全 文 ：中草药 Chinese Traditional and Herbal Drugs 第 47 卷 第 12 期 2016 年 6 月

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• 药理与临床 •
吴茱萸碱逆转 K562/Adr 细胞多药耐药的实验研究
李晓朋，冯子强，石雪萍，李 静*
重庆医科大学基础医学院，组织学与胚胎学教研室，干细胞与组织工程研究室，重庆 400016
摘 要：目的 探讨吴茱萸碱（evodiamine，EVO）对白血病 K562 细胞及其耐药株 K562/Adr 的增殖、细胞周期及多
药耐药性（MDR）的影响。方法 用细胞增殖毒性检测试剂盒（CCK-8）检测 EVO 和/或柔红霉素（DNR）对细胞增
殖的影响，并计算耐药指数（RI）和逆转倍数（RF）；流式细胞仪检测 EVO 和/或 DNR 对 K562 及 K562/Adr 细胞周期
的影响；流式细胞仪检测 K562 及 K562/Adr 细胞内 DNR 的荧光强度；定量 PCR 检测 K562 及 K562/Adr 细胞中 MDR1
基因的表达；Western blotting 检测 K562 及 K562/Adr 细胞中 MDR1、BCRP 蛋白的表达。结果 EVO、DNR 作用于
K562 和 K562/Adr 细胞后，细胞增殖受到抑制，且呈剂量和时间依赖性；与 K562 细胞相比，K562/Adr 细胞对 DNR 的
RI 为 30.54，K562/Adr 细胞对 EVO 的 RI 为 19.09。当 EVO（0.125 μmol/L）与不同浓度 DNR 联合作用后，能使 DNR
对 K562/Adr 细胞的 IC50 明显下降，DNR＋EVO 对 K562/Adr 细胞的 RF 为 12.07；EVO、DNR 单独或联合作用于 K562
及 K562/Adr 细胞后，能够使 K562/Adr 细胞 BCRP、MDR1 蛋白及 mRNA 表达水平均明显下降。结论 EVO 能有效逆
转白血病 K562/Adr 细胞对 DNR 的耐药现象，而这种作用可能与 EVO 通过减少细胞膜上多药耐药蛋白 MDR1 的表达
有关。
关键词：吴茱萸碱；K562/Adr 细胞；多药耐药性；MDR1；BCRP
中图分类号：R285.5 文献标志码：A 文章编号：0253 - 2670(2016)12 - 2123 - 07
DOI: 10.7501/j.issn.0253-2670.2016.12.018
Experimental study of evodiamine on reversing multidrug resistance of K562/Adr
cells
LI Xiao-peng, FENG Zi-qiang, SHI Xue-ping, LI Jing
Laboratory of Stem Cell and Tissue Engineering, Department of Histology and Embryology, Basic Medical College,Chongqing
Medical University, Chongqing 400016, China
Abstract: Objective To study the effect of evodiamine (EVO) on the proliferation, cell cycle, and multidrug resistance (MDR) of
leukemia K562 and K562/Adr cells. Methods The effect on the proliferation was detected by CCK-8 kit and/or daunorubicin (DNR).
The resistance index (RI) and reversal fold (RF) were calculated. The effect of EVO on cell cycle was tested by flow cytometry; Flow
cytometry was used to check the fluorescence intensity of DNR. The expression of MDR1 gene in leukemia K562 and K562/Adr cells was
detected by q-PCR. The expression of MDR1 and BCRP proteins in leukemia K562 and K562/Adr cells were detected by Western
blotting. Results CCK-8 test results showed that the proliferation of K562 and K562/Adr cells induced by EVO and DNR was inhibited
in a dose and time dependent manner. The RI of DNR on K562/Adr cells was 30.54, the RI of EVO on K562/Adr cells was 19.09,
compared with K562 cells; The RF of DNR + EVO on K562/Adr cells was 12.07. The expression of BCRP and MDR1 protein of
K562/Adr cells was significantly decreased in K562/Adr cells induced by EVO and DNR. Conclusion Therefore EVO can effectively
reverse the DNR resistance in K562/Adr cells, which may be related to reduce the expression of MDR1 on cell membrane.
Key words: evodiamine; K562/Adr cells; multidrug resistance; MDR1; BCRP


收稿日期：2015-10-06
基金项目：国家自然科学基金资助项目（31271368）
作者简介：李晓朋，硕士研究生。Tel: 15123222906 E-mail: 819926409@qq.com
*通信作者 李 静，硕士研究生导师，副教授。Tel: 13370762980 E-mail: lijingyangyang@126.com
中草药 Chinese Traditional and Herbal Drugs 第 47卷 第 12期 2016年 6月

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白血病是一类造血干细胞恶性克隆性疾病，是
血液科常见恶性肿瘤之一。目前，化疗是治疗白血
病的主要手段，但由于白血病治疗中原发性耐药及
继发性耐药的产生，极大地影响了患者的化疗效果。
多药耐药性（multidrug resistance，MDR）是指肿瘤
细胞对一种药物具有耐药性的同时，对其他结构不
同、作用靶点不同的抗肿瘤药物也具有耐药性[1-2]。
目前，如何克服 MDR 已成为白血病治疗中最大的
技术难题。
吴茱萸碱（evodiamine，EVO）是从吴茱萸 Euodiae
Fructus中提取的吲哚类生物碱。国外学者Ogasawara
等[3-5]研究发现，EVO 有明显抗肿瘤侵袭及抗肿瘤
转移作用。农丽等[6]发现 EVO能逆转肺癌耐药细胞
株 A549/DDP 的耐药性，增加耐药细胞对顺铂
（DDP）的敏感性。本研究以白血病 K562细胞及其
耐药株 K562/Adr细胞为实验对象，初步探讨 EVO
对肿瘤细胞 MDR 的影响及可能机制，为其临床应
用提供实验依据。
1 材料
1.1 药品与试剂
EVO 购自南京泽朗医药科技有限公司（批号
ZL20131015，HPLC 检测质量分数大于 98%），取
二甲基亚砜（DMSO）将 EVO 充分溶解，配制成
100 μmol/L的储存液，−20 ℃保存。实验前用 RPMI
1640完全培养液（含 10%胎牛血清）稀释成所需浓
度（DMSO终体积分数＜0.1%）。RPMI 1640培养
基、胎牛血清（美国 Gibco公司）；Cell Counting Kit-8
（重庆鼎国生物技术有限公司）；柔红霉素（DNR，
南京泽朗医药科技有限公司，质量分数≥98%）；
DMSO（重庆鼎国生物技术有限公司）。
1.2 细胞株
人白血病 K562 细胞为重庆医科大学干细胞与
组织工程研究室冻存；K562/Adr细胞购自上海博谷
生物科技有限公司。
2 方法
2.1 CCK-8法检测细胞增殖
取处于对数生长期的 K562及 K562/Adr细胞，
调整细胞密度为 l×105个/mL，接种于 96孔板，接
种量为每孔 100 μL。将细胞分为空白组、对照组和
药物组。空白组只加入 RPMI 1640 完全培养基
（DMSO终体积分数＜0.1%），对照组加入含等量细
胞的 RPMI 1640完全培养基，药物组分别加入不同
浓度的 EVO或 DNR，药物量为每孔 100 μL，每一
浓度设 6个平行复孔。在 CO2恒温细胞培养箱中培
养 24、48、72 h。作用结束后，加入 CCK-8 试剂
10 μL，培养 2.5 h后，用酶标仪检测吸光度（A）
值，计算药物对 K562及 K562/Adr细胞的增殖抑制
率，实验重复 3次，从而筛选出 EVO和 DNR最适
作用时间和浓度。采用直线回归方法计算药物的半
数抑制浓度（IC50），通过公式计算出各药物的耐药
指数（RI）。
增殖抑制率＝(1－药物组 A值)/对照组 A值
RI＝药物对耐药细胞株 IC50/药物对亲本细胞株 IC50
采用直线回归法计算出细胞存活率＞90%时，
EVO的药物浓度。将非细胞毒剂量的 EVO和不同
浓度的 DNR联合作用于 K562和 K562/Adr细胞，
CCK-8 检测细胞增殖活性，计算 EVO＋DNR 对
K562和 K562/Adr细胞的 IC50值。通过公式计算出
逆转倍数（RF）。
RF＝不加逆转剂时药物 IC50/加逆转剂时药物 IC50
2.2 形态学观察
取处于对数生长期的 K562及 K562/Adr细胞，
接种于细胞培养瓶中。将细胞分为对照组和加药
（EVO、DNR、EVO＋DNR）组。K562细胞加药浓
度为 DNR 0.1 μmol/L、EVO 3.7 μmol/L、EVO 0.125
μmol/L＋DNR 0.142 μmol/L，K562/Adr细胞加药浓
度为 DNR 3.1 μmol/L、EVO 70.6 μmol/L、EVO 0.125
μmol/L＋DNR 0.258 μmol/L。根据上述药物浓度，
向加药组细胞加入各药物，对照组加入等量完全培
养基，将细胞培养瓶放入 CO2 恒温细胞培养箱中
培养 48 h。作用结束后，取出细胞，在倒置显微镜
（200×）下观察各组细胞状态，随机选取 3个视野
观察并进行拍照。
2.3 细胞周期实验
取处于对数生长期的 K562及 K562/Adr细胞，
接种于细胞培养瓶中。细胞分组及用药情况同“2.2”
项。根据上述药物浓度，向加药组细胞加入各药物，
对照组加入等量完全培养基，将细胞培养瓶放入
CO2恒温细胞培养箱中培养 48 h。收集各组细胞，
用 PBS溶液洗涤 3次，以 2 000 r/min离心 5 min，
收集 5×105个细胞，用流式细胞仪测定各组细胞周
期分布比例。
2.4 荧光实验
取处于对数生长期的 K562及 K562/Adr细胞，
接种于细胞培养瓶中。将细胞分为对照组、DNR组
和 DNR＋EVO组。K562细胞加药浓度为 DNR 0.1
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μmol/L、EVO 0.125 μmol/L＋DNR 0.142 μmol/L。
K562/Adr 细胞加药浓度为 DNR 3.1 μmol/L、EVO
0.125 μmol/L＋DNR 0.258 μmol/L。根据上述药物浓
度，向各组细胞分别加入各药物，对照组加入等量
完全培养基，将细胞培养瓶放入 CO2 恒温细胞培
养箱中培养 48 h。收集细胞，PBS洗涤细胞 3次，
以 2 000 r/min离心 5 min，收集 5×105个细胞，用
流式细胞仪测定各组细胞内 DNR荧光强度。
2.5 RT-PCR实验
取处于对数生长期的K562及K562/Adr细胞，接
种于细胞培养瓶中，分为对照组、EVO组、DNR组、
EVO＋DNR 组。K562 细胞加药浓度为 DNR 0.1
μmol/L、EVO 3.7 μmol/L、EVO 0.125 μmol/L＋DNR
0.142 μmol/L，K562/Adr 细胞加药浓度为 DNR 3.1
μmol/L、EVO 70.6 μmol/L、EVO 0.125 μmol/L＋DNR
0.258 μmol/L。各组加入相应浓度药物后，将细胞培
养瓶放入 CO2恒温细胞培养箱中培养 48 h后收集细
胞，用 Trizol法提 RNA，并测定浓度。用 Takara试
剂盒进行逆转录，用Quant one step QRT-PCR试剂盒
进行实验，并且统计数据，进行表达差异分析。
2.6 Western blotting实验
取处于对数生长期的 K562及 K562/Adr细胞，
接种于细胞培养瓶中，细胞分组及用药情况同“2.5”
项。各组加入相应浓度药物后，将细胞培养瓶放入
CO2恒温细胞培养箱中培养 48 h，收集细胞，提取
总蛋白。用蛋白浓度测定试剂盒检测蛋白浓度，用
BCA 方法定量蛋白。各取 50 μg 蛋白，进行
SDS-PAGE电泳，电转到 PDVF膜，5%脱脂奶粉封
闭 2 h，一抗 4 ℃过夜，TBST 缓冲液漂洗，二抗
室温孵育 1.5 h，TBST缓冲液漂洗后用 ECL系统显
影，运用 Quantity One图像分析软件测得条带的吸
光度值，以各组的目的条带和内参条带吸光度比值
为相对表达量，比较各组间差异。
2.7 统计学方法
采用 SPSS 18.0 软件对所得数据进行统计处
理，数据以 ±x s表示，多组间采用两因素方差分析
和单因素方差分析，两两比较采用 LSD检验。
3 结果
3.1 EVO对细胞增殖及耐药逆转情况的影响
3.1.1 EVO和 DNR对细胞增殖的影响及 RI 采用
CCK-8法，经酶标仪 490 nm波长分别检测 EVO、
DNR对K562和 K562/Adr细胞增殖的影响，发现对
照组细胞体外生长活跃，加药组细胞增殖受到抑制，
且呈剂量依赖性，见图 1。根据 CCK-8 结果，计算
各组药物作用48 h的 IC50，EVO对K562和K562/Adr
细胞的 IC50分别为 3.702 5、70.687 5 μmol/L，DNR
对K562和K562/Adr细胞的 IC50分别为 0.102、3.116
μmol/L。DNR的 RI为 30.54；EVO的 RI为 19.09。







图 1 EVO和 DNR对 K562和 K562/Adr细胞增殖的抑制作用 ( x±s, n = 6)
Fig. 1 Inhibition of EVO and DNR on proliferation of K562 and K562/Adr cells ( x±s, n = 6)
100
80
60
40
20
0



80

60

40

20

0



100
80
60
40
20
0



100
80
60
40
20
0



增
殖
抑
制
率
/%

增
殖
抑
制
率
/%

增
殖
抑
制
率
/%

增
殖
抑
制
率
/%

0 5 10 15 20
EVO/(μmol·L−1)
0 50 100 150
EVO/(μmol·L−1)
0 10 20 30 40
DNR/(μmol·L−1)
0 0.5 1.0 1.5
DNR/(μmol·L−1)
24 h
24 h
K562细胞
72 h
48 h
48 h
72 h
24 h 24 h
48 h 48 h
72 h 72 h
K562/Adr细胞
K562细胞 K562/Adr细胞
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3.1.2 EVO 对 DNR 的 RF CCK-8 检测发现，当
EVO浓度＜0.125 μmol/L时K562和K562/Adr细胞
的存活率均＞90%，因此 0.125 μmol/L为 EVO非细
胞毒剂量。将 0.125 μmol/L的EVO与不同浓度DNR
联用后，能使 DNR对 K562/Adr细胞的 IC50明显下
降（0.258 μmol/L），但对 K562细胞的 IC50却没有
明显变化（0.142 μmol/L）。在 K562/Adr 细胞中，
EVO对 DNR的 RF为 12.07。
3.2 EVO对细胞形态的影响
倒置显微镜观察结果显示，将对照组与药物组
（EVO、DNR、EVO＋DNR）细胞培养 48 h 后，
分别拍照。K562细胞：对照组细胞生长状况良好，
而药物组（EVO、DNR、EVO＋DNR）细胞数目
明显减少，且 EVO＋DNR 组减少数量明显多于
EVO、DNR组。K562/Adr细胞：对照组细胞生长
良好，而药物组（EVO、DNR、EVO＋DNR）细
胞数目明显减少，EVO＋DNR 组细胞减少的数量
明显多于 EVO、DNR 组。但 EVO＋DNR 使
K562/Adr 细胞减少数量少于其使 K562 细胞减少
的数量。见图 2。
3.3 EVO对K562及K562/Adr细胞细胞周期的影响
EVO、DNR 单用及联合应用作用于 K562 细胞
48 h后，流式细胞仪检测结果显示，EVO和DNR组
细胞周期没有明显变化，与对照组相比无统计学意
义；EVO＋DNR组G2/M期、S期细胞比例增加，G0/G1
期细胞比例减少，与对照组相比差异显著（P＜0.01）。
EVO、DNR单用及联合应用作用于 K562/Adr细胞
48 h后，流式细胞仪检测结果显示，EVO和 DNR
组细胞周期也没有明显变化，与对照组相比无统计
学意义；EVO＋DNR组 G2/M期、S期细胞比例增
加，G0/G1 期细胞比例减少，与对照组相比差异显
著（P＜0.01）。见表 1。



对照 EVO DNR EVO＋DNR
图 2 EVO和 DNR对 K562和 K562/Adr细胞形态的影响
Fig. 2 Effects of EVO and DNR on morphology of K562 and K562/Adr cells
表 1 EVO和 DNR对 K562和 K562/Adr 细胞细胞周期的影响 ( x±s, n = 3)
Table 1 Effects of EVO and DNR on cell cycle of K562 and K562/Adr cells ( x±s, n = 3)
组别
K562 K562/Adr
G0/G1 G2/M S G0/G1 G2/M S
对照 73.29±2.74 8.18±3.67 18.53±0.93 71.12±0.25 8.97±1.66 19.91±0.28
EVO 72.17±0.88# 7.47±2.06# 20.36±1.18# 68.86±0.62# 8.86±1.24# 22.19±1.23#
DNR 72.44±2.57# 7.72±4.08# 19.83±6.65# 69.79±1.62# 7.45±3.01# 22.76±1.85#
EVO＋DNR 67.41±0.45** 10.57±1.44** 22.02±0.98** 65.92±0.28*

9.84±1.14** 24.24±0.18*
与对照组比较：**P＜0.01；与 EVO＋DNR组比较：#P＜0.05，下同
**P < 0.01 vs control group; #P < 0.05 vs EVO + DNR group, same as below
3.4 EVO对细胞摄取 DNR的影响
流式细胞仪检测结果显示，对 K562 细胞，
EVO＋DNR 组细胞内荧光阳性率增高，与对照组
相比差异非常显著（P＜0.01）；对 K562/Adr细胞，
EVO＋DNR组细胞内荧光阳性率明显增高，与对照
组相比差异非常显著（P＜0.01）；经 EVO＋DNR
联合作用后的K562/Adr细胞内DNR荧光阳性率增
强较 K562细胞更为明显。见图 3。
K562
K562/Adr
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3.5 EVO对K562及K562/Adr细胞MDR1基因和
MDR1、BCRP蛋白表达的影响
RT-PCR检测结果显示，EVO、DNR单独及联合
应用作用于K562、K562/Adr细胞 48 h后，与对照组





图 3 EVO对 K562和 K562/Adr细胞摄取 DNR的影响
Fig. 3 Effect of EVO on DNR uptake of K562 and
K562/Adr cells
相比较，EVO组、DNR组及EVO＋DNR组K562/Adr
细胞内 MDR1 基因的表达均逐渐降低（P＜0.01），
但给药组间相比差异无统计学意义；各组K562细胞
中MDR1基因几乎不表达。见图 4。Western blotting
检测结果显示，K562/Adr细胞中，各组BCRP、MDR1
蛋白表达水平均有所下降，其中 EVO＋DNR 组的
MDR1、BCRP 蛋白表达水平的下降较 EVO、DNR
组更为明显（P＜0.01）；K562细胞中，各组MDR1
蛋白表达水平明显下降（P＜0.01），BCRP蛋白表达
水平略微下降（P＜0.05），见图 5。



图 4 EVO和 DNR对 K562和 K562/Adr细胞MDR1基因
表达的影响
Fig. 4 Effects of EVO and DNR on MDR1 gene expression
of K562 and K562/Adr cells


对照 EVO DNR EVO+DNR 对照 EVO DNR EVO+DNR
K562/Adr K562

对照 EVO DNR EVO+DNR 对照 EVO DNR EVO+DNR 对照 EVO DNR EVO+DNR 对照 EVO DNR EVO+DNR
K562 K562/Adr K562 K562/Adr
图 5 EVO和 DNR对 K562和 K562/Adr细胞MDR1和 BCRP蛋白表达的影响
Fig. 5 Effects of EVO and DNR on MDR1 and BCRP protein expression of K562 and K562/Adr cells
200

150

100

50

0



200

150

100

50

0


荧
光
率

荧
光
率

阴性率
阴性率 阳性率
阳性率
对照 DNR EVO＋DNR
对照 DNR EVO＋DNR
MDR1
BCRP
β-actin
200

150

100

50

0



M
D
R1
基
因
相
对
表
达
量
×
10
3
M
D
R
1/
β-
ac
tin
或
BC
R
P/
β-
ac
tin

MDR1 BCRP
**
**
**
** **
**

**
#
**#

**
#
**
K562
K562/Adr
1.0
0.8
0.6
0.4
0.2
0.0



对照 EVO DNR EVO＋DNR 对照 EVO DNR EVO＋DNR
K562 K562/Adr

**
**
**
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4 讨论
白血病作为我国 10 种高发恶性肿瘤之一，由
于其分型和预后分层复杂，因此治疗方法并非千篇
一律，需要结合每个病人细致的分型和预后分层制
定治疗方案。目前白血病治疗的主要手段之一就是
化疗，而白血病对化疗的先天耐药及获得性耐药，
是化疗失败的主要原因。
本实验中，选择 K562和 K562/Adr细胞作为研
究对象，加入不同浓度的 DNR 作用不同时间，并
用 CCK-8法检测DNR对K562和K562/Adr细胞增
殖的影响。实验结果表明，DNR能有效抑制 K562
和 K562/Adr细胞的增殖，并呈剂量和时间依赖性。
值得注意的是 DNR 对 K562 细胞的 IC50为 0.102
μmol/L，而 DNR对 K562/Adr细胞的 IC50为 3.116
μmol/L。上述结果表明，K562/Adr细胞对 DNR有
耐药作用，通过计算得出 K562/Adr细胞对 DNR的
RI为 30.54。
肿瘤 MDR 逆转剂是世界各国学者研究的热
点，目前正尝试从天然药物中探索天然的肿瘤MDR
逆转剂[7-8]，众多学者将视线转向了中药吴茱萸。
EVO是从吴茱萸中提取的吲哚类生物碱。外国学者
研究发现，EVO作用于多种离体肿瘤细胞株，发现
有明显抗侵袭以及抗转移作用，包括对黑色素瘤细
胞、宫颈癌细胞、A549/DDP 肺癌细胞均有抑制作
用。Wang 等[9]发现 EVO 在乳腺癌细胞中能逆转耐
药。本实验采用了 CCK-8 法检测 EVO 对 K562 和
K562/Adr细胞增殖的影响。实验结果表明，EVO能
有效抑制 K562和 K562/Adr细胞的增殖，并呈剂量
和时间依赖性，EVO对K562细胞的 IC50为 3.702 5
μmol/L，而对 K562/Adr 细胞的 IC50 为 70.687 5
μmol/L。通过计算得出 K562/Adr细胞对 EVO的 RI
为 19.09。同时发现用非细胞毒性剂量的 EVO（0.125
μmol/L）与不同浓度的 DNR 联合作用于 K562/Adr
细胞后，DNR对K562/Adr细胞的 IC50值明显降低，
RF为 12.07。结果提示，EVO在体外具有增强 DNR
的增殖抑制效应的作用。进一步应用倒置显微镜来
观察药物（DNR、EVO、EVO＋DNR）作用于 K562
和 K562/Adr 细胞后的细胞形态变化，发现对照组
细胞生长良好，而药物组细胞数目明显减少。与单
独使用 EVO 或 DNR 比，EVO＋DNR 组细胞减少
更明显。同时，因为 DNR 是一种荧光物质[10]，可
通过荧光显微镜观察 K562 和 K562/Adr 细胞对
DNR的摄取情况。DNR作用于 K562和 K562/Adr
细胞 2、6、12 h后，随着时间推移，细胞内荧光强
度不断增强。但在同一作用时间下，联合用药组比
单独 DNR 组荧光强度增强更为明显。流式细胞仪
检测荧光阳性率的结果与荧光显微镜下观察结果
一致，结果表明 EVO可促进 DNR进入细胞内，而
进入细胞内的 DNR增多，可增强 DNR对细胞的增
殖抑制作用。经流式细胞仪检测细胞周期也发现，
联合用药后可将细胞周期阻滞在 G2/M期和 S期，
从而进一步抑制了细胞增殖。
耐药的产生涉及机制较为复杂，是一个多基因
参与的过程[11]。近年来对化疗药物耐药性机制的研
究发现，耐药的原因主要是肿瘤细胞膜上存在大量
的多药耐药基因蛋白[12]。目前的研究公认的白血病
化疗药物引发的多药耐药性最常见和最主要的机
制是 ABC转运体超表达[13-15]。ABC转运蛋白超家
族是一种膜结合蛋白，有 8个亚家族，其中 ABCB、
ABCC、ABCG 3个亚家族与肿瘤细胞的MDR密切
相关，研究较为清楚的有 ABCB1（MDR1）、BCRP、
MRP 等。MDR1 与 BCRP 是一种由多药耐药基因
表达的多药耐药蛋白，它们属于 ATP能量依赖性跨
膜蛋白，可通过其膜泵功能将其作用底物如各种化
疗药物“泵出”细胞外，使药物不能有效地到达其
作用靶点而引起组织对药物的耐药现象。本实验经
RT-PCR 检测发现，EVO＋DNR 处理的 K562/Adr
细胞内MDRl基因的表达明显下调。同时用Western
blotting检测经过各组药物处理的K562及K562/Adr
细胞中 BCRP、MDR1蛋白的表达，发现在单独使
用 EVO或者 DNR的时候 BCRP、MDR1蛋白的表
达较对照组有微弱降低，而联合用药的时候二者降
低非常明显。因此推测，EVO 可能通过降低
K562/Adr细胞MDR1 mRNA的表达，使细胞膜上
MDR1蛋白的表达量减少，继而降低MDR1介导的
细胞内化疗药物的外排能力，使细胞内药物的浓度
升高而发挥逆转作用。
综上所述，EVO 能有效逆转白血病 K562/Adr
细胞对 DNR 的耐药作用，而这种作用可能与 EVO
通过减少细胞膜上多药耐药蛋白 MDR1 的表达有
关。更加深入的机制有待进一步的研究探明。
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