全 文 ：第 源愿 卷 第 怨 期
圆 园 员 圆 年 怨 月
林 业 科 学
杂悦陨耘晕栽陨粤 杂陨蕴灾粤耘 杂陨晕陨悦粤耘 灾燥造郾 源愿袁晕燥郾 怨杂藻责援 袁 圆 园 员 圆
收稿日期院圆园员员 原 园圆 原 员愿曰 修回日期院圆园员员 原 园远 原 猿园遥
基金项目院黑龙江省博士后基金项目渊蕴月匀 原 在园缘园员猿冤曰 黑龙江大学高层次人才支持计划项目渊生态修复团队 匀凿贼凿 圆园员园 原 员圆冤曰 黑龙江大
学博士启动基金项目遥
鄢蔡柏岩为通讯作者遥
不同生境黄檗 粤酝真菌菌群结构分析鄢
王摇 雪员 摇 接伟光圆 摇 蔡柏岩员袁 圆
渊员援 黑龙江大学生命科学学院摇 黑龙江省普通高等学校微生物重点实验室摇 哈尔滨 员缘园园愿园曰
圆援黑龙江东方学院食品与环境工程学部摇 哈尔滨 员缘园园愿远冤
摘摇 要院摇 以 猿 个不同生境黄檗菌根为研究对象袁采用酸性品红染色法分析黄檗根系 粤酝 真菌侵染情况曰 利用
孕悦砸鄄阅郧郧耘技术并结合 阅郧郧耘图谱分析尧阅晕粤测序及系统发育分析袁研究黄檗菌根 粤酝真菌菌群组成及多样性袁揭
示不同生境黄檗 粤酝真菌菌群动态变化规律袁为黄檗菌根功能菌群的研究奠定基础遥 结果表明院不同生境黄檗根
系与 粤酝真菌均能形成良好的共生关系袁并且侵染率尧阅郧郧耘 图谱条带丰度和优势度存在差异遥 城市人工林地区菌
根的侵染率尧丰度尧优势度尧多样性指数均高于天然次生林和天然原始林袁且天然原始林地区菌根各项检测指标最
低遥 阅郧郧耘条带测序和系统发育分析显示院 全部序列可分为 源 类菌群袁即球囊霉属尧盾孢囊霉属尧多孢囊霉属和肉
盘菌科遥 城市人工林尧天然次生林和天然原始林黄檗根系样品中最具优势的 粤酝真菌均为 郧造燥皂怎泽属遥
关键词院摇 黄檗曰 粤酝真菌曰 孕悦砸鄄阅郧郧耘曰 菌群结构曰 多样性
中图分类号院匝怨猿摇 摇 摇 文献标识码院粤摇 摇 摇 文章编号院员园园员 原 苑源愿愿渊圆园员圆冤园怨 原 园园怨怨 原 园怨
悦燥皂皂怎灶蚤贼赠 悦燥皂责燥泽蚤贼蚤燥灶 燥枣 贼澡藻 粤酝 云怎灶早蚤 燥枣 孕澡藻造造燥凿藻灶凿则燥灶 葬皂怎则藻灶泽藻
蚤灶 阅蚤枣枣藻则藻灶贼 匀葬遭蚤贼葬贼泽
宰葬灶早 载怎藻员 摇 允蚤藻 宰藻蚤早怎葬灶早圆 摇 悦葬蚤 月葬蚤赠葬灶员袁 圆
渊员援 运藻赠 蕴葬遭燥则葬贼燥则赠 燥枣 酝蚤糟则燥遭蚤燥造燥早赠摇 悦燥造造藻早藻 燥枣 蕴蚤枣藻 杂糟蚤藻灶糟藻泽袁 匀藻蚤造燥灶早躁蚤葬灶早 哉灶蚤增藻则泽蚤贼赠摇 匀葬则遭蚤灶 员缘园园愿园曰
圆援 陨灶泽蚤贼怎贼藻 燥枣 云燥燥凿 葬灶凿 耘灶增蚤则燥灶皂藻灶贼 耘灶早蚤灶藻藻则蚤灶早袁 匀藻蚤造燥灶早躁蚤葬灶早 耘葬泽贼 哉灶蚤增藻则泽蚤贼赠摇 匀葬则遭蚤灶 员缘园园愿远冤
粤遭泽贼则葬糟贼院摇 陨灶 贼澡蚤泽 泽贼怎凿赠袁 贼澡藻 皂赠糟燥则则澡蚤扎葬藻 燥枣 孕澡藻造造燥凿藻灶凿则燥灶 葬皂怎则藻灶泽藻 蚤灶 贼澡则藻藻 凿蚤枣枣藻则藻灶贼 澡葬遭蚤贼葬贼泽 憎藻则藻 怎泽藻凿 葬泽 贼澡藻 则藻泽藻葬则糟澡
燥遭躁藻糟贼泽援 栽澡藻 则燥燥贼 泽葬皂责造藻泽 憎藻则藻 蚤灶增藻泽贼蚤早葬贼藻凿 遭赠 皂藻葬灶泽 燥枣 葬糟蚤凿 枣怎糟澡泽蚤灶 泽贼葬蚤灶 葬枣贼藻则 贼澡藻赠 憎藻则藻 造赠泽藻凿 蚤灶 葬造噪葬造蚤灶藻 泽燥造怎贼蚤燥灶援
栽澡藻灶袁 贼澡藻 糟燥皂皂怎灶蚤贼赠 糟燥皂责燥泽蚤贼蚤燥灶 葬灶凿 凿蚤增藻则泽蚤贼赠 燥枣 凿蚤枣枣藻则藻灶贼 粤酝 枣怎灶早蚤 泽责藻糟蚤藻泽 蚤灶 泽葬皂责造藻泽 憎藻则藻 葬灶葬造赠扎藻凿 怎泽蚤灶早 孕悦砸鄄阅郧郧耘援
阅郧郧耘 则藻泽怎造贼泽 憎藻则藻 葬灶葬造赠扎藻凿 蚤灶 糟燥灶躁怎灶糟贼蚤燥灶 憎蚤贼澡 阅郧郧耘 责则燥枣蚤造藻泽袁阅晕粤 泽藻择怎藻灶糟蚤灶早 葬灶凿 责澡赠造燥早藻灶藻贼蚤糟泽 贼燥 蚤灶增藻泽贼蚤早葬贼藻 贼澡藻
责葬贼贼藻则灶 燥枣 凿赠灶葬皂蚤糟 增葬则蚤葬贼蚤燥灶 燥枣 贼澡藻 粤酝 枣怎灶早蚤 燥枣 孕澡藻造造燥凿藻灶凿则燥灶 葬皂怎则藻灶泽藻 蚤灶 贼澡则藻藻 凿蚤枣枣藻则藻灶贼 澡葬遭蚤贼葬贼泽袁 造葬赠 贼澡藻 枣燥怎灶凿葬贼蚤燥灶 枣燥则
贼澡藻 泽贼怎凿赠 枣燥则 枣怎灶糟贼蚤燥灶葬造 枣造燥则葬 蚤灶 皂赠糟燥则则澡蚤扎葬造 燥枣 孕援 葬皂怎则藻灶泽藻援 栽澡藻 则藻泽怎造贼泽 泽澡燥憎藻凿 贼澡葬贼 贼澡藻 则燥燥贼泽 葬灶凿 粤酝 枣怎灶早蚤 燥枣 孕援 葬皂怎则藻灶泽藻
蚤灶 凿蚤枣枣藻则藻灶贼 澡葬遭蚤贼葬贼泽 憎藻则藻 葬遭造藻 贼燥 枣燥则皂 泽赠皂遭蚤燥泽蚤泽援 阅蚤泽贼蚤灶糟贼 凿蚤枣枣藻则藻灶糟藻泽 憎藻则藻 凿藻贼藻糟贼藻凿 蚤灶 蚤灶枣藻糟贼蚤燥灶 则葬贼藻袁 阅郧郧耘 遭葬灶凿
葬遭怎灶凿葬灶糟藻 葬灶凿 凿燥皂蚤灶葬灶糟赠援 栽澡藻 蚤灶枣藻糟贼蚤燥灶 则葬贼藻袁 葬遭怎灶凿葬灶糟藻袁 凿燥皂蚤灶葬灶糟赠 葬灶凿 凿蚤增藻则泽蚤贼赠 蚤灶凿藻曾 燥枣 贼澡藻 皂赠糟燥则则澡蚤扎葬藻 蚤灶 怎则遭葬灶
责造葬灶贼葬贼蚤燥灶 葬则藻葬泽 憎藻则藻 泽蚤早灶蚤枣蚤糟葬灶贼造赠 澡蚤早澡藻则 贼澡葬灶 贼澡葬贼 蚤灶 灶葬贼怎则葬造 泽藻糟燥灶凿葬则赠 枣燥则藻泽贼 葬灶凿 灶葬贼怎则葬造 责则蚤皂葬则赠 枣燥则藻泽贼援 粤造造 贼澡藻 凿藻贼藻糟贼蚤燥灶
蚤灶凿藻曾藻泽 燥枣 贼澡藻 皂赠糟燥则则澡蚤扎葬藻 蚤灶 灶葬贼怎则葬造 责则蚤皂葬则赠 枣燥则藻泽贼 憎葬泽 造燥憎藻泽贼援 杂藻择怎藻灶糟蚤灶早 葬灶凿 责澡赠造燥早藻灶藻贼蚤糟 葬灶葬造赠泽蚤泽 则藻增藻葬造藻凿 贼澡藻泽藻
泽藻择怎藻灶糟藻泽 糟燥怎造凿 遭藻 凿蚤增蚤凿藻凿 蚤灶 枣燥怎则 早则燥怎责泽院 郧造燥皂怎泽袁 杂糟怎贼藻造造燥泽责燥则葬袁 阅蚤增藻则泽蚤泽责燥则葬 葬灶凿 匀赠责燥灶藻糟贼则蚤葬 遭怎曾蚤援 郧造燥皂怎泽 枣怎灶早蚤 憎藻则藻
贼澡藻 凿燥皂蚤灶葬灶贼 泽责藻糟蚤藻泽 蚤灶 贼澡藻 则燥燥贼泽 燥枣 孕援 葬皂怎则藻灶泽藻 蚤灶 贼澡藻 怎则遭葬灶 责造葬灶贼葬贼蚤燥灶袁 灶葬贼怎则葬造 泽藻糟燥灶凿葬则赠 枣燥则藻泽贼 葬灶凿 灶葬贼怎则葬造 责则蚤皂葬则赠
枣燥则藻泽贼援
运藻赠 憎燥则凿泽院摇 孕澡藻造造燥凿藻灶凿则燥灶 葬皂怎则藻灶泽藻曰 粤酝 枣怎灶早蚤曰 孕悦砸鄄阅郧郧耘曰 糟燥皂皂怎灶蚤贼赠 糟燥皂责燥泽蚤贼蚤燥灶曰 凿蚤增藻则泽蚤贼赠
摇 摇 丛枝菌根渊葬则遭怎泽糟怎造葬则 皂赠糟燥则则澡蚤扎葬造袁 粤酝冤真菌是
自然界中普遍存在的一种寡营养活体微生物袁能够
侵染绝大多数的陆生植物根系而形成菌根渊灾蚤燥造蚤 藻贼
葬造援袁 圆园园愿曰 阅葬藻蚤 藻贼 葬造援袁 圆园园怨曰 栽葬澡藻则蚤 藻贼 葬造援袁 圆园员园冤袁具
有提高植物对营养元素的吸收袁提高植物的抗逆性袁
提高苗木移栽成活率等作用渊 月藻凿蚤灶蚤 藻贼 葬造援袁 圆园园苑曰
粤灶凿则佴泽 藻贼 葬造援袁 圆园园怨曰 郧赠怎则蚤糟扎葬 藻贼 葬造援袁 圆园员园冤遥 粤酝真菌
的分布是世界性的袁但在不同的土壤气候带袁由于环
境因子的不同袁粤酝真菌的多样性存在差异遥
黄檗渊孕澡藻造造燥凿藻灶凿则燥灶 葬皂怎则藻灶泽燥冤又名黄菠萝袁属
林 业 科 学 源愿 卷摇
芸香科阔叶乔木袁是我国东北阔叶红松林的重要伴
生树种袁为珍贵的药用植物和用材树种袁被列为国家
二级保护植物渊阎秀峰袁 圆园园猿冤遥 目前袁国内外关于
黄檗 粤酝真菌的研究并不多袁仅涉及到接种 粤酝 真
菌对黄檗药用成分影响方面的研究 渊范继红等袁
圆园园远冤袁以及黄檗菌根真菌初步鉴定 渊接伟光等袁
圆园园苑冤等遥 本研究分析了 猿 种不同生境下黄檗根系
粤酝真菌侵染情况袁并利用 孕悦砸鄄阅郧郧耘 技术分析不
同生境下黄檗根系 粤酝 真菌菌群组成及多样性袁揭
示其菌群变化规律遥 该方法能减少传统分类鉴定的
误差袁并通过指纹图谱直接再现群落结构袁克服传统
方法的局限性袁可为今后收集尧保护及利用这类微生
物资源袁以及为黄檗菌根功能菌群的研究奠定基础遥
员摇 材料与方法
员郾 员摇 材料
黄檗根系于 圆园园愿 年 愿 月分别采自 猿 种不同的
生境遥 员冤 东北林业大学校内林场渊简称林大冤袁位
于黑龙江省哈尔滨市内袁处于亚欧大陆东部的中高
纬度袁地理坐标为 源缘毅源员忆晕袁员圆远毅猿苑忆耘遥 该样地属于
典型的城市人工林袁 主要树种有红松 渊 孕蚤灶怎泽
噪燥则葬蚤藻灶泽蚤泽冤尧落叶松渊蕴葬则蚤曾 泽责责援 冤尧樟子松渊孕援 泽赠造增藻泽贼则蚤泽
增葬则援 皂燥灶早燥造蚤糟葬冤尧水曲柳渊云则葬曾蚤灶怎泽 皂葬灶凿泽澡怎则蚤糟葬冤尧黄
檗尧胡桃楸渊允怎早造葬灶泽 皂葬灶凿泽澡怎则蚤糟葬冤以及椴渊栽蚤造蚤葬冤尧榆
渊哉造皂怎泽冤尧杨渊孕燥责怎造怎泽冤尧桦渊月藻贼怎造葬冤等遥 圆冤东北林业
大学帽儿山实验林场 渊简称帽儿山冤袁位于黑龙江省
尚志市袁属于长白山支脉张广才岭西北部小岭的余
脉袁地理坐标为 源缘毅圆园忆要源缘毅圆缘忆晕袁员圆苑毅猿园忆要员圆苑毅猿源忆
耘袁该样地为东北东部山区较典型的天然次生林区遥
境内天然次生林类型多样袁木本和草本植物达千余
种遥 土壤类型为暗棕壤袁有机质含量丰富遥 猿冤伊春
市带岭区凉水国家级自然保护区渊简称凉水冤袁位于
黑龙江省伊春市袁地处小兴安岭山脉的东南部袁地理
坐标为 源苑毅苑忆猿怨义要源苑毅员源忆圆圆义晕袁员圆愿毅源愿忆猿园义要员圆愿毅缘缘忆
缘园义耘袁区内既有处于演替顶极状态的原始阔叶红松
林尧冷云杉林和兴安落叶松林袁又有处于不同演替阶
段的次生林袁几乎囊括了小兴安岭山脉的所有森林
植被类型遥 土壤主要为温润地区针阔混交林下发育
的暗棕林袁为典型的低山丘陵地貌遥 猿 个样地的土
壤理化性状见表 员遥
表 员摇 猿 个样地的土壤理化性状渊平均值冤
栽葬遭援 员摇 耘凿葬责澡蚤糟 责则燥责藻则贼蚤藻泽 枣燥则 贼澡则藻藻 泽蚤贼藻泽 渊皂藻葬灶泽冤
采样地点杂葬皂责造蚤灶早泽蚤贼藻泽 责匀
全氮栽燥贼葬造 灶蚤贼则燥早藻灶 辕
渊早窑噪早 原员 冤
全磷栽燥贼葬造 责澡燥泽责澡燥则怎泽 辕
渊早窑噪早 原员 冤
全钾栽燥贼葬造 责燥贼葬泽泽蚤怎皂 辕
渊早窑噪早 原员 冤
碱解氮粤造噪葬造蚤鄄澡赠凿则燥造赠扎藻凿灶蚤贼则燥早藻灶 辕
渊皂早窑噪早 原员 冤
速效磷粤增葬蚤造葬遭造藻责澡燥泽责澡燥则怎泽 辕
渊皂早窑噪早 原员 冤
速效钾粤增葬蚤造葬遭造藻责燥贼葬泽泽蚤怎皂 辕
渊皂早窑噪早 原员 冤
林大 蕴蚤灶凿葬 远郾 员 圆郾 园圆 园郾 园猿 员缘郾 猿怨 员园园郾 愿圆 员员郾 缘猿 圆猿园郾 缘缘
帽儿山 酝葬燥藻则泽澡葬灶 远郾 猿 远郾 园远 园郾 员源 员缘郾 源苑 员愿远郾 圆员 员愿郾 愿缘 圆源愿郾 猿苑
凉水 蕴蚤葬灶早泽澡怎蚤 缘郾 苑 愿郾 园圆 园郾 员缘 员远郾 员员 圆员怨郾 员源 圆园郾 源猿 源远圆郾 圆员
摇 摇 随机选取 猿 种不同生境下相近林龄的黄檗各
员园 株袁每株为一样点袁每个样点按东西南北 源 个方
位袁除去表层杂物后袁挖 员园 耀 圆园 糟皂 深的土壤剖面袁
收集其中鲜黄色的根系即为黄檗根系遥 分别将每
员园 个样点采集的黄檗根系充分混匀袁各自组成 员 个
混合样品袁其中一部分根样采集后立即放入 云粤粤固
定液中保存曰 其余根样带回实验室洗净后袁立即提
取其 阅晕粤袁 原 苑园 益保存备用遥
员郾 圆摇 粤酝真菌侵染率测定
统计 猿 种不同生境下黄檗菌根侵染率和根系的
菌根侵染强度袁公式如下院菌根侵染率渊云袁豫 冤 越菌
根侵染的根段数 辕检测的根段总数 伊 员园园豫 袁根系的
菌根侵染强度渊酝袁豫 冤 越侵染根长 辕总根长 伊 员园园豫 遥
员郾 猿摇 阅晕粤的提取
根样 阅晕粤 的提取参照董秀丽等渊圆园园远冤的方
法袁稍作修改遥
员郾 源摇 晕藻泽贼藻凿鄄孕悦砸扩增 粤酝 真菌 员愿杂 则阅晕粤 晕杂猿员 辕
郧造燥员 区
分别将上述 猿 种不同生境下黄檗菌根 阅晕粤 适
当稀释后作为扩增模板袁进行 晕藻泽贼藻凿鄄孕悦砸袁反应体
系和反应程序参照文献渊杂糟澡憎葬则扎燥贼贼 藻贼 葬造援袁 圆园园员曰 龙
良鲲等袁 圆园园缘曰 蔡柏岩等袁 圆园园怨冤的方法袁稍加修改遥
取 孕悦砸扩增产物各 缘 滋蕴袁 员郾 园豫琼脂糖凝胶电
泳检测遥
员郾 缘摇 阅郧郧耘分析
阅郧郧耘分析条件参照蔡柏岩等渊圆园园怨冤的方法袁
稍加修改遥
员郾 远摇 阅郧郧耘图谱分析
利用 郧藻造鄄孕则燥 粤灶葬造赠扎藻则 源郾 缘 软件对 阅郧郧耘图谱的
丰度尧优势度和多样性指数 猿 个指标进行统计分析遥
员郾 苑摇 阅郧郧耘条带的序列分析
阅郧郧耘条带的序列分析参照蔡柏岩等渊圆园园怨冤的
园园员
摇 第 怨 期 王摇 雪等院 不同生境黄檗 粤酝真菌菌群结构分析
方法遥
圆摇 结果与分析
圆郾 员摇 粤酝真菌侵染率
采用碱解离 原酸性品红染色法对不同生境下黄
檗根系 粤酝侵染情况进行测定袁侵染率如图 员遥
图 员摇 猿 个样地 粤酝真菌侵染率
云蚤早援 员摇 栽澡藻 蚤灶枣藻糟贼蚤燥灶 责藻则糟藻灶贼 燥枣 粤酝 枣怎灶早蚤 蚤灶 贼澡则藻藻 泽蚤贼藻泽
由图 员 可知院 猿 个采样地点的黄檗根系均被
粤酝真菌侵染袁且侵染率均很高袁其中林大地区黄檗
粤酝真菌侵染率最高袁达 怨远郾 苑圆豫 曰 其次是帽儿山地
区袁为 怨源郾 员园豫 曰 凉水地区黄檗 粤酝 真菌侵染率最
低袁为 怨员郾 猿猿豫 遥 根系的菌根侵染强度与菌根侵染
率呈正相关袁林大根系的菌根侵染强度较高遥 由此
可见袁不同生境下的黄檗根系 粤酝 真菌的侵染率差
异较为明显袁城市人工林地区菌根的侵染率明显高
于天然次生林和天然原始林袁天然原始林地区菌根
的侵染率最低遥
圆郾 圆摇 晕藻泽贼藻凿鄄孕悦砸及 阅郧郧耘分析
使用该法提取的菌根 阅晕粤袁无需检测袁适当稀
释后即可作为模板袁进行 晕藻泽贼藻凿鄄孕悦砸遥
在靶模板 阅晕粤 量很少的情况下袁通过 晕藻泽贼藻凿鄄
孕悦砸的放大作用可很好的扩增出目标产物袁以获取
大量目标产物遥 从各样品的 晕藻泽贼藻凿鄄孕悦砸 扩增结果
渊图 圆冤可知院 经第 员 次 孕悦砸 扩增后袁粤酝 真菌 阅晕粤
的拷贝数较低袁难以在琼脂糖凝胶上观察到目的条
带渊员郾 愿 噪遭冤遥 而通过第 圆 次 孕悦砸扩增袁可得到大量
目标产物渊园郾 缘怨 噪遭冤袁为能够扩增出适宜进行 阅郧郧耘
分析的目标产物袁进行了第 猿 次 孕悦砸 扩增袁得到大
量目的片段渊园郾 圆苑 噪遭冤遥
第 猿 次 孕悦砸扩增产物经纯化后袁进行 阅郧郧耘 分
析袁结果如图 猿 所示遥 不同样品的 阅郧郧耘 条带数目尧
各个条带的强度和迁移率均存在一定程度的差异袁
表明 孕悦砸鄄阅郧郧耘 技术可以对黄檗 粤酝 真菌群落结
构进行分析袁能够反映不同生境下 粤酝 真菌的遗传
多样性遥
阅郧郧耘是根据 阅晕粤解链行为的不同袁分离具有
相同长度但是碱基对序列不同的 阅晕粤遥 各泳道中
被分离的每一个条带理论上可代表样品 粤酝真菌群
落中的一个种属袁条带的浓度代表了菌群数量的多
少遥 由图 猿 可见院 在不同样品之间有共同的条带袁
如条带 蕴郧猿袁说明不同生境下的黄檗菌根中可能都
侵染了这种 粤酝 真菌袁但共有条带的强度也有所不
同袁表明该 粤酝 真菌含量不同遥 各个样品具有各自
特有的条带袁如条带 蕴郧员圆 只在林大菌根中很亮袁条
带 酝郧员 只在帽儿山地区菌根中有分布袁表明有些
粤酝真菌只出现在个别生境下的黄檗菌根中遥
图 圆摇 猿 样地菌根 晕藻泽贼藻凿鄄孕悦砸扩增结果
云蚤早援 圆摇 粤皂责造蚤枣蚤糟葬贼蚤燥灶 燥枣 皂赠糟燥则则澡蚤扎葬造 枣则燥皂 贼澡则藻藻 泽蚤枣藻泽 遭赠 晕藻泽贼藻凿鄄孕悦砸
酝援 阅蕴圆园园园 酝葬则噪藻则曰 员 原 猿院第 员 次 孕悦砸 云蚤则泽贼 孕悦砸曰
源 原 远院第 圆 次 孕悦砸 杂藻糟燥灶凿 孕悦砸曰 苑 原 怨院第 猿 次 孕悦砸 栽澡蚤则凿 孕悦砸
圆郾 猿摇 阅郧郧耘图谱分析
圆郾 猿郾 员摇 阅郧郧耘图谱的丰度 摇 在微生物多样性的分
析中袁丰度代表一定区域的物种数袁反映到 阅郧郧耘
指纹图谱上则代表某个样品中所有条带数量的总
和袁阅郧郧耘 指纹图谱的条带数量在一定程度上反映
了群落中优势微生物组成的多样性遥 通过 郧藻造鄄孕则燥
粤灶葬造赠扎藻则 源郾 缘 软件对不同生境黄檗菌根样品 员愿杂
则阅晕粤 晕杂猿员 辕 郧造燥员 区 阅郧郧耘 图谱渊图 猿冤进行泳道分
析袁发现 猿 种样品 阅郧郧耘 带谱在条带数量上存在较
大的差异遥 林大尧帽儿山和凉水 猿 地菌根样品分别
分离出 员源袁员猿 和 员园 条比较清晰的条带袁即丰度分别
为 员源袁员猿 和 员园袁表明林大地区黄檗菌根中 粤酝 真菌
菌群的数量多于帽儿山和凉水地区遥
圆郾 猿郾 圆摇 阅郧郧耘图谱条带的优势度 摇 优势度代表某
一特定位置处条带的量占该样品中总体条带量的百
分比袁与条带的明亮程度和条带的峰面积成正比袁反
映了各物种种群数量的变化情况渊魏薇袁 圆园园苑冤遥 图
源 显示院 不同样品中各条带的优势度值有不同程度
的变化袁并且在不同样品中袁同一水平位置处的条带
的优势度值不同遥
图 源 显示不同菌根样品中不同条带优势度值的
变化情况遥 林大菌根 阅郧郧耘 条带中 蕴郧缘 条带的优
员园员
林 业 科 学 源愿 卷摇
图 猿摇 猿 个地点黄檗菌根样品 阅郧郧耘图谱
云蚤早援 猿摇 阅郧郧耘 责则燥枣蚤造藻 燥枣 则燥燥贼 泽葬皂责造藻泽 燥枣 孕援 葬皂怎则藻灶泽藻 蚤灶 贼澡则藻藻 泽蚤贼藻泽
员援林大菌根 蕴蚤灶凿葬 皂赠糟燥则则澡蚤扎葬曰 圆援 帽儿山菌根 酝葬燥藻则泽澡葬灶 皂赠糟燥则则澡蚤扎葬曰
猿援 凉水菌根 蕴蚤葬灶早泽澡怎蚤 皂赠糟燥则则澡蚤扎葬援
势度值最高袁为 员缘郾 怨缘豫 袁蕴郧员园 的优势度值最低袁为
员郾 源园豫 曰 帽儿山菌根 阅郧郧耘 条带中 酝郧圆 的优势度
值最高袁为 员怨郾 缘缘豫 袁 酝郧员圆 的优势度值最低袁均为
员郾 员园豫 曰 凉水菌根中 再郧圆 的优势度值最高袁为
员怨郾 源员豫 袁再郧员园 的优势度值最低袁为 源郾 远远豫 遥
图 源摇 猿 个地点菌根 阅郧郧耘条带优势度
云蚤早援 源摇 月葬则 早则葬责澡 燥枣 贼澡藻 凿藻早则藻藻 燥枣 凿燥皂蚤灶葬灶糟藻 葬遭燥怎贼 皂赠糟燥则则澡蚤扎葬造 阅郧郧耘 遭葬灶凿泽 蚤灶 贼澡则藻藻 葬则藻葬泽
柱状图上方的数字分别对应横轴上每一采样地点的 阅郧郧耘条带袁条带命名见图 猿遥 栽澡藻 灶怎皂遭藻则 葬遭燥增藻 糟燥造怎皂灶
糟燥则则藻泽责燥灶凿泽 则藻泽责藻糟贼蚤增藻造赠 贼燥 阅郧郧耘 遭葬灶凿 葬贼 藻葬糟澡 泽葬皂责造蚤灶早 泽蚤贼藻袁 遭葬灶凿 灶葬皂藻凿 葬泽 泽澡燥憎灶 蚤灶 云蚤早援 猿援
圆郾 猿郾 猿摇 阅郧郧耘图谱条带的多样性指数 摇 多样性指
数表示环境中的生物多样性情况袁多样性指数的高
低反映优势菌群种类的多少袁这与种群数量的多寡
和种群个体分配均匀度的高低情况有关遥 林大尧帽
儿山尧凉水地区菌根样品 粤酝 真菌 杂澡葬灶灶燥灶鄄宰蚤藻灶藻则
指数分别为 猿郾 圆怨袁猿郾 圆源 和 猿郾 圆员袁这说明凉水地区黄
檗菌根样品中的 粤酝 真菌种群数量最少袁同时种群
的丰富度也最低袁种群个体分配均匀性最低曰 而林
大地区黄檗菌根样品中袁粤酝 真菌种群数量最多袁种
群个体分配均匀性最高袁在该系统中的生物多样性
也最高遥
由以上试验结果及表 员 可知院 城市人工林地区
菌根的侵染率尧丰度尧优势度尧多样性指数均高于天
然次生林和天然原始林袁且天然原始林地区菌根各
项检测指标最低袁这主要是由土壤理化性质所决定
的遥 土壤理化性质是影响 粤酝真菌侵染的重要因素
之一袁土壤养分对 粤酝真菌多样性具有重要影响袁肥
力高的土壤中袁粤酝真菌侵染率较低遥 其中袁土壤速
效磷的含量袁土壤有机质以及土壤 责匀 对 粤酝 的形
成以及繁殖体数量有直接影响遥 土壤中的有机质尧
有效磷和氮素的积累量较少袁在酸碱性适中的条件
下袁有利于 粤酝 真菌的活动遥 酝蚤糟澡藻造蚤灶蚤 等渊员怨怨猿冤研
究了矿质营养尧有机质含量尧土壤 责匀 值等对 粤酝 真
菌发育的影响袁发现不同地区侵染状况显著不同袁区
域特征与菌根侵染之间有显著的相关性遥 同时袁其
他环境因子也影响植物对 粤酝 真菌的选择遥 另外袁
在不同的生境中袁粤酝 真菌可能形成了不同的生态
型以适应不同的环境遥
圆郾 源摇 阅郧郧耘条带测序及系统发育分析
为了更全面地研究不同生境下黄檗 粤酝真菌菌
群结构袁本试验将 阅郧郧耘 图谱中的全部条带进行回
收遥 回收液直接用于 孕悦砸 扩增袁经检测袁长度约为
圆园员
摇 第 怨 期 王摇 雪等院 不同生境黄檗 粤酝真菌菌群结构分析
圆苑园 遭责袁与 粤酝真菌 员愿杂 则阅晕粤的 晕杂猿员 辕 郧造燥员 区序列
大小一致遥 将其纯化后重新进行 阅郧郧耘袁经多次试
验袁最终选取了全部 阅郧郧耘 条带所对应的阳性克
隆袁测序结果见表 圆遥
测序结果表明院 所测序列片段长度约为 圆猿源
遭责袁且测序结果与 郧藻灶月葬灶噪 数据库中的已知菌种
均具有较高的相似性袁可以初步确定优势菌种
的属遥
表 圆摇 阅郧郧耘条带序列的 月蕴粤杂栽结果
栽葬遭援 圆摇 月蕴粤杂栽 则藻泽怎造贼泽 燥枣 贼澡藻 泽藻择怎藻灶糟藻凿 阅郧郧耘 泽藻择怎藻灶糟藻泽
克隆编号悦造燥灶藻 晕燥援
序列长度杂藻择怎藻灶糟藻泽蚤扎藻 辕 遭责
晕悦月陨数据库中最相似菌种渊登录号冤栽澡藻 泽贼则葬蚤灶泽 憎澡蚤糟澡 澡葬增藻 贼澡藻 澡蚤早澡藻泽贼 蚤凿藻灶贼蚤贼赠 枣则燥皂 晕悦月陨渊粤糟糟藻泽泽蚤燥灶冤 相似性杂蚤皂蚤造葬则蚤贼赠
蕴郧员 圆猿源 缩球囊霉 郧造燥皂怎泽 糟燥灶泽贼则蚤糟贼怎皂 渊粤酝怨源远怨远员冤 圆猿员 辕 圆猿源 渊怨愿豫 冤
蕴郧圆 圆猿源 未培养的球囊霉属真菌 哉灶糟怎造贼怎则藻凿 郧造燥皂怎泽 渊阅匝猿愿愿远员愿冤 圆猿猿 辕 圆猿缘 渊怨怨豫 冤
蕴郧猿 圆猿源 未培养的球囊霉属真菌 哉灶糟怎造贼怎则藻凿 郧造燥皂怎泽渊耘哉员缘圆员怨圆冤 圆猿园 辕 圆猿源渊怨愿豫 冤
蕴郧源 圆猿源 未培养的球囊霉属真菌 哉灶糟怎造贼怎则藻凿 郧造燥皂怎泽渊耘云猿怨猿缘怨园冤 圆猿源 辕 圆猿源 渊员园园豫 冤
蕴郧缘 圆猿缘 未培养的球囊霉属真菌 哉灶糟怎造贼怎则藻凿 郧造燥皂怎泽 渊耘哉源圆愿苑远圆冤 圆猿源 辕 圆猿缘渊怨怨豫 冤
蕴郧远 圆猿源 未培养的球囊霉属真菌 哉灶糟怎造贼怎则藻凿 郧造燥皂怎泽 渊粤允缘远猿愿怨远冤 圆猿园 辕 圆猿源 渊怨愿豫 冤
蕴郧苑 圆猿源 未培养的球囊霉属真菌 哉灶糟怎造贼怎则藻凿 郧造燥皂怎泽渊粤允缘远猿愿远圆冤 圆猿园 辕 圆猿源渊怨愿豫 冤
蕴郧愿 圆猿缘 未培养的球囊霉属真菌 哉灶糟怎造贼怎则藻凿 郧造燥皂怎泽 渊耘哉源怨苑远苑员冤 圆猿猿 辕 圆猿缘 渊怨怨豫 冤
蕴郧怨 圆猿猿 亮色盾巨孢囊霉 杂糟怎贼藻造造燥泽责燥则葬 枣怎造早蚤凿葬 渊粤允猿园远源猿缘冤 圆圆愿 辕 圆猿猿 渊怨苑豫 冤
蕴郧员园 圆猿缘 未培养的球囊霉属真菌 哉灶糟怎造贼怎则藻凿 郧造燥皂怎泽渊粤允缘远猿愿远圆冤 圆猿员 辕 圆猿源 渊怨愿豫 冤
蕴郧员员 圆猿缘 未培养的球囊霉属真菌 哉灶糟怎造贼怎则藻凿 郧造燥皂怎泽 渊耘哉源怨苑远苑猿冤 圆猿缘 辕 圆猿缘 渊员园园豫 冤
蕴郧员圆 圆猿源 未培养的球囊霉属真菌 哉灶糟怎造贼怎则藻凿 郧造燥皂怎泽渊耘哉员缘圆员愿怨冤 圆猿圆 辕 圆猿源 渊怨怨豫 冤
蕴郧员猿 圆猿源 未培养的球囊霉属真菌 哉灶糟怎造贼怎则藻凿 郧造燥皂怎泽 渊耘哉员圆猿源源圆冤 圆猿圆 辕 圆猿源 渊怨怨豫 冤
蕴郧员源 圆猿缘 未培养的球囊霉属真菌 哉灶糟怎造贼怎则藻凿 郧造燥皂怎泽 渊耘哉员缘圆员怨圆冤 圆猿猿 辕 圆猿缘 渊怨怨豫 冤
酝郧员 圆猿源 未培养的球囊霉属真菌 哉灶糟怎造贼怎则藻凿 郧造燥皂怎泽渊粤酝苑源远员猿员园冤 圆猿园 辕 圆猿源 渊怨愿豫 冤
酝郧圆 圆猿源 未培养的球囊霉属真菌 哉灶糟怎造贼怎则藻凿 郧造燥皂怎泽渊阅匝猿愿愿远员愿冤 圆猿猿 辕 圆猿缘 渊怨怨豫 冤
酝郧猿 圆猿源 未培养的球囊霉属真菌 哉灶糟怎造贼怎则藻凿 郧造燥皂怎泽渊粤允缘远猿愿怨怨冤 圆猿员 辕 圆猿源 渊怨愿豫 冤
酝郧源 圆猿源 未培养的球囊霉属真菌 哉灶糟怎造贼怎则藻凿 郧造燥皂怎泽渊阅匝猿愿愿远员愿冤 圆猿圆 辕 圆猿源渊怨怨豫 冤
酝郧缘 圆猿源 未培养的球囊霉属真菌 哉灶糟怎造贼怎则藻凿 郧造燥皂怎泽渊粤酝怨源远愿园苑冤 圆圆远 辕 圆猿源 渊怨远豫 冤
酝郧远 原 员 圆猿源 未培养的球囊霉属真菌 哉灶糟怎造贼怎则藻凿 郧造燥皂怎泽 渊粤允缘远猿愿怨怨冤 圆猿员 辕 圆猿缘 渊怨愿豫 冤
酝郧远 原 圆 圆猿源 未培养的球囊霉属真菌 哉灶糟怎造贼怎则藻凿 郧造燥皂怎泽渊耘哉员圆猿源源圆冤 圆猿猿 辕 圆猿源 渊怨怨豫 冤
酝郧苑 圆猿源 未培养的球囊霉属真菌 哉灶糟怎造贼怎则藻凿 郧造燥皂怎泽渊耘哉员圆猿源源圆冤 圆猿园 辕 圆猿源 渊怨愿豫 冤
酝郧愿 圆猿源 未培养的多孢囊霉属真菌 哉灶糟怎造贼怎则藻凿 阅蚤增藻则泽蚤泽责燥则葬 渊耘哉员圆猿猿怨猿冤 圆猿圆 辕 圆猿源 渊怨怨豫 冤
酝郧怨 圆猿源 未培养的球囊霉属真菌 哉灶糟怎造贼怎则藻凿 郧造燥皂怎泽 渊粤酝怨源远愿源园冤 圆猿员 辕 圆猿源渊怨愿豫 冤
酝郧员园 圆猿缘 未培养的球囊霉属真菌 哉灶糟怎造贼怎则藻凿 郧造燥皂怎泽渊耘云员苑苑缘缘怨冤 圆圆苑 辕 圆猿缘 渊怨远豫 冤
酝郧员员 原 员 圆猿猿 亮色盾巨孢囊霉 杂糟怎贼藻造造燥泽责燥则葬 枣怎造早蚤凿葬渊粤允猿园远源猿缘冤 圆猿园 辕 圆猿猿 渊怨愿豫 冤
酝郧员员 原 圆 圆猿源 未培养的球囊霉属真菌 哉灶糟怎造贼怎则藻凿 郧造燥皂怎泽 渊耘哉员缘圆员愿怨冤 圆猿源 辕 圆猿源渊员园园豫 冤
酝郧员圆 圆猿远 未培养的球囊霉属真菌 哉灶糟怎造贼怎则藻凿 郧造燥皂怎泽 渊耘云员苑苑缘远猿冤 圆圆远 辕 圆猿远 渊怨缘豫 冤
酝郧员猿 圆猿远 未培养的肉盘菌科真菌 哉灶糟怎造贼怎则藻凿 杂葬则糟燥泽燥皂葬贼葬糟藻葬藻渊耘云园圆源员苑员冤 圆圆源 辕 圆猿远 渊怨源豫 冤
再郧员 圆猿源 未培养的球囊霉属真菌 哉灶糟怎造贼怎则藻凿 郧造燥皂怎泽 渊粤酝苑源远员猿员冤 圆猿员 辕 圆猿源 渊怨愿豫 冤
再郧圆 圆猿源 未培养的球囊霉属真菌 哉灶糟怎造贼怎则藻凿 郧造燥皂怎泽 渊粤允缘远猿愿怨怨冤 圆猿员 辕 圆猿源 渊怨愿豫 冤
再郧猿 圆猿源 未培养的球囊霉属真菌 哉灶糟怎造贼怎则藻凿 郧造燥皂怎泽 渊耘哉员圆猿源源圆冤 圆猿员 辕 圆猿源 渊怨愿豫 冤
再郧源 圆猿源 未培养的球囊霉属真菌 哉灶糟怎造贼怎则藻凿 郧造燥皂怎泽 渊粤酝怨源远愿园苑冤 圆圆远 辕 圆猿源 渊怨远豫 冤
再郧缘 圆猿猿 未培养的球囊霉属真菌 哉灶糟怎造贼怎则藻凿 郧造燥皂怎泽 渊云酝怨缘远远愿怨冤 圆圆愿 辕 圆猿圆 渊怨愿豫 冤
再郧远 圆猿源 未培养的球囊霉属真菌 哉灶糟怎造贼怎则藻凿 郧造燥皂怎泽 渊粤允缘远猿愿怨怨冤 圆猿猿 辕 圆猿源 渊怨怨豫 冤
再郧苑 圆猿源 未培养的球囊霉属真菌 哉灶糟怎造贼怎则藻凿 郧造燥皂怎泽 渊粤酝怨源远愿园苑冤 圆猿员 辕 圆猿源 渊怨愿豫 冤
再郧愿 圆猿源 未培养的球囊霉属真菌 哉灶糟怎造贼怎则藻凿 郧造燥皂怎泽 渊粤酝怨源远愿苑缘冤 圆猿圆 辕 圆猿缘渊怨愿豫 冤
再郧怨 圆猿源 亮色盾巨孢囊霉 杂糟怎贼藻造造燥泽责燥则葬 枣怎造早蚤凿葬渊粤允猿园远源猿缘冤 圆圆愿 辕 圆猿猿 渊怨苑豫 冤
再郧员园 圆猿缘 未培养的球囊霉属真菌 哉灶糟怎造贼怎则藻凿 郧造燥皂怎泽 渊阅匝猿愿愿远员源冤 圆猿员 辕 圆猿源 渊怨愿豫 冤
摇 摇 测序结果表明院 所测序列片段长度约为 圆猿源遭责袁
且测序结果与 郧藻灶月葬灶噪 数据库中的已知菌种均具
有较高的相似性袁可以初步确定优势菌种的属遥
圆郾 源郾 员摇 林大地区黄檗菌根 阅郧郧耘 条带序列分析摇
林大地区黄檗菌根 阅郧郧耘条带比对结果显示院 条带
蕴郧怨 所代表的菌群属于盾孢囊霉属渊杂糟怎贼藻造造燥泽责燥则葬冤
粤酝真菌袁它与该属的亮色盾巨孢囊霉渊杂援 枣怎造早蚤凿葬冤
相似性最高袁达 怨苑豫 曰 蕴郧员 原 蕴郧愿袁蕴郧员园 原 蕴郧员源 这
员猿 个 阅郧郧耘 条带代表的菌群均属于球囊霉属
渊郧造燥皂怎泽冤粤酝真菌袁其中条带 蕴郧员 所代表的菌群与
缩球囊霉渊郧援 糟燥灶泽贼则蚤糟贼怎皂冤相似性达 怨愿豫 遥 其中袁条
带 蕴郧猿 和 蕴郧员源 比对结果均与 哉灶糟怎造贼怎则藻凿 郧造燥皂怎泽
猿园员
林 业 科 学 源愿 卷摇
渊耘哉员缘圆员怨圆冤相似性最高袁说明这 圆 个条带所代表的
菌种应归属同一菌种曰 条带 蕴郧苑 和 蕴郧员园 比对结果
均与 哉灶糟怎造贼怎则藻凿 郧造燥皂怎泽渊粤允缘远猿愿远圆冤相似性最高袁归
属同一菌种遥 经统计可知院 林大地区黄檗菌根 粤酝
真菌菌种可初步归为 员圆 个不同的菌种遥 由测序结
果可知院 该地区黄檗根系 粤酝真菌以球囊霉属为优
势菌群遥 结合优势度分析结果可知院 条带 蕴郧缘 所代
表的菌群 哉灶糟怎造贼怎则藻凿 郧造燥皂怎泽渊耘哉源圆愿苑远圆冤为该地区
黄檗根系 粤酝真菌的优势种遥
圆郾 源郾 圆摇 帽儿山地区黄檗菌根 阅郧郧耘 条带序列分析
摇 帽儿山地区黄檗菌根 阅郧郧耘 条带比对结果显示院
条带 酝郧愿 所 代 表 的 菌 群 属 于 多 孢 囊 霉 属
渊阅蚤增藻则泽蚤泽责燥则葬冤粤酝 真菌曰 条带 酝郧员员 原 员 所代表的菌
群与亮色盾巨孢囊霉渊杂糟怎贼藻造造燥泽责燥则葬 枣怎造早蚤凿葬冤相似性
最高袁达 怨愿豫 曰 条带 酝郧员猿 所代表的菌群与肉盘菌
科渊杂葬则糟燥泽燥皂葬贼葬糟藻葬藻冤相似性达 怨源豫 袁该菌种不属于
粤酝真菌袁说明 晕杂猿员 辕 郧造燥员 引物对也能扩增出非 粤酝
真菌袁引物特异性有一定的缺陷曰 条带 酝郧员 原 酝郧苑袁
酝郧怨袁酝郧员园袁酝郧员员 原 圆袁酝郧员圆 这 员员 个 阅郧郧耘条带代
表的菌群均属于球囊霉属 粤酝 真菌遥 其中袁序列
酝郧远 原员 和 酝郧远 原圆 为条带 酝郧远 的 圆 个阳性克隆测
序结果袁序列 酝郧员员 原 员 和 酝郧员员 原 圆 为条带 酝郧员员
的 圆 个阳性克隆测序结果遥 由表 圆 可知院 条带 酝郧远
虽然两个序列同属球囊霉属袁但它们之间存在 员员 个
碱基差异袁相似性为 怨缘豫 袁而在 酝郧员员 代表的菌群
中含有 圆 种不同种属的菌群袁说明 阅郧郧耘 分离的单
一条带中可能会含有不同的菌种遥 条带 酝郧圆 和
酝郧源 比对结果都与 哉灶糟怎造贼怎则藻凿 郧造燥皂怎泽渊阅匝猿愿愿远员愿冤
相似性最高袁说明这 圆 个条带所代表的菌种应归属
同一菌种曰 条带 酝郧远 原 圆 和 酝郧苑 比对结果都与
哉灶糟怎造贼怎则藻凿 郧造燥皂怎泽渊耘哉员圆猿源源圆冤相似性最高袁归属同
一菌种曰 条带 酝郧猿 和 酝郧远 原 员 比对结果都与
哉灶糟怎造贼怎则藻凿 郧造燥皂怎泽渊粤允缘远猿愿怨怨冤相似性最高袁归属于
同一菌种遥 经统计可知院 帽儿山地区黄檗菌根 粤酝
真菌菌种可归为 员员 个不同的菌种遥 由测序结果可
知院 该地区黄檗根系 粤酝真菌以球囊霉属为优势菌
群遥 结合优势度分析结果可知院 条带 酝郧圆 所代表
的菌群 哉灶糟怎造贼怎则藻凿 郧造燥皂怎泽渊阅匝猿愿愿远员愿冤为该地区黄
檗根系 粤酝真菌的优势种遥
圆郾 源郾 猿摇 凉水地区黄檗菌根 阅郧郧耘 条带序列分析摇
凉水地区黄檗菌根 阅郧郧耘条带比对结果显示院 条带
再郧怨 所代表的菌群属于盾孢囊霉属 粤酝 真菌袁它与
该属的亮色盾巨孢囊霉相似性最高袁达 怨苑豫 曰 再郧员
原 再郧愿袁再郧员园 这 怨 个 阅郧郧耘条带代表的菌群均属于
球囊霉属遥 其中袁条带 再郧圆 和 再郧远 比对结果都与
哉灶糟怎造贼怎则藻凿 郧造燥皂怎泽渊粤允缘远猿愿怨怨冤相似性最高袁说明这 圆
个条带所代表的菌种应归属同一菌种曰 条带 再郧源
和 再郧苑 比 对 结 果 都 与 哉灶糟怎造贼怎则藻凿 郧造燥皂怎泽
渊粤酝怨源远愿园苑冤相似性最高袁归属同一菌种遥 经统计
可知院 凉水地区黄檗菌根 粤酝真菌菌种可归为 愿 个
不同的菌种遥 由测序结果可知院 该地区黄檗根系
粤酝真菌以球囊霉属为优势菌群遥 结合优势度分析
结果可知院 条带 再郧圆 所代表的菌群 哉灶糟怎造贼怎则藻凿
郧造燥皂怎泽渊粤允缘远猿愿怨怨冤为该地区黄檗根系 粤酝真菌的优
势种遥
在 阅郧郧耘图谱渊图 猿冤中处于同一水平位置的条
带袁经测序尧比对袁结果也不完全一致遥 条带 蕴郧圆 和
酝郧圆 在 郧藻灶月葬灶噪数据库中比对结果相同袁碱基序列
一致曰 条带 蕴郧怨 和 再郧怨 在 郧藻灶月葬灶噪 数据库中比对
结果相同袁碱基序列一致曰 而条带 蕴郧苑 和 酝郧怨 在
郧藻灶月葬灶噪 数据库中比对结果与测序长度完全相同袁
但序列有 员愿 个碱基的差异袁说明 蕴郧苑 和 酝郧怨 条带
所代表的 粤酝真菌可能不属于同一个种袁但具有相
同的迁移率遥
虽然不同生境黄檗菌根 阅郧郧耘 图谱之间存在
很大差异袁但从测序结果来看袁这 猿 个样地均以球囊
霉属为优势种群袁并且初步分析都含有盾孢囊霉属
的亮色盾巨孢囊霉袁仅在帽儿山地区检测出多孢囊
霉属 粤酝真菌遥 林大尧帽儿山和凉水地区黄檗菌根
粤酝真菌菌种分别可归为 员圆尧员员 和 愿 个不同的菌
种遥 由此可见院 林大地区 粤酝 真菌物种多样性最
高袁帽儿山次之袁凉水地区 粤酝 真菌物种多样性最
低遥 此结果与 粤酝真菌侵染率和 阅郧郧耘图谱分析结
果相一致遥
圆郾 源郾 源摇 黄檗菌根 阅郧郧耘 条带系统发育分析 摇 用
阅晕粤酝粤晕软件对目的序列与每条序列亲缘关系最
近的已鉴定出来的微生物进行多序列比对袁构建系
统发育树袁以显示目的序列与已知 粤酝 真菌之间的
亲缘关系及其系统地位遥 从系统发育树图 缘 可以看
出院 阅郧郧耘图谱中的 猿苑 条条带主要含有 源 类菌群袁
即球囊霉属尧盾孢囊霉属尧多孢囊霉属及肉盘菌科遥
测序序列 蕴郧怨尧再郧怨 和 酝郧员员 原 员 与数据库中盾孢囊
霉属有较近的亲缘关系袁同源性达 怨怨豫 袁归为一族袁
命名为 郧则燥怎责玉曰 测序序列 酝郧愿 与数据库中多孢囊
霉属同源性达 怨愿豫 袁单列一族袁命名为 郧则燥怎责域遥 测
序序列 酝郧员猿 与肉盘菌科同源性达 怨源豫 袁属同一分
支袁将其归为一族袁命名为 郧则燥怎责郁遥 其他 猿源 条条
带与数据库中球囊霉属亲缘关系很近袁同源性达
怨远豫 袁归为一族袁命名为 郧则燥怎责 芋遥
源园员
摇 第 怨 期 王摇 雪等院 不同生境黄檗 粤酝真菌菌群结构分析
图 缘摇 阅郧郧耘序列与其他近缘种的系统发育树
云蚤早援 缘摇 阅郧郧耘 泽藻择怎藻灶糟藻泽 葬灶凿 贼澡藻 责澡赠造燥早藻灶藻贼蚤糟 贼则藻藻 燥枣 贼澡藻蚤则 糟造燥泽藻造赠 则藻造葬贼藻凿 泽责藻糟蚤藻泽
渊节点上的数字表示 员 园园园 自展后的数值冤 月燥燥贼泽贼则葬责 增葬造怎藻泽 渊藻曾责则藻泽泽藻凿 葬泽 责藻则糟藻灶贼葬早藻泽 燥枣 员园园园 则藻责造蚤糟葬贼蚤燥灶泽冤 葬则藻 泽澡燥憎灶 葬贼 遭则葬灶糟澡鄄责燥蚤灶贼泽援
猿摇 讨论
近年来袁粤酝 真菌菌群结构分析研究的分子技
术主要是基于对 粤酝 真菌 则阅晕粤 的序列分析袁这种
技术在 粤酝真菌分子鉴定及群落研究等方面均取得
很大的成功渊运燥憎葬造糟澡怎噪 藻贼 葬造援袁 圆园园圆曰 砸藻凿凿赠 藻贼 葬造援袁
圆园园缘冤遥 目前袁各种 粤酝真菌特异性引物已被设计出
来袁用于扩增野功能基因冶以进行 孕悦砸鄄阅郧郧耘 分析
渊杂葬噪怎则葬蚤 藻贼 葬造援袁 圆园园苑冤遥
杂蚤皂燥灶等渊员怨怨圆冤和 匀藻造早葬泽燥灶 等渊员怨怨愿冤分别设
计的引物 晕杂猿员 和 粤酝员 能够特异性扩增所有 粤酝真
菌种类遥 其中 晕杂猿员 是真核生物通用引物袁粤酝员 是
粤酝真菌 员愿杂 则阅晕粤渊杂杂哉 则阅晕粤冤的特异性扩增引物遥
酝葬等渊圆园园缘冤和刘永俊等渊圆园园苑冤利用 晕杂猿员 原 郧悦 辕
粤酝员 引物对的 孕悦砸 产物袁分别对不同样地土壤 粤酝
真菌群落和黄土沟壑柠条渊悦葬则葬早葬灶葬 噪燥则泽澡蚤灶泽噪蚤蚤冤粤酝
真菌群落进行了 阅郧郧耘 分析袁得到了较好的结果遥
但龙良鲲等渊圆园园缘冤利用该引物对始终未能得到清
缘园员
林 业 科 学 源愿 卷摇
晰尧重复性好的 阅郧郧耘 条带曰 而通过利用 晕杂猿员 原
郧悦 辕 郧造燥造引物对进行第 猿 轮 孕悦砸后得到了条带清晰
阅郧郧耘图谱遥 推测其原因可能在于片段太大袁不适
合进行 阅郧郧耘分析遥 阅郧郧耘技术一般要求目标片段
在 缘园园 遭责 以下袁且应为物种间可变区遥 此外袁
阅葬灶蚤藻造造 等 渊 圆园园员 冤 和 砸藻凿藻糟噪藻则 渊 圆园园园 冤 研究发现
晕杂猿员 辕 粤酝员 引物对具有一定的缺陷袁引物 粤酝员 不能
扩增原囊霉科 渊 粤则糟澡葬藻燥泽责燥则葬糟藻葬藻冤 和类球囊霉科
渊孕葬则葬早造燥皂葬糟藻葬藻冤圆 个科的 粤酝真菌曰 其次袁由于混合
的 阅晕粤样品中含有部分非 粤酝 真菌以及宿主的基
因组污染袁这些非 粤酝 真菌模板在极高的退火温度
下渊远缘益冤也能与 粤酝员 辕 晕杂猿员 引物对产生一定效率
的非特异性扩增遥 利用该引物对进行研究时会得到
许多子囊菌尧担子菌等非 粤酝真菌序列遥
本文利用 粤酝 真菌的 晕杂猿员 辕 郧造燥造 区进行 阅郧郧耘
分析袁经多次试验袁得到了重复性较好的结果遥 所测
得 阅郧郧耘条带序列仅 酝郧员猿 所代表的菌群与肉盘菌
科真菌相似性达 怨源豫 袁该菌种不属于 粤酝 真菌外袁
其他 阅郧郧耘条带所代表的菌群均为 粤酝真菌遥 该试
验结果与接伟光渊圆园园愿冤通过对 粤酝 真菌 阅郧郧耘 条
带测序显示 晕杂猿员 辕 郧造燥员 引物对扩增出与病原微生物
匀赠责燥灶藻糟贼则蚤葬 遭怎曾蚤 的相似性很高的菌群的结果相似袁
说明 晕杂猿员 辕 郧造燥员 引物对也能扩增出非 粤酝真菌遥 近
年来袁各国科学家们试图设计更好的 粤酝 真菌特异
性引物袁但均未取得成功遥 从不同研究者的试验结
果来看袁引物对 晕杂猿员 辕 粤酝员 虽然存在一定的缺陷袁
但仍然能够较为真实地反映出 粤酝真菌菌群结构的
变化袁所以该引物对在 粤酝 真菌菌群结构研究中仍
然广泛使用遥 如一些研究者利用这对引物同时结合
其他的分子技术已对各种生态系统中的 粤酝真菌群
落进行了广泛研究袁并得到了较理想的试验结果
渊砸藻凿凿赠 藻贼 葬造援袁 圆园园缘曰 酝葬 藻贼 葬造援袁 圆园园缘冤遥
由于 阅郧郧耘 技术易造成对菌群结构多样性的
过高或过低的估测袁在某些情况下袁可能会导致一个
种类多于一条带的现象发生袁因此不易鉴定群落结
构到种的水平渊刘永俊袁 圆园园苑冤遥 阅郧郧耘 技术能分离
较小的片段渊达 缘园园遭责冤袁较长的片段分离率下降袁这
点限制了用于系统发育分析袁所以本试验中由于一
些条带序列信息量有限袁测序后只能将其归于
郧造燥皂怎泽袁而不能将其进一步分类遥 利用 阅郧郧耘 技术
对于微生物菌群结构分析袁尚停留在定性阶段袁无法
准确分析各类 粤酝真菌的数量及各种 粤酝真菌在该
生态系统中所发挥的作用遥 但是袁如果再辅以其他
技术袁将可以在一定程度上避免该技术所带来的缺
陷袁从而使该技术成为 粤酝 真菌群落研究中的有力
工具遥
参 考 文 献
蔡柏岩袁 葛菁萍袁 接伟光袁 等援 圆园园怨援 黄檗根围丛枝菌根真菌菌群结
构分析援 菌物学报袁 圆愿渊源冤院 缘员圆 原 缘圆园援
董秀丽袁 赵摇 斌援 圆园园远援 嵌套多重 孕悦砸要要要研究田间植物部分丛枝
菌根真菌和微生物区系的一个可行技术援 中国科学院 生命科学
版袁 猿远渊员冤院 缘怨 原 远缘援
范继红袁 杨国亭袁 穆立蔷袁 等援 圆园园远援 接种丛枝菌根真菌对黄檗苗木
主要 猿 种生物碱含量的影响援 防护林科技袁 渊缘冤院 圆源 原 圆远援
接伟光援 圆园园愿援 黄檗渊孕澡藻造造燥凿藻灶凿则燥灶 葬皂怎则藻灶泽藻冤丛枝菌根真菌鉴定及
菌群结构分析援 黑龙江大学硕士学位论文援
接伟光袁 蔡柏岩袁 葛菁萍袁 等援 圆园园苑援 黄檗丛枝菌根真菌鉴定援 生物
技术袁 员苑渊远冤院 猿圆 原 猿缘援
刘永俊援 圆园园苑援 黄土沟壑区柠条丛枝菌根生态学研究援 上海交通大
学硕士学位论文援
龙良鲲袁 羊宋贞袁 姚摇 青袁 等援 圆园园缘援 粤酝 真菌 阅晕粤 的提取与 孕悦砸鄄
阅郧郧耘分析援 菌物学报袁 圆源渊源冤院 缘远源 原 缘远怨援
魏摇 薇援 圆园园苑援 利用 阅郧郧耘技术研究黑龙江省各地沤麻系统中细菌
多样性援 黑龙江大学硕士学位论文援
阎秀峰援 圆园园猿援 药用木本植物的生态保护援 应用生态学报袁 员源渊怨冤院
员缘远员 原 员缘远源援
粤灶凿则佴泽 孕 杂袁 酝葬则侏葬 蕴怎蚤泽葬 杂 酝袁 粤灶凿则佴泽 孕 孕袁 藻贼 葬造援 圆园园怨援 粤则遭怎泽糟怎造葬则
皂赠糟燥则则澡蚤扎葬造 枣怎灶早蚤 蚤灶糟则藻葬泽藻凿 早则燥憎贼澡袁 灶怎贼则蚤藻灶贼 怎责贼葬噪藻 葬灶凿 贼燥造藻则葬灶糟藻 贼燥
泽葬造蚤灶蚤贼赠 蚤灶 燥造蚤增藻 贼则藻藻泽 怎灶凿藻则 灶怎则泽藻则赠 糟燥灶凿蚤贼蚤燥灶泽援 允燥怎则灶葬造 燥枣 孕造葬灶贼
孕澡赠泽蚤燥造燥早赠袁 员远远渊员猿冤院 员猿缘园 原 员猿缘怨援
月藻凿蚤灶蚤 杂袁 粤增蚤燥 蕴袁 粤则早藻泽藻 耘袁藻贼 葬造援 圆园园苑援 耘枣枣藻糟贼泽 燥枣 造燥灶早鄄贼藻则皂 造葬灶凿 怎泽藻
燥灶 葬则遭怎泽糟怎造葬则 皂赠糟燥则则澡蚤扎葬造 枣怎灶早蚤 葬灶凿 早造燥皂葬造蚤灶鄄则藻造葬贼藻凿 泽燥蚤造 责则燥贼藻蚤灶援
粤早则蚤糟怎造贼怎则藻袁 耘糟燥泽赠泽贼藻皂泽 葬灶凿 耘灶增蚤则燥灶皂藻灶贼袁 员圆园院 源远猿 原 源远远援
悦燥皂藻躁燥 孕袁 粤扎糟佼灶鄄粤早怎蚤造葬则 悦袁 月葬则藻葬 允 酝袁 藻贼 葬造援 圆园园源援 栽藻皂责燥则葬造
贼藻皂责藻则葬贼怎则藻 早则葬凿蚤藻灶贼 早藻造 藻造藻糟贼则燥责澡燥则藻泽蚤泽 渊 栽栽郧耘冤 葬泽 葬 贼燥燥造 枣燥则 贼澡藻
糟澡葬则葬糟贼藻则蚤扎葬贼蚤燥灶 燥枣 葬则遭怎泽糟怎造葬则 皂赠糟燥则则澡蚤扎葬造 枣怎灶早蚤援 云耘酝杂 酝蚤糟则燥遭蚤燥造燥早赠
蕴藻贼贼藻则泽袁 圆源员院 圆远缘 原 圆苑园援
阅葬藻蚤 郧袁 粤则凿藻噪葬灶蚤 酝 砸袁 砸藻躁葬造蚤 云袁 藻贼 葬造援 圆园园怨援 粤造造藻增蚤葬贼蚤燥灶 燥枣 泽葬造蚤灶蚤贼赠
泽贼则藻泽泽 燥灶 憎澡藻葬贼 赠蚤藻造凿袁 赠蚤藻造凿 糟燥皂责燥灶藻灶贼泽袁 葬灶凿 灶怎贼则蚤藻灶贼 怎责贼葬噪藻 怎泽蚤灶早
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渊责任编辑摇 朱乾坤冤
叶长江三峡库区森林景观格局与景观恢复研究曳
渊长江三峡库区森林生态系统研究系列冤
摇 摇 本书基于景观生态学理论和 猿杂技术袁以长江三峡渊本书简称三峡冤库区 栽酝影像及自然尧社会和经济数
据为基础袁重点评价了三峡库区自然景观与环境特征袁研究了三峡库区森林景观格局袁探讨了森林景观恢复
规划的技术与方法袁并结合实际开展了三峡库区森林景观恢复的规划研究遥 全书包括 源 篇 圆园 章袁系统地揭
示了三峡库区自然景观分异与森林景观格局特征袁提出了森林景观恢复的方法与途径袁为三峡库区森林景观
恢复与重建的规划与设计提供了重要依据遥
本书是景观生态学理论与方法在三峡库区森林景观恢复规划与设计中的应用研究成果袁是森林景观生
态研究人员尧林业规划设计人员和森林景观管理者的重要参考资料袁也可供生态规划尧土地规划人员及高等
院校师生借鉴遥
肖文发尧周志翔尧黄志霖等著袁陨杂月晕 怨苑愿 原 苑 原 园猿 原 园猿源猿园缘 原 缘 辕 杂窑园苑苑源袁定价 愿园援 园园 元袁开本 月缘袁平装袁
圆园员圆 年 远 月出版遥
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