全 文 ：中草药 Chinese Traditional and Herbal Drugs 第 45 卷 第 5 期 2014 年 3 月
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HPLC 法同时测定芙朴感冒颗粒中芦丁、橙皮苷和牛蒡苷
王伟影 1，范 蕾 1，余华丽 1，戴德雄 2
1. 丽水市食品药品检验所，浙江 丽水 323000
2. 浙江维康药业有限公司，浙江 丽水 323000
摘 要：目的 建立芙朴感冒灵颗粒中芦丁、橙皮苷和牛蒡苷的测定方法。方法 应用 HPLC 法测定，色谱柱为 Agilent Zorbax
SB-C18柱（250 mm×4.6 mm，5 μm）；流动相为甲醇-水，梯度洗脱；体积流量为 0.8 mL/min，柱温 30 ℃；检测波长 280 nm。
结果 芦丁、橙皮苷和牛蒡苷的线性范围分别为 5.204～130.1 μg/mL，r＝0.999 0；1.819～145.5 μg/mL，r＝1.000 0；43.22～
778.0 μg/mL，r＝0.999 9；平均加样回收率分别为 98.77%、99.52%、100.84%，RSD 分别为 1.69%、1.01%、1.59%。结论 该
方法简便易行、准确、重复性好，可用于芙朴感冒颗粒的质量控制。
关键词：芙朴感冒颗粒；芦丁；橙皮苷；牛蒡苷；HPLC
中图分类号：R286.02 文献标志码：A 文章编号：0253 - 2670(2014)05 - 0665 - 03
DOI: 10.7501/j.issn.0253-2670.2014.05.013
Simultaneous determination of rutin, hesperidin, and arctiin in Fupo Ganmao
Granules by HPLC
WANG Wei-ying1, FAN Lei1, YU Hua-li1, DAI De-xiong2
1. Lishui Institute for Food and Drug Control, Lishui 323000, China
2. Zhejiang Welcome Pharmaceutical Co., Ltd., Lishui 323000, China
Abstract: Objective To establish a high performance liquid chromatographic method for simultaneous determination of rutin,
hesperidin, and arctiin in Fupo Ganmao Granules. Methods HPLC was applied with the chromatographic condition as follows: The
chromatographic column was Agilent Zorbax SB-C18 (250 mm × 4.6 mm, 5 μm) at 30 ℃; methanol-water as the mobile phase,
gradient elution; flow rate was 0.8 mL/min and the detection wavelength was 280 nm. Results Linear relationships were 5.204－
130.1 μg/mL (r = 0.999 0), 1.819－145.5 μg/mL (r = 1.000 0), and 43.22－778.0 μg/mL (r = 0.999 9), respectively. The average
recoveries were 98.77% (RSD = 1.69%), 99.52% (RSD = 1.01%), and 100.84% (RSD = 1.59%). Conclusion The results show that
the method is simple, accurate, and repeatable, and it is suitable for the simultaneous determination of rutin, hesperidin, and arctiin in
Fupo Ganmao Granules.
Key words: Fupo Ganmao Granules; rutin; hesperidin; arctiin; HPLC
芙朴感冒颗粒是由芙蓉叶、厚朴、陈皮和牛蒡
子（炒）4 味中药饮片制成的中药制剂，具有清热
解毒、宣肺利咽、宽中理气的功效，主要用于风热
或风热挟湿引起的发热头痛、咽痛、肢体酸痛等病
症。其质量标准[1]缺少定量测定项目，不能有效控
制药品的质量。芙蓉叶具有清肺凉血、消肿排脓的
功效，芦丁为其有效成分[2]；陈皮理气开胃、燥湿
化痰，橙皮苷为其质控指标成分[3]；牛蒡子疏散风
热、宣肺透疹、解毒利咽，牛蒡苷为其质控指标成
分[3]。本实验在相关研究的基础上[4-5]，采用 HPLC
法对芦丁、橙皮苷和牛蒡苷的测定方法进行研究。
1 仪器与材料
Agilent 1200 高效液相色谱仪（美国安捷伦公
司）；Agilent Zorbax SB-C18 色谱柱（250 mm×4.6
mm，5 μm，美国安捷伦公司）；XS105DU 电子天
平（瑞士梅特勒公司）；DL—360D 智能超声波清洗
器（上海之信仪器有限公司）。
对照品芦丁（批号 100080-200707，质量分数
90.5%）、橙皮苷（批号 0721-200010，质量分数
100%）、牛蒡苷（批号 110819-200404，质量分数
收稿日期：2013-05-06
作者简介：王伟影（1983—），女，浙江丽水人，主管中药师。Tel: (0578)2183956 E-mail: onlyying0508@gmail.com
中草药 Chinese Traditional and Herbal Drugs 第 45 卷 第 5 期 2014 年 3 月
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100%）均购自中国药品生物制品检定所。芙朴感冒
颗粒，批号 101125、110247、110348、110465、110510、
110704、110715、110716、110720、110807、110808、
110809，浙江天一堂药业有限公司。甲醇为色谱纯
（Merck 公司），水为娃哈哈纯净水。
2 方法与结果
2.1 色谱条件
色谱柱为 Agilent Zorbax SB-C18 柱（250 mm×
4.6 mm，5 μm）；流动相为甲醇-水，梯度洗脱：0～
35 min，33%～43%甲醇；体积流量为 0.8 mL/min；
柱温 30 ℃；检测波长为 280 nm；进样量为 5 μL。
2.2 对照品溶液的制备
精密称取芦丁、橙皮苷、牛蒡苷对照品适量，
分别加甲醇制成含芦丁 260.2 μg/mL、橙皮苷 303.2
μg/mL、牛蒡苷 864.4 μg/mL 的溶液，作为储备液。
精密吸取 3 种储备液制成含芦丁 9.096 μg/mL、橙皮
苷 26.02 μg/mL、牛蒡苷 216.1 μg/mL 的混合溶液，
作为对照品溶液。
2.3 供试品溶液的制备
取 10 袋芙朴感冒颗粒的内容物，精密称定，研
细，精密称取 2.0 g 置锥形瓶中，精密加入 25 mL
甲醇，密塞，称定质量，超声处理 30 min，放冷至
室温，再称定质量，用甲醇补足减失的质量，摇匀，
用 0.45 μm 的微孔滤膜滤过，滤液即为供试品溶液。
2.4 阴性样品溶液的制备
分别去除芙蓉叶、陈皮和牛蒡子（炒），按处方
制备工艺制备阴性对照样品。按“2.3”项下方法制
成阴性对照溶液。
2.5 专属性实验
分别精密吸取“2.2、2.3、2.4”项下溶液，按
“2.1”项下色谱条件进样，记录色谱图，见图 1。可
见，在该色谱条件下，芦丁、橙皮苷和牛蒡苷与其
他成分可达到基线分离，分离度均大于 1.5，具有良
好的分离效果；阴性对照无干扰。
1-芦丁 2-橙皮苷 3-牛蒡苷
1-rutin 2-hesperidin 3-arctiin
图 1 混合对照品 (A)、供试品 (B) 和阴性样品 (C) 的 HPLC 图谱
Fig. 1 HPLC of mixed reference substances (A), sample (B), and negative sample (C)
2.6 线性关系考察
精密吸取各对照品储备液适量，分别制成芦丁
质量浓度为 5.204、26.02、52.04、78.06、130.1
μg/mL，橙皮苷质量浓度为 1.819、9.096、18.19、
90.96、145.5 μg/mL，牛蒡苷质量浓度为 43.22、
216.1、432.2、605.1、778.0 μg/mL 的混合对照品
溶液，各进样 5 μL，按上述色谱条件进行测定，
分别以峰面积（Y）对质量浓度（X）进行回归分
析，得芦丁回归方程为 Y＝1.929 03 X＋2.777 06，
r＝0.999 0；橙皮苷回归方程为 Y＝11.540 39 X＋
0.490 90，r＝1.000 0；牛蒡苷回归方程为 Y＝
3 278.556 56 X－0.002 71，r＝0.999 9。结果表明，
芦丁、橙皮苷和牛蒡苷分别在5.204～130.1 μg/mL、
1.819～145.5 μg/mL、43.22～778.0 μg/mL 呈良好
的线性关系。
2.7 精密度试验
取对照品溶液，按“2.1”项色谱条件连续进样
5 次，计算芦丁峰面积的 RSD 为 1.48%，橙皮苷峰
面积的 RSD 为 1.30%，牛蒡苷峰面积的 RSD 为
0.94%，结果显示精密度良好。
2.8 稳定性试验
取同一供试品溶液（批号 110465），分别在 0、
2、6、14、24、30 h 进样，结果芦丁峰面积的 RSD
为 1.86%，橙皮苷峰面积的 RSD 为 1.15%，牛蒡苷
峰面积的 RSD 为 1.61%，表明供试品溶液 30 h 内
稳定性良好。
2.9 重复性试验
取同一批芙朴感冒颗粒（批号 110465），平行
取样 5 份，按照“2.3”项下制备，按“2.1”项色谱
条件测定，计算芦丁、橙皮苷和牛蒡苷的量，分别
3
2 1
3
2
1
A B C
0 10 20 30 0 10 20 30 0 10 20 30
t / min
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为 0.754、0.092、5.540 mg/g，RSD 分别为 1.56%、
1.78%、1.24%。
2.10 回收率试验
取已测定的芙朴感冒颗粒样品（批号 110465）
6 份，各约 1.0 g，精密称定，置具塞锥形瓶中，
分别精密加入芦丁对照品溶液（260.2 μg/mL）3
mL、橙皮苷对照品溶液（30.32 μg/mL）3 mL 和
牛蒡苷对照品溶液（864.4 μg/mL）6 mL，再分别
精密加入甲醇 13 mL，按“2.3”项下方法制备供
试品液，按“2.1”项色谱条件测定，测定芦丁、
橙皮苷和牛蒡苷的量，计算回收率。结果芦丁、
橙皮苷和牛蒡苷的平均回收率分别为 98.77%、
99.52%、100.84%，RSD 分别为 1.69%、1.01%、
1.59%。
2.11 样品测定
取不同批号的样品约 2.0 g，各 2 份，精密称定，
按“2.3”项下方法制备供试品溶液，按“2.1”色谱
条件测定，计算，结果见表 1。
表 1 芙朴感冒颗粒中芦丁、橙皮苷和牛蒡苷测定结果 (n＝2)
Table 1 Determination of rutin, hesperidin, and arctiin in Fupo Ganmao Granules (n＝2)
质量分数 / (mg·g−1) 质量分数 / (mg·g−1) 质量分数 / (mg·g−1) 批号
芦丁 橙皮苷 牛蒡苷
批号
芦丁 橙皮苷 牛蒡苷
批号
芦丁 橙皮苷 牛蒡苷
101125 0.186 0.118 3.851 110510 0.559 0.104 5.003 110720 0.191 0.091 4.353
110247 0.244 0.107 5.090 110704 0.256 0.111 4.031 110807 0.373 0.096 5.212
110348 0.277 0.161 5.148 110715 0.292 0.064 4.016 110808 0.711 0.160 3.133
110465 0.754 0.092 5.540 110716 0.294 0.078 4.131 110809 0.200 0.113 3.704
3 讨论
陈皮中橙皮苷的检测波长为 283 nm[3]，牛蒡子
中牛蒡苷的检测波长为 280 nm[3]，芙蓉叶中芦丁的
检测波长为 254 nm[2]，经紫外扫描发现，芦丁在
255、274 nm 波长处有最大吸收，在 280 nm 波长处
也有较大吸收，故选择 280 nm 为检测波长。
陈皮中橙皮苷的检测所用流动相为甲醇-醋酸-
水（35∶4∶61）[3]，牛蒡子中牛蒡苷的检测所用流
动相为甲醇-水（1∶1.1）[3]，芙蓉叶中芦丁的检测
所用流动相为甲醇-水-冰醋酸（30∶70∶2.5）[2]，
预实验发现以甲醇-水进行梯度洗脱的分析效果较
优，3 种组分的理论板数均在 10 000 以上，与其他
相邻组分之间的分离度较高。
分别考察了提取溶剂甲醇的用量、超声时间对
测定结果的影响，结果发现甲醇用量超过 25 mL 时，
3 种成分的量无显著差异；超声 30 min 时，各组分
提取完全。因此，本实验选用 25 mL 甲醇超声处理
30 min 为样品的提取方法。
经方法学研究结果表明，本方法具有良好的精
密度、准确度和重复性，能够同时测定芦丁、橙皮
苷和牛蒡苷的量，有效地控制芙朴感冒颗粒质量。
参考文献
[1] 国家药品标准修改批件 (2000ZFB0134) 所附标准
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[2] 孟会宁, 罗国平. HPLC 法测定木芙蓉叶中芦丁的含量
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[3] 中国药典 [S]. 一部. 2010.
[4] 祝 明. HPLC 测定芙朴感冒颗粒中牛蒡苷的含量 [J].
中成药, 2000, 8(22): 539-541.
[5] 周伟忠, 陈国强. HPLC 法测定芙朴感冒颗粒中橙皮苷
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