7. 410* * * LSD ( p = 95% ) B 6. 4  a
误 差 66 0. 199 差异显著性检验 A 5. 8   b
总 和 68 C 3. 8    c
  母芽和子芽的增殖培养对比试验结果表
明:子芽的增殖芽倍数为 8. 3,显著高于母芽
的增殖芽倍数 4. 9(表 2)。培养过程还观察
到:母芽呈黄绿至青绿色,约 60%的繁殖体,
母芽进入高生长, 增殖芽个数很少; 仅 10%
的繁殖体经大量增殖后死亡。而子芽,新萌芽
多,呈青绿色,幼嫩,其肥大的母芽基部常形
 表 2 不同芽苗类型(母芽和子芽 )对增殖倍数的
影响( 1 个月)
变异
来源 自由度 均方 
均方比
F
平均增殖芽倍数
上代芽 当代芽
芽苗类型 1 6. 997 19. 219* * * 4. 9 8. 3
误 差 58 0. 361 
总 和 59
成白色愈伤组织; 个别新芽叶片大,且显现变形或结构疏松。单一母芽一般不增殖,仅伸长或维
持生命,甚至于死亡。此外,繁殖体芽苗高度,随着增殖培养次数的增加而增高,经一次增殖培
养后的繁殖体芽,高度为 1. 25 cm, 两次增殖培养后, 高度达到 1. 72 cm, 3次培养的高达 2. 36
cm ,适合伸长培养。
  继代增殖培养过程中, 未生根与已生根繁殖体, 经剪根处理后,再次继代增殖培养,无论是
增殖芽倍数, 还是母芽高生长均未达到显著差异。因此, 在继代增殖培养中, 已生根的繁殖体,
经剪根处理后,可继续作为增殖繁殖体。
1532 期        刘 英等: 黄藤继代增殖培养和成苗的繁殖体选择
2. 2 伸长培养的繁殖体选择
3组不同高度的繁殖体连续伸长培养 2个月,观察结果表明,芽高 2. 1~4. 0 cm 的 C组繁
殖体,其芽苗伸长速度最快,平均净伸长 1. 83 cm,其次是芽高 1. 1~2. 0 cm 的 B组繁殖体, 平
均净增长 1. 28 cm ,而芽苗高度为 0. 5~1. 0 cm 的 A 组繁殖体表现最差,仅伸长 0. 94 cm。方
差分析结果表明, 3组不同高度芽苗繁殖体,月净伸长指标均达到极显著差异, 其中, C 组繁殖
体芽苗的伸长显著高于 A 和B 组繁殖体(表 3)。因此,建议伸长培养应选择高度2. 1~4. 0 cm
的芽苗为伸长培养繁殖体。
表 3 不同芽苗高度繁殖体抽高培养效果的方差分析和 L SD 差异显著性检验( 2 个月)
变异来源 自由度 均方 均方比 F 组别 平均净伸长( cm ) 相似组
繁殖体高度 2 3. 870 8. 148* * * LSD ( p = 95% ) C 1. 83  a
误 差 66 0. 475 差异显著性检验 B 1. 28   b
总 和 68 A 0. 94    c
2. 3 生根诱导的繁殖体选择
图 1 不同芽苗高度繁殖体组在生根诱导中其生根
速率 a、生根条数 b和根系生长 c的变化规律
  3组不同高度的繁殖体生根培养 3个月,
观察结果表明(图 1) ,繁殖体芽体高,其出根速
率亦高,生根多,根系生长快。对生根速率、生根
条数和根长 3项观测指标值进行方差分析,结
果发现, 培养 1个月生根速率即达到极显著差
异, D组繁殖体的生根速率显著低于 E 和 F 组
繁殖体,培养 2个月,差异则不显著; 3个月后,
各组繁殖体的生根速率趋同,约为 96%。由此
可见,繁殖体高度对生根速率影响很大,以芽苗
高度 4 cm 以上的 F 组繁殖体和芽苗高度 2. 1
~4. 0 cm 的 E 组繁殖体作生根诱导,能缩短生
根诱导时间, 提早成苗。
  各组繁殖体生根条数在第一个月即达到显
著差异,生根条数最多的是 F 组繁殖体, 同生
根速率一样,这种差异随着培养时间的延长而
减小。但到第 3个月, F 组繁殖体仍保持有最多
的生根条数。因此,在生根培养中,要获得生根
多、速度快的繁殖体, 应选择芽苗高度在 4 cm
以上的繁殖体,高度为 2. 1~4. 0 cm 的繁殖体
也可用于生根诱导。
各组繁殖体的根系生长在第一个月内即达
到极显著差异。根系生长最快的是F 组繁殖体,其长度显著高于D 和E 组繁殖体。同样,这种
差异随着培养时间的延长而缩小, 但到第三个月时, F 组繁殖体的根系仍显著优于 D 和 E 组
繁殖体。可见,生根培养过程中,不同高度繁殖体对生根数量和根系长度影响很大,高度在 4
154 林 业 科 学 研 究               11 卷
cm 以上的繁殖体能快速生根,且根系生长快,提早达到壮苗标准。
3 小  结
  ( 1)黄藤继代增殖培养,以生长健壮、形态正常的 1. 1~2. 0 cm 的子芽繁殖体作为继代培
养材料较佳; 已分化成苗,经剪根处理后,仍可作为增殖繁殖体。
( 2)高度在 2. 1~4. 0 cm 的繁殖体,芽苗伸长速度最快,为伸长培养理想繁殖体。
( 3)高度为4. 0 cm 以上的繁殖体出根速率最高,生根条数最多, 根系生长也最快。因此,生
根诱导培养时,应选择高于 4 cm 的芽苗作为繁殖体。
参 考 文 献
  1 尹光天,许煌灿.黄藤种子储藏条件的初步研究.林业科学研究, 1992, 5( 3) : 347~350.
  2 尹光天,许煌灿,张伟良.黄藤苗木施肥量的研究.林业科学研究, 1991, 4( 5) : 550~554.
  3 许煌灿,尹光天,曾炳山,等.黄藤栽培技术研究.林业科学研究, 1994, 7( 3) : 239~246.
  4 Rao A N, Aziah M Y. Proceedings of the sem inar on tis sue cu lture of fores t s pecies . Kuala Lumper : Forest Re-
search In st itute Malaysia, 1987, 56~69.
  5 庄承纪,周建葵.省藤组织培养的植株再生.云南植物研究, 1991, 13( 1) : 97~100.
  6 张方秋.棕藤组织培养技术研究.林业科学研究, 1993, 6( 5) : 486~492.
  7 刘英,曾炳山,许煌灿,等.棕藤继代培养增殖和成苗特性的研究.林业科学研究, 1996, 9( 6) : 579~585.
Selection of Appropriate Explants for Multiplication, Shoot and
Root Induction in Tissue Culture of Daemonorop s margaritae
L iu Ying Zeng B ingshan Yin Guangt ian
  Abstract This paper deals w ith the select ion o f appropriate explants for mult iplicat ion,
shoo t and root induction in t issue culture of Daemonorop s margaritae. The results indicated
that the new ly formed explants at a leng th ranging f rom 1. 1~2. 0 cm are good for the multi-
plicat ion, the explants at length ranging f rom 2. 1~4. 0 cm and w ithout developed leaves ar e
optimal material for shoot induction, w hile shoo ts at a height o ver 4 cm can be w ell used for
roo ting. All these results pro vided informat ion for massive propagat ion o f D . mar garitae
thr ough t issue culture at indust rial scale.
  Key words Daemonor op s mar garitae tissue culture explants select ion
  Liu Ying, En gineer, Zen g Bingshan, Yin Guangt ian ( T he Research Inst itute of T ropical Forest ry, CAF  Guang zhou
510520) .
1552 期        刘 英等: 黄藤继代增殖培养和成苗的繁殖体选择