全 文 ：中草药 Chinese Traditional and Herbal Drugs 第 44 卷 第 5 期 2013 年 3 月

·622·
不同来源救必应药材的质量评价
顾利红 1，毕福钧 1，陈 蔼 2
1. 广州市药品检验所，广东 广州 510160
2. 广东药学院中药学院，广东 广州 510000
摘 要：目的 对收集的 22 批救必应药材进行性状、显微、HPLC 指纹图谱鉴别。方法 以粉末显微特征为主，并采用 HPLC
法，色谱柱为 Dikma C18（200 mm×4.6 mm，5 μm），以乙腈（A）-0.1%磷酸水溶液（B）为流动相，进行梯度洗脱，体积
流量为 1.0 mL/min；检测波长 210 nm；柱温 35 ℃。结果 性状、粉末鉴别评价所得出的药材质量优劣结果与指纹图谱相似
度评价结果相一致，所建立的指纹图谱精密度、重复性、稳定性良好，可反映救必应药材的整体特征。结论 所建立的性状、
粉末鉴别方法可以用于救必应药材及其混淆品的鉴别，HPLC 指纹图谱可用于救必应药材的质量评价。
关键词：救必应；性状；显微鉴别；指纹图谱；HPLC
中图分类号：R286.022 文献标志码：A 文章编号：0253 - 2670(2013)5 - 0622 - 04
DOI：10.7501/j.issn.0253-2670.2013.05.024
Quality evaluation of Ilicis Rotundae Cortex from different sources
GU Li-hong1, BI Fu-jun1, CHEN Ai2
1. Guangzhou Institute for Drug Control, Guangzhou 510160, China
2. College of Chinese Materia Medica, Guangdong Pharmaceutical University, Guangzhou 510000, China
Key words: Ilicis Rotundae Cortex; characteristic; microscopic identification; fingerprint; HPLC

救必应 Ilicis Rotundae Cortex 为冬青科植物铁
冬青 Ilex rotunda Thunb. 的干燥树皮，具有清热解
毒、凉血止血、行气止痛等功效，为广东、广西民
间常用中药，药用部位为树皮，包括树干皮及枝皮。
该品种收载于《中国药典》2010 年版[1]，本课题组
对其质量标准进行了深入研究，主要对收集的 22
批药材进行生药鉴定、HPLC 指纹图谱进行研究。
1 仪器与试药
Olympus BX60 显微镜、Agilent 1100 高效液相
色谱仪、Agilent 1200 高效液相色谱仪和岛津
LC—20AT 高效液相色谱仪。数据处理软件：中药
色谱指纹图谱相似度评价系统（2004 年 A 版）。
紫丁香苷对照品（批号 111574-200201，中国
药品生物制品检定所）；长梗冬青苷、铁冬青酸、芥
子醛葡萄糖苷对照品由原广州市医药工业研究所刘
国樵主任药师提供，经 HPLC 归一化法测定，质量
分数为 99.7%。救必应对照药材（批号 1076-9901，
中国药品生物制品检定所）。乙腈为色谱纯，水为超
纯水，其他试剂均为分析纯。
通过野外采集、从中药材市场购买、企业提供
等方式共收集 22 个样品，均经广州市药品检验所刘
柏英副主任药师鉴定，见表 1。
2 方法与结果
2.1 性状
对收集的 22 批药材从部位、外观形状、颜色、
断面质地、掺杂等方面进行评价，结果见表 1。《广
东省中药材标准》第一册[2]“救必应”项下指出，
广东地区曾发现以冬青科植物米碎木（青皮香）Ilex
godajam (Colebr.) Wall. 的树皮充救必应使用的情
况，米碎木树皮的典型特征为树皮厚，有的可达 3
cm，断面粗糙，米碎样或沙粒样。从 22 批药材的
外观性状看，样品 11、15 与米碎木的性状相符，为
救必应的混淆品。样品 13、16 与 17 多为小枝皮，
且掺杂有木质部碎片，属质量较差的 3 批样品。样
品 1～3、7、9、14、18～20 共 9 个样品树干皮较多，
皮厚、呈长卷筒状，判定其质量较优。
2.2 显微鉴别
本品粉末浅棕色至棕褐色。石细胞甚多，浅黄

收稿日期：2012-10-13
作者简介：顾利红（1967—），女，江苏武进人，主任中药师，生药学硕士，研究方向为中药检验及质量分析。
Tel: (020)26283696 13503053838 E-mail: Gulh@gzfda.gov.cn
中草药 Chinese Traditional and Herbal Drugs 第 44 卷 第 5 期 2013 年 3 月

·623·
表 1 22 批救必应药材基本情况
Table 1 General survey of 22 batches of Ilicis Rotundae Cortex
编号 来 源 药用部位 主要外观性状
S1 湖南永州 树干皮、枝皮 呈卷筒状，厚 1～3 mm，内表皮黄棕色或黄褐色
S2 广东阳山 树干皮、枝皮 呈卷筒状，厚 1～3 mm，内表皮黄棕色
S3 广东/广州中一药业 树干皮、枝皮 呈长卷筒状，厚约 3 mm，内表皮黄棕色
S4 湛江药检所 枝皮多、树干皮 呈卷筒状，厚 1～5 mm，内表皮黄褐色或黑褐色
S5 广东韶关曲江 枝皮、树干皮 呈卷筒状，厚 1～3 mm，内表皮黄棕色或黑褐色
S6 广东鼎湖 枝皮 呈片状，厚约 1 mm，表面有少量苔藓
S7 广东翁源 枝皮、树干皮 呈长卷筒状，厚 1～5 mm，内表皮黄绿色或黑褐色
S8 广东连州 枝皮、皮 呈卷筒状，厚 2～5 cm，内表皮黄褐色
S9 福建/广州中一药业 树干皮、枝皮 呈长卷筒或碎块，厚 1～2 mm，内表皮黑褐色
S10 广西/广州清平药材市场 树干皮、枝皮 呈卷筒状，厚 2～4 mm，内表皮黑褐色
S11 广西/广州清平药材市场 枝皮、树干皮 厚 8～12 mm，断面粗糙呈明显颗粒状
S12 广西/广州清平药材市场 枝皮、树干皮 呈卷筒状，厚 1～8 mm
S13 广西/广州清平药材市场 碎枝皮 细碎片，薄，厚约 1 mm，内表皮黄绿色或黄褐色
S14 广西灵山 树干皮、枝皮 呈长卷筒状，厚 2～4 mm，内表皮黄色或褐色，掺有木部
S15 湛江嘉辉药业 枝皮、树干皮 呈短碎块，有的略卷曲，厚 1～20 mm，断面粗糙呈明显颗粒状
S16 江西百草行 枝皮、树干皮 宽大，厚约 3 mm，内表面黄色
S17 江西赣州 碎枝皮、树干皮 呈小片状，厚约 2 mm，掺有木部
S18 广州星群药业 枝皮、树干皮 呈卷筒状，厚 0.2～0.5 cm，内表皮黑褐色
S19 广州星群药业 枝皮、树干皮 呈卷筒状，厚 0.2～0.5 cm，内表皮黑褐色
S20 广州星群药业 枝皮、树干皮 呈卷筒状，厚 0.2～0.5 cm，内表皮黑褐色
S21 韶关阳元中药饮片公司 枝皮、树干皮 呈长卷筒状，厚 1～2 mm，内表皮黑褐色
S22 广西博白 树干皮 长块状，厚 8～13 mm，内表皮黑褐色

绿色或浅黄色，类方形、椭圆形或不规则形，单个
或成群，长 30～80 μm，宽 14～56 μm，壁厚约 20 μm，
孔沟明显；有的胞腔内含草酸钙方晶，含方晶石细
胞通常壁较薄，方晶充塞整个胞腔。草酸钙方晶众
多，呈多面形或正方形、菱形、类双锥形，散在或
存在于薄壁细胞中，长 17～40 μm，宽 7～25 μm。
有的薄壁组织中可见草酸钙簇晶，或草酸钙簇晶及
方晶共存。木栓细胞无色或浅棕色，成群或单个散
离，表面呈多角形，壁稍厚，微木化，可见细小纹
孔。救必应与米碎木两者显微特征见图 1 和 2。

图 1 救必应石细胞 (A)、草酸钙方晶及簇晶 (B) 和木栓细胞 (C) 的粉末显微特征图
Fig. 1 Powder microscopic characteristic figures of stone cells (A), square and cluster crystal
of calcium oxalate (B), and cork cells (C) in Ilicis Rotundae Cortex

图 2 米碎木石细胞及含晶石细胞 (A)、草酸钙方晶 (B) 和木栓细胞 (C) 的粉末显微特征图
Fig. 2 Wood powder microscopic charactertistic figures of stone cells (A), square crystal
of calcium oxalate (B), and cork cells (C) in I. godajam
30 μm
30 μm 20 μm
A B C
20 μm 20 μm 20 μm
中草药 Chinese Traditional and Herbal Drugs 第 44 卷 第 5 期 2013 年 3 月

·624·
2.3 HPLC 指纹图谱评价
2.3.1 色谱条件与系统适应性试验 Dikma C18
（200 mm×4.6 mm，5 μm）色谱柱；以乙腈（A）-0.1%
磷酸水溶液（B）为流动相，梯度洗脱，0～70 min，
10%～60% A；70～80 min，60% A。体积流量 1.0
mL/min；检测波长为 210 nm；柱温为 35 ℃；理论
塔板数按紫丁香苷色谱峰计算不低于 3 000。
2.3.2 对照品溶液的制备 取紫丁香苷、长梗冬青
苷、芥子醛葡萄糖苷、铁冬青酸对照品适量，精密
称定，加 50%甲醇制成含紫丁香苷 0.1 mg/mL、长
梗冬青苷 0.3 mg/mL、芥子醛葡萄糖苷 30 μg/mL 和
铁冬青酸 0.1 mg/mL 的混合溶液，即得。
2.3.3 供试品溶液的制备 取本品粉末（过 3 号筛）
约 0.1 g，精密称定，置具塞锥形瓶中，精密加入 50%
甲醇 25 mL，密塞，摇匀，称定质量，超声处理 30
min（功率 250 W，频率 40 kHz），放冷，再称定质
量，用 50%甲醇补足减失的质量，摇匀，滤过，取
续滤液，即得。
2.3.4 检测波长的选择 考虑到救必应药材中含有
黄酮、酚类、木脂素和皂苷等化合物成分，制备供
试品溶液进样分析，经二极管阵列检测器检测，得
到各主要色谱峰的全波长扫描图，综合各色谱峰的
分析结果，表明以 210 nm 为检测波长检测的色谱
峰较多，且色谱峰的分离度、峰形等均较好，因此，
选择 210 nm 作为检测波长。
2.3.5 专属性试验 精密吸取混合对照品溶液、供试
品溶液各 20 μL，注入液相色谱仪，测定，见图 3。
2.3.6 稳定性试验 取样品（S2）的供试品溶液，
在室温下放置 0、2、4、8、12、24 h 后分别进样，


1-紫丁香苷 2-芥子醛葡萄糖苷 3-长梗冬青苷 4-铁冬青酸
1-syringin 2-sinapaldehyde glucoside 3-pedunculoside 4-rotundic acid
图 3 供试品 (A) 和对照品 (B) 的 HPLC 色谱图
Fig. 3 HPLC chromatograms of samples (A)
and reference substances (B)
依法测定，将所得色谱图 AIA 格式数据导入中药色
谱指纹图谱相似度评价系统软件（2004A 版）进行
相似度计算（以中位数建立参照特征图谱），结果显
示，样品在 24 h 内稳定性的相似度均大于 0.999，
说明样品在 24 h 内稳定。
2.3.7 精密度试验 取样品（S2）的供试品溶液连
续进样 6 次，进行相似度计算，结果 6 次试验色谱
图的相似度均大于 0.99，说明仪器的精密度良好。
2.3.8 重复性试验 取样品（S2）0.1 g，共 6 份，
按“2.3.3”项下制得供试品溶液，依法测定，进行
相似度计算。结果显示，6 份供试液的色谱图相似
度均大于 0.999，说明测定方法的重复性良好。
2.3.9 HPLC 特征图谱的建立及相似度评价 取
收集的样品 22 批，按“2.3.3”项下制得供试品溶
液，依法测定，记录色谱图，得到各批药材 HPLC
特征图谱。结合救必应药材的性状、显微鉴别及
紫丁香苷和长梗冬青苷测定的结果[3]，选择 18 批
药材的 HPLC 色谱特征图谱，建立共有模式（图
4）。采用中药色谱指纹图谱相似度评价系统软件
（2004A 版）计算各样品与共有模式的相似度，见
图 5 和表 2。

4-紫丁香苷 6-芥子醛葡萄糖苷 12-长梗冬青苷 14-铁冬青酸
4-syringin 6-sinapaldehyde glucoside 12-pedunculoside 14-rotundic acid
图 4 救必应药材对照特征图谱
Fig. 4 Reference characteristic chromatogram
of Ilicis Rotundae Cortex
3 讨论
实验中取样品分别精密加入甲醇、乙醇、水和
50%甲醇，其余操作按“2.3.3”项下制得供试品溶
液，依法测定，结果显示采用 50%甲醇作为提取溶
剂效果最好。
实验中分别采用超声提取 30 min、加热回流提取
2 h 和索氏回流提取 5 h 的方法，其余操作按“2.3.3”
项下制得供试品溶液，依法测定，结果显示 3 种方法
的效果差异极小，故采用较为简便的超声提取方法。

0 10 20 30 40 50 60 70 80
B1
2
3 4
t / min
0 10 20 30 40 50 60 70 80
A1
2
3
4

0 11.59 23.18 34.78 46.37 57.96 69.55 81.14
1
2
3
4
5
6 7
8
910
11
12
13 14
t / min
中草药 Chinese Traditional and Herbal Drugs 第 44 卷 第 5 期 2013 年 3 月

·625·

图 5 样品与共有模式比较 HPLC 色谱图
Fig. 5 HPLC chromatograms of samples and common mode
在测定的 23 批药材（包括救必应对照药材 1
批）中，相似度在 0.90 以上的有 16 批，占 69.5%。
样品 1～3、18～20、7、9、14 共 9 个救必应药材树
干皮较多，皮厚、呈长卷筒状，从性状上判定为质
量较优，其相似度也均在 0.964 以上。
不同产地的救必应药材之间某些化学成分在组
成或量上存在差异。样品 11 和样品 15 两批救必应
药材经性状、粉末鉴别为米碎木，此类药材的 HPLC
色谱图中几乎没有检测出色谱峰，与其他样品有明
显的区别。样品 13、16、17 从性状上看，多为碎小
表 2 22 批样品与共有模式的相似度
Table 2 Similarity between 22 batches
of samples and common mode
样品编号 相似度 样品编号 相似度
S1 0.984 S12 0.958
S2 0.979 S13 0.731
S3 0.970 S14 0.964
S4 0.938 S15 −
S5 0.925 S16 0.754
S6 0.909 S17 0.746
S7 0.979 S18 0.970
S8 0.937 S19 0.984
S9 0.968 S20 0.972
S10 0.972 S21 0.870
S11 − S22 0.834
对照 0.913
“−”代表供试品色谱峰严重缺失，无法计算相似度
“−” means significant lack of characteristic chromatograms, which
could not calculate similarity
的枝皮，且掺杂有部分木质部，经鉴别，其质量较
差，结果相似度结果也均为 0.76 以下。
参考文献
[1] 中国药典 [S]. 一部. 2010.
[2] 广东省食品药品监督管理局. 广东省中药材标准 (第 1
册) [M]. 广州: 广东科技出版社, 2004.
[3] 毕福钧, 钟顺好, 陈 蔼, 等. HPLC 法同时测定救必
应药材中紫丁香苷和长梗冬青苷 [J]. 中草药, 2010,
41(8): 1386-1388.




0 11.59 23.18 34.78 46.37 57.96 69.55 81.14
对照品
对照样品
S22
S21
S20
S19
S18
S17
S16
S14
S13
S12
S10
S9
S8
S7
S6
S5
S4
S3
S2
S1
t / min