全 文 ：园 艺 学 报 2007，34(6)：1379—1386
Acta Hortieuhurae Siniea
冬枣浆胞病病原茵鉴定及其防治研究
徐作 ，李长松 ，李 林，李 凡，齐军山
(山东省农业科学院植物保护研究所 ，济南 250100)
摘 要：近年来冬枣上发生的一种引起枣果浆烂的病害，在山东省冬枣主产区为害很大。病原菌分离
和致病性测定结果表明，该病主要 由菜豆壳球孢菌 [Macrophomina phaseolina(Tassio)Goidanich]侵染所
致。经散射光诱导7～10 d，在室内PDA培养基和接种的枣果上可产生分生孢子器。菌丝生长的最适温度
为 25～32℃I=，最适 pH 5．5～8．0。室内测定结果表明，25％凯润 EC、60％百泰 WG、25％阿米西达 sc和
50％翠贝 DF等4种药剂对菜豆壳球孢菌的抑制中浓度 (EC )分别为0．1970、0．5770、4．4042和 55．3120
g／mL。田间试验表明，50％翠贝 DF 330 mg／L或 25％凯润 EC 250 mg／L或 60％百泰 WG 500 mg／L喷雾，
防治效果可达 88．51％ ～97．60％。
关键词：冬枣；浆胞病；病原鉴定；菜豆壳球孢菌；药剂防治
中图分类号：S 665．1；S 432 文献标识码：A 文章编号 ：0513—353X (2007)06．1379-08
Etiology of Thick Liquid Disease Fruit of Ziz2phus jujuba Mil1．‘Zhanhua
Dongzao’and Its Control
XU Zuo—ting，LI Chang—song ，LI Lin，LI Fan，and QI Jun—shan
(Institute ofPlant Protection，Shandong Academy ofAgricultural Sciences，Jinan 250100，China)
Abstract：The thick liquid disease fruit of dongzao iujube iS one of the most important diseases in main
producing areas in Shandong Province．The isolation and pathogenicity tests showed that the disease was
caused by Macrophomina phaseolina．The biological characteristics of phaseolina were studied in this pa—
per．The results of lab tests showed that the median inhibitory concentrations(EC n)of Ovraclostrobin 25％
EC．Ovraclostrobin—metiram 60％ WG。Azoxystrobin 25％ SC and Kresoxim—methyl 50％ DF for phaseolina
were 0．1970，0．5770，4．4042 and 55．3 120 g／mL，respectively．rI1he field trial results demonstrated that
the control eficacy of 330 mg／L Kresoxim—methyl 50％ DF，250 mg／L Ovraclostrobin 25％ EC or 500 mg／L
Ovraclostrobin—metiram 60％ W G against phaseolina was 88．5 1％ 一97．60％ ．
Key words：Ziziphus jujuba；rI1hick liquid disease fruit；Pathogenic identifcation；Macrophomina
phaseolina：Chemical control
我国冬枣 (Ziziphusjujuba Mil1．‘Zhanhua Dongzao’)主要分布在渤海湾西南岸的山东省滨州市和
河北省沧州市等地。冬枣以其果肉细嫩多汁、甘甜清香、含糖量高、富含维生素 C而深受人们的喜
爱。近几年随着市场需求量的增大和经济效益的增加，冬枣的种植面积迅速扩大，储藏保鲜量也越来
越大。但随着连作年限延长，冬枣病害，尤其是浆胞病 日益加重。不但影响产量，还影响冬枣贮藏保
鲜后的果实质量，严重时出现大量烂果，已经成为影响冬枣生产的重要病害之一 (孙蕾 等，2004；
季延平 等，2005；赵淑艳 等，2005)。自20世纪70年代末公开报道枣缩果病以来 ，相继报道了多
收稿日期：2007—04—23；修回日期：2007-08—26
基金项目：国家 ‘十一五’科技支撑计划项 目 (2006BAD07B02)
通讯作者 Author for correspondence(E—mail：zbsbls@saas．ac．an)
致谢 ：病原菌鉴定工作得到中国农业科学院作物科学研究所王晓鸣研究员指导 ，谨表谢忱。
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园 艺 学 报 34卷
种严重危害枣果实的病害。冬枣烂果病是 21世纪初在我国才正式报道的病害，辛玉成等 (2003)将
其分为黑斑和溃疡、软腐等不同类型。孙蕾等 (2004)和赵淑艳等 (2005)分别对冬枣采后储藏期
浆胞病病原菌进行了分离鉴定。
作者于 2002～2006年对生长期冬枣浆胞病进行了病原菌分离鉴定及药剂防治研究，以期明确其
病原因子并为有针对性的防治提供依据。
1 材料与方法
1．1 病原菌分离和鉴定
病原菌分离采用常规组织分离法。采用马铃薯葡萄糖琼脂培养基 (PDA)平板分离获得的病原
菌菌丝在 25～28~C、光照条件下培养 5～7 d，观察分生孢子器的产生，然后经单分生孢子器分离纯
化菌种，镜检观察其形态特征。
形态学特征鉴定参照魏景超 (1979)的描述。
1．2 致病性及寄主范围测定
对病原菌分离中出现频率较高的菌株进行致病性测定。
果柄菌丝接种法：摘取刚发红的新鲜健康冬枣果，经酒精表面消毒后，将在 PDA培养基上培养
5～7 d的病菌菌丝连带基质紧贴在枣柄 (果把)凹陷处，每皿放 5个枣，重复3皿，以不接菌为对
照。接种后的枣果置塑料袋内，保湿48 h后，在25～28~C恒温箱内培养，逐 日观察病情。接种 10～
14 d，在冬枣果实长满灰黑色菌丝后 ，将其在散射光条件下培养5～7 d，在菌丝表面观察到分生孢子
器时调查结果，并对病果进行再分离，验证是否与原菌株相同。
结果枝 (枣吊)、果枝刺塞菌丝接种法：先在新鲜健康的枣吊、果枝上用灭菌手术刀划一浅口，
长度为3～5 mm，挑取在PDA平板上生长5 d的菌丝塞入切口中，置塑料袋中保湿培养。将从冬枣褐
斑病病果分离到的褐斑病菌 (Ahernaria sp．)采用刺塞菌丝接种法接种，在新鲜冬枣果上用灭菌手术
刀划伤果皮，长度为2～3 mm，将培养5～7 d的病菌菌丝塞入切口中，以无菌水接种作对照。培养
同果柄菌丝块接种法。
寄主范围测定：幼苗采用盆栽土壤接菌法。土壤先用40％甲醛消毒，将麦粒菌剂按0．5％接菌量
进行土壤接菌。菜豆、豇豆、心叶烟、花生、高梁、棉花、番茄植株长至3～7叶期移栽，每种作物
接 5盆，每盆接4株，共接种 35盆。乐陵小枣、酸枣、苹果 (红星、富士)、梨 (鸭梨)、甜椒、番
茄、土豆、甘薯和茄子等果实接种用菌丝块接种法。
1．3 病原菌生物学特性
将培养4 d的浆胞病菌沿菌落边缘打取直径为5 mm的菌丝块，置于 PDA培养基、燕麦片琼脂培
养基 (OMA)、玉米粉琼脂培养基 (CMA)、蔬菜汁琼脂培养基 (V )、胡萝 卜琼脂培养基 (CA)和
马铃薯琼脂培养基 (PA)6种不同培养基上；在 PDA培养基上进行的不同温度测试范围为 10、20、
25、30、32、35、38、40~C；在 PDA培养基上进行的不同pH值测试范围为5．5～8．0。除不同温度试
验外，其他试验均在 26～28~C条件下培养，测量菌落直径，观察菌落形态。
1．4 室内药剂筛选
供试药剂为25％凯润 EC、60％百泰 WG、50％翠贝 DF[均系巴斯夫 (中国)股份有限公司生
产]和25％阿米西达 DF(由先正达公司生产)。将供试药剂分别配成不同浓度 (100、50、10、0．1、
0．01 g／mL)的 PDA含药培养基平板，然后将浆胞病菌菌块 (d：5 mm)置于平板中央，以不加药
为空白对照。每处理重复3皿，26～28~C培养。待对照菌丝长满皿时，测量各处理的菌落直径，计算
抑菌率和抑制中浓度 (EC如)。
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2．2 病原菌分离及鉴定
2．2．1 病原菌分离
2001—2005年从沾化、无棣 、章丘等地的60棵冬枣树上采集到 150个病果，采用组织分离法分
离 11次，分离出 133块发病组织。
结果表明，在 PDA培养基上菜 豆壳球孢 菌 (Macrophomina sp．)组织块 占分 离总块数 的
78．20％，链格孢菌 (Alternaria sp．) 占 18．05％，串珠镰孢霉菌 (Fusarium monilifo ) 占 1．5％，
无菌组织块占分离总块数的 1．5％，毛霉菌 (Mucor sp．)等杂菌占分离总块数的0．75％。从分离结
果看出，菜豆壳球孢的出现频率最高。
2．2．2 病原茵致病性测定
从冬枣病果分离获得的01—1、03—1和04—1菌株经对果柄菌丝块接种，其病果率均为100％，病情
指数分别为 100、90．48和97．04。
03．1菌株经对结果枝 (枣吊)和果枝刺塞菌丝接种后，其病果率均为100％，病情指数分别为
71．43和 33．33。
3个不同接种部位中以果柄接种发病最重。
致病性测定结果表明，菜豆壳球孢菌对冬枣果实有较强致病力，表现出典型冬枣浆胞果症状
(图2)，与田间病果症状相同。经重分离获得的病菌分生孢子器与田间病果分离获得的病菌分生孢子
器相同。
接种链格孢菌 (Alternaria sp．)菌株的冬枣果实产生褐色或黑褐色小病斑 ，未出现冬枣浆胞病果
典型症状 (表 1)。
表1 冬枣浆胞病病原分离物致病性测定结果
Table1 Thetest results ofpathogenicity of someisolatesof 胍 Phaseolina andAiternaria sp．
菌种
Species 釜e蒜 重复 果 病果 蒙善diseased病情指 Reptis TotalDiseased ⋯ Diseaseindex
M phaseolirta Ol一1 沾化
Zhanhua
04—1 章丘
Zhangqiu
03—1 沾化
Zhanhua
03—1 沾化
Zhanhua
03—1 沾化
Zhanhua
Alternaria sp． 03-8 沾化
Zhanhua
果柄菌丝块接种 Inoculation with 4
placing myeelial clump on fruit petiole
不接菌 No inoculation 4
果柄菌丝块接种 Inoculation with 7
placing myeelial clump on fruit petiole
不接菌 No inoculation 2
果柄菌丝块接种 Inoculation with 7
placing myeelial clump on fruit petiole
不接菌 No inoculation 3
枣吊刺塞菌丝接种 4
Inoculation with placing mycelia into
needle puncture in the fruiting cane
不接菌 No inoculation l
果枝刺塞菌丝接种 4
Inoculation wi山 placing mycelia into
needle puncture in the cane
不接菌 No inoculation l
果实刺塞菌丝接种
Inoculation with placing mycelia
into needle puncture in the fruit
不接菌No inoculation
l00
O
97．04
O
90．48
O
71．43
O
33．33
O ∞ O ∞ O ∞ O ∞
I l l l
O 9 O l O 7 O 6 2 2 l
2 9 O l 5 7 3 6
l 2 l 2 l l
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6期 徐作 等：冬枣浆胞病病原菌鉴定及其防治研究 l383
2．2．3 病原茵形态特征
该菌的分生孢子器暗褐色球形，初埋生、分散，后排列紧密，直径为 95．4～307．4 Ixm，高
116．6～498．2 ；分生孢子单孢无色椭圆形、梭形或纺锤形，两端略尖，长 17．0～30．7 m，宽
5．3～9．5 Ixm；菌核生于病果组织或培养基中，黑色，坚硬，直径为 42．4～254．4 Ixm (图3)。
图3 病原菌显微镜照片
Fig．3 Microscope photographs of M phaseolina f Tassio)Goidanich
2．2．4 病原茵培养特性
从表2可以看出，病原菌 ( phaseolina)在6种不同培养基上可形成 3种不同类型的菌落。第
1种类型气生菌丝多而密，如在 PDA培养基上培养72 h，菌落直径为85 mm，培养基表面可产生多而
密集的分生孢子器；第2种类型菌丝稍稀薄，分生孢子器少，如在 OMA、V 、CMA和 CA培养基上
出现的多为此类型；第3种类型菌丝稀薄，不形成分生孢子器，如在 PA培养基上培养72 h菌落直径
为48．33 mm。
菜豆壳球孢菌在 10、20、25、30、32、35、38、40~C不同温度下在 PDA培养基上培养 3 d的菌
落直径分别为 0、45．00、82．87、85．00、85．00、37．33、0和0 mm，菌丝生长最适温度为 25～32~C，
在20~C和35~C生长缓慢，10~(2和高于 38~C菌丝不生长。
在 PDA培养基上培养6 d菌落生长结果 (表3)表明，菜豆壳球孢菌在 pH值5．5～8．0范围内均
可生长 。
表 2 菜豆壳球孢菌 (M phaseolina)在不同
培养基上的菌落形态特征
Table 2 The colony growth of phaseolina on 6 media
注：在 27~C条件下培育 72 h，+菌丝稀薄， ++菌丝稍稀
薄，+++菌丝较密，++++菌丝茂密。
Note：Incubated at 27oC for 72 h， + thin hyphae， + + thinnish
hyphae． + + + thick hyphae， + + + + thickish hyphae．
表3 不同pH值下菜豆壳球孢菌 (M phaseolina)菌丝生长情况
Table 3 The co lony growth of M．phaseo／／na
at diferent pH (mm)
注：+菌丝稀薄，++菌丝稍稀薄，+++菌丝较密，
++++菌丝茂密。
Note： + thin hyphae， + + thinnish hyphae， + + + thick
hyphae．+ + + + thickish hyphae．
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2．2．5 寄主范围测定
测定结果表明，菜豆壳球孢菌接种乐陵小枣、酸枣、苹果 (富士、红星)、梨 (鸭梨、山棘梨)、
甜椒、土豆、甘薯和茄子果实的病果率均为 100％，病情指数分别为 94．29、100、100、100、100、
100、100、100、100和71．43；对菜豆、豇豆、心叶烟、花生的病株率均为 100％，病情指数分别为
85．71、80．45、75．o0、20．41；对高梁、棉花、番茄的病株率分别为94．40％、91．18％、57．14％，
病情指数分别为82．54、48．32、36．73，发病较轻的黄瓜病株率和病情指数分别为23．80％和 15．38。
从果园冬枣浆胞病果上分离的菌株，经过致病性测定，证明其为具有致病性的菌株，经重分离和
镜检，与田间病果分离获得的菌株相同。根据病原菌产生菌核和分生孢子器的形态特征及其培养性
状，鉴定为菜豆壳球孢菌 [Macrophomina phaseolina(Tassio)Goidanich，异名：Rhizoctonia bataticola
(Taub．)But1．]。
2．3 防治研究
2．3．1 室内药剂筛选
从表4可以看出，25％凯润 EC、60％百泰 WG、25％阿米西达 SC和50％翠贝 DF对菜豆壳球孢
菌均有较好的抑菌作用，可作为防治冬枣浆胞病的轮换药剂供生产上使用。
表4 药剂对菜豆壳球孢菌 ( phaseolina)的生物活性测定
Table 4 The biological activities of four fungicides against phaseolina
处理 Treatment
药剂
Fungicide
浓度
Concentration(p~g／mL)
菌落直径 抑菌率
Colony diameter(mm) Inhibition rate(％)
EC50
(I~g／mL)
25％凯润 EC
Ovraclostrobin 25％ EC
6o％百泰 WG
Ovraelostrobin—metiram 60％ WG
25％阿米西达 SC
Azoxystrobin 25％SC
50％翠 贝 DF
Kresoxim—methyl 50％ DF
98．34
95．4l
71．25
46．25
22．o9
l0o．0o
98．34
67．9l
28．34
2．50
69．5l
67．09
66．25
30．84
5．4l
53．75
47．9l
41．25
40．4l
21．25
2．3．2 田问防治试验
从田间试验结果 (表5)看出，50％翠贝DF 330 mg／L (芽前加喷 1次)的防效显著优于其250
mg／L处理的防效，与其他各处理防效均无显著差异。各处理的病情指数 (0．1 1～1．0)均极显著低
于不防治对照区病情指数 (4．59)。测产结果表明，药剂处理均极显著优于不防治对照区的产量。
" ∞ ∞ ∞ " ∞ ∞ ∞ ∞ ∞
L n L 强 ” 钾 钾一
●
叭 ● 叭 ● 叭 ● 叭 啪∞m n n 啪 ∞m n n 啪 ∞m n n ∞m 0 0
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6期 徐作埏等：冬枣浆胞病病原菌鉴定及其防治研究 1385
50％翠贝 DF(芽前加喷 1次药) 330
Kresoxim—methyl 50％ DF
(Extra control before sprouting)
50％翠贝DF 330
Kresoxim—methyl 50％ DF
50％翠贝DF 250
Kresoxim—methyl 50％ DF
25％凯润 EC 250
Ovraclostrobin 25％ EC
60％百泰 WG 500
Ovraclostrobin—metiram 60％ WG
对照Control 一
100 0．5 0．11 bB 97．60 aA 3．13 aA 32
． 07
0．33 bB 92．76 abA 3．22 aA 35．86
2．3．3 储藏期防病试验
将50％翠贝DF 330 mg／L(芽前加喷 1次)、50％翠贝DF 330 mg／L芽后喷施和不防治对照3个
处理中挑选的冬枣果，保鲜 110 d后进行的调查结果表明，冬枣浆胞病病果率分别为 16％、39．36％
和 87．95％，其病情指数分别为2．44、3．90和23．26，两个药剂处理对储藏期浆胞病果的防治效果分
别为89．51％和82．09％，其中50％翠贝 DF 330 mg／L(芽前加喷 1次)处理的防治效果显著优于其
330 mg／L处理。两个药剂处理的病情指数均极显著低于不防治对照区。
3 讨论
冬枣浆胞病是冬枣储藏期和生长期重要病害之一。孙蕾等 (2004)报道该病病原为交链孢霉
(Alternaria Nees)和根菌索菌 (Rhizomorpha Roth．ex Fr．)，而赵淑艳等 (2005)报道该病病原为链
格孢菌 [Alternaria alternate(Fr．)Keissler]和裸孢壳菌 [Emericela nidulans(Eid．)]。刘春琴等
(2004)报道，金丝小枣浆烂果病主要致病菌为仁果囊孢壳菌 [Physalospora obtuse(Schw．)Cooke．]、
细链格孢菌 [Alternaria alternate(Fr、)Keissler]和毁灭茎点霉菌 (Phoma destructive Plowr)。辛玉成
等 (2003)报道，引起冬枣烂果病的原因主要有两个：一为链格孢菌 (Alternaria sp．)单独侵染或与
细菌复合侵染，二为殴氏杆菌属细菌 (Erwinia sp．)、假单孢杆菌细菌 (Pseudomonas sp．)和黄单孢
杆菌细菌 (Xanthomonas sp．)侵染引起。
与前人研究结果不同，作者经过多年研究认为冬枣浆胞病的病原菌为菜豆壳球孢菌 『Macropho—
mina phaseolina(Tassio)Goidanich]。该菌侵染冬枣，以前未见报道，冬枣应为该菌的新寄主。该菌
系广生亚大茎点菌，可形成菌核和分生孢子器。值得指出的是，M．phaseolina在 PDA培养基平板上
可产生灰黑色菌丝和菌核，该菌在未产生分生孢子器前，极似无孢菌群真菌，但经散射光照射7～l0
d，即可出现大量半埋生的分生孢子器，是典型的广生亚大茎点菌。作者将产生分生孢子器的 ．
phaseolina接种冬枣果实，可出现典型的冬枣浆胞病果症状。接种Alternaria sp．菌株的冬枣果产生褐
色或黑褐色小病斑，未出现冬枣浆胞病果典型症状。该菌除侵染冬枣外，人工接种可侵染乐陵小枣、
酸枣、苹果、梨、甜椒 、番茄、土豆、甘薯和茄子的果实及块根 、块茎，还可侵染菜豆、豇豆、 f~,nf
烟、花生、高梁、棉花、番茄、黄瓜等多种植物，与魏景超 (1979)对球壳孢科广生亚大茎点菌寄
生范围广的报道一致。
5 O 5 8 5
0 O 0 7
∞ ∞ ∞ ∞ ∞
l 1 l I l
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l386 园 艺 学 报 34卷
菜豆壳球孢菌的越冬部位、果枝上的发病率与发生为害程度之间的关系，以及冬枣浆胞病发病条
件等尚需进一步研究。
不同的研究者，在不同时期、不同地区、不同生态型的枣园中，分离鉴定到的病原菌不同，甚至
差异很大 (魏天军和魏象廷，2006)。我们认为，冬枣果实病害的名称较乱，浆烂果病也称为浆枣
病、轮纹烂果病、浆包，采用统一的方法，确认统一的症状和明确的病原菌，对于冬枣果实病害的研
究和有针对性的防治是十分必要的。
冬枣浆胞病的药剂防治试验结果表明，50％翠贝 DF 330 mg／L增加一次芽前用药和发芽盛期开始
喷雾防治相比，虽然采收前的防治效果和产量没有显著差异，但在保鲜储藏后浆胞病果的发病率却差
异明显，芽前加芽后处理的防病效果显著优于芽后处理的防效。我们认为，芽前用药可能提前阻止了
枣树枝条上的M．phaseolina孢子和菌丝的萌发，降低了病原菌初侵染的菌源量，减少了对果柄的侵
染。该方法不仅对冬枣生长期浆胞病防效高，而且能够大大减轻储藏期浆胞病烂果的发生，防效显
著，具有一定推广价值和较好的经济效益。
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