全 文 ：中草药 Chinese Traditional and Herbal Drugs 第 43 卷 第 11 期 2012 年 11 月

·2194·
不同提取方法对菝葜中总皂苷提取效果的影响
王敏杰 1，王丽莉 2，杜晓曦 1，张铁军 2*，龚苏晓 2，杨金颖 3
1. 成都中医药大学，四川 成都 611137
2. 天津药物研究院 中药现代研究部，天津 300193
3. 天津中医药大学，天津 300193
摘 要：目的 考察不同提取方法对菝葜中总皂苷提取效果的影响。方法 分别采用加热回流（水和乙醇溶液）、酶解、渗
漉和超临界 CO2流体萃取法对菝葜药材进行提取，通过紫外-可见分光光度（UV-Vis）法检测菝葜总皂苷的量，计算不同提
取方法的转移率。结果 5 种提取方法菝葜总皂苷转移率分别为 34.22%、86.48%、85.51%、78.68%、38.66%。结论 不同
提取方法对菝葜中总皂苷的转移率影响较大，采用乙醇加热回流提取法所得转移率较高，且简单易行，可作为菝葜总皂苷工
艺提取方法应用。
关键词：菝葜；总皂苷；酶解；超临界流体萃取；紫外-可见分光光度法
中图分类号：R284.2 文献标志码：A 文章编号：0253 - 2670(2012)11 - 2194 - 03
Effects of different extracting methods on total saponins extraction efficacy
from Smilax china
WANG Min-jie1, WANG Li-li2, DU Xiao-xi1, ZHANG Tie-jun2, GONG Su-xiao2, YANG Jin-ying3
1. Chengdu University of Traditional Chinese Medicine, Chengdu 611137, China
2. Department of Morden Chinese Materia Medica, Tianjin Institute of Pharmaceutical Research, Tianjin 300193, China
3. Tianjin University of Traditional Chinese Medicine, Tianjin 300193, China
Key words: Smilax china L.; total saponins; zymolysis; supercritical fluid extraction; UV-visible spectrophotometry

菝葜 Smilacis Chinae Rhizoma 又称金刚藤，收
载于《中国药典》2010 年版一部，为百合科菝葜属
植物菝葜 Smilax china L. 的干燥根茎，具有利湿去
浊、祛风除痹、解毒散瘀等功效，临床广泛用于治
疗妇科慢性炎症、附件炎症等病症[1]。菝葜主要含
有皂苷、黄酮、氨基酸及其他类化合物，其中皂苷
为菝葜抗炎的主要活性成分之一[2-3]。
菝葜根茎内的皂苷类成分通过糖基与纤维
素结合而存在于细胞壁中，所以不容易被提取完
全[4]，本实验考虑到甾体皂苷的极性以及细胞壁
的致密结构，比较了酶解法[5]、超临界 CO2 流体
萃取法[6]同常规提取方法（加热回流和渗漉）对
菝葜药材中总皂苷提取的影响，为菝葜药材中总
皂苷的质量控制以及深层次的研究和开发奠定
了基础。
1 仪器与材料
UV—1601 紫外分光光度仪，R501B 星海旋转
蒸发仪，AS3120 超声仪，AB204—N 十万分之一天
平，HA220—50—06 超临界萃取仪。
薯蓣皂苷对照品（批号 111707-200501）由中
国药品生物制品检定所提供，聚酰胺（60～90 目，
江苏临江试剂化工厂），植物精提复合酶 SPE-007
（由纤维素酶和果胶酶组成，宁夏夏盛实业集团有限
公司生产），实验所用药材购于河北安国药材市场，
经天津药物研究院中药现代研究部张铁军研究员鉴
定为百合科植物菝葜 Smilax china L. 的干燥根茎，
其他试剂均为分析纯。
2 方法与结果
2.1 样品提取方法
2.1.1 水加热回流提取 称取菝葜药材 100 g，置于

收稿日期：2012-02-03
作者简介：王敏杰（1984—），女，硕士研究生。E-mail: wangminjie-good@163.com
*通讯作者 张铁军 E-mail: tiezheng4@sina.com
网络出版时间：2012-10-19 网络出版地址：http://www.cnki.net/kcms/detail/12.1108.R.20121019.1031.002.html
中草药 Chinese Traditional and Herbal Drugs 第 43 卷 第 11 期 2012 年 11 月

·2195·
圆底烧瓶中，水加热回流提取 3 次，溶剂用量分别
为 1 000、800、800 mL，提取时间分别为 2.0、1.5、
1.5 h。抽滤，合并 3 次滤液。
2.1.2 乙醇加热回流提取 称取菝葜药材 100 g，置
于圆底烧瓶中，60%乙醇为溶剂加热回流提取 3 次，
溶液用量分别为 1 000、800、800 mL，提取时间分
别为 2.0、1.5、1.5 h。抽滤，合并 3 次滤液。
2.1.3 酶解法提取 称取菝葜药材 100 g，置于圆底
烧瓶中，加入 600 mL 温水（40 ℃）浸泡 30 min；
取复合酶适量（药材干质量的 0.5%）加入温水（40
℃）活化 10 min；待水浴温度为 50 ℃，pH 值调至
5 时，缓慢加入酶液并轻轻搅拌，恒温酶解 2.0 h。
滤过，药渣加入 60%乙醇加热回流提取 3 次，同
“2.1.2”项操作，抽滤，合并滤液。
2.1.4 渗漉法提取 称取菝葜药材（粉碎后过 20
目筛）100 g，60%乙醇作为渗漉溶剂（用量为药材
干质量的 20 倍），以 2.0 mL/min 的体积流量渗漉 24
h，收集渗漉液。
2.1.5 超临界CO2流体萃取法提取 称取菝葜药材
（粉碎后过 40 目筛）150 g 投入萃取釜中，95%乙醇
作为夹带剂，分别对萃取釜、分离釜进行加热，使
萃取温度为 40 ℃，分离釜温度为 45 ℃，压力为
25 MPa。当温度达到要求时开启 CO2 钢瓶，通过加
压泵对系统加压，静态提取 1 h，CO2循环提取 1 h，
收集并合并萃取液。
2.2 总皂苷定量测定
2.2.1 供试品溶液的制备 精密吸取上述方法制备
的不同提取液适量，蒸干，残渣加提取溶剂使溶解，
加于 10 g 聚酰胺柱上端，70%乙醇洗脱收集洗脱液
200 mL，蒸干，加甲醇使溶解并转移至 10 mL 量瓶
中，甲醇稀释至刻度，摇匀，即得供试品溶液。
2.2.2 对照品储备液的制备 精密称取薯蓣皂苷对
照品 10.31 mg，置 25 mL 量瓶中，用甲醇溶解并稀
释至刻度，摇匀，配成质量浓度为 412.4 μg/mL 的
储备液。
2.2.3 吸收波长的选择 分别精密量取薯蓣皂苷对
照品溶液和供试品溶液各 0.1 mL，水浴挥干溶剂，
加 5 mL 高氯酸，摇匀，于 70 ℃水浴加热 15 min，
取出，立即置冰水浴中冷却 2～3 min，摇匀，以试
剂作空白，在波长 200～700 nm 进行扫描，对照品
溶液与供试品溶液均在 405～409 nm 处有最大吸
收，故选择测定波长为 407 nm。
2.2.4 线性关系考察 分别精密量取薯蓣皂苷对照
品储备液 0.05、0.1、0.2、0.3、0.4、0.5 mL，按“2.2.3”
项方法显色，在 407 nm 处测定吸光度（A）值。以
质量浓度为横坐标（X）、A 值为纵坐标（Y）进行
线性回归，得回归方程 Y＝16.618 X－0.008 6，r＝
0.999 3，结果表明薯蓣皂苷在 4.124～41.24 μg/mL
与 A 值具有良好线性关系。
2.2.5 精密度试验 精密量取供试品溶液 0.1 mL，
按“2.2.3”项方法显色后，在 407 nm 处重复测定 A
值 6 次，计算得其 RSD 为 0.02%。
2.2.6 重复性试验 取同一批金刚藤药材粉末 6
份，按“2.2.1”项操作制备供试品溶液，再按“2.2.3”
项显色后，在 407 nm 处测定 A 值，并计算每份总
皂苷的量，其 RSD 为 3.22%。
2.2.7 稳定性试验 取同一供试品溶液，按“2.2.3”
项显色后，分别在 0、5、10、15、20、25、30 min
时在 407 nm 处测定 A 值，并计算其 RSD 为 0.52%。
2.2.8 加样回收率试验 取已知总皂苷量（3.08%）
的菝葜药材粉末 9 份，每份 0.1 g，精密称定，分别
精密加入412.4 μg/mL薯蓣皂苷对照品溶液0.6、0.75、
0.9 mL 各 3 份，按“2.2.1”项方法制备供试品溶液，
再按“2.2.3”项方法显色后，在 407 nm 处测定 A
值，并计算薯蓣皂苷回收率，得平均回收率为
97.9%，RSD 为 2.71%。
2.2.9 样品测定 分别精密量取对照品溶液、供试
品溶液各 0.1 mL 置具塞试管中，按“2.2.3”项方法
显色后在 407 nm 处测定 A 值，计算不同提取方法
所得菝葜提取物中总皂苷的量，计算质量分数、转
移率和出膏率，结果见表 1。
总皂苷质量分数＝提取物中总皂苷质量/提取物干膏
质量
转移率＝提取物中总皂苷质量/药材中总皂苷质量
出膏率＝提取物干膏质量/药材干质量
3 讨论
从结果来看，加入复合酶并没有达到预期提高
菝葜总皂苷提取的效果，而是增大了出膏率，由此
推测，采用 60%乙醇提取已经能够穿透细胞壁，酶
的作用是进一步破坏细胞壁，将高分子物质降解为
糊精、纤维二糖等，从而增大非指标成分的溶出，
引入了更多杂质。超临界 CO2 流体萃取法的质量分
数高于其他提取方法，但转移率很低，可见在提取
过程中，造成了大量损失。而水加热回流法和渗漉
法无论是转移率还是质量分数都小于醇加热回流提
取。因此，醇加热回流的提取方法在菝葜的提取中
中草药 Chinese Traditional and Herbal Drugs 第 43 卷 第 11 期 2012 年 11 月

·2196·
表 1 不同提取方法菝葜总皂苷提取效果
Table 1 Extraction efficacy of total saponins from S. china by different methods
提取方法 总皂苷 / mg 质量分数 / % 转移率 / % 出膏率 / %
水加热回流 429.50 1.7 34.22 6.94
醇加热回流 1 085.37 4.1 86.48 7.50
酶解法 1 073.11 3.3 85.51 9.37
渗漉 987.44 3.4 78.68 9.91
超临界萃取 1 455.63 7.0 38.66 4.22

是一种值得广泛推广的方法。
在显色剂的选择上分别选用香草醛-冰醋酸和
硫酸、香草醛-冰醋酸和高氯酸，在 30 min 内高氯
酸相对前两种显色剂稳定，因此选择高氯酸作为显
色剂。
菝葜红色素是一种水溶性色素，从外观来看，
除超临界提取液外，其他提取液中其量均较高，这
直接影响了总皂苷定量测定的准确性，因此，本实
验分别采用了 3 种不同方法进行前处理：直接过大
孔吸附树脂、水饱和正丁醇萃取氨试液除杂后过聚
酰胺、直接过聚酰胺柱。结果表明，选用直接过聚
酰胺柱的前处理方法制备的菝葜总皂苷样品，与红
色素分离效果好、损失少，并且经过全波长扫描，
最大吸收出现在 407 nm 附近。同时对未显色的样
品进行了全波长扫描，无干扰。因此菝葜提取物的
预处理选择直接过聚酰胺柱的方法。
皂苷类化合物为菝葜中的主要成分之一，同时
又是活性成分，如采用不当的测定方法会使结果偏
离真实值，从而影响对菝葜质量的真实评价。本实
验所建立的菝葜总皂苷定量测定方法，操作简便，
准确性和精确性较高，为菝葜药材的质量评价和进
一步开发奠定了基础。
参考文献
[1] 中国药典 [S]. 一部. 2010.
[2] 姚新生. 天然药物化学 [M]. 北京: 人民卫生出版社,
2001.
[3] 仇 萍, 盛孝邦, 邱赛红. 菝葜不同工艺提取物对慢性
盆腔炎大鼠的治疗作用 [J]. 中草药 , 2010, 41(12):
2046-2049.
[4] 罗 敏, 舒 军, 陆 茵. 薯蓣皂苷及苷元提取分离和
抗肿瘤研究进展 [J]. 南京中医药大学学报 , 2009,
25(4): 318-320.
[5] 杨军宣, 伊蓉莉. 纤维素酶在三七提取工艺中的应用
[J]. 中国中医药科技, 2001, 8(5): 12-14.
[6] 华小黎, 陈东生. 菝葜超临界 CO2 萃取物中薯蓣皂苷
元的含量测定 [J]. 中药材, 2006, 26(4): 339-340.