全 文 ：中草药 Chinese Traditional and Herbal Drugs 第 44 卷 第 9 期 2013 年 5 月

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丹参酮 IIA、隐丹参酮和丹参酮 I 组合物在斑马鱼体内的代谢研究
韦英杰 1*，贾晓斌 1*，詹 扬 1，王长梅 1，马文泉 2，王 兵 2，徐丽丽 2
1. 江苏省中医药研究院 国家中医药管理局中药口服释药系统重点研究室，江苏 南京 210028
2. 潍坊高新区生物医药科技产业园，山东 潍坊 261061
摘 要：目的 研究丹参酮 IIA、隐丹参酮和丹参酮 I 组合物（组合物）在斑马鱼体内的代谢，探讨斑马鱼用于中药多组分
代谢研究的可行性及合理性。方法 将斑马鱼暴露于组合物 1% DMSO 纯净水溶液中，采用高效液相色谱-电喷雾离子阱质
谱（HPLC-MS）检测，根据准分子离子峰获得代谢物相对分子质量信息，通过与文献数据或对照品比较，鉴定组合物暴露
于斑马鱼 24 h 后的药液及鱼体中的代谢产物。结果 组合物经斑马鱼作用后，产生丹参酮 IIA和隐丹参酮的羟基化和脱氢产
物，未发现丹参酮 I 的代谢产物。结论 斑马鱼对组合物的代谢与大鼠或鼠肝微粒体的代谢机制高度一致，提示斑马鱼对该
组合物的代谢具合理性，且具有化合物用量少、成本低、简单、高效等优点，为斑马鱼用于更复杂的中药体系代谢研究提供
依据。
关键词：丹参酮 IIA；隐丹参酮；丹参酮 I；斑马鱼；代谢；高效液相色谱-电喷雾离子阱质谱
中图分类号：R965.2；R969.1 文献标志码：A 文章编号：0253 - 2670(2013)09 - 1149 - 08
DOI: 10.7501/j.issn.0253-2670.2013.01.016
In vivo metabolic study on combination of tanshinone IIA, cryptotanshinone,
and tanshinone I in zebrafish
WEI Ying-jie1, JIA Xiao-bin1, ZHAN Yang1, WANG Chang-mei1, MA Wen-quan2, WANG Bing2, XU Li-li2
1. Key Laboratory of New Drug Delivery System of Chinese Meteria Medica, Jiangsu Provincial Academy of Chinese Medicine,
Nanjing 210028, China
2. Biology & Medicine Science and Technology Industry Park of Weifang Hi-tech Development Zone, Weifang 261061, China
Abstract: Methods To investigate the in vivo metabolism of the combination of tanshinone IIA (Tan IIA), cryptotanshinone (Cry),
and tanshinone I (Tan I) in zebrafish and discuss the possibility and rationality of using zebrafish in multi-component metabolism of
Chinese materia medica (CMM). Methods The zebrafish was exposed to the 1% DMSO solution of the combinations with Tan IIA,
Cry, and Tan I. High performance liquid chromatography coupled with ion-trap mass spectrometry (HPLC-MS) method was used to
calculate the relative molecular weight of the metabolites based on the excimer ion peak. The metabolites in solution and zebrafish
after the combination being exposed to zebrafish for 24 h were identified through comparing with the literature data and reference
substances. Results After the combination being exposed to zebrafish, hydroxylation and dehydrogenation products of Tan IIA and
Cry were obtained while the metabolites of Tan I was not found. Conclusion The metabolic mechanism of zebrafish against the
combination highly consists with those in rats or rat liver microsomes, which indicates that the metabolism of zebrafish against the
combination is rational with the advantages of less amount of compound, lower cost, simpler operation, and higher efficiency. The
above results provide the reference for using zebrafish in the metabolic study on complex CMM system.
Key words: tanshinone IIA; cryptotanshinone; tanshinone I; zebrafish; metabolism; high performance liquid chromatography coupled
with ion-trap mass spectrometry

斑马鱼（zebrafish）是近年来广泛用于药物高
通量筛选和毒性研究的热门模式生物，具有简单、
高效、成本低及化合物用量少等优点，将斑马鱼用
于中药研究亦日益受到重视[1-4]。斑马鱼具有完善的
器官系统、与哺乳动物相似的基因及相关代谢酶系，
这为将斑马鱼用于药物代谢研究提供了遗传学和生

收稿日期：2012-07-27
基金项目：国家自然科学基金资助项目（30973978）；江苏省中医药领军人才项目（2006）
*通信作者 韦英杰，博士，副研究员。Tel: (025)85637809 E-mail: wyj970@163.com
贾晓斌，博士，研究员。Tel: (025)85608672 E-mail: jxiaobin2005@hotmail.com
中草药 Chinese Traditional and Herbal Drugs 第 44 卷 第 9 期 2013 年 5 月

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理学依据。目前研究中药的代谢主要借助化学药物
研究的基本理论和方法，由于体内代谢产物用量
大，大量微量成分的在体代谢分析无法进行；而体
外代谢作用环节单一，难以体现中药作用的整体
性。因此建立能弥补现有模型不足的斑马鱼药物研
究模型，对丰富中药代谢的研究思路与方法具有重
要意义[5]。前期实验已成功将斑马鱼用于丹参二萜
醌类、淫羊藿黄酮类及三七皂苷类单体成分的代谢
研究[6-8]。
丹参酮 IIA、隐丹参酮和丹参酮 I 是丹参中主要
的二萜醌类活性成分，在大鼠体内的转化主要为羟
基化或脱氢的 I 相代谢反应，该反应的发生与其分
子骨架的饱和度密切相关：如脱氢反应是 A 环和 D
环均饱和的隐丹参酮的主要代谢路径，而羟基化反
应则是具饱和 A 环的丹参酮 IIA 的主要代谢途径，
但同时具有不饱和 A 环和 D 环的丹参酮 I 则很难发
生代谢转化[9]。本实验在前期研究[8]丹参酮 IIA、隐
丹参酮和丹参酮 I 在斑马鱼体内代谢转化的基础
上，进一步研究这 3 个化合物的组合物在斑马鱼体
内的代谢，以期为斑马鱼用于更复杂的中药体系代
谢提供实验依据。
1 材料
1.1 药物与试剂
丹参酮 IIA（批号 110766-200518，供定量用）、
隐丹参酮（批号 110852-200305，供定量用）对照
品，购于中国药品生物制品检定所；丹参酮 I，质
量分数＞98%，成都思科华生物科技有限公司。乙
腈、磷酸、甲酸为色谱纯，德国 Merck 公司；甲醇
为分析纯；水为纯净水。
1.2 仪器
Agilent 1200型系列高效液相色谱仪（包括G1312
A 二元梯度泵，G1329A 自动进样器，G1316A 柱温
箱，G1314B VWD 检测器），Agilent 6301 离子阱质谱
仪，6300 Series Iop Trap LC/MS Software 6.1 数据分析
软件，美国 Agilent 公司；Mettler Toledo AB135—S 分
析天平，瑞士 Mettler Toledo 公司；TGL—16G 型高速
离心机，上海安亭科学仪器厂；TDZ5B—WS 低速自
动平衡离心仪，上海卢湘仪离心机仪器有限公司；
XW—80A 旋涡混合器，上海青浦泸西仪器厂器厂；
Organomation N-EVAP TM 112 氮吹仪，美国
Organomation 公司。
1.3 动物
斑马鱼成鱼，南京大学模式生物研究所提供。
2 方法
2.1 分组与给药
取斑马鱼成鱼，平均分成 2 组，每组 5 条，分
别置于 30 mL 含有 1% DMSO 纯净水（空白鱼组）、
含丹参酮 IIA、隐丹参酮和丹参酮 I 组合物（丹参酮
IIA、隐丹参酮、丹参酮 I 质量浓度分别为 1.57、1.02、
2.09 μg/mL）的 1% DMSO 纯净水溶液（给药鱼组）
棕色瓶中，同时设空白药物组（组合物 1% DMSO
纯净水溶液）。
2.2 样品采集与处理
给药鱼组分别于斑马鱼暴露药液后 0、1、2、4、
6、8、12、18、24 h 取药液 4 mL 各 2 份，24 h 将
鱼取出，用纯净水迅速洗涤 3 次，处死，去除鱼鳍
和鱼磷，称质量，于−70 ℃冰箱放置。各时间点斑
马鱼药液各 2 份分别混合，于−70 ℃冰箱放置。空
白药物组于斑马鱼暴露药液后 0、24 h 时同法取样。
将不同时间点取出的斑马鱼药液冷冻干燥，残
渣加 0.5 mL 甲醇溶解，过 0.22 μm 滤膜，滤液 20 μL
进行 HPLC-MS 分析。
取 24 h 空白鱼组和给药鱼组斑马鱼，混合，剪
碎，称取 1 g，加 5 mL 生理盐水匀浆，3 500 r/min
离心 10 min，上清液用等体积醋酸乙酯萃取 3 次，
合并萃取液，氮气吹干，残渣加 1 mL 甲醇溶解制
成 1 g/mL 的溶液，过 0.22 μm 滤膜，滤液 20 μL 进
行 HPLC-MS 分析。
2.3 色谱与质谱条件
2.3.1 色谱条件 Zorbax Extend C18 色谱柱（250
mm×4.6 mm，5 μm）和 C18预柱（12.5 mm×4.6 mm，
5 μm）；柱温 25 ℃；流动相 A 为纯净水（与质谱联
用时改为 0.05%甲酸水溶液）、B 为乙腈，采用梯度
洗脱：0～5 min，45% B；5～10 min，45%～50% B；
10～30 min，50%～90% B；30～35 min，90%～100%
B；36～45 min，100%～45% B；体积流量1.0 mL/min，
液相到质谱 ESI 离子源的分流比为 2∶1；检测波长
270 nm；记录时间 45 min；进样量为 20 μL。
2.3.2 离子阱质谱条件 电喷雾离子源参数：干燥
气体温度 350 ℃，干燥气体积流量 12.0 L/min，雾
化气压力 241.33 kPa，裂解电压 100 V，毛细管电压
3.5 kV；扫描范围 m/z 100～600，选择 [M＋H]+为
母离子进行 MSn 分析。
3 结果
采用 HPLC-MS 联用技术检测组合物经斑马鱼
作用后的药液与鱼体中的代谢产物。与空白鱼组和
中草药 Chinese Traditional and Herbal Drugs 第 44 卷 第 9 期 2013 年 5 月

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空白药物组对照，通过提取离子流，根据正离子模
式准分子离子峰 [M＋H]+和 [M＋Na]+，推测出可
能的相对分子质量，结果在斑马鱼体外药液或鱼体
内检出原形成分（P1～P3）及 10 个羟基化或脱氢
代谢产物（M1～M10）。总离子流及代谢产物提取
离子流图见图 1。

A-空白药物 B-空白鱼体外药液 C-空白鱼体内 D-给药鱼体
外药液 E-给药鱼体内
A-blank drug B-in vitro solution of blank zebrafish C-in vivo of
blank zebrafish D-in vitro solution of zebrafish with drug E-in
vivo of zebrafish with drug
图 1 组合物暴露斑马鱼 24 h 后的斑马鱼体外药液和斑马
鱼体内总离子流图及代谢物提取总离子流图
Fig. 1 TIC of zebrafish in vitro solution and in vivo
prototype components after combination
being exposed to zebrafish for 24 h and
TIC of extracted metabolites
3.1 来源于丹参酮 IIA的代谢产物鉴定
在斑马鱼体外药液或体内检测到原型成分丹参
酮 IIA（P1，相对分子质量为 294）及其单羟基化（M1、
M2）、双羟基化（M9）及脱氢（M3、M4）等代谢
产物。M1、M2均有准分子离子峰m/z 311 [M＋H]+ 和
333 [M＋Na]+，故相对分子质量为 310，较其母体多
16，通过与文献报道[9-11]对比，鉴定分别为 3α-羟基
丹参酮 IIA（3α-hydroxytanshinone IIA）和紫丹参甲素
（przewatanshinquinone A）。M3 准分子离子峰为 m/z
309 [M＋H]+，其水合物准分子离子峰 m/z 为 327
[M＋H＋H2O]+；M4 准分子离子峰为 m/z 309 [M＋
H]+和 331 [M＋Na]+，推测 M3 和 M4 相对分子质量
为 308，较丹参酮 IIA 单羟基化产物少 2，故为羟基
化丹参酮 IIA的脱氢产物。图 1 中 EIC293 旨在检测
是否有丹参酮 IIA 的脱氢产物，结果发现丹参酮 IIA
羟基化后的脱氢产物（EIC309），可能是丹参酮 IIA
的主要代谢路径为羟基化，其脱氢后易羟基化造成。
M9 的准分子离子峰为 m/z 327 [M＋H]+和 349 [M＋
Na]+，故相对分子质量为 326，较丹参酮 IIA多 32，
其主要碎片离子为 m/z 309 [M＋H－18]+，由脱 H2O
形成，提示为丹参酮 IIA的双羟基化产物。组合物中
丹参酮 IIA 在斑马鱼作用下的代谢与丹参酮 IIA 在大
鼠或大鼠肝微粒体的代谢高度一致[9-11]，提示斑马鱼
对组合物中的丹参酮 IIA代谢具合理性。组合物经斑
马鱼作用后的代谢产物见表 1，丹参酮 IIA在斑马鱼
体内的可能代谢途径见图 2，质谱图见图 3。
3.2 来源于隐丹参酮的代谢产物鉴定
在斑马鱼体外药液或体内检测到原形成分隐丹
参酮（P2，相对分子质量为 296）及其脱氢（P1）、
单羟基化（M5、M6）、双羟基化（M10）及 D 环开
环（M7、M8）的代谢产物。丹参酮 IIA是隐丹参酮
的主要脱氢产物[9,12-13]，通过与对照品及其质谱图对
比，并参考前期研究结果[8]，推测丹参酮 IIA也是隐
丹参酮的脱氢产物。M5、M6 的准分子离子峰均为
m/z 313 [M＋H]+和 335 [M＋Na]+，推测相对分子质量
均为 312，较隐丹参酮多 16，故为隐丹参酮的单羟基
化产物。M10 的准分子离子峰为 m/z 329 [M＋H]+和
351 [M＋Na]+，故相对分子质量为 328，较隐丹参酮
多 32，其碎片离子峰 m/z 311 [M＋H－18]+，经脱水
形成，故推测为隐丹参酮双羟基化产物；M7、M8 的
准分子离子峰均为 m/z 315 [M＋H]+和 337 [M＋Na]+，
相对分子质量为 314，较隐丹参酮多 18，通过与文献
数据[9]比对，推测为 D 环开环代谢产物。此外由于隐
丹参酮转化成丹参酮 IIA，故推测丹参酮 IIA的代谢产
物也是隐丹参酮的代谢产物。组合物中隐丹参酮在斑
马鱼作用下的代谢与其在大鼠、猪体内的代谢高度相
似[9,12]，提示斑马鱼对组合物中隐丹参酮的代谢具合
理性。其在斑马鱼体内的代谢途径见图 2。组合物经
斑马鱼作用后的代谢产物见表 1，质谱图见图 3。
3.3 来源于丹参酮 I 的代谢产物鉴定
除了原形成分丹参酮 I（P3，相对分子质量
276），未发现其他代谢产物，这与其在大鼠体内的
代谢相一致[9]。组合物经斑马鱼作用后的代谢产物见
表 1，质谱图见图 3。

A
P2
P3
P1
B
P2
EIC 297
EIC 277
EIC 295
EIC 311
EIC 293
EIC 309
EIC 327
EIC 313
EIC 315
EIC 329
P3 P1
M1
M2
M3 M4
M9
M5
M7
M6
M8
M10
0 5 10 15 20 25 30 40
t / min
C
D
E
P2
P3
P1
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表 1 丹参酮 IIA、隐丹参酮和丹参酮 I 组合物暴露斑马鱼 24 h 后的代谢产物
Table 1 Metabolits of combination of Tan IIA, Cry, and Tan I after being exposed to zebrafish for 24 h
准分子离子峰 峰号 t / min
[M＋H]+ [M＋Na]+ HPLC/ESI-MS
n 或碎片离子 相对分子质量 推测代谢物 药液 斑马鱼体 参考文献
P1 27.7 295.2 317.1 MS2: 277.1[M＋H－H2O]+,
249.1 [M＋H－H2O－CO]+
294.2 丹参酮 IIA ＋ ＋ 9-11
MS3: 262.1 [M＋H－CH3]+,
249.1 [M＋H－H2O－CO]+,
231.1 [M＋H－2H2O－CO]+,
221.1 [M＋H－H2O－2CO]+,
206.1 [M＋H－H2O－2CO－CH3]+

MS4: 234 [M＋H－H2O－CO－CH3]+,
221.1, 206.2,
191.2 [M＋H－H2O－2CO－2CH3]+

P2 22.8 297.2 319.2 MS2: 297.2 [M＋H]+,
279.2 [M＋H－H2O]+,
264.1 [M＋H－H2O－CH3]+,
251.1 [M＋H－H2O－CO]+,
237.1 [M＋H－CO－CH3OH]+,
209.1 [M＋H－2CO－CH3OH]+
296.2 隐丹参酮 ＋ ＋ 9
MS3 [297→279]: 264.1, 251.1,
237.1, 209.1

P3 23.4 277.1 299.1 MS2: 259.1 [M＋H－H2O]+,
249.1 [M＋H－CO]+,
231.1 [M＋H－2H2O－CO]+,
221.1 [M＋H－H2O－2CO]+
276.1 丹参酮 I

＋ ＋ 9
MS3: 234.1 [M＋H－CO－CH3]+,
231.1 [M＋H－CO－H2O]+,
221.1 [M＋H－2CO]+,
203 [M＋H－2CO－H2O]+,
193.1 [M＋H－3CO]+,
178 [M＋H－3CO－CH3]+

M1 11.6 311.2 333.2 MS2: 293.1 [M＋H－H2O]+,
275.1 [M＋H－2H2O]+,
263.1 [M＋H－H2O－2CH3]+,
251.1 [M＋H－CO－CH3OH]+,
235.1 [M＋H－H2O－2CH3－CO]+
310.2 3α-羟基丹参酮 IIA ＋ 9-11
MS3: 275.1 [M＋H－2H2O]+,
265.3 [M＋H－CO－H2O]+,
251.1 [M＋H－CO－CH3OH]+,
247.2 [M＋H－CO－2H2O]+,
229.1 [M＋H－CO－3H2O]+,
219.1 [M＋H－2CO－2H2O]+

M2 13.9 311.2 333.3 310.2 紫丹参甲素 ＋ 9-11
M3 13.6 309.1 MS2: 291.1 [M＋H－H2O]+,
277.2 [M＋H－CH3OH]+,
265.2 [M＋H－2CH3－CH3OH＋H2O]+,
247.0 [M＋H－2CH3－CH3OH]+,
235.2 [M＋H－4CH3－CH3OH＋H2O]+
308.1 羟基化丹参酮 IIA
脱氢产物
＋ ＋ 9
MS3: 291.2 [M＋H－H2O]+,
273.2 [M＋H－2H2O]+,
261.2 [M＋H－H2O－2CH3]+,
245.1 [M＋H－2H2O－CO]+

M4 16.4 309.1 331.2 MS2: 281.1 [M＋H－CO]+,
263.1 [M＋H－CO－H2O]+,
235.1 [M＋H－2CO－H2O]+,
211.0 [M＋H－CH3OH－2H2O－2CH3] +
308.1 羟基化丹参酮 IIA
脱氢产物
＋ 9
中草药 Chinese Traditional and Herbal Drugs 第 44 卷 第 9 期 2013 年 5 月

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续表 1
准分子离子峰 峰号 t / min [M＋H]+ [M＋Na]+ HPLC/ESI-MS
n 或碎片离子 相对分子质量 推测代谢物 药液 斑马鱼体 参考文献
M4 16.4 309.1 331.2 MS3: 263.1, 253.1 [M＋H－2CO]+,
239.1 [M＋H－2CO－CH3OH＋H2O]+,
211.0 [M＋H－3CO－CH3OH＋H2O]+,
201.2 [M＋H－4CO－CH3OH＋2H2O]+,
183.0 [M＋H－4CO－CH3OH＋H2O]+

M5 6.4 313.2 335.2 295.2 [M＋H－H2O]+, 283.2 [M＋H－2CH3]+ 312.2 羟基化隐丹参酮 ＋ 9
M6 34.0 313.3 335.3 256.3 [M＋H－CH3－CH3OH－CO＋H2O]+,
230.3 [M＋H－CH3－CH3OH－2H2O]+
312.3 羟基化隐丹参酮 ＋ 9
M7 19.1 315.3 337.3 300.3 [M＋H－CH3]+,
286.2 [M＋H－CH3－CH3OH＋H2O]+,
270.3 [M＋H－3CH3]+
314.3 丹参酮 V ＋ ＋ 9
M8 28.5 315.3 337.3 300.1 [M＋H－CH3]+,
282.3 [M＋H－CH3－H2O]+,
262.3 [M＋H－2CO－CH3＋H2O]+,
314.3 丹参酮 V 异构体 ＋ 9
M9 24.6 327.2 349.2 309.2 [M＋H－H2O]＋, 299.2 [M＋H－CO]+ 326.2 双羟基化丹参酮 IIA ＋ 9
M10 32.8 329.3 351.2 311.3 [M＋H－H2O]+,
286.2 [M＋H－CO－CH3]+
328.3 双羟基化隐丹参酮 ＋ 9
“＋”表示存在此化合物
“＋” represents existence of compounds

a-脱氢反应 b-羟基化反应 c-D 环开环 Z-斑马鱼模型 R-大鼠模型 P-猪模型 M-大鼠肝微粒体
a-dehydrogenation reaction b-hydroxylation reaction c-open-loop D ring Z-zebrafish model R-rat model P-pig model M-rat liver microsomes
图 2 隐丹参酮和丹参酮 IIA在斑马鱼体内及现有体内外研究代谢路径比较
Fig. 2 Comparison on metabolic pathways of Tan IIA and Cry in in vivo zebrafish and present in vitro and in vivo study
M7 or M8, m/z 314
P2, m/z 296
M5, M6, m/z 312
M10, m/z 328
m/z 294 P1, m/z 294
M1, m/z 310
M2, m/z 310
m/z 310
M9, m/z 326or
or
or
c
R. Z R. Z R. Z
a a
b
R R. P. Z
a
a
b
R. M. Z
R. M. Z
R. Z
R. M
R. Z
M3, M4 m/z 308
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[M+H]−
295.2
[M+Na]−
317.1
+MS, 27.7 min
+MS2 (295.0)
150 200 250 300 350 400
+MS3 (295.0→277.0)
+MS4 (295.0→277.0→249.0)
[M+H]−
297.2
[M+Na]−
319.2
+MS, 22.8 min
+MS2 (297.0)
+MS3 (297.0→279.0)
200 220 240 260 280 300 320 340
200 210 220 230 240 250 260 270 280 290
m/z
P1
180 190 200 210 220 230 240 250 260
150 200 250 300 350 400
180 200 220 240 260 280 300 320 340
160 180 200 220 240 260 280
m/z
P2
[M+H]−
277.1
+MS2 (277.0)
+MS, 23.4 min
+MS3 (277.0→249.0)
[M+H]−
311.2 +MS, 11.6 min
[M+Na]−
299.1
[M+Na]−
333.2
+MS2 (311.0)
+MS3 (311.0→293.0)
150 200 250 300 350 400
180 200 220 240 260 280 300 320
160 180 200 220 240 260
m/z
P3
150 200 200 250 300 350
160 180 200 220 240 260 280 300 320 340
160 180 200 220 240 260 280 300 320
m/z
M1[M+H]−
309.1 +MS, 13.6 min
+MS2 (309.0)
+MS3 (309.0→291.0)
[M+H+H2O]−
327.1
[M+H]−
309.1
[M+Na]−
331.2 +MS, 16.4 min
+MS2 (309.0)
+MS3 (309.0→281.0)
250 260 270 280 290 300 310 320 330 340
160 180 200 220 240 260 280 300 320 340
125 150 175 200 225 250 275 300 325 350
260 280 300 320 340 360 380
200 220 240 260 280 300 320 340
140 160 180 260 280 300 320 340 360 380
m/z
M3
m/z
M4
中草药 Chinese Traditional and Herbal Drugs 第 44 卷 第 9 期 2013 年 5 月

·1155·

图 3 隐丹参酮、丹参酮 IIA和丹参酮 I 组合物暴露斑马鱼 24 h 后的代谢产物质谱图
Fig. 3 MS chromatograms of metabolites of combination of Cry, Tan IIA, and Tan I after being exposed to zebrafish for 24 h
4 讨论
本实验选择代谢机制相对明确的丹参酮 IIA、隐
丹参酮和丹参酮 I 为模式药，探索将斑马鱼用于这
3 个化合物的组合物的多成分体系代谢的可行性及
合理性。参考前期研究结果[6-8]，即药物经斑马鱼代
谢 18～24 h 时的代谢产物较全面，因此本实验取 24
h 的样品分析，结果发现，3 个成分经斑马鱼作用后，
除原形成分外，还检测到丹参酮 IIA 和隐丹参酮的
单羟基化、双羟基化及脱氢产物，以及隐丹参酮的
D 环开环产物，未检测到丹参酮 I 的转化产物，这
与在大鼠及其肝微粒体、猪的代谢研究结果高度一
致，提示斑马鱼用于这 3 个成分组合物的代谢研究
具合理性。斑马鱼模型具有独特优势，与现有体内、
外代谢模型相比，实验成本低，仅为大鼠的 1/1 000；
化合物用量少（本实验各化合物用量 1～2 mg），仅
约为大鼠经口给药研究用量的 1/30；实验条件简单、
易控，在一般实验室均可进行，不需体外实验的苛
刻条件；低劳动强度、高效率，可同时进行批量样
本的代谢研究。
综上所述，斑马鱼模型能够克服微量化合物及
其多成分体系难以进行在体代谢的技术难题，是一
种模式的在体研究药物代谢新的生物模型，对丰富
中药代谢研究思路与方法具重要意义。
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[M+H]−
311.2
[M+Na]−
333.3
[M+H]−
327.2
[M+H]−
313.2
[M+Na]−
349.2
[M+Na]−
335.2
[M+Na]−
335.3
[M+Na]−
337.2
[M+Na]−
337.3
[M+H]−
315.3
[M+H]−
315.2[M+H]−
313.3
[M+H]−
329.3
[M+Na]−
351.3
m/z
M2
240 260 280 300 320 340 180 200 220 240 260 280 300 320 340 360 260 280 300 320 340 360 380
m/z
M9
m/z
M5
200 220 240 260 280 300 320 340 360 380 220 240 260 280 300 320 340 360 380 200 220 240 260 280 300 320 340 360 380
m/z
M6
m/z
M7
m/z
M8
240 260 280 300 320 340 360
+MS, 13.9 min +MS, 24.6 min +MS, 6.4 min
+MS, 34.0 min +MS, 19.1 min +MS, 28.5 min
+MS, 32.8 min
m/z
M10
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·1156·
1011.
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